藥物鑒別試驗

1、 藥物鑒別試驗一、葡萄糖注射液（一）化學結(jié)構(gòu) 結(jié)構(gòu)簡式：CH2OHCHOHCHOHCHOHCHOHCHO系統(tǒng)命名：（2R,3S,4R,5R)-2，3，4，5，6-五羥基己醛（二）理化性質(zhì)1.無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末，無臭，味甜。易溶于水，微溶于乙醇。熔點83，無結(jié)晶水熔點146。（甜度：a-D-葡萄糖的比甜度為0.7，以蔗糖為基準物，憑味覺感官判斷）2. 旋光性：葡萄糖分子結(jié)構(gòu)中有5個不對稱碳原子，具有旋光性3. 黏度：葡萄糖的黏度隨著溫度的升高而增大。4. 分子中的醛基，有還原性，易被氧化成葡萄糖酸5. 醛基還能被還原為己六醇6. 分子中有多個羥基，能與酸發(fā)生酯化反應7. 葡萄糖在生

2、物體內(nèi)發(fā)生氧化反應，放出熱量。（三）鑒別方法1.比旋度：葡萄糖具有旋光性，為右旋體。比旋度是旋光性物質(zhì)的特征常數(shù)，具有鑒別意義。D-葡萄糖在20攝氏度光時的比旋光度數(shù)值為+52.2.2.化學方法（1）醛基鑒別（還原性）1）葡萄糖溶液與銀氨溶液反應有銀鏡反應CH2OH（CHOH）4CHO+2Ag(NH3)2OH（水浴加熱）CH2OH（CHOH）4COONH4+2Ag+3NH3+H2O2）在堿性溶液中可將銅離子還原成紅色的氧化亞銅沉淀。A.葡萄糖溶液與新制氫氧化銅懸濁液反應原理：氫氧化鈉與硫酸銅反應生成氫氧化銅藍色沉淀新制的氫氧化銅具有氧化性，與葡萄糖反應生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。CH2OH（CH

3、OH）4CHO+2Cu(OH)2-加熱CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O+2H2OB.與斐林試劑反應葡萄糖為可溶性還原糖，在加熱的條件下，溶液的顏色變化過程為：淺藍色棕色磚紅色，能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。C. 將葡萄糖的鑒別方法修改為:取本品0.2g,加水5ml溶解后,加3ml堿性酒石酸銅試液,加熱,即生成氧化亞銅的紅色沉淀3）與溴水反應（與果糖區(qū)別）葡萄糖在酸性條件下能被溴水氧化而使溴水褪色。（2）成脎反應：葡萄糖還可與苯肼結(jié)合，生成葡萄糖脎，后者在結(jié)晶形狀和熔點方面都與其他糖脎不同。雖然果糖和葡萄糖生成相同的的脎，但果糖的糖脎反應比葡萄糖快。（3）與膠體硫溶液反應（將0.5g硫

4、代硫酸鈉溶解于10ml濃硫酸中,再加濃硫酸至25ml,即得） 取葡萄糖或葡萄糖的混合物溶解于一滴水中,添加o.3ml試劑,幾分鐘后呈現(xiàn)淡紫色-紫色反應。若是葡萄糖溶液,則直接取1滴,加o.3ml試劑,觀察呈色反應。（4）在葡萄糖溶液中入間苯二酚稀鹽酸溶液,加熱, 長時間后變?yōu)榉奂t色（快生成鮮紅色的溶液是果糖,）3光譜方法（1）紅外光譜法葡萄糖結(jié)構(gòu)中有許多特征基團，其紅外吸收圖譜應與對照的圖譜一致。4.色譜方法（1）薄層色譜法取葡萄糖原料50mg,置10間量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成每ml含葡萄糖5mg的供試品溶液。另取無水葡萄糖,同法操作,制成每ml含葡萄糖5mg的對照品溶液。吸取

5、上述2種溶液各5閃,分別點于同一硅膠HSGF254薄層板上(用前105活化lh),以甲醇:濃氨溶液(50:10)為展開劑展開',取出,室溫晾干,置紫外分析儀(254lun)下檢視,2個檢品均無斑點,薄層板再置碘蒸氣中顯色30min,取出檢視,葡萄糖是圓狀的褐色大斑點. ,在與葡萄糖對照品斑點相應的位置上,葡萄糖供試品出現(xiàn)相同顏色的斑點,斑點清晰.（2）拉曼散射光譜法原理：采用拉曼光譜分析技術(shù)，激發(fā)波長785nm，激光強度和積分時間根據(jù)樣品的特性進行調(diào)整，對葡萄糖注射液樣品進行拉曼光譜掃描,選擇特征譜段，建立化學計量學模型:譜段為970cm-11140cm-1與1160cm-11580c

