獸醫(yī)微生物學(xué)

1、獸醫(yī)微生物資料緒言一、微生物與微生物學(xué)1、微生物（Microorganism）是一類肉眼看不見，有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)，能在適宜環(huán)境中生長繁殖的細(xì)小生物。包括八大類：細(xì)菌、真菌(包括霉菌和酵母菌)、放線菌、螺旋體、霉形體、立克次體、衣原體和病毒等。微生物的種類：具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物（原核微生物，如細(xì)菌和放線菌；真核微生物，如真菌、顯微藻類和原生動物）、沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物，病毒。2、微生物學(xué)研究微生物生命活動的科學(xué)稱為微生物學(xué)。包括研究其形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化、遺傳變異、生態(tài)等方面。微生物是一把雙刃劍，有利有害 （1）有利面：在食品、醫(yī)藥制品、環(huán)境治理等方面起著重要作用。（2）有害面：是人和其他各種生物傳

2、染疾病的罪魁禍?zhǔn)住?二、微生物學(xué)發(fā)展簡史微生物學(xué)的發(fā)展可分為三個階段第一階段 微生物形態(tài)學(xué)時期（1683-1870） 1683年荷蘭人呂文虎克(Antony van Leeuwenhoek)發(fā)明了放大200倍的顯微鏡，并首次觀察到微生物的細(xì)微形態(tài)。第二階段 微生物生理學(xué)及免疫學(xué)奠基時期（1870-1920） 這個時期主要有兩個代表性人物：巴斯德和科赫巴斯德的功績：徹底否定了自然發(fā)生說、證實(shí)發(fā)酵由微生物引起、免疫學(xué)預(yù)防接種、發(fā)明巴氏消毒法科赫的功績：1、發(fā)明了固體培養(yǎng)基并用其純化微生物等一系列研究方法的創(chuàng)立2、證實(shí)炭疽病因 炭疽桿菌3、發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌、霍亂弧菌4、提出柯赫氏法則(Koch post

3、ulates)柯赫法則：是確定某種微生物是否具有致病性的主要依據(jù)。第一 特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中可查見，在健康者不存在；第二 此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純培養(yǎng)物；第三 此純培養(yǎng)物接種易感動物，能導(dǎo)致同樣病癥；第四 自感染的動物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)。該法則也適用于其他病原微生物，如病毒等。 (Edward Jenner,17491823)首創(chuàng)用牛痘預(yù)防天花，為預(yù)防醫(yī)學(xué)開辟了廣闊途徑。(Joseph Lister,18271912)首創(chuàng)用石炭酸噴灑手術(shù)室和煮沸手術(shù)用具以防術(shù)后感染，為防腐、消毒，以及無菌操作奠定了基礎(chǔ)。第三階段：近代及現(xiàn)代微生物學(xué)時期（1920年起）特別是近半個世紀(jì)以來

4、，微生物學(xué)在理論研究、技術(shù)創(chuàng)新及實(shí)際應(yīng)用方面都取得了重要進(jìn)展。1928年，英國科學(xué)家弗雷明發(fā)現(xiàn)，青霉菌落周圍出現(xiàn)抑制萄葡球菌生長的現(xiàn)象三、微生物學(xué)理論成就及應(yīng)用1.微生物遺傳理論的研究 ：揭示了遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)是DNA或RNA。2.組織移植、免疫耐受的研究：可以識別抗原、控制抗原抗體反應(yīng)，使人類器官移植得以成功。3.抗微生物藥物的研究：化學(xué)治療藥劑和抗生素的研究。4.免疫球蛋白的研究 ：免疫球蛋白(包括單克隆抗體)在疾病診斷及防治方面廣泛應(yīng)用。四、 微生物的特點(diǎn)體積小，面積大；吸收多，轉(zhuǎn)化快；適應(yīng)強(qiáng)，易變異；分布廣，種類多；生長旺，繁殖快五、獸醫(yī)微生物學(xué)任務(wù)與作用1.任務(wù)與作用獸醫(yī)微生物學(xué)是以微生

5、物學(xué)一般理論和技術(shù)為基礎(chǔ)，研究病原微生物與動物疾病的關(guān)系，診斷和防止動物疾病，保障動物健康和人類食品安全的一門基礎(chǔ)學(xué)科。2.研究領(lǐng)域 包括家畜、家禽、家庭動物、實(shí)驗(yàn)動物、水生動物、野生動物等的微生物。內(nèi)容涉及微生物學(xué)基礎(chǔ)、動物免疫、動物微生態(tài)、動物病原微生物等。第一章 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)1.細(xì)菌(bacterium)是屬原核生物界的一種單細(xì)胞微生物。觀察細(xì)菌常用光學(xué)顯微鏡，以微米(m)為測量單位。細(xì)菌按其外形，主要有：球菌、桿菌和螺旋菌球菌：雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌桿菌：不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致（大、中、?。粭U菌的形態(tài)多樣（兩端齊平，兩端尖細(xì)、分枝桿菌、雙歧桿菌）

6、；螺旋菌：弧菌、螺菌、螺桿菌其它形態(tài)：柄桿菌（prosthecate bacteria）細(xì)胞上有柄（stalk）、菌絲（hyphae）、附器（appendages）等細(xì)胞質(zhì)伸出物，細(xì)胞呈桿狀或梭狀，并有特征性的細(xì)柄 。衰老型和多形性 在正常情況下，細(xì)菌的個體形狀和排列是規(guī)則和一致的，在老齡培養(yǎng)物中，會出現(xiàn)和正常形狀不一樣的個體，這就是衰老型和退化性。當(dāng)這些衰老型的培養(yǎng)物，重新處于正常的培養(yǎng)環(huán)境中，可恢復(fù)正常形狀（慢性豬丹毒桿菌）。但有些細(xì)菌，即使在正常環(huán)境中生長，起形狀也很不一致，這種現(xiàn)象稱多形性（溶血巴氏桿菌,支原體,L型細(xì)菌）。 第二節(jié) 細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核

7、質(zhì)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽孢基本結(jié)構(gòu)一、細(xì)胞壁革蘭染色法：結(jié)晶紫1min；碘液1min；95%乙醇脫色；復(fù)紅（沙黃）革蘭陽性菌染成紫色；革蘭陰性菌染成紅色。兩類細(xì)菌細(xì)胞壁的共同組分為肽聚糖，但各有其特殊組分。細(xì)胞壁的功能：維持菌體固有的形態(tài)；保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境；參與菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換；菌體表面帶有多種抗原分子；可誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答。細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型（細(xì)菌L型）細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型(bacterial L form)：細(xì)胞壁受損后仍能生長和分裂的細(xì)菌。革蘭陽性菌細(xì)胞壁缺失后，原生質(zhì)僅被一層細(xì)胞膜包住原生質(zhì)體(protoplast)。革蘭陰性菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)原生質(zhì)球(s

