UV-2600型紫外分光光度計操作指導書

1、UV-2600型紫外分光光度計操作指導書1概況1.1儀器概況：UV-2600型紫外分光光度計是由日本島津（Shimadzu）生產(chǎn)制造，與功能強大的操作軟件UVProbe結(jié)合，操作簡單方便，且符合SH/T0181方法的測量精度要求。1.2主要技術(shù)參數(shù)波長范圍185nm900nm（使用積分球附件ISR- 2600Plus時220nm1400nm）分辨率0.1nm波長準確性±0.3nm譜帶范圍0.1、0.2、0.5、1、2、5nm測光方式雙光束方式雜散光0.005%以下檢測器光電倍增管R-928測光范圍-55Abs比色池1cm光源50W鹵素燈、氘燈單色器切尼爾-特納單色器主電壓AC100V

2、240V主頻率50/60Hz1.3使用條件操作溫度：1535操作濕度：30%805%2儀器結(jié)構(gòu)儀器由UV-2600型紫外分光光度計和計算機組成。3操作步驟 3.1 開機在使用前先確認儀器和計算機的工作電源，檢查儀器樣品室應無遮擋光路的物品。確認后先開啟計算機，然后開啟儀器電源。待分光光度計外側(cè)的指示燈顯示綠色時，啟動電腦桌面上的UVPROBE程序。首先從下拉式菜單的儀器項上追加需要的儀器，操作完畢如下圖所示，然后點擊上圖的連接鍵，這樣儀器與計算機連接（當然，中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的，此處不再贅述）并開始下示的初始化面。初始化大約需要5分鐘左右，進行一系列的檢查和初置，如一

3、切順利通過就可以開始測定。3.2 測定首先選擇測定的方式，在主菜單上能發(fā)現(xiàn)右圖所示的各鍵，自左至右分別為：報告生成器：用于制作各種格式的報告。動力學測定方式：一般測定吸收值隨時間的變化，通常用于酶反應隨時間的變化。光度測定（定量）方式：可進行多波長、單波長、峰高或峰面積定量。校準曲線可使用多點、單點、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能，DNA/蛋白質(zhì)測定等以前需要特殊選購的軟件才能進行的工作，使用UVPROBE可自編程序進行測定。光譜測定方式：可進行紫外可見區(qū)的光譜測定。3.3光譜測定方式3.3.1參數(shù)的設定點擊菜單欄上的鍵，即可出現(xiàn)如下圖所示的選擇測定條件的畫面：在此對話框中可選擇波長測

4、定的范圍、掃描的速度、采樣間隔等條件。點擊圖中試樣準備標簽，可輸入重量、體積、稀釋因子、光程長等信息。點擊圖中儀器參數(shù)標簽，可選擇測定種類（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通帶（狹逢）等條件。數(shù)據(jù)處理面板方法面板圖象面板點擊主菜單上的鍵，可分別開關(guān)圖象面板（圖中的左鍵）、數(shù)據(jù)處理面板（中）以及方法面板（右鍵）。 3.3.2 光譜測定首先點擊上圖的進行基線校正，然后點擊波長設置到500nm，再點擊自動調(diào)零。為何要如此做？原因非常簡單，由于一般的分光光度計的能量在500nm左右最強，在此自動調(diào)零可得到最正確的基線。通常上述操作在開機后進行一次就足夠了。此后，設置樣品點擊鍵即可開始測定。3.4 光

5、度測定方式3.4.1 參數(shù)的設定點擊菜單欄中的鍵，出現(xiàn)下圖：測定的方式選擇測定波長的列名選擇和登錄波長登錄后的波長顯示區(qū)此處顯示的波長類型是“點”表示測定高度，如果選擇的是范圍，則需輸入起始和結(jié)束波長，并可選擇最大、最小、峰、谷或面積等作為定量的依據(jù)。無論如何選擇，波長都是必須的，并要加入以后才有效。在某單欄上有右列各鍵，點擊以后分別出現(xiàn)標準表（最左）、樣品表（左2）、工作曲線圖（右2）和樣品圖（最右）。工作曲線標準表樣品圖樣品表3.4.2 定量測定首先如前所述，選擇了點及波長，然后在方法中選擇校準，在此決定用工作曲線法定量，并選擇多點、單點或K因子法等。進行定量測定也需要基線校正和自動調(diào)零，

6、方法如前面所述。此后，樣品室內(nèi)逐個放入標準，點擊上圖下方的讀數(shù)鍵即可。注意，無論是測定標準或未知樣品，必須輸入名稱才有效。標準測定完畢，工作曲線自動顯示。接下去就可測定未知樣品的濃度了。有時不測定濃度，只測定某些波長的讀數(shù)，則在校準方法中選擇“原始數(shù)據(jù)”，在登錄時選擇若干需要的波長，即可測定各波長的讀數(shù)。使用SH/T0181方法標準進行光譜測定時，點擊設置波長到287.5nm，再放入兩只均裝有光譜純異辛烷的比色皿，點擊自動調(diào)零，最后，將外面一只比色皿中裝入需要測定的樣品，點擊鍵讀數(shù)，即可測得在該波長處的樣品的吸光度值。在工作曲線圖象上點擊鼠標右鍵，選擇屬性，可從該圖象上得到許多有用的信息，見下

