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文檔簡介
1、實驗一觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一 P26)一.實驗目的:初步掌握觀察 DNA和RNA在細胞中分布的方法二.實驗原理:1 .甲基綠和口比羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使 DNA呈現綠色,口比羅紅使RNA呈現紅色。利用甲基綠、口比羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示 DNA和RNA在細胞中的分布。2 .鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色休中的DNA和蛋白質分離,有利于DNA與染色劑結合。三.方法步驟:操作步驟注意問題解釋取口腔上皮 細胞制片載玻片要潔凈,淅-滴質量分數為0.9%的NaCl溶液用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕刮幾卜取細胞將載
2、玻片在酒精燈卜烘干防止污跡干擾觀察效果保持細胞原有形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失敗固定裝片(細胞已死亡)水解將烘干的載玻片放入質量分數為8%的鹽酸溶液中,用300C水浴保溫5min改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,促進染色體的 DNA與蛋白質分離而被染色沖冼涂片用蒸儲水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸染色滴2滴口比羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min兩種溶液混合,現配現用觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、色澤 淺的區(qū)域,移至視野中央,調節(jié)清晰 后才換用高倍物鏡觀察使觀察效果最佳實驗二檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(必修一 P18)1 .實驗目的:嘗試用化學試劑檢測生物組織
3、中糖類、脂肪和蛋白質2 .實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應。1 .可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成醇紅色的Cu 2O沉淀。如:加熱葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 k葡萄糖酸 + Cu 2OJ (醇紅色)+ H 2。,即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2 .脂肪可以被蘇丹出染液染成橘黃色(或被蘇丹IV染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍色。3 .蛋白質與雙縮月尿試劑發(fā)生作用,產生紫色反應。(蛋白質分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮月尿試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應。)三.實驗材料
4、1 .做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)2 .做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡34小時(也可用蔗麻種子)。3 .做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清。 四、實驗試劑斐林試劑(包括甲液:質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:質量濃度為0.05g/ mL CuSO 4溶液)、蘇丹山或蘇丹IV染液、雙縮月尿試劑(包括 A液:質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液:質量濃度為0.01g/ mL CuSO 4溶液)、體積分數為50%的酒精溶液,碘液、蒸儲水。 五、
5、方法步驟:(一)可溶性糖的鑒定操作方法注意問題解釋1.制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高, 組織液很易被氧化成褐色, 將產生的顏色掩蓋。2.取1支試管,向試管內注 入2mL組織樣液。3.向試管內注入 1mL新制 的斐林試劑,振蕩。應將組成斐林試劑的甲液、乙液 分別配制、儲存,使用前才將甲、 乙液等量混勻成斐林試劑;切勿將甲液、乙液分別加入蘋果 組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙 液混合保存時,生成的 Cu (OH ) 2在70900c下分解 成黑色CuO和水; 甲、乙液分別加入時可能會 與組織樣液發(fā)生反應,無 Cu ( OH )