8、pheroplast)。某些L型仍有一定的致病力，通常引起慢性感染。細(xì)菌L型的形態(tài)和染色性：細(xì)菌L型呈高度多形性，大小不一，著色不勻，無論其原為革蘭陽性或陰性菌，形成L型大多染成革蘭陰性。細(xì)菌L型的菌落形態(tài)：細(xì)菌L型在高滲的含血清的培養(yǎng)基上生長后形成三種類型菌落。二、細(xì)胞膜由磷脂和多種蛋白質(zhì)組成。主要有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、生物合成、分泌和呼吸等作用。細(xì)菌細(xì)胞膜可形成一種特有的結(jié)構(gòu)，稱為間體。間體：是部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊形成的囊狀物，多見于革蘭陽性菌。三、細(xì)胞質(zhì)核糖體（ribosome）；質(zhì)粒（plasmid）；含有多種顆粒，大多為貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)。四、核質(zhì)核質(zhì)由單一密閉環(huán)狀DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤繞組成松

9、散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。特殊結(jié)構(gòu)莢膜：某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外包繞一層黏液性物質(zhì)，為疏水性多糖或蛋白質(zhì)的多聚體。鞭毛：許多細(xì)菌在菌體上附有細(xì)長并呈波狀彎曲的絲狀物，稱為鞭毛，是細(xì)菌的運(yùn)動器官。（單鞭毛、叢鞭毛、雙鞭毛、周毛菌），功能是運(yùn)動器官，有抗原性。菌毛：菌毛蛋白具有抗原性；菌毛可分為普通菌毛和性菌毛兩類。芽孢：某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下，能在菌體內(nèi)部形成一個圓形或卵圓形小體，是細(xì)菌的休眠形式芽胞的形成與發(fā)芽一個細(xì)菌只形成一個芽胞，一個芽胞發(fā)芽也只生成一個菌體，因而芽胞不是細(xì)菌的繁殖方式。與芽胞相比，未形成芽胞而具有繁殖能力的菌體可稱為繁殖體(vegetative form)。芽胞的大小、形狀、位置等隨菌

10、種而異，有重要的鑒別意義。芽胞的功能：抵御外界一切不良環(huán)境條件。第三節(jié) 細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)檢查法顯微鏡放大法細(xì)菌形體微小，肉眼不能直接看到，必須借助顯微鏡（普通光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡）放大后才能觀察。染色法細(xì)菌體小半透明，經(jīng)染色后才能觀察較清楚。普通光學(xué)顯微鏡：普通光學(xué)顯微鏡的分辨率為0.25um。一般細(xì)菌都大于0.25um，故可用普通光學(xué)顯微鏡觀察。電子顯微鏡：電子顯微鏡的分辨率為1nm。不僅能看清細(xì)菌的外，內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)可一覽無余。染色法革蘭染色法：結(jié)晶紫1min；碘液1min；95%乙醇脫色；復(fù)紅（沙黃）抗酸染色：石碳酸復(fù)紅5min；脫色3%鹽酸酒精；美蘭（結(jié)核桿菌）第二章 細(xì)菌的生長繁殖和生

11、態(tài)第一節(jié) 細(xì)菌細(xì)胞的代謝過程一、細(xì)菌的化學(xué)組成 （一）水分 （二）礦物質(zhì)（三）有機(jī)物1蛋白質(zhì)和含氮化合物 2核酸：DNA和RNA)3糖類：主要以多糖的形式存在，并與脂類、蛋白質(zhì)等形成復(fù)合物。4脂類：主要存在于細(xì)胞壁。二、細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換的方式單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動輸送、基團(tuán)轉(zhuǎn)位三、細(xì)菌的代謝（一）能量代謝呼吸：以無機(jī)物為受氫體，包括: 需氧呼吸（分子氧）厭氧呼吸（氧以外的其它無機(jī)物）發(fā)酵：以有機(jī)物為受氫體（二）物質(zhì)代謝1合成性代謝產(chǎn)物熱源(原)質(zhì)(pyrogen)：注入人體或動物體能引起發(fā)熱反應(yīng)，耐高壓滅菌。毒素：外毒素（蛋白質(zhì)）、內(nèi)毒素（脂多糖）抗生素：由某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一

12、類抗菌物質(zhì)，能抑制或殺死某些病原微生物和腫瘤細(xì)胞。細(xì)菌素（蛋白質(zhì)）：僅對與產(chǎn)生菌有近緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用。2.分解性代謝產(chǎn)物依此設(shè)計(jì)特定的生化反應(yīng)，對細(xì)菌進(jìn)行鑒定。 第二節(jié) 細(xì)菌的生長繁殖一、細(xì)菌個體的生長繁殖 細(xì)菌繁殖的方式：二等分分裂法、代時（多數(shù)為2030 min） 二、細(xì)菌群體的生長繁殖細(xì)菌的生長曲線觀察細(xì)菌形態(tài)和G染色反應(yīng)以對數(shù)期至穩(wěn)定期中期的細(xì)菌為標(biāo)準(zhǔn)。1.延滯期特點(diǎn)生長速率常數(shù)等于零；菌體粗大；含量增加；代謝活力強(qiáng)；對不良條件抵抗能力降低縮短延滯期的意義和方法可以縮短生產(chǎn)周期，提高設(shè)備利用率；接種對數(shù)生長期的菌種，采用最適菌齡；加大接種量；用于培養(yǎng)菌種相同組成分的培養(yǎng)基。2、指

13、數(shù)期(對數(shù)期)特點(diǎn)活菌數(shù)呈對數(shù)增加 酶系活躍，代謝旺盛 生長速率最大，generation time最短 細(xì)胞的化學(xué)組成及形態(tài)，生理特性比較一致3、穩(wěn)定期特點(diǎn)活菌數(shù)保持相對穩(wěn)定，總菌數(shù)達(dá)最高水平。細(xì)菌代謝物積累達(dá)到最高峰。芽胞桿菌這時開始形成芽胞。這是生產(chǎn)收獲時期。4、衰亡期特點(diǎn)細(xì)菌死亡數(shù)大于增殖數(shù),活菌數(shù)明顯減少,群體衰落。細(xì)胞出現(xiàn)多形態(tài),大小不等的 畸形,變成衰退型。細(xì)胞死亡,出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。第三節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng) 人工培養(yǎng)細(xì)菌，除需要提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)外，尚需要有合適的酸堿度、適宜的溫度及必要的氣體環(huán)境 。一、細(xì)菌生長繁殖的條件1營養(yǎng)條件：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子等2溫度： 低溫型

