農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)

1、農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)首先，無公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)過程中控制的重點(diǎn)是農(nóng)藥使用。一是 品種控制，二是安全間隔期的控制。其次，無公害農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中檢 測(cè)的重點(diǎn)是農(nóng)藥殘留（種植業(yè)產(chǎn)品） 。一、農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)類別1. 農(nóng)藥殘留的生物測(cè)定技術(shù) 利用指示生物的生理生化反應(yīng)來判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況。 例如，可以用實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)的敏感性家蠅為測(cè)定材料，以其接觸待測(cè)樣 品后的中毒程度來表示該樣品中的殺蟲劑殘留；以病菌生長(zhǎng)受抑制 的程度來檢測(cè)殺菌劑的殘留，以玉米或其它指示植物根長(zhǎng)受抑制的 程度來檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑殘留等。該方法無需對(duì)樣品前處 理比較簡(jiǎn)單快速或無需進(jìn)行前處理，但對(duì)指示生物要求較高，測(cè)定 結(jié)果不能確定農(nóng)藥

2、品種，并且可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性的情況，該 方法可作為快速檢驗(yàn)方法用于農(nóng)產(chǎn)品引起中毒或在現(xiàn)場(chǎng)使用。2. 農(nóng)藥殘留的理化檢測(cè) 用于農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測(cè)方法有分光光度法、極譜法、原子吸 收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標(biāo)記法、 核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等。自二十世紀(jì)九十年代以來，現(xiàn)代 化學(xué)分析技術(shù)日新月異，許多新技術(shù)已進(jìn)入實(shí)用階段，如毛細(xì)管電 脈儀技術(shù)（CZE,色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（GC-MS HPLC-M）超臨界流體色 譜技術(shù)（SFC,直接光譜分析技術(shù)等。這些新技術(shù)的應(yīng)用，大大提 高農(nóng)藥殘留分析的靈敏度，簡(jiǎn)化分析步驟，提高了分析效率。但是， 這些分析方法有的靈敏度不高，如分光光度法、

3、薄層層析法等。有 的需要昂貴的儀器，如色質(zhì)聯(lián)用法、核磁共振波譜法等。還有的需 要特殊的設(shè)備，如同位素標(biāo)記法等。因此，目前，普遍采用的還是 氣相色譜法和液相色譜法，它們具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏以及穩(wěn)定性 和重現(xiàn)性好，線性范圍寬、耗資低等優(yōu)點(diǎn)。（1）氣相色譜法（ GC） 采用氣體作流動(dòng)相的色譜法，用于揮發(fā)性農(nóng)藥的檢測(cè)，具有高 選擇性、高分離效能、高靈敏度、快速和特點(diǎn)，是農(nóng)藥殘留量檢測(cè) 最常用的方法之一，目前用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)的檢測(cè)器主要有電子捕 獲檢測(cè)器（ECD、微池電子捕獲檢測(cè)器（U-ECD）、火焰光度檢測(cè)器（FPD、脈沖火焰光度檢測(cè)器（P-FPD、氮磷檢測(cè)器（NPD等。（ 2、液相色譜法（ HPLC

4、、 采用液體作流動(dòng)相的一種色譜法，它可以分離檢測(cè)極性強(qiáng)、分 子量大及離子型農(nóng)藥， 可用于不易氣化或受熱易分解的農(nóng)藥的檢測(cè)。 近年來，采用新型高效固定相、高壓泵和高靈敏度的檢測(cè)器，柱前 和柱后衍生技術(shù)、以及計(jì)算機(jī)聯(lián)用等，大大提高了檢測(cè)效率、靈敏 度、速度和操作自動(dòng)化程度。目前用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)最多是紫外吸 收檢測(cè)器（UV、兩極管陣列檢測(cè)器（DAD和熒光檢測(cè)器（FLD（ 3）色質(zhì)聯(lián)用法（ GC-MS,HPLC-MS 氣相或液相與質(zhì)譜聯(lián)用，它既具備了色譜的高分離效能優(yōu)點(diǎn)， 而且具備了質(zhì)譜準(zhǔn)確鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，可同時(shí)達(dá)到定性、定 量的檢測(cè)目的，特別適合于農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測(cè)和多殘留檢 測(cè)等，不過