6、 2 生成。4.試管放在盛有 50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察到溶液顏色:淺藍 色一棕色一磚紅色(沉 淀)最好用試管夾夾住試管上部,使 試管底部不觸及燒杯底部,試管 口/、朝向實驗者。防止試管內的溶液沖出試 管,造成燙傷;模擬尿糖的檢測1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、檢測方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙3、結果:(用斐林試劑檢測)試管內發(fā)生出現磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現磚紅色沉淀的是正常人的尿液。4、分析:因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖,與斐林試劑發(fā)生反應產生醇紅色沉淀,而正常人尿液中無還原糖,所以沒有發(fā)生反應。(二)脂肪的鑒定操作方法:
7、注意問題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子 葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴 中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小 時,新花生的浸泡時 間可縮短。因為浸泡時間短,不易切片, 浸泡時間過長,組織較軟,切 下的薄片不易成形。切片要盡 可能薄些,便于觀察。在十葉溥片上滴23滴蘇丹出或蘇 丹IV染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用 50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色,不洗去浮 色,會影響對橘黃色脂肪滴的 觀察。同時,酒精是脂溶性溶 齊山可將花生細胞中的脂肪顆 粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上 12滴蒸儲水,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時
8、產 生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最 薄處,可看到細胞中有染成橘黃色 或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇 中。三、蛋白質的鑒定操作方法注意問題|解釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過濾。)黃豆浸泡1至2天,容易研磨 成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約 實驗時間。鑒定。加樣液約 2ml于試管 中,加入雙縮月尿試劑 A,搖勻; 再加入雙縮月尿試劑 B液34 滴,搖勻,溶液變紫色。A液和B液也要分開配制, 儲存。鑒定時先加 A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2+與 蛋白質反應提供一個堿性的 環(huán)境。A、B液混裝或同時加 入,會導致Cu2+變成Cu(OH
9、) 2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍色會遮蓋反 應的真實顏色??捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋小夠,在實驗中蛋清 粘在試管壁,與雙縮月尿試劑反 應后會粘固在試管內壁上, 使 反應不容易徹底,并且試管也 不易洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液, 向試管內滴加 2滴碘液,觀 察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察考點提示:(1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些?(2 )還原性糖植物組織取材條件?(3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?(4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現混現用?(5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為:(
10、6)花生種子切片為何要?。?7)轉動細準焦螺旋時,若花生切片的細胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因 一般是什么?(8)脂肪鑒定中乙醇作用?(9)雙縮月尿試劑 A、B兩液是否混合后用?(1)葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。(2 )含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。(3)加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時 溶液顏色變化不明顯。(4)混合后使用;產生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。(5)淺藍色棕色磚紅色(6)只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。(7)切片的厚薄不均勻。(8)洗去浮色