14、(嗜冷菌)、中溫型(嗜溫菌)和高溫型(嗜熱菌)3pH：細(xì)菌：7.2-7.6；霉菌：3.0-6.0。4滲透壓5氣體：O2，CO2二、培養(yǎng)基1. 按狀態(tài)的差異，可將培養(yǎng)基分為三類：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基（1%2%瓊脂）半固體培養(yǎng)基（0.5%瓊脂）培養(yǎng)基的用途液體培養(yǎng)基：增菌；固體培養(yǎng)基：純化，增菌，保種；半固體培養(yǎng)基：動力檢測，保種2.按功能的差異，可將培養(yǎng)基分為三類：鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入特定作用底物及指示劑，即可憑肉眼根據(jù)顏色識別。選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，對不同細(xì)菌分別產(chǎn)生抑制或促進(jìn)作用，從而可從混雜多種細(xì)菌的樣本中分離出所需細(xì)菌。如麥康凱培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入配

15、制培養(yǎng)基的原則（1）適合微生物的營養(yǎng)特點(diǎn)（2）按微生物需要量調(diào)好營養(yǎng)配比 （3）控制微生物的培養(yǎng)條件：A、 pH值，B、調(diào)節(jié)氧和CO2的濃度，C、調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓第四節(jié) 細(xì)菌的生態(tài)微生物在自然界的分布微生物生態(tài)學(xué)是研究微生物群（微生物區(qū)系或正常菌群）與其周圍的生物和非生物環(huán)境條件相互作用的科學(xué)。微生物種類很多，適應(yīng)能力強(qiáng)，在自然界中廣泛分布，大部分對動物和人類生產(chǎn)生活無害或有益，一小部分是危害人類和動植物的病原微生物。土壤中的微生物（一）土壤環(huán)境適合微生物的生長1 土壤中有各種有機(jī)物和無機(jī)物；2 溫度恒定，晝夜溫差和季節(jié)溫差不大；3 經(jīng)常保持一定的濕度；4 酸堿適中(pH大多5.5-8.5之

16、間)，緩沖性強(qiáng)；5 空隙中充滿著空氣和水分，滲透壓適中。是微生物在自然界最大的貯藏所。（二）土壤中微生物的分布土壤中微生物的分布受地理區(qū)域、環(huán)境條件和土壤深淺等因素的影響，一般：1. 肥沃泥土中微生物多；每克肥土中通常含有幾億至幾十億個微生物，貧瘠土壤每克也有幾百萬至幾千萬個微生物。2. 表層和深層含菌量較少，在距離地面10-20cm的土層中含菌量最多，在4-5m的深土層中幾乎呈無菌狀態(tài)；3. 隨季節(jié)的變化微生物的數(shù)量也有所改變。不同微生物在土壤中生存的時間土壤的細(xì)菌學(xué)檢查 主要測定菌落總數(shù)、大腸菌值和產(chǎn)氣莢膜梭菌值3項(xiàng)指標(biāo)。大腸菌值(產(chǎn)氣莢膜梭菌值)是指能檢出大腸桿菌(產(chǎn)氣莢膜梭菌)的最小土

17、壤量(g)。水中的微生物水環(huán)境：地球的70%左右由水覆蓋，其中溶解和懸浮有機(jī)物和無機(jī)物，流動水有氧滲入可供微生物生長，是微生物棲息的第二天然場所。(一) 水體中微生物的來源土壤、空氣、動植物尸體、人和動物的排瀉物、工業(yè)及生活污水。(二) 種類水中存在的微生物90%為革蘭氏陰性菌，主要有弧菌、假單胞菌、黃桿菌等。(三) 水體中的病原微生物通過水體傳播的病原微生物主要有沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、霍亂弧菌等。淡水微生物淡水的pH值多數(shù)為6.5-8.5，因而適于多數(shù)水生微生物的生長。大多來源于土壤、空氣、污水等。一般:1. 有機(jī)物含量多，溫度適中的地方微生物多；深層水中厭氧微生物較多，而表層水中好氧微生

18、物較多；2. 遠(yuǎn)離人群的水體中，微生物少，且以自養(yǎng)型為主；在人口密集的區(qū)的湖泊和河流內(nèi)，微生物多，且多是腐生型細(xì)菌和原生動物。在飲用水的微生物學(xué)檢測中，由于水體中病原菌較少，所以通常采用大腸菌群的數(shù)量作為指標(biāo)，判斷水源被污染程度。大腸菌群：該菌群主要來源于人、畜糞便，大腸菌群數(shù)愈多，表示糞便污染的情況愈嚴(yán)重，也間接表明可能有腸道致病菌污染，故以此作為水污染程度的指標(biāo)。水中大腸菌群系以及100ml檢樣內(nèi)大腸菌群最近似數(shù)（MPN）表示。某些微生物在水中的生存時間水質(zhì)細(xì)菌學(xué)檢查三項(xiàng)指標(biāo)空氣中的微生物1空氣是傳播微生物的重要介質(zhì)空氣本身缺乏微生物生活所必需的營養(yǎng)物，日光對微生物也具有很強(qiáng)的殺菌作用，另

19、外空氣一般是干燥的，因此空氣不是微生物生活的良好環(huán)境，所以無固定種類。2空氣中微生物的種類和數(shù)量來源：帶有微生物菌體及孢子的灰塵（腐生）。人和動物（呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物）分布：隨環(huán)境條件及微生物的抵抗力不同而不同?？諝庵写嬖谳^多的、存活時間較長的是各種真菌、放線菌的孢子及細(xì)菌芽胞。空氣中微生物的數(shù)目決定于塵埃的總量。不同地區(qū)空氣中的細(xì)菌總數(shù)微生物種群間的相互關(guān)系可分為互生、共生、拮抗和寄生?；ド?synergism)：兩種或多種微生物共同生存時，可互相受益。共生(symbiosis):兩種或多種微生物共同生活在一起，彼此間互不傷害或互為有利的關(guān)系。拮抗(antagonism):

20、兩種或兩種以上微生物共同生長時，使雙方或一方受害的現(xiàn)象。雙方受害叫競爭，一方受害叫偏生寄生(parasitism):是一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)或體表，從中獲取營養(yǎng)生長繁殖并使后者蒙受傷害甚至被殺死的現(xiàn)象。細(xì)胞內(nèi)寄生和細(xì)胞外寄生動物的正常菌群一 概念正常菌群(normal microbiota在正常動物的體表或體內(nèi)腔道經(jīng)常有一層微生物或微生物層存在，它們對宿主不但無害，而且是有益的和必需的。二 分布1、呼吸道菌群：以鼻腔細(xì)菌最多。2、消化道菌群：口腔細(xì)菌較多，有葡萄球菌、鏈球菌、乳桿菌、棒狀桿菌、螺旋體等；食道和胃內(nèi)細(xì)菌極少。正常菌群與其宿主的相互關(guān)系營養(yǎng)、免疫、生物拮抗益生菌：