6、m-1;光譜預處理方法為矢量歸一與一階導數(shù)(23 點平滑);采用主成分光譜和主成分參考光譜的相關(guān)系數(shù)進行計算;閾值為0.95，同時驗證模型的準確性對葡萄糖注射液進行拉曼光譜掃描，采用模式識別技術(shù).對驗證集中的樣品能夠作出準確無誤的判別.（3）高相液相色譜法在含量測定項下記錄的色譜中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。二、阿司匹林腸溶片（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1.本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分解。2.酸性：分子結(jié)構(gòu)中具有

7、游離羧基而顯酸性。3.水解性：分子結(jié)構(gòu)中具有酯鍵而可發(fā)生水解反應。4.吸收光譜特性：分子結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和特征取代基，具有紫外和紅外特征光譜。（三）鑒別方法1.外觀及熔點：純乙酰水楊酸為白色針狀或片狀晶體，m.p135136，但由于它受熱易分解，因此熔點難測準。2.與三氯化鐵反應原理：水楊酸及其鹽在中性或弱酸條件下，與三氯化鐵試液反應, 分子中的酯鍵受熱水解，生成紫堇色鐵配合物，顯紫堇色。這是部分本品水解成水楊酸，三價鐵離子與水楊酸的酚羥基結(jié)合所致3.水解反應原理：阿司匹林與碳酸鈉試液加熱水解，得水楊酸鈉,醋酸鈉,加過量稀硫酸后，水楊酸白色沉淀析出,產(chǎn)生醋酸的臭氣. 4.紅外分光光度法 本品的紅

8、外光吸收圖譜應與對照的圖譜一致。5.薄層色譜法 各取供試品和對照品溶液20ul，點樣于硅膠GF254板，將正己烷乙酸乙酯冰乙酸（15:5:1）混合液810ml倒入層析缸中，將點樣完畢的薄層板放入，待展開完全將板取出，待展開劑揮盡，置254nm紫外光燈下觀察，供試品所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液的主斑點相同。6.高效液相色譜法 各取供試品和對照品溶液20ul注入高效液相分析儀，在記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。7.近紅外光譜法 本法是通過測定被測物質(zhì)在近紅外光譜區(qū)750-2500nm的特征光譜并利用適宜的化學計量學方法提取相關(guān)信息后，對被測物質(zhì)進行

9、定性、定量的一種分析技術(shù)。具有快速、準確、對樣品無破壞的檢測特性，特別是還可以直接對“在線樣品進行檢測。8.原子吸收法 利用原子蒸汽可以吸收元素作為陰極的空心陰極燈發(fā)出的特征普線的特性。根據(jù)供試溶液在特征譜線處的最大吸收和特征譜線的強度減弱程度可以進行定性、定量分析。9.核磁共振 利用原子核的物理性質(zhì)，采用當代先進的電子和計算機技術(shù)，用于各種分子物理和化學結(jié)構(gòu)的研究。最常用的是1H-NMR。三、維生素E軟膠囊（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1.外觀：維生素E為微黃色至黃色或黃綠色澄清的粘稠液體，幾乎無臭，遇光色漸變深。2.溶解度：在無水乙醇，丙酮，氯仿，乙醚或石油醚中易溶，在水中不溶。維生素E苯

10、環(huán)上有乙?；姆恿u基，在酸性或堿性溶液中加熱或水解生成游離生育酚，故常將其作為特殊雜質(zhì)進行檢查3.物理常數(shù)吸收系數(shù)：紫外吸收特性：維生素E結(jié)構(gòu)中苯環(huán)上有酚羥基，故有紫外吸收，其無水乙醇溶液在284nm的波長處有最大吸收，其吸收系數(shù)為41.045.0。（三）鑒別方法1.三氯化鐵反應原理：維生素E在堿性條件下，水解生成游離的生育酚，生育酚經(jīng)乙醚提 取后，可被Fecl3氧化成對生育酚；同時鐵離子被還原為亞鐵離子，亞鐵離子與聯(lián)吡啶生成紅色的配位離子。方法：取本品的內(nèi)容物，研細，加乙醇制氫氧化鉀試液2ml，煮沸5分鐘， 放冷，加水4ml與乙醚10ml，振搖，靜置使分層；取乙醚液2ml，加2,2-聯(lián)吡啶的