11、。(9)不能混合;先加 A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。實驗四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一 P47)一.實驗目的:使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)分布。二.實驗原理:葉綠體的辨認依據:葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球形。線粒體辨認依據:線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,可以使活細胞中線粒體呈現藍綠色。三.實驗材料:觀察葉綠體時選用:群類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體 清楚,可取整個小葉直接制片,所以作為實驗的首選材料。若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為
12、表皮細胞不含葉綠體。四.方法步驟:步驟注意問題分析1.制片。用鐐子取一片黑藻 的小葉,放入載玻片的水滴 中,蓋上蓋玻片。制片和鏡檢時,臨時裝片中的 葉片不能放干了,要隨時保持 有水狀態(tài)否則細胞或葉綠體失水收縮, 將影響對葉綠體形態(tài)和分布 的觀察。2 .低倍鐐下找到葉片細胞3.高倍鐐下觀察葉綠體的形 態(tài)和分布4.制作人的口腔上皮細胞臨 時裝片在潔凈載玻片中央淅-滴健 那綠染液一用牙簽取碎屑一 蓋蓋玻片5.觀察線粒體藍綠色的是線粒體,細胞質接 近無色。討論:1、細胞質基質中的葉綠體,是不是靜止不動的?為什么?答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動,這種運動能隨時改變橢球體的方向,使葉
13、綠體既能接受較多光照,又不至于被強光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關系?答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。實驗六觀察植物細胞的質壁分離和復原(必修一 P61 “探究”)一、實驗目的:1 .學會觀察植物細胞質壁分離與復原的方法。2 . 了解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。二.實驗原理:1 .質壁分離的原理:當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而失水,細胞液中的水分就透過原生質層進入到溶液中,使細胞壁和原生質層都出現一定程度的收縮。由于原生質層
14、比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時,原生質層就會與細胞壁分離。2 .質壁分離復原的原理:當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質層進入到細胞液中,整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),緊貼細胞壁,使植物細胞逐漸發(fā)生質壁分離復原。二、實驗材料:紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質壁分離劑對細胞無毒害作用。三、實驗步驟:步 驟注意問題分 析1.制作洋蔥表皮的臨時裝片。在載玻片上方滴水,撕取蓋蓋玻片應讓蓋玻防止裝片產生氣泡。洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴 中展平(也可挑取幾條水綿
15、放入水滴中)。蓋上蓋玻片。片的一側先觸及載 玻片,然后輕輕放 平。2.觀察洋蔥(或水綿)細胞 可看到:液泡大,呈紫色, 原生質層緊貼著細胞壁。(或 水綿細胞中有帶狀葉綠體) 原生質層呈綠色,緊貼著細 胞壁。液泡含花青素,所以液泡呈紫色。先觀察正常細胞與后面的“質壁分離” 起對照作用。3.觀察質壁分離現象。從蓋玻片的一側滴入 0. 3g/ml 的蔗糖溶液,在另一側用吸 水紙吸引,重復幾次。鏡檢。觀察到:液泡由大變小,顏 色由淺變深,原生質層與細 胞壁分離。原生質層與細胞 壁之間充滿蔗糖溶液。重復幾次糖液濃度不能過高蔗糖溶液濃度大于細胞液濃度,細胞通 過滲透作用失水,細胞壁伸縮性小原生 質層的伸縮
16、性大,液泡和原生質層不斷 收縮,所以發(fā)生質壁分離。為了使細胞完全浸入蔗糖溶液中。否則,細胞嚴重失水死亡, 看/、到質壁 分離的復原。4.觀察細胞質壁分離的復原 現象。從蓋玻片的一側滴入清水, 在另,側用吸水紙吸引,重 復幾次。鏡檢。觀察到:液 泡由小變大,顏色由深變淺, 原生質層恢復原狀。發(fā)生質壁分離的裝 片,不能久置,要 馬上滴加清水,使 其復原。重復幾次。細胞液的濃度高于外界溶液,細胞通過 滲透作用吸水,所以發(fā)生質壁分離復原 現象。因為細胞失水過久,也會死亡。為了使細胞完全浸入清水中。實驗討論答案:1 .如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會出現什么 現象?答
17、:表皮細胞維持原狀,因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2 .當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質壁分離?為什么?答:不會。因為紅細胞不具細胞壁??键c提示:(1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦?(2)洋蔥表皮應撕還是削?為何?(3)植物細胞為何會出現質壁分離?(4)質壁分離時,液泡大小和顏色的變化?復原時呢?(5)若發(fā)生質壁分離后的細胞,不能發(fā)生質壁分離復原,其原因是什么?(6)高倍鏡使用前,裝片如何移動?(7)換高倍物鏡后,怎樣使物像清晰?視野明暗度會怎樣變化?如何調亮?(8)所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數的關系?(9)物像清晰后,物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數的