21、平衡，能抑制對宿主有害微生物的生長，這些微生物制劑稱之為益生菌。某些細(xì)菌或真菌有利于宿主胃腸道微生物區(qū)系的益生元：飼料或食品中的某些寡糖不被宿主消化吸收，但能選擇性地刺激宿主消化道有益微生物或飼喂的益生菌的生長，對宿主產(chǎn)生有益作用，此類成分稱為益生元。菌群失調(diào)與菌群失調(diào)癥菌群失調(diào)正常情況下，正常菌群與宿主、環(huán)境間處于協(xié)調(diào)，維持著一定的生態(tài)平衡，對動物是有利的。如果宿主患病、外科手術(shù)、環(huán)境改變和濫用抗菌藥物等，宿主機(jī)體某個部位的正常菌群中微生物種類、數(shù)量和棲居處將會發(fā)生改變，即稱為菌群失調(diào)。菌群失調(diào)癥由于腸道正常菌群的生態(tài)平衡受到破壞而引起的病理過程稱為。在應(yīng)用抗菌藥物治療疾病的過程中，要注意防

22、止菌群失調(diào)癥的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)動物分類無菌動物、悉生動物、無特定病原體動物、清潔動物、普通動物無菌動物 (germ free animal, GF)：指不攜帶任何微生物的動物，即無外源菌動物。無特定病原體動物(specific pathogen-free animals, SPF)：指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動物。第三章 消毒、滅菌與獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全基本概念殺菌作用：指某些物質(zhì)或因素所具有的在一定條件下殺死微生物的作用。抑菌作用：某些物質(zhì)或因素具有抑制微生物生長與繁殖的作用?？咕饔茫耗承┧幬锞哂械囊种苹驓缥⑸锏淖饔?。滅菌：應(yīng)用物理或化學(xué)方法殺滅物體中所有的病原微

23、生物、非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。消毒：應(yīng)用物理或化學(xué)方法殺滅物體中的病原微生物的方法，稱為消毒。防腐：應(yīng)用各種化學(xué)藥品或物理方法防止或抑制微生物生長繁殖的方法。無菌法：采取防止或杜絕任何微生物進(jìn)入動物機(jī)體或其他物體的方法。無菌操作：以無菌法進(jìn)行的操作。濾過除菌：通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣的細(xì)菌等微生物除去的方法。 病毒、支原體以及細(xì)菌L型 ！第一節(jié) 物理消毒滅菌法影響細(xì)菌的物理因素有：溫度、輻射、干燥、滲透壓、濾過等。一、溫度對細(xì)菌的影響按細(xì)菌對溫度的適應(yīng)可分為：嗜冷菌、嗜溫菌、嗜熱菌按溫度對細(xì)菌的影響有：最適溫度、最高溫度、最低溫度1. 低溫對細(xì)菌的影響大多數(shù)微生物對低溫具有很

24、強(qiáng)的抵抗力。環(huán)境溫度<最低生長溫度：代謝活動降低，最后生長繁殖停滯，存活較長時間。一般細(xì)菌菌種在5-10低溫下保存。但也有些細(xì)菌對低溫持別敏感，在冰箱內(nèi)保存比在室溫下保存死亡更快。冷凍保存細(xì)菌：迅速降低溫度2. 高溫對細(xì)菌的影響高溫對細(xì)菌有明顯的致死作用，是最常用的有效的滅菌方法。干熱滅菌法(火焰滅菌和熱空氣滅菌）火焰滅菌法 主要用于接種針、接種環(huán)、試管口等的滅菌。熱空氣滅菌法用加熱空氣使滅菌物品溫度升高到160并維持12小時來進(jìn)行滅菌的方法。 主要用于干燥的玻璃器皿、金屬器械等的滅菌。濕熱滅菌法1. 煮沸滅菌10-20min殺死所有細(xì)菌繁殖體；加入1-2%碳酸鈉或2-5%石炭酸，滅菌的

25、效果更好。2.巴氏消毒法：用于葡萄酒、啤酒及牛乳等的消毒低溫維持巴氏消毒法： 63-65 ，30min，然后迅速冷卻至10以下。高溫瞬時巴氏消毒法： 71-72，15s，然后迅速冷卻至10以下。超高溫巴氏消毒法：使鮮牛奶通過溫度不低于132的管道1-2s，然后迅速冷卻至10以下。3.流通蒸汽消毒法：100的蒸汽維持30min (不能殺死芽胞和霉菌孢子）4.流通蒸汽滅菌法（間歇滅菌法）：利用反復(fù)多次的流通蒸汽間歇加熱以達(dá)到殺滅所有微生物的方法。5.高壓蒸汽滅菌法：在一個加有少量水的密閉金屬容器內(nèi)，通過加熱來加大蒸汽壓力，以提高溫度，達(dá)到在短時間內(nèi)完全滅菌的效果。高壓蒸汽滅菌時壓力與溫度的關(guān)系10

26、磅(磅/平方英寸），115 ；15磅，121 ；20磅，126 一定要排除冷空氣高壓蒸汽滅菌的適用范圍適用于培養(yǎng)基、生理鹽水等。糖類溶液或含糖的培養(yǎng)基可用10磅1520min滅菌，若壓力、溫度過高則可使培養(yǎng)基顏色變深。血清、酶、氨基酸等-過濾二、輻射對細(xì)菌的影響1.日光對細(xì)菌的影響-殺菌作用：日光殺菌作用的主要因素是紫外線，紫外線波長為13604000A，而以25002650A殺菌力最強(qiáng)。紫外線的穿透力不強(qiáng)。 2.電離輻射：x射線，射線和射線 應(yīng)用：塑料制品的消毒；食品、飼料的消毒。3.紅外線1-10um波長的電磁波的熱效應(yīng)最強(qiáng)。紅外線烤箱滅菌， 類似于熱空氣滅菌。應(yīng)用：醫(yī)療器械的滅菌。4.微

27、波1mm-1m波長的超高頻電磁波，可穿透玻璃、塑料薄膜等，但不能穿透金屬表面。三、干燥對細(xì)菌的影響缺水à細(xì)菌的新陳代謝發(fā)生障礙à死亡。不同種類細(xì)菌對干燥的抵抗力差異很大淋球菌: 干燥的環(huán)境中僅能存活幾小時巴氏桿菌、鼻疽桿菌、嗜血桿菌: 幾天結(jié)核桿菌: 幾周至三個月炭疽桿菌: 幾年甚至幾十年四、滲透壓對細(xì)菌的影響鹽腌、糖漬造成細(xì)菌的生理干燥導(dǎo)致質(zhì)壁分離而達(dá)到抑菌的目的。第二節(jié) 化學(xué)消毒滅菌法一、消毒劑和防腐劑的概念消毒劑(disinfectant)：用于殺滅病原微生物的化學(xué)藥物。防腐劑(antiseptic)/抑菌劑(bacteriostat)：用于抑制細(xì)菌生長繁殖的化學(xué)藥物