5、此法需要貴重儀器且操作繁雜困難，不適合于經(jīng)常性的 檢測(cè)。一般可用來做最后的確認(rèn)工作。（4）超臨界流體色譜（ SFC） 是以超臨界流體作為流動(dòng)相的色譜體系，超臨界流體是指物質(zhì) 處于臨界溫度和臨界壓力時(shí)的狀態(tài)，介于氣、液態(tài)之間，兼有氣體 和液體的某些物理特性，因此，超臨界流體色譜既有氣譜的快速、 高效、靈敏的特點(diǎn)，又有能檢測(cè)對(duì)熱不穩(wěn)定和大分子化合物的液譜 的特點(diǎn)。（5）毛細(xì)管電泳法（ CE）該方法是利用毛細(xì)管及高電壓（15-30KW）分離各種農(nóng)藥殘留物， 非常適合于一些難于用傳統(tǒng)色譜法分離的離子化樣品的分離和分 析，比HPLC有高10-1000倍的分析能力，而且所需之緩沖液具有不 危害環(huán)境之特點(diǎn)，

6、在短時(shí)間 （30 分鐘）內(nèi)就可以完成定性及定量分析。3. 常用農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)方法（1）酶抑制法：有機(jī)磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽 堿脂酶抑制物，因此可以利用農(nóng)藥靶標(biāo)酶 -乙酰膽用堿酯酶（ AChE） 受抑制的程度來檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。該方法目前已開 發(fā)出了相應(yīng)的各種速測(cè)卡和速測(cè)儀。 該方法檢測(cè)時(shí)， 蔬菜中的水份、 碳水化合物、 蛋白質(zhì)、脂等物質(zhì)不會(huì)對(duì)農(nóng)藥殘留物的檢測(cè)造成干擾， 不必進(jìn)行分離去雜，節(jié)省了大量預(yù)處理時(shí)間，從而能達(dá)到快速檢測(cè) 的目的，因此該方法具有快速方便、前處理簡(jiǎn)單、無需儀器或儀器 相對(duì)簡(jiǎn)單，適用于現(xiàn)場(chǎng)的定性和半定量測(cè)定，目前的農(nóng)藥殘留快速 檢測(cè)就是用了該方法

7、，已上升為農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。但該方法只能用 于測(cè)定有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑，其靈敏度和所使用的酶、顯 色反應(yīng)時(shí)間和溫度密切相關(guān)，經(jīng)酶法檢測(cè)出陽(yáng)性后，需用標(biāo)準(zhǔn)儀器 檢驗(yàn)方法進(jìn)一步檢測(cè)，以鑒定殘留農(nóng)藥品種及準(zhǔn)確殘留量。（2）免疫分析法：有放射性免疫分析、酶免疫分析、多組份分 析物免疫分析、免疫傳感器分析等。最為常用的是酶聯(lián)免疫法 （ELISA 法），它主要是以抗原與抗體的特異性、 可逆性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的農(nóng) 藥殘留檢測(cè)方法。該法利用化學(xué)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)能產(chǎn)生免疫抗體的 原理，先將小分子農(nóng)藥化合物與大分子生物物質(zhì)結(jié)合成大分子，做 成抗原，并使之在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生抗體，對(duì)抗體篩選制成試劑盒，通 過抗原與抗體之

8、間發(fā)生的酶聯(lián)免疫反應(yīng)， 依靠比色來確定農(nóng)藥殘留， 它具有專一性強(qiáng)、靈敏度高、快速、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，試劑盒可廣 泛用于現(xiàn)場(chǎng)樣品和大量樣品的快速檢測(cè)，可準(zhǔn)確定性、定量。但由 于受到農(nóng)藥種類多，抗體制備難度大、在不能肯定樣本中的農(nóng)藥殘 留種類時(shí)檢測(cè)有一定的盲目性以及抗體依賴國(guó)外進(jìn)口等影響，酶聯(lián) 免疫法的應(yīng)用范圍受到較大的限制，目前，我國(guó)市場(chǎng)上酶聯(lián)免疫法 成品試劑盒依賴從國(guó)外進(jìn)口。（3）化學(xué)法速測(cè)靈法“速測(cè)靈”法應(yīng)用的原理是具有強(qiáng)催化作用的金屬離子催化劑， 使各類有機(jī)磷農(nóng)藥（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下 水解為磷酸與醇，水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，使顯色劑的紫紅色退去 變成無色。主要針對(duì)的是有機(jī)