18、關系?(10)總放大倍數的計算方法?放大倍數具體指面積的放大倍數還是長度的放大倍數?(11)放大倍數與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關系?(12)更換目鏡,若異物消失,則異物在目鏡上;更換物鏡,若異物消失,則異物在物鏡上、移動載玻片,若異物移動,則異物在載玻片上。(13)怎樣利用質壁分離現象來測定植物細胞液的濃度?(1)紫色的洋蔥有紫色的大液泡,便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈,使視野變暗些。(2)表皮應撕不能削,因為削的表皮往往太厚。(3)當細胞失去水分時,其原生質層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性;動物細胞不會發(fā)生質 壁分離,因為動物細胞沒有細胞壁。(4)細胞發(fā)生質壁分離時,液泡變小,紫色加深
19、;當細胞質壁分離復原時,液泡變大,紫 色變淺。(5)細胞已經死亡(可能是外界溶液濃度過大,細胞失水過多或質壁分離時間過長)(6)若要把視野中上方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向左方移動,因為顯微鏡視野中看到的是倒像。(7)換高倍物鏡后,應調節(jié)細準焦螺旋使物像變得清晰;視野會變暗,可調大光圈或改用 反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。(8)目鏡越長,放大倍數越??;物鏡越長,放大倍數越大。(9)物鏡與載玻片之間的距離越小,放大倍數越大。(10)總放大倍數等于目鏡放大倍數與物鏡放大倍數的乘積;放大倍數是指細小物體長度或寬度的放大倍數。(
20、11)放大倍數越大,視野中細胞越大、數目越少、視野越暗。(12)更換目鏡,若異物消失,則異物在目鏡上;更換物鏡,若異物消失,則異物在物鏡上、移動載玻片,若異物移動,則異物在載玻片上。(13)配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片用顯微鏡觀察某植物細胞是否發(fā)生質壁分離。某植物細胞液的濃度就介于 不能引起質壁分離的濃度和能引起質壁分離的濃度之間。實驗七探究影響酶活性的因素(必修一 P78、P83)一.實驗目的:1 .探究不同溫度和 PH對過氧化氫酶活性的影響。2 .培養(yǎng)實驗設計能力。二.方法步驟:提出問題一作出假設一設計實驗一(包括選擇實驗材料、選擇實驗器
21、具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)一實施實驗一分析與結論一表達與交流。實例1:比較過氧化氫酶和 Fe3+的催化效率一).實驗原理:鮮肝提取液中含有過氧化氫酶,過氧化氫酶和 Fe3+都能彳t化H2O2分解放出02。經計算,質 量分數為3.5%的FeCl3溶液和質量分數為 20%的肝臟研磨液相比, 每滴FeCl3溶液中的Fe3+ 數,大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數的25萬倍。)方法步驟:步驟注意問題解釋取4支潔凈試管,編號,分 別加入2mL H2O2溶液不讓H2O2接觸皮膚H2O2有一定的腐蝕性將2號試管放在900C左右的 水浴中加熱,觀察氣泡冒出 情況,與1號對照向3號、4號試管內分別
22、滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝臟研 磨液,觀察氣泡產生情況不可用同 一支滴管肝臟研磨 液必須是 新鮮的肝臟要制 成研磨液由于酶具后同效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準確性 因為過氧化氫酶是蛋白質,放置過久,可受細 菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數減少, 活性降低研磨可破壞肝細胞結構,使細胞內的酶釋放出 來,增加酶與底物的接觸面積2-3min后,將點燃的衛(wèi)生香 分別放入3號和4號試管內 液面的上方,觀察復燃情況放衛(wèi)生香 時,動作要 快,不要插現象:4號試管產生氣泡多,冒泡時間短,衛(wèi) 生香猛烈復燃,3號試管產生氣泡少,冒泡時 間長,衛(wèi)生香幾乎無變化到氣泡中避免衛(wèi)生香
23、因潮濕而熄滅注意問題:實驗時必須用新鮮的、剛從活的動物體中取出的肝臟作實驗材料。肝臟如果不新鮮,肝細胞內的過氧化氫酶等有機物就會在腐生細菌的作用下分解,使組織中酶分子的數量減少且活性降低。實驗中使用肝臟的研磨液,可以加大肝細胞內過氧化氫酶與試管中過氧化氫的接觸面積,從而加速過氧化氫的分解。考點提示:(1)為何要選新鮮的肝臟?(2)該實驗中所用試管應選較粗的還是較細的?為什么?(3)為何要選動物的肝臟組織來做實驗,其他動植物的組織的研磨液能替代嗎?(4)相同質量的塊狀肝臟和肝臟研磨液,哪一個催化效果好?為什么?(5)滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時,可否共用下個吸管?為什么?(1)因為在不新鮮的肝臟
24、中,過氧化氫酶的活性會由于細菌的破壞而降低。(2)應選用較粗的,因為在較細的試管中容易形成大量的氣泡,而影響衛(wèi)生香的復燃。(3)因為肝臟組織中過氧化氫酶含量較豐富;其它動植物組織也含有少量的過氧化氫酶,所以能夠替代。(4)研磨液效果好;因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。(5)不可共用,防止過氧化氫酶與氯化鐵混合,而影響實驗效果。酶的專一性(1)方案一:用同一種酶催化兩種不同物質淀粉(非還原糖)淀粉酶一麥芽糖(還原糖)1蔗糖(非還原糖)流粉酶蔗糖用淀粉酶分別作用于淀粉前詢謊,再用斐林試劑鑒定,根據是否有穆紅色沉淀生成來判斷淀粉酶對二者是否有催化作用,從而探索酶的專一性。(2)方案二:用兩