28、。化學(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥物。二 、消毒劑的應(yīng)用消毒劑主要用于體表、器械、排泄物和周圍環(huán)境的消毒。最理想的消毒劑應(yīng)是殺菌力強(qiáng)、價格低、無腐蝕、能長期保存、對動物無毒性或毒性較小的化學(xué)藥物。三、影響消毒劑作用的因素消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時間各種消毒劑的理化性質(zhì)不同，對微生物的作用大小也有差異。 一般濃度高，殺菌作用強(qiáng)。濃度一定，作用時間越長，殺菌效果越好。（2）微生物的種類與數(shù)量同一消毒劑對不同種類和處于不同生長期的微生物的殺菌效果不同。 微生物的數(shù)量越多，消毒時間就越長。（3）溫度 一般溫度升高，可增強(qiáng)殺菌效果。（4）pH值（5）有機(jī)物:蛋白質(zhì)能和許多消毒劑

29、結(jié)合，嚴(yán)重降低消毒劑的效果。（6)藥物的相互拮抗:由于理化性質(zhì)不同，兩種藥物合用時，可能產(chǎn)生相互拮抗，使藥效降低。 第三節(jié) 抗生素和細(xì)菌素的殺菌作用一、 抗生素（antibiotics）某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺滅另一些微生物的物質(zhì)。主要來源于放線菌，少數(shù)來源于某些霉菌和細(xì)菌，有些也能用化學(xué)方法合成或半合成。二、 細(xì)菌素（bacteriocin）是某種細(xì)菌產(chǎn)生的一種具有殺菌作用的蛋白質(zhì)，只能作用于與它同種不同菌株的細(xì)菌以及與它親緣關(guān)系相近的細(xì)菌。三、 植物殺菌素（phytocidin）存在于某些植物中的殺菌物質(zhì)。如黃連、黃苓、黃柏、大蒜、板藍(lán)根等都含有殺菌物質(zhì)。第四節(jié) 獸醫(yī)微生

30、物實(shí)驗(yàn)室的生物安全一、概念生物安全一般指由現(xiàn)代生物技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用所造成的對生態(tài)環(huán)境和人體健康產(chǎn)生的潛在威脅，及對其所采取的一系列有效預(yù)防和控制措施。實(shí)驗(yàn)室的生物安全目的：防止病原微生物等及其他有害生物物質(zhì)傳入實(shí)驗(yàn)室(biosecurity)防止病原微生物等傳出實(shí)驗(yàn)室(biosafety)實(shí)驗(yàn)室人員的自身安全防護(hù)二、獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的安全要點(diǎn)（P46）所有送檢材料都應(yīng)視為有傳染性并做相應(yīng)處理。實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)具備防范生物危害的知識。三、獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級（P1-4 ）根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護(hù)措施，將生物安全的防護(hù)水平 (biosafety level,BSL)分為四級(1

31、-4級)四、動物病原微生物的分類我國的動物病原微生物的分類：1-4類1類危害最大，4類危害最小。1類（10）：口蹄疫V，高致病性禽流感V,豬水泡病V，非洲豬瘟V，非洲馬瘟V，牛瘟V，小反芻獸瘟V，牛傳染性胸膜肺炎絲狀支原體，牛海綿狀腦病病原，癢病病原2類（8）：豬瘟V， 雞新城疫V，狂犬病V，綿羊痘、山羊痘V，蘭舌病V，兔出血癥V，炭疽芽胞桿菌，布氏桿菌第七章 革蘭陽性球菌葡萄球菌屬：金黃色葡萄球菌鏈球菌屬：無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、豬鏈球菌一、 葡萄菌屬個體為球狀，群體排列為葡萄串狀的細(xì)菌分布：空氣、飼料、飲水、地面和物體表面，人和動物的皮膚、黏膜、消化呼吸道和乳腺。1. 形態(tài)與染

32、色特性球狀，直徑為0.5-1.5m革蘭陽性（衰老死亡或被細(xì)胞吞噬后可轉(zhuǎn)為革蘭陰性）無鞭毛、無芽孢，一般無莢膜固體培養(yǎng)基呈葡萄串狀；濃汁或液體培養(yǎng)基呈雙球狀或短鏈狀。2. 分類根據(jù)細(xì)胞組成、血漿凝固酶、毒素產(chǎn)生以及噬菌體敏感性的不同在1968年分為20多種常見的動物致病菌：金黃色葡萄球菌、金黃色葡萄球菌厭氧亞種、中間葡萄球菌和豬葡萄球菌。3.培養(yǎng)特性（以金黃色葡萄球菌為例）營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上生長良好；需氧或兼性厭氧；致病菌株最適生長溫度37，最適pH7.2-7.6（1） 普通瓊脂：24h-48h，光滑、濕潤、邊緣整齊、不透明的圓形隆起菌落，直徑1-2mm，有時達(dá)到3-4mm。有氧環(huán)境：可

33、產(chǎn)生色素；無氧環(huán)境：不產(chǎn)生色素。（2） 血瓊脂平板上形成較大的菌落多數(shù)致病菌株-溶血4.生化特性：致病菌株，DNA酶陽性，血漿凝固酶陽性，分解甘露醇。5.抵抗力：較強(qiáng)，在塵埃、干燥濃汁和血液中存活幾個月，70 1h，80 30min不能有效的殺死。對石炭酸、升汞、70-75%酒精等消毒藥很敏感。6.致病性：取決于其產(chǎn)生的毒素和酶的能力。（腸毒素、毒素休克綜合征毒素1、透明質(zhì)酸酶、血漿凝固酶、溶血素和殺白細(xì)胞素等多種毒素和酶。）超級細(xì)菌：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 Methicillin-resistant Staphylococcus aureusMRSA7.微生物學(xué)診斷（1）病料采集：不同病型

34、采取不同檢材，如濃汁、血液、可疑食物、嘔吐物以及糞便。（2）直接涂片染色鏡檢：涂片，革蘭氏染色，鏡檢。根據(jù)細(xì)菌形態(tài)，排列和染色性可做出初步診斷。（3）分離培養(yǎng)與鑒定：將病料接種于血瓊脂平板和卻蒲曼瓊脂平板在37 恒溫箱中培養(yǎng)24h，觀察可疑菌落的形態(tài)，溶血和色素，將可疑菌落涂片染色鏡檢，然后進(jìn)行毒力和致病性鑒定（血漿凝固試驗(yàn)、分解甘露醇試驗(yàn)、耐熱核酸酶試驗(yàn)。動物試驗(yàn)（家兔）（4）食物中毒的嘔吐物或剩余食物：將經(jīng)涂片染色鏡檢的可疑菌落接種到普通肉湯中，上清100 24h 進(jìn)行腸毒素檢測（幼貓）8.防治措施（1）注意衛(wèi)生，皮膚創(chuàng)傷及時清理，消毒處理（2）發(fā)病后選擇敏感性藥物進(jìn)行治療，（抗菌素藥敏試