9、磷農(nóng)藥的殘留檢測(cè)，特別是甲胺磷、 對(duì)硫磷農(nóng)藥。這種方法采用化學(xué)反應(yīng)原理，避免了通常所使用生化 方法（酶法）的缺點(diǎn)（酶的制備、保存以及反應(yīng)需比較嚴(yán)格的條件） 靈敏度也達(dá)到一定的要求。但是此方法主要針對(duì)的是甲胺磷、對(duì)硫 磷等較高毒性的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的定性檢測(cè)。該方法的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、價(jià)格便宜、檢測(cè)速度快，通過進(jìn)一 步改善試劑性能，規(guī)范測(cè)定技術(shù)，可提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性， 從而為當(dāng)前廣大城鄉(xiāng)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和銷售者所青睞。二、幾種檢測(cè)農(nóng)藥殘留方法的比較氣相色譜儀 是目前比較權(quán)威的方法，可以精確定量，可測(cè)出 多種不同種類農(nóng)藥。但檢測(cè)成本高，儀器操作須專業(yè)人員，前處理 要求較高，時(shí)間長(zhǎng)?；铙w生物檢測(cè) 不需要

10、儀器，無須前處理，對(duì)各種毒物都可以 測(cè)定。但難以找到與該產(chǎn)品同時(shí)種植的未施農(nóng)藥產(chǎn)品做對(duì)照，只能 估算，不能精確定量分析，受很多因素影響。免疫法檢測(cè) 特異性強(qiáng)，靈敏度高，快速簡(jiǎn)便，可準(zhǔn)確定性， 定量，適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。但抗體制備比較困難，不能肯定試樣中的 農(nóng)藥品種時(shí)，有一定的盲目性，易出現(xiàn)假陰，假陽(yáng)性現(xiàn)象。酶抑制法檢測(cè) 使用殘毒速測(cè)箱，無須大型設(shè)備和專業(yè)人員， 成本較低，酶片保存時(shí)間長(zhǎng)，靈敏度低，不能定量。比色法 靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)快，可檢測(cè)多種殘毒綜合 量,酶易失活，不易保存，檢測(cè)時(shí)受溫度影響， 需要控制的條件較多。傳感器 靈敏度高，儀器自動(dòng)化程度高，響應(yīng)時(shí)間短，適合現(xiàn) 場(chǎng)檢測(cè)。但方法選擇

11、性有限，原理單一（僅限于膽堿酯酶的功能被 抑制）生物材料固定化易失活。化學(xué)法 速度快、成本低、操作簡(jiǎn)便、針對(duì)性強(qiáng)，尤其適合于 現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。但適用范圍小，僅限于果蔬的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)。三、農(nóng)藥殘留檢測(cè)發(fā)展趨勢(shì) 農(nóng)藥殘留分析是分析化學(xué)中最復(fù)雜的領(lǐng)域，其原因主要是：1. 需分離和測(cè)定的殘留農(nóng)藥量往往是在 ng（10 -9g） 、 pg（ 10-12 g） 甚至在fg（io-15g）級(jí)，一次成功的分析需要有許多操作條件的正確結(jié) 合和選擇，尤其是萃取和凈化方法的成功應(yīng)用；2. 分析樣品用藥歷史的未知性即污染源的未知性和樣品種類的 多樣性；3. 一次樣品測(cè)定能分析多種農(nóng)藥殘留，即多殘留分析的要求。 農(nóng)藥殘留的萃取、凈化技術(shù)是農(nóng)藥殘留分析的關(guān)鍵。1.固相萃取（SPE技術(shù)；2. 超臨界流體萃取技術(shù) （SFE）；3. 固相微萃取技術(shù)（ SPM）E；4. 凝膠萃取技術(shù)（GPC凝膠滲透色譜）；5. 快速溶劑萃取（ PSE）。隨著高新分析技術(shù)引入農(nóng)藥殘留檢測(cè)之中，發(fā)達(dá)國(guó)家目前經(jīng)常 采用如氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、毛細(xì) 管電泳與質(zhì)譜聯(lián)用、以及氣