11、乙醇溶液（0.5ml稀釋成100ml）數(shù)滴和三氯化鐵的乙醇液（0.2ml稀釋成100ml）數(shù)滴，應顯血紅色。2. 紫外光譜法：本品的0.01%無水乙醇液，在284nm的波長處有最大吸收；在254nm的波長處有最小吸收，可供鑒別。3. 薄層色譜法：將供試品點于硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷乙醚（4:1）為展開劑，展開10-15cm后，取出，于空氣中晾干，噴以濃硫酸，在105攝氏度加熱5min，生育酚，生育酚醋酸酯和生育醌的Rf值分別為0.5,0.7，0.9。4.紅外光譜法5.高效液相色譜法四、硫酸阿托品片（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1.  無色結(jié)晶或白色晶性粉末，無臭，味苦。極易溶于水，易

12、溶于乙醇，不溶于乙醚或氯仿。2.水解性：阿托品分子結(jié)構(gòu)中，具有酯的結(jié)構(gòu)，易于水解。3.堿性：阿托品分子結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上有叔胺氮原子，具有較強的堿性，易于與酸成鹽。（三）鑒別方法1.化學方法（1）Vitali反應阿托品的酯鍵水解后生成莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀的醇溶液和固體氫氧化鉀作用脫羧，轉(zhuǎn)變成具有共軛結(jié)構(gòu)的陰離子而顯深紫色。（2）與硫酸-重鉻酸鉀的反應阿托品的酯鍵水解后生成莨菪酸，可與硫酸-重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味（3）與生物堿沉淀試劑反應阿托品具有生物堿的性質(zhì)，在酸性水溶液中可與重金屬鹽類或大分子酸類等沉淀

13、試劑反應，生成難溶性的鹽、復鹽或配合物沉淀。2光譜方法（1）紫外光譜法阿托品結(jié)構(gòu)中有苯環(huán)，具有紫外吸收，通過比較最大波長、最小坡長或吸收光譜的一致性進行鑒別，若不止一個峰（谷），也可通過比較其吸光度或吸收系數(shù)的比值。（2）紅外光譜法阿托品結(jié)構(gòu)中有許多特征基團，其紅外吸收圖譜應與對照的圖譜一致。3.色譜方法（1）薄層色譜法（2）高效液相色譜法各取供試品和對照品溶液20ul注入高效液相分析儀，在記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。4.硫酸鹽的反應（1）取供試品溶液，滴加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。（2）取供試品溶液，滴加醋酸鉛

14、試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸鉛試液或氫氧化鈉試液中溶解。（3）取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀（與硫代硫酸鹽區(qū)別）五、維生素C顆粒（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1. 無色晶體，無臭有酸味。熔點190192（分解）2.溶解性：在水中易溶，水溶液呈酸性；在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。3.酸性：分子結(jié)構(gòu)中有烯二醇基，尤其是C3位OH由于受共軛效應的影響，酸性較強。4.旋光性：分子中有2個手性碳原子，具有旋光性，其比旋度為+20.5+21.55.還原性：分子結(jié)構(gòu)中的烯二醇基具極強的還原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗壞血酸，加氫又可還原為抗壞血酸。在堿性溶液或強酸性溶液中能進一步

15、水解為二酮古洛糖酸而失去活性，且為不可逆反應。6.水解性：因雙鍵使內(nèi)酯環(huán)變得較穩(wěn)定，和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解。但在強堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解，生成銅酸鹽。7.糖類的性質(zhì)：化學結(jié)構(gòu)與糖類類似8.紫外吸收特征：結(jié)構(gòu)中具有共軛雙鍵，其稀鹽酸溶液在243nm波長處有最大吸收；若在中性或堿性條件下，則最大吸收移至265nm處。（三）鑒別方法1. 比旋度：維生素C具有旋光性，為右旋體。比旋度為+20.5+21.52.與硝酸銀反應分子結(jié)構(gòu)中有烯二醇基，具有強還原性，可被硝酸銀氧化為去氫抗壞血酸，同時產(chǎn)生黑色金屬銀沉淀。3.與二氯靛酚鈉反應分子結(jié)構(gòu)中有烯二醇基，具有強還原性，可將玫瑰花色氧化型2,6-