35、驗(yàn)、防止耐藥性產(chǎn)生）（3）加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，定期消毒圈舍。（4）防止醫(yī)源性感染二、鏈球菌屬該屬細(xì)菌為長短不一、鏈狀排列的球形或卵球形、革蘭陽性菌，共有30余種，常見的有10余種。1. 形態(tài)和染色特性（1） 革蘭陽性菌（老齡培養(yǎng)物或被吞噬后可為革蘭陰性菌）（2） 球形或卵圓形，直徑0.5-1m，鏈狀排列。（3） 無芽孢、無鞭毛（D群一些菌株除外）（4） A、B、C、D群中，多數(shù)菌株在血清培養(yǎng)基上的幼齡培養(yǎng)菌或病料中的菌體常見莢膜。2. 鏈球菌分類（1） 核蛋白抗原（P抗原）：無特異性，各種鏈球菌均相同，并與葡萄球菌有交叉（2） 多糖抗原（C抗原）：群特異性抗原（3） 蛋白質(zhì)抗原（表面抗原）：型特異性

36、抗原；是細(xì)胞壁中的蛋白質(zhì)抗原，位于C抗原外層。根據(jù)鏈球菌細(xì)胞壁中多糖抗原的不同，將鏈球菌分成20個血清群。常見的為A-G，動物病原菌以B、C群較多；人多為A群按溶血能力分類：根據(jù)鏈球菌在血瓊脂平板上的溶血現(xiàn)象分為、3種型溶血鏈球菌：在菌落周圍形成不透明的草綠色溶血環(huán)，紅細(xì)胞未溶解，血紅蛋白變成綠色。這類細(xì)菌統(tǒng)稱為草綠色鏈球菌，致病力不強(qiáng)，多為機(jī)會致病菌。型溶血鏈球菌：菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán)，紅細(xì)胞完全溶解。這類菌致病力強(qiáng)，常引起人及動物各種疾病。型溶血鏈球菌：菌落周圍無溶血現(xiàn)象。一般為非致病菌。3. 培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧，個別厭氧；最適生長溫度37，最適PH7.4-7.6；營養(yǎng)要求較高

37、，普通培養(yǎng)基生長不良，需加有血液或血清、葡萄糖等。血瓊脂：細(xì)小露滴狀、灰白色、圓而微凸、表面光滑。邊緣整齊的菌落。血清肉湯：有黏稠或絮狀成點(diǎn)，上液清朗。4. 致病性致病因子有：（1） 毒素溶血素：溶解細(xì)胞；紅斑毒素：致熱，致血斑、細(xì)胞毒性和致死性休克；內(nèi)毒素：為肽聚糖多糖復(fù)合物，致熱、炎癥反應(yīng)、致皮膚壞死、溶解紅細(xì)胞和血小板。（2） 酶透明質(zhì)酸酶、鏈道酶、鏈激酶：擴(kuò)散感染；DNA酶：分解DNA（3） 菌體本身的一些成分菌毛：黏附定居；莢膜：抗吞噬；M蛋白：位于細(xì)胞壁，黏附和抗吞噬（4） 感染譜較廣豬牛羊馬犬貓雞及實(shí)驗(yàn)動物和野生動物的化膿性炎癥、敗血癥和膿毒血癥等。人類感染鏈球菌，可引起猩紅熱、

38、丹毒、風(fēng)濕熱等。豬鏈球菌豬鏈球菌病的病原至少有三種：馬鏈球菌獸疫亞種、豬鏈球菌2型、豬鏈球菌1型（1） 馬鏈球菌獸疫亞種：又叫獸疫鏈球菌C群，溶血；對各種動物有致病性，致豬急性敗血癥及關(guān)節(jié)炎；但未見感染人并致死的報道。（2） 豬鏈球菌致豬敗血癥、肺炎、腦膜炎、關(guān)節(jié)炎及心內(nèi)膜炎1型，S群2型，R群，或溶血，致病性最強(qiáng)，人畜共患5. 微生物學(xué)診斷（1） 病料采集不同病型采取不同檢材，如濃汁。乳汁。血液、組織等（2） 直接涂片染色鏡檢：涂片；革蘭染色；鏡檢；根據(jù)菌落形態(tài)，排列和染色性可做出初步的診斷（3） 分離培養(yǎng)與鑒定將病料接種于血瓊脂平板，37 24h 培養(yǎng)，可疑菌落（形態(tài)、溶血）將可疑菌落涂片

39、染色鏡檢，進(jìn)行生化試驗(yàn)、動物試驗(yàn)（小白鼠、家兔）血清學(xué)試驗(yàn)可用于定群和定型，分子生物學(xué)方法快速檢測。第八章 腸桿菌科腸桿菌科細(xì)菌是一大群生物學(xué)性狀近似的革蘭氏陰性桿菌。多數(shù)是腸道的正常菌群，少數(shù)為病原菌。埃希菌屬：大腸埃希菌沙門菌屬耶爾森菌屬：鼠疫耶爾森菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌其他腸道桿菌屬：克雷伯菌屬埃希菌屬 埃希菌屬有5個種，其中最重要的是大腸埃希菌俗稱大腸桿菌（E.coli)，是最常見的臨床分離菌。形態(tài)特征：大腸桿菌為革蘭氏陰性無芽孢的直桿菌，大小0.40.7umx23um，兩端鈍圓，散在或成對，大多數(shù)菌株周生鞭毛，但也有無鞭毛或丟失鞭毛的變異株。染色特性：堿性染料對本菌有良好著色性，革蘭

40、氏染色法被染成紅色。培養(yǎng)及生化特性：本菌為兼性厭氧菌，在普通肉湯培養(yǎng)基上生長良好，最適生長溫度為37，最適生長pH為7.27.4。在麥康凱瓊脂上形成紅色菌落;在伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬閃光的菌落; 在SS瓊脂上一般不生長或生長較差，生長者呈紅色。在血液瓊脂上大腸桿菌生長茂盛，一些致病性菌株在菌落周圍形成-溶血。 本菌能發(fā)酵多種碳水化合物產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大多數(shù)菌株可迅速發(fā)酵乳糖。約半數(shù)菌株不分解蔗糖，幾乎均不產(chǎn)生硫化氫，不分解尿素。TSI（三糖鐵培養(yǎng)基）上反應(yīng)呈黃色。 抗原及血清型大腸桿菌抗原主要有O、K和H三種。O抗原：173種；K抗原：103種；H抗原：60種。由此，有人認(rèn)為自然界大腸桿菌的血

41、清型可高達(dá)數(shù)萬種。血清型的表示：根據(jù)對大腸桿菌抗原的鑒定，可用O:K:H排列表示其血清型（抗原結(jié)構(gòu)式）。如O8:K23（L）:Hl9，即表示該菌具有O抗原8，L型K抗原23，H抗原為19。對含有蛋白質(zhì)性黏附素抗原的菌株，其黏附素抗原應(yīng)并列K抗原之后。如O8:K87，K88:Hl9中K88即為黏附素抗原F4。 致病性根據(jù)毒力因子與發(fā)病機(jī)制的不同，Gyles認(rèn)為與動物疾病有關(guān)的病原性大腸桿菌可分為五類: 1、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌 (ETEC)2、產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌 (SLTEC)3、腸致病性大腸桿菌 (EPEC)4、敗血性大腸桿菌(SEPEC)5、尿道致病性大腸桿菌 (UPEC)1、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌

42、 (ETEC) ETEC系一類致人和幼畜 (初生仔豬、犢牛、羔羊及斷奶仔豬)腹瀉最常見的病原性大腸桿菌，其致病力主要由黏附素性菌毛和腸毒素兩類毒力因子構(gòu)成，二者密切相關(guān)且缺一不可。初生幼畜被ETEC感染后常因劇烈水樣腹瀉，發(fā)病率和死亡率均很高,如仔豬黃痢 。粘附素性菌毛系人和動物ETEC的一類特有菌毛，因其能粘附于宿主的小腸上皮細(xì)胞，故又稱其為粘附素或定居因子。迄今，在動物ETEC中已發(fā)現(xiàn)的黏附素主要有F4(K88)、F5(K99)、F6 (987P)和F41，其次為F42和F17。腸毒素是ETEC在體內(nèi)或體外生長時產(chǎn)生并分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素，按其對熱的耐受性不同可分為不耐熱腸毒素(L

43、T)和耐熱腸毒素(ST)二種。在動物ETEC中，只有豬源F4+株能同時產(chǎn)生LT和ST，其他菌株僅產(chǎn)ST。2、產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌(STEC)又稱產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素大腸桿菌 (VTEC)，系一類在體內(nèi)或體外生長時可產(chǎn)生類志賀毒素 的病原性大腸桿菌。在動物，SLTEC可致豬的水腫病，以頭部、腸系膜和胃壁漿液性水腫為特征，常伴有共濟(jì)失調(diào)、麻痹或驚厥等神經(jīng)癥狀，發(fā)病率較低但致死率很高。 引起豬水腫病的SLTEC兩類毒力因子： 1）粘附性菌毛：在1990年Bertsching等首次報道，從致豬水腫病的大腸桿菌分離出F18，是豬水腫病的SLTEC菌株的一個重要的毒力因子，它有助于細(xì)菌在豬腸黏膜上皮細(xì)胞定居

44、和繁殖。 2）致水腫病2型類志賀毒素 (SLT-2e或SLT-2v)：系引起豬水腫病的SLTEC所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)性細(xì)胞毒素。微生物學(xué)診斷：動物致病性大腸桿菌的分離與鑒定程序如下禽大腸桿菌病禽大腸桿菌病是由大腸埃希氏菌的某些血清型所引起的一類疾病的總稱。包括心包炎、臍炎、卵巢炎、輸卵管炎、腸炎或慢性腫瘤樣肉芽腫等。 O抗原：是S型菌的一種耐熱菌體抗原，121加熱2h不破壞其抗原性。它的抗原特異性決定于LPS的特異多糖側(cè)鏈的結(jié)構(gòu)。當(dāng)S型菌體丟失特異性多糖時，即變成R型菌，O抗原也隨之丟失。每個菌落只含有一種O抗原，O抗原注射于兔可產(chǎn)生抗O血清。K抗原： 是菌體表面的一種熱不穩(wěn)定抗原，多存在于被膜

45、或莢膜中，個別位于菌毛中。具有K抗原的菌株不會被其相應(yīng)的抗O血清凝集，稱為O不凝集性。根據(jù)耐熱性不同，K抗原又分成L、A、B三型。每個大腸桿菌的菌體可以含有1-2種不同的K抗原，也有無K抗原的菌株。H抗原：是一類不耐熱的鞭毛蛋白抗原，加熱至80或經(jīng)乙醇處理后即可破壞其抗原性。每一有動力的菌株僅含有一種H抗原，且無兩相變異。無鞭毛菌株或丟失鞭毛的變種則不含H抗原。H抗原能刺激機(jī)體產(chǎn)生高效價凝集抗體。沙門菌屬（Salmonella)沙門菌屬（1） 邦戈?duì)柹抽T菌（2） 腸道沙門菌（腸道亞種（與致病密切相關(guān)）、薩拉姆亞種、亞利桑那亞種、雙亞利桑那亞種、豪頓亞種、英迪加亞種）豬：豬副傷寒雞：雞白痢、禽傷

46、寒、禽副傷寒兔：沙門氏菌病牛：沙門氏菌病羊：沙門氏菌病形態(tài)及染色革蘭染色：兩端鈍圓革蘭陰性桿菌瑞士染色：鞭毛：周身鞭毛（雛沙門菌、雞沙門菌除外）莢膜：有菌毛：大多數(shù)有芽孢：無培養(yǎng)及生化特性菌落形態(tài)：普通培養(yǎng)基（圓形、光滑） SS培養(yǎng)基（圓形、光滑、無色、 菌落中央有黑點(diǎn)）在選擇培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖而呈無色菌落。多數(shù)菌株H2S陽性而在菌落中央形成黑點(diǎn)。IMViC試驗(yàn)：-+-+抗原及血清型（一）抗原1 .菌體抗原（O抗原）：其成分為LPS的側(cè)鏈多糖。60多種，耐熱，1個菌株可含多種O抗原，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示。2. 莢膜抗原（Vi抗原）：與毒力有關(guān),由N-乙酰半乳糖醛酸組成。有的菌株有，有的菌株無。3

47、. 鞭毛抗原（H抗原）：其成分為蛋白質(zhì)，不耐熱，63種。 分為兩相：（1）第1相（特異相）：小寫英文字母表示 （2）第2相（非特異相）：阿拉伯?dāng)?shù)字表示（二）血清型（抗原式）表示方法： O抗原：第1相H抗原：第2相H抗原，如： 1，4，5，12：i : 1,2 有Vi抗原的，Vi抗原可寫在O抗原之后，表示為：O抗原： Vi抗原：第1相H抗原：第2相H抗原致病性多數(shù)具有致病性，是一種重要的人畜共患病原菌，很容易在動物與動物、動物與人、人與人之間間接或直接傳播。根據(jù)對宿主適應(yīng)性不同，可分為：1. 專嗜性：如雞白痢、雞傷寒沙門氏菌2. 偏嗜性：如豬霍亂沙門氏菌3. 泛嗜性：如腸炎沙門氏菌致病因子鞭毛、