7、圖：只需在這些顯示的項目中做標記，相應的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見下圖的劃圈部分：所謂K因子法實際上可稱為已知工作曲線法（而且不局限于直線），即工作曲線回歸方程的系數(shù)和次數(shù)已知，故而只要輸入這些系數(shù)以及工作曲線的次數(shù)。這一方法對工作曲線較為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設置方法見下圖：3.5 動力學分析在菜單欄中點擊方法鍵，得到如下圖象：此處的計時方式選擇的是“自動”，時間總量中需手動設置測定的時間。由于是自動計時方式，所以采樣步長（圖中為時間周期）和讀數(shù)次數(shù)將根據(jù)時間總量自動設置。此外可設置波長以及活度計算的開始和結(jié)束時間。設置大短的活度范圍會出現(xiàn)錯誤信息。相反，如果計時方式選擇的是手動

8、的話，則可輸入時間周期和讀取次數(shù)，而時間總量（測定時間）會根據(jù)輸入的時間周期和讀取次數(shù)自動計算得到?；疃确秶糜诿阜磻S時間的變化，如果單純進行時間掃描的話，則可不考慮活度范圍。測定的波長欄內(nèi)可選擇單波長或雙波長（波長l-波長2或波長l/波長2）兩種方法。選擇后輸入相應的波長。主菜單中有如右各鍵，自主到右分別是時間掃描圖象、數(shù)據(jù)處理面板、測定參數(shù)面板和酶活度圖象。點擊各鍵屏幕出現(xiàn)相應的板塊。下圖中表示已經(jīng)測定得到數(shù)據(jù)的顯示情況。4 定期維護檢查表檢查維護項目每天1年2年3年檢查樣品室檢查外觀確認光源點燈時間更換W1（鹵素）燈更換D2（氘）燈性能確認5 常見故障及排除5.1 初始化室的異常狀況（

9、以下編號見前文初始化窗口中內(nèi)容）編號檢查位置處理措施 關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開（ON），進新儀器初始化。、樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開（ON）電源。觀察光源室，W1是否漏光？如果沒有漏光將W1熄滅。暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開（ON）。如果光源不亮，請更換W1燈。光源的使用時間是否超過使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配置”窗口后單擊“點燈時間”選項卡。如果各光源燈的點燈時間超過“燈壽命”，請更換光源。、樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品

10、電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開（ON）電源，對儀器進行初始化。樣品室蓋是否敞開？暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品電源開關(guān)。關(guān)閉樣品室蓋后再次打開（ON）電源開關(guān)，對儀器進行初始化。光源的使用時間是否超過使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配置”窗口后單擊“點燈時間”選項卡。如果各光源燈的點燈時間超過“燈壽命”，請更換光源。5.2 故障癥狀與處理方法故障（癥狀）主要原因處理方法打開電源開關(guān)后不通電。AC電源線插頭是否插好？正確連接AC電源線插頭。AC電源線是否被壓，或電源線彎曲？如果AC電源線損壞，更換相同型號的電源線。供電電源是否符合儀器的電源規(guī)格？使用與儀器的電

11、源規(guī)格相符的電源。保險絲是否燒斷？需要確認和更好保險絲時請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。無法與UVProbe通訊。是否確保正確連接USB纜線？請確切鏈接到PC和儀器上。是否正確設置PC的COM端口？在PC顯示器右下方確認本產(chǎn)品COM端口號后，電極UVProbe“儀器”菜單的“配置”，設置連接端口。是否正確安裝USB驅(qū)動程序？按照UVProbe軟件的安裝窗口安裝USB驅(qū)動程序。測光值異常。光源是否熄滅？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配置”窗口然后單擊“維護”選項卡。“光源狀況”的“W1”、“D2”復選框未被激活時，A處理：光源熄燈時，激活“W1”、“D2”的復選框。在UV

12、Probe中單擊“斷開”，關(guān)閉（OFF）與UVProbe的通訊；關(guān)閉（OFF）儀器電源。稍后再打開電源；單擊“連接”，進行儀器初始化。如果光源燈未亮，顯示錯誤時，再進行“B處理”。光源燈點亮，隨后又熄滅時進行“C處理”。B處理：光源未亮。請更換新燈。C處理：儀器檢出異常時強行將燈熄滅；檢測風扇是否停止或基板上的溫度感應器是否過熱；關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域內(nèi)的島津分公司聯(lián)系。波長等測定參數(shù)設置是否正確？請重新檢查輸入的參數(shù)。測光值異常。狹縫寬度是否合適？改變狹縫寬度，重新進行測定。光源的使用時間收費超過使用壽命？如果光源的使用時間超過使用壽命，請更換光源。測定的樣品是否正確？請檢查所取樣品是否正

13、確。使用的吸收池是否合適？請使用符合測定目的的吸收池。使用玻璃池時無法測定紫外區(qū)，請使用石英池。儀器附近是否使用手機？手機種類的信號強度可能光度值有影響。樣品室安裝的特殊附件和連接器的連接是否正確？請檢查特殊附件是否正確安裝到樣品室，或連接器是否正確連接？在儀器前方是否聽到發(fā)動機的異常聲響？扇形發(fā)動機可能運行異常。請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。異常警報發(fā)出蜂鳴聲，LED顯示紅色。排氣風扇的排氣口是否堵塞？關(guān)閉電源開關(guān)。檢查排氣風扇出口處10cm以內(nèi)是否存在阻礙物，如果有請清除。由于可能出現(xiàn)溫度異常，請稍后再重新打開電源開關(guān)。如果仍未解決，請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。排氣風扇是否停止？確認空氣從左后方的排氣口排出。如果風扇停止運行，關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。光源是否熄滅？如果光源的使用時間超過使用壽命，請更換光源。兩側(cè)光源都未亮。排氣風扇是否停止？確認空氣從左后方的排氣口排出。如果風扇停止運行，關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。UVProbe啟動慢。儀器記錄文件的容量是否增加？由于加載存儲的儀器記錄需要時間，軟件的啟動可能會變慢。按照以下順序?qū)x器記錄刪除