16、二氯靛酚還原成無色的酚亞胺。4.與其他氧化劑反應維生素C還可被亞甲藍、高錳酸鉀、堿性酒石酸銅試液、磷鉬酸等氧化劑氧化為去氫抗壞血酸，同時使其試劑褪色，產(chǎn)生沉淀或呈現(xiàn)顏色。5. 利用糖類性質(zhì)的反應維生素C可在三氯醋酸或鹽酸存在下水解、脫羧，生成戊糖，再失水，轉(zhuǎn)變?yōu)榭啡?，加入吡咯，加熱?0產(chǎn)生藍色。6. 紅外光譜法：USP、BP均采用該方法鑒別維生素C。本品的紅外吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集450圖)一致。7.薄層色譜法吸取供試品溶液和對照品溶液各2ul，分別點于同一硅膠GF254薄層上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5:4:1）8.紫外光譜法9.高效液相色譜法六、阿苯達唑膠囊（一）化學.結(jié)構(gòu)（二）理

17、化性質(zhì)本品為白色或為類白色粉末；無臭無味。本品在丙酮或三氯甲烷中微溶，在乙醇中幾乎不溶，在水中不溶，在冰醋酸中溶解。熔點：本品的熔點為206212，熔融時同時分解。（三）鑒別方法1. 取本品的內(nèi)容物適量，取本品約0.1g，置試管底部，管口放一濕潤的醋酸鉛試紙，加熱灼燒試管底部，產(chǎn)生的氣體能使醋酸鉛試紙顯黑色。2. 取本品約0.1g，溶于微溫的稀硫酸中，滴加碘化鉍鉀試液，即生產(chǎn)紅棕色沉淀。3. 取含量測定項下的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄A）測定，在295nm的波長處有最大吸收，在277nm的波長處有最小吸收。4. 吸收系數(shù)：取本品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加冰醋酸5ml溶

18、解后，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在295的波長處測定吸光度，吸光系數(shù)為430458. 5.紅外光譜法6.高相液相色譜法七、對乙酰氨基酚（一） 化學結(jié)構(gòu) （二） 理化性質(zhì)1.白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。在熱水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中略溶。熔點：168172.2.酸性：結(jié)構(gòu)中有酚羥基，有弱酸性。3.水解性：藥物結(jié)構(gòu)中有酰胺基，在酸性溶液中易水解得具有芳伯氨基的產(chǎn)物。因此藥物的水解產(chǎn)物可具有芳伯氨基特性反應。4.吸收光譜特征：結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和特征取代基，具有紫外和紅外特征光譜。5.基團特征：結(jié)構(gòu)中有酚羥基，能與三價鐵

19、可生成有色配位化合物。（三）鑒別方法1.與三氯化鐵反應因為結(jié)構(gòu)中有酚羥基，其水溶液加三氯化鐵試液即顯藍紫色。2.重氮化-偶合反應本品在稀鹽酸中加熱水解生成對氨基酚，具有游離芳伯氨基結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中與亞硝酸試液進行重氮化反應，生成的重氮鹽再與堿性-萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。3. 水解產(chǎn)物酯化反應對乙酰氨基酚水解后產(chǎn)生醋酸，可在硫酸介質(zhì)中與乙醇反應，發(fā)出醋酸乙酯的香味4.光譜法（1）紫外分光光度法本品在257士Inm波長處測定對乙酞氨基酚泡騰片的含量,其濃度與吸收度的線性關(guān)系。本法簡便、快速、結(jié)果準確。（2）紅外分光光度法以熱水為溶劑進行重結(jié)晶,采用紅外分光光度法(溴化鉀壓片)進行定性鑒別。對

20、乙酰氨基酚片與對乙酰氨基酚對照品的紅外吸收光譜完全一致,并與國家藥典委員會頒布的藥品紅外光譜集中的對乙酰氨基酚光譜一致。本法專屬性強、快速、簡便.（3）差示分光光度法利用對乙酰胺在酸性條件下水解生成的-氨基酚在堿性條件下與硝普鈉反應生成綠藍色，在700nm處有最大吸收峰，而除4-氨基酚以外的其他對位取代物均無此反應的特點，因此可以采用差示分光光度法。5.色譜法（1）薄層色譜法（2）高效液相色譜法本品取含量測定項下記錄的HPLC色譜圖進行鑒別。取本品適量，精密稱定，加溶劑制成每1ml中約含20mg的溶液；另取對氨基酚對照品和對乙酰氨基酚對照品適量，精密稱定，加上述溶液溶解并制成每1ml中約含對氨