48、脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）、粘附素、型分泌系統(tǒng) （Type secretion system, T3SS）五、診斷（一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基（二）生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵、IMViC試驗(yàn)、H2S陽性 （三）血清學(xué)試驗(yàn)：玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型與大腸桿菌的鑒別診斷：被檢材料分離培養(yǎng)三糖鐵瓊脂斜面普通瓊脂斜面涂 片 鏡 檢生化反應(yīng)血清型鑒定耶爾森菌屬鼠疫耶爾森菌（人）、假結(jié)核耶爾菌屬（哺乳動物、鳥類）、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（哺乳動物、鳥類）、魯氏耶爾森菌（魚類）、弗氏耶爾森菌、羅氏耶爾森菌、莫氏耶爾森菌、貝氏耶爾森菌、阿氏耶爾森菌鼠疫可在旱懶（土撥鼠）、松鼠、小鼠、花栗鼠等多種野

49、生鼠及野兔和家兔中流行。形態(tài)及染色革蘭染色：多形性，固體培養(yǎng)基中多見卵圓形或短桿狀湯中為短鏈狀（鼠疫耶爾森菌）；肉湯中為絲狀（假結(jié)核耶爾森菌）鞭毛：周身鞭毛（鼠疫耶爾森菌除外）莢膜：有菌毛：大多數(shù)有芽孢：無培養(yǎng)及生化特性菌落形態(tài)：在含血液或組織液的營養(yǎng)培養(yǎng)基中，經(jīng)24小時48小時形成可見菌落。菌落細(xì)小，圓形，無色半透明，中央厚而致密，邊緣薄而不規(guī)則。有毒菌株形成灰白色，粘液性菌落。液體培養(yǎng)：在肉湯培養(yǎng)基中沉淀生長和形成菌膜，液體一般不混濁，稍加搖動，菌膜下沉呈鐘乳石狀溫度：28-30。兼性厭氧pH：7.2-7.4。選擇性培養(yǎng)基：Clin-1培養(yǎng)基、改良Y培養(yǎng)基（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌）致病機(jī)理粘附

50、小腸上皮細(xì)胞及M細(xì)胞，分泌毒力因子，破壞宿主細(xì)胞。鑒定細(xì)菌分離接種選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)生化、血清學(xué)、分子生物學(xué)鑒定克雷伯菌屬肺炎克雷伯菌（肺炎、臭鼻、鼻硬結(jié)）、產(chǎn)酸克雷伯菌、土生克雷伯菌、值生克雷伯菌、肉芽腫克雷伯菌、活動克雷伯菌存在于呼吸道和腸道，是一種條件致病菌。醫(yī)院感染：造成肺炎、尿路感染和菌血癥。耐藥菌：超廣譜-內(nèi)酰胺酶耐藥基因形態(tài)及染色革蘭染色：較粗的短桿菌，成堆或短桿狀排列鞭毛：無莢膜：有菌毛：大多數(shù)有芽孢：無培養(yǎng)及生化特性營養(yǎng)要求：普通培養(yǎng)基菌落形態(tài)：粘液狀大菌落，濃厚、圓凸、灰白色、閃光、豐盛而黏稠溫度： 37兼性厭氧pH： 7.2-7.4。選擇性培養(yǎng)基：腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基（麥康

51、凱肌醇阿東醇羧芐青霉素培養(yǎng)基(MIAC）血清型：O抗原：O1-O5。K抗原：82個莢膜型。第十章 巴氏桿菌科及黃桿菌科巴氏桿菌屬:多殺性巴氏桿菌曼氏桿菌屬:溶血性曼氏桿菌放線桿菌屬:胸膜肺炎放線桿菌嗜血桿菌屬:副豬嗜血桿菌巴氏桿菌屬本屬細(xì)菌已報道有16多種，多殺性巴氏桿菌(P.multocida)是本屬中最重要的畜禽致病菌，可引起多種動物發(fā)生出血性敗血癥或傳染性肺炎。豬：豬肺疫雞：禽霍亂牛：牛出血性敗血癥（牛出?。┩茫和冒褪蠗U菌病羊：羊巴氏桿菌病一、形態(tài)及染色兩端鈍圓，中央鈍圓的短桿菌G-菌，單個存在，有時成雙排列,病料涂片用瑞氏染色或美藍(lán)染色時，可見典型的兩極著色，培養(yǎng)物所作的涂片，兩極著色

52、不明顯。無鞭毛、無芽孢、新分離的細(xì)菌有莢膜二、培養(yǎng)特性 對營養(yǎng)要求較嚴(yán)格。在普通培養(yǎng)基上生長貧瘠，血液或血清培養(yǎng)基中生長良好，長成灰白色露珠狀針尖大小菌落，不溶血，麥康凱培養(yǎng)上不生長。馬丁肉湯培養(yǎng)基三、血清型1.菌體抗原:16個型，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示 2.莢膜抗原:有6個型，大寫英文字母表示禽多殺性巴氏桿菌：5:A、8:A。豬源：5:A、6:B、8:A、2:D。羊源：6:B家兔：7:A四、抵抗力本菌抵抗力不強(qiáng)，普通消毒藥常用濃度對本菌都有很好的消毒力。在無菌蒸餾水和生理鹽水中很快死亡。凍干菌種在低溫中可保存長達(dá)26年。五、致病性與免疫性本菌是多種動物的重要病原菌 ，主要引起出血性敗血癥、肺炎，如

53、豬肺疫 、禽霍亂等。實(shí)驗(yàn)動物中小鼠非常易感。（莢膜多糖：內(nèi)毒素、外毒素）動物患病痊愈后，可獲得較強(qiáng)的免疫力，且對其他血清型具有交叉保護(hù)力。高免多價血清具有良好的緊急預(yù)防和治療作用。滅活疫苗、弱毒疫苗、莢膜亞單位疫苗六、微生物學(xué)診斷 1.涂片或觸片鏡檢 染色（美藍(lán)或瑞氏），兩極著色 2.分離培養(yǎng) 麥康凱瓊脂不生長,血平板不溶血 3.動物試驗(yàn) 病料懸液或培養(yǎng)物接種小白鼠,引起小白鼠迅速死亡 曼氏桿菌屬（Mannheimia) 溶血性曼氏桿菌（Mannheimia. haemolytica）原名溶血性巴氏桿菌，是反芻動物（牛、綿羊）肺炎、新生羔羊急性敗血癥的病原菌。形態(tài)及染色革蘭染色：兩極著色兩端鈍圓革蘭陰性桿菌瑞士染色：兩極著色無鞭毛、有莢膜、有菌毛、無芽孢培養(yǎng)及生化特性營養(yǎng)要求：普通培養(yǎng)基、血培養(yǎng)基菌落形態(tài)：光滑、半透明菌落，多數(shù)菌株在牛血平板出現(xiàn)溶血。溫度： 37兼性厭氧pH： 7.2-7.4。三、毒力因子白細(xì)胞毒素：穿孔毒素，Repeats-in-toxins（RTX），溶解白細(xì)胞和血小板 放線桿菌屬胸膜肺炎放線桿菌：豬是該菌的唯一宿主，引起豬的傳染性胸膜肺炎林氏放線桿菌駒放線桿菌一、形態(tài)及染色革蘭染色：小球桿菌，具新鮮病料兩極著色瑞士染