25、種不同酶催化同一種物質淀粉(非還原糖)淀粉酶 麥芽糖(還原糖)I淀粉(非還原糖)淀粉酶 淀粉再用斐林試劑鑒定,從而探究酶的專一性。 疑難點拔:這三個實驗為探索類實驗。探索酶的高效性時,應合理設計對照實驗,嚴格控制實驗變量。探索酶的專一性時,設計實驗首先要從已知入手,確定何為實驗變量(自變量),何為因變量,何為控制變量。淀粉、蒸糖水解的產物,水解的速率等為變化的結果,即因變量,從因變量入手我們將推知自變量(實驗變量)即淀粉酶對其的影響程度或它們之間的關系。淀粉、蔗糖在實驗過程中的濃度、用量,淀粉酶的濃度、用量。水解過程的溫度等都為控制變量,需遵循同時等量原則,以排除控制變量對2個水解反應的影響。
26、探索溫度對酶活性的影響時,通過研究某一因素,如溫度(實驗變量)對某一特定反應的影響時,要在其他因素(控制變量)相同的條件下進行。觀察不同的實驗變量(如不同的溫 度)對特定反應的影響結果(因變量),以便對實驗結果(實驗變量與因變量關系)進行科學的分析。實例2:溫度對酶活性的影響一)實驗目的:1 .初步學會探索溫度對酶活性的影響的方法。2 .探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。)實驗原理:1.淀粉遇碘后,形成紫藍色的復合物。2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖(淀粉水解過程中,不同階段的中間產物 遇碘后,會呈現紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注:市售a-淀粉酶的最適溫度
27、約 600C三)方法步驟:操作注意問題解釋取3支試管,編上號,然后分 別注入2mL可溶性淀粉溶液另取3支試管,編上號,然后 分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液將裝有淀粉溶液和酶溶液的試 管分成3組,分別放入熱水(約 600C)、沸水和冰塊中,維持各 自的溫度5min不能只用不同溫度 處理淀粉溶液或酶 溶液防止混合時,由于陰種溶液的溫度小 同而使混合后溫度發(fā)生變化,反應溫 度不是操作者所要控制的溫度,影響 實驗結果。分別將淀粉酶溶液注入相同溫 度卜的淀粉溶液中,搖勻后, 維持各自的溫度5min保持各自溫度時間 不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定時間在3支試管中各滴入1-2滴碘 液,搖勻后觀察這 3支試
28、管中 溶液顏色變化并記錄碘液/、能滴加太多防止影響實驗現象的觀察用表格的形式顯示實驗步驟序號加入試劑或處理方法試管ABCabc1r可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鮮淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保溫5min600C1000c00C600C1000c00C3將a液加入到A試管,b液加入到 B試管,c液加入到C試管中,搖 勻4保溫5min600C1000c00C5滴入碘液,搖勻2滴2滴2滴6r觀察現象并記錄實例3: PH值對酶活性的影響操作步驟:用表格開式顯示實驗步驟:(注意操作順序不能錯)序號加入試劑或處理方法試管1231注入新鮮的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸儲水1mL/3注入氫氧
29、化鈉溶液/1mL/4注入鹽酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保溫5min7加入斐林試劑,邊加邊振蕩2mL2mL2mL8水浴加熱煮沸1min9觀察3支試管中溶液顏色變化變記錄實驗八 葉綠體色素的提取和分離(必修一 P97)一.實驗目的:1 .嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和用紙層析法分離提取到的色素。2 .分析實驗結果,探究葉綠體中有幾種色素,以及各自所呈現的顏色。二.實驗原理:1 .葉綠體中的色素是有機物,不溶于水,易溶于丙酮等有機溶劑中,所以用丙酮、乙醇等 能提取色素。2 .層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,
30、隨層析液在濾紙上擴散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。所以用層析法來分離四種色素。三、實驗材料:幼嫩、鮮綠的菠菜葉 四、實驗步驟:2驟注意問題分 析1.提取色素5克綠葉剪碎,放入研缽,加 SiO2、CaCO3 和 10mL 無水乙醇,迅速、充分研 磨。(若沒用尢水乙醇,也 可用體積分數為 95%的乙 醇,但要加入適量的無水 碳酸鈉,除去水分)加 SiO2加 CaCO3加SiO2為了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為 葉綠素含鎂,可被細胞液中的有機酸產生的 氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸,防止葉綠體被破壞。 葉綠體色素易溶于無水乙醇等有
31、機溶劑。2.收集濾液漏斗基部放一單層尼龍 布,研磨倒入漏斗內擠壓, 將濾液收集到小試管中, 用棉化塞塞住試官口。尼龍布起過濾作用。試管口用棉花塞塞緊是為了防止無水乙醇揮 發(fā)。3.制備濾紙條將干燥的濾紙,順著紙紋 剪成長6cm,寬1cm的紙 條,一端剪去二個角,并 在距這一端1cm處劃一鉛 筆線。干燥順著紙紋剪成 長條一端剪去二個 角可吸收更多的濾液。層析時,色素分離效果好??墒箤游鲆和瑫r到達濾液細線。4.劃濾液細線用毛細吸管吸取少量濾 液,沿鉛筆線劃出細、齊、 直的一條濾液細線,干后 重復三次。濾液細線越細、 越齊越好。 重復三次。防止色素帶之間部分重疊。增加色素在濾紙上的附著量,實驗結果更明
