物流開題報(bào)告畢業(yè)論文

1、物流開題報(bào)告畢業(yè)論文研究背景眼科最常見致盲眼病有白內(nèi)障、青光眼、糖 尿病視網(wǎng)膜病變和黃斑病等，其中青光眼是繼白內(nèi)障后的 第二致盲原因，物流開題報(bào)告畢業(yè)論文。我國青光眼的發(fā)病率為，患 病人數(shù)約為700萬。xx年資料顯示世界青光眼發(fā)病人數(shù)到 xx年將達(dá)到7000萬，雙眼盲目人數(shù)達(dá)到840萬 (quigleyetal. , xx)。眾多的青光眼患者和青光眼盲者， 不僅給患者帶來極大的身心痛苦，而且還造成社會(huì)和經(jīng)濟(jì) 的巨大負(fù)擔(dān)，因此，預(yù)防、控制及治療青光眼十分重要且 迫切！青光眼是一種由于病理性眼壓增高導(dǎo)致的具有特征性 視神經(jīng)結(jié)構(gòu)損傷和視野缺損為表現(xiàn)的神經(jīng)性退行性視神經(jīng) 病變，其最終的結(jié)局是視網(wǎng)膜神經(jīng)

2、節(jié)細(xì)胞(rgcs)凋亡、視 功能逐漸喪失(bu ckinghamet al. , xx)。目前已有大量保 護(hù)rgcs的研究結(jié)果，主要包插：改善視乳頭微循環(huán)、谷氨 酸途徑抑制劑、神經(jīng)營養(yǎng)因子，誘導(dǎo)熱休克蛋白表達(dá)及抗 氧化治療等。然而，青光眼的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、受體通道研究在rgcs損傷與保護(hù)中的作用 近年來正得到關(guān)注。最新的研究方向和靶點(diǎn)之一是關(guān)于能 感受壓力的受體通道可能參與傳遞病理刺激造成神經(jīng)損傷 (quigleyet al. , xx) 。 tr pc6(transi entrecepto rpotential , c6)是一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的、壓力敏感、參與神經(jīng)元 存活與凋亡的

3、鈣離子通透膜通道蛋白。本人曾參與課題 仃p c6通道在視網(wǎng)膜缺血再灌模型中對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的保 護(hù)作用的研究，并獲得了有價(jià)值的前期研究結(jié)果：較為全 面而精確的定位了 tr pc6通道基因和蛋白在sd大鼠視網(wǎng)膜、 尤其是rgcs上的表達(dá)和分布，trpc6在rgc層上有選擇性 的高表達(dá);探討了 trp c6在大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌(ischemi areperfusi on, ir)損傷過程中的表達(dá)變化，trp c6基因和 蛋白在視網(wǎng)膜缺血損傷中的再灌注后24小時(shí)，出現(xiàn)一過性 的表達(dá)升高;在體的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，其激動(dòng)劑o昭具 有保護(hù)視網(wǎng)膜ir模型誘導(dǎo)的rgcs免受損傷，而拮抗劑 skf963 65則

4、促進(jìn)了 rgcs凋亡的發(fā)生，本研究擬進(jìn)一步探 討trpc6的作用機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-d erivedneur otrophicfa ctor, bdnf)與trpc通道在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、調(diào)控細(xì)胞 存活的過程中有密切的聯(lián)系。xx年4月中國科學(xué)院上海神 經(jīng)科學(xué)研究所王以政研究員課題組在n atureneuro science 上發(fā)表論文，首次證實(shí)過表達(dá)trpc6/trpc 3可保護(hù)小腦神 經(jīng)元對抗因血清剝奪而導(dǎo)致的細(xì)胞死亡，且發(fā)現(xiàn)bd nf位于 trpc3/ 6介導(dǎo)的細(xì)胞保護(hù)信號通路的上游(taie tai., xxa; j iaetal. , xx ) o本課題擬探討bdn

5、f介導(dǎo)trpc 6通道蛋白保護(hù)視網(wǎng)膜跟 模型誘導(dǎo)的rgcs免受損傷的作用機(jī)制，對深入闡明青光眼 的發(fā)病機(jī)制，為臨床干預(yù)治提供新的思路和藥物干預(yù)靶點(diǎn), 具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。本課題的研究主要分為以下二部 分：第一部分視網(wǎng)膜ir模型中調(diào)控trpc通道時(shí)bdnf的表 達(dá)變化一、研究目的在sd大鼠視網(wǎng)膜ir模型中檢測bdnf 基因不同再灌注時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化，同時(shí)檢測抑制trp c通 道時(shí)bdnf蛋白水平變化、探討其表達(dá)類型對rgcs凋亡的 影響。二、研究方法1、在視網(wǎng)膜ir模型中檢測bdnf基 因的表達(dá)。采用視神經(jīng)血管鉗夾法建立視網(wǎng)膜ir模型，夾 閉視網(wǎng)膜血供6 0分鐘，分別于再灌注后3小時(shí)、24小 時(shí)

6、、48小時(shí)、7天處死大鼠，摘取眼球，顯微鏡下剝離視 網(wǎng)膜，提取視網(wǎng)膜總rna,利用反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(r t- pcr)及實(shí)時(shí)熒光定量per(rea 1-timepcr)測定bdnf基因表 達(dá)變化。2、抑制trp c通道時(shí)檢測bdnf蛋白的表達(dá)。建立 大鼠視網(wǎng)膜ir模型，于視網(wǎng)膜缺血術(shù)前30分鐘，右眼通 過玻璃體腔注射trpc拮抗劑sk f96365為實(shí)驗(yàn)組，左眼注 射溶劑pbs為陰性對照組，分別于再灌后3小時(shí)、6小時(shí)、 12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)處死大鼠，摘取眼 球，顯微鏡下剝離視網(wǎng)膜，提取視網(wǎng)膜總蛋白，蛋白質(zhì)免 疫印跡(wes ternblot)檢測bdnf在視網(wǎng)膜組織中的蛋白表 達(dá)水平， 開題報(bào)告物流開題報(bào)告畢業(yè)論文分享好文3、抑制tr pc通道時(shí)檢測bdn f基因的 表達(dá)。將sd大鼠分為4組，分別進(jìn)行如下處理：第一組， 對眼球進(jìn)行假手術(shù)，只行視神經(jīng)分離術(shù)，不行視網(wǎng)膜缺血 手術(shù);第二組，建立視網(wǎng)膜ir模型;第三組于視網(wǎng)膜缺血術(shù) 前30分鐘，通過玻璃體腔注射pbs溶液，然后再建立視網(wǎng) 膜讓模型;第四組于視網(wǎng)膜缺血術(shù)前30分鐘，通過玻璃體 腔注射注射skf96365,然后再建立視網(wǎng)膜ir模型。所有大 鼠于再灌注后24小時(shí)處死，摘取眼球，顯微鏡下剝離視網(wǎng) 膜，提取視網(wǎng)膜總rna, real-t imepcr測定bd nf基因表達(dá) 變化。三、研究結(jié)果r