21、基酚1ug和對乙酰氨基酚20ug的混合溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法檢查。八、苯妥英鈉片（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1. 白色粉末，無臭。熔點290-299。置于空氣中能吸收水分和二氧化碳，析出苯妥英。易溶于乙醇、水，不溶于氯仿和乙醚。2.堿性：含堿性氮原子，水溶液顯堿性。3.水解性：水溶液不穩(wěn)定，放置時易發(fā)生水解反應。（有內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)）（三）鑒別方法1.取本品的細粉適量（約相當于苯妥英鈉1g），加水20ml，浸漬使苯妥英鈉溶解，濾過，濾液加二氯化汞試液數(shù)滴，即生成白色沉淀，在氨試液中不溶解。2. 與吡啶硫酸銅試液反應顯藍色（巴比妥類顯紫色）3.紫外分光光度法取本品約10mg，加高猛酸

22、鉀10mg、氫氧化鈉0.25g與水10ml,小火加熱5分鐘，放冷，取上清液5ml，加正庚烷20ml，振搖提取，靜置分層后，取正庚烷提取液,照紫外-可見分光光度法（附錄A）測定，在248nm的波長處有最大吸收4.鈉的焰色反應：取本品的細粉適量（約相當于苯妥英鈉1g），加水20ml，浸漬使苯妥英鈉溶解，濾過，取濾液，蒸干，取鉑絲，用鹽酸潤濕后，蘸取前述供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。九、異煙肼片（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1. 外觀：為無色結(jié)晶，或白色至類白色的結(jié)晶性粉末；無臭，味微甜后苦；遇光漸變質(zhì)。2.溶解性：在水中易溶，在乙醇中微溶，幾乎不溶于苯和乙醚。須避光密封保存。本品的熔點

23、為170173。2.堿性：結(jié)構(gòu)中有堿性氮原子，顯堿性。3.還原性：結(jié)構(gòu)中有酰肼基，酰肼基具有較強的還原性，并可與某些含羰基的試劑發(fā)生縮合反應。（三）鑒別方法1. 制備衍生物測定熔點異煙肼含酰肼基，可以和含羰基的試劑如香草醛發(fā)生縮合反應，生成異煙腙衍生物，為黃色結(jié)晶物，可測定其熔點2. 銀鏡反應異煙肼的肼基具有還原性，可與多倫試劑（氨制硝酸銀）作用，放出氮氣并有銀鏡生成！3.與硫酸銅試液反應，生成草綠色沉淀。（金屬離子配伍）4.紅外光譜5.紫外光譜法6.高效液相色譜法十、維生素B2片（一）化學結(jié)構(gòu) （二）理化性質(zhì)1. 維生素B2又叫核黃素，橙黃色結(jié)晶化合物，微溶于水，幾乎不溶于乙醇和氯仿，也不溶

24、于丙酮，乙醚和苯，易溶于稀的氫氧化鈉溶液。在水溶液中它會發(fā)出略帶綠色的黃色熒光。核黃素在240變暗色，其熔點為275282，并在此溫度下被破壞。 2. 核黃素在干燥狀態(tài)下性質(zhì)穩(wěn)定。在中性和酸性溶液中，核黃素對熱穩(wěn)定，120下加熱lh也僅有少量破壞，但在堿性溶液中加熱則容易被破壞，降解為無生物活性的光黃素。核黃素對大多數(shù)氧化劑(如過氧化氫)穩(wěn)定，但可被鉻酸和高錳酸鉀所氧化。 3.游離核黃素對光很敏感，在光照尤其是紫外線照射下，極易引起不可逆分解而被破壞，且被破壞速度隨溫度和pH升高而加速。但大多數(shù)食物中的核黃素是以結(jié)合形式(與磷酸，蛋白質(zhì)等結(jié)合成復合化合物)存在的。此種結(jié)合型的維生素B2對光比較穩(wěn)定。（三）鑒別方法1.本品在水溶液中呈現(xiàn)黃綠色熒光。2. 比旋度 避光操作。取本品，精密稱定，加無碳酸鹽的氫氧化鉀溶液（取氫氧化鉀20g，加無醛乙醇制成20的溶液，放置過夜后，吸取上清液，加無醛