32、 顯。5.紙層析法分離色素將3mL層析液倒入燒杯 中,將濾紙條(劃線一端 朝下)插入層析液中,用 培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。層析液不能沒 及濾紙條。燒杯要蓋培養(yǎng) 皿蓋。防止色素溶解在層析液中,層析液中的苯、內酮、石油醒易揮發(fā)。6.觀,察實驗結果E 肯 口U月蘿1里J行卜分別為:卜素(橙黃fe)口(黃色)_葉綠素a (監(jiān)綠色) 葉綠素b (黃綠色)擴散最快是胡蘿卜素,擴散最慢是葉綠素b,含量最多的是葉綠素 a。四種色素之所以能被分離, 是因為四種色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同。溶解度越高擴散速度越快.五:實驗討論:1 .濾紙條上的濾液細線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細線如觸及層析液,濾
33、紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。2 .提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關鍵是:葉片要新鮮、濃綠;研磨要迅速、充分;濾液收集后,要疑難點拔:四條色素帶的分布與色素擴散速度有關,而擴散速度大小由分子量大小所決定,這四種色素的分子量分別是:胡蘿卜素(C40H56)536、葉黃素(C40H56。2)568、葉2素a(C55H 72O5N4Mg) 892、葉綠素b (C55HToOeN,Mg) 906,所以色素帶從上到下,即擴散從快到慢依次為胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉2素bo胡蘿卜素與葉黃素分子量相差32,葉綠素a與葉綠素b的分子量相差14,故前二種色素的距離
34、大于后二種色素的距離。色素帶 的粗細與色素的含量有關。通常葉綠素含量是類胡蘿卜素的四倍,葉綠素a的含量是葉綠素b的三倍,葉黃素含量是胡蘿卜素的二倍,含量越多,色素帶就會越濃越粗,故由濃粗到淡 細依次是:葉綠素 a葉綠素b葉黃素胡蘿卜素??键c提示:(1)對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅對實驗有何影響?(3)丙酮的作用?它可用什么來替代?用水能替代嗎?(4)碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?(5)研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙?(6)濾紙條為何要剪去兩角?(7)為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線?(8)濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?(9)
35、濾液細線為何不能觸到層析液?(10)濾紙條上色素為何會分離?(11)色素帶最寬的是什么色素?(12)濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素?(13)色素帶最窄的是第幾條色素帶?為何?(1)綠色、最好是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。(2)為了使研磨充分。不加二氧化硅,會使濾液和色素帶的顏色變淺。(3)溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替,但不能用水來代替,因為色素不溶于 水。(4)保護色素,防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣,濾液會變成黃 綠色或褐色。(5)研磨迅速,是為了防止丙酮大量揮發(fā);只有充分研磨,才能使大量色素溶解到丙 酮中來。色素不能通過濾紙,但能通過尼龍布。(6)防止
36、兩側層析液擴散過快。(7)因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素,會影響色素的分離結果。(8)防止色素帶的重疊;增加色素量,使色素帶的顏色更深一些。(9)防止色素溶解到層析液中。(10)由于不同的色素在層析液中的溶解度不同,因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。(11)最寬的色素帶是葉綠素 a,它的溶解度比葉綠素 b大一些。(12)胡蘿卜素和葉黃素。(13)第一條色素帶,因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。是濾液細線要細且及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關鍵是:直,而且要重復劃幾次;二是層析液不能沒及濾液線。實驗九 探究酵母菌的呼吸方式 (必修一 P91)一.實驗
37、目的:1 . 了解酵母菌的無氧呼吸和有氧呼吸情況2 .學會運用對比實驗的方法設計實驗二.實驗原理:1 .酵母菌是一種單細胞真菌,在有氧和無氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來研究細胞呼吸的不同方式。方程式(略)2 . CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使澳麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據石灰水混濁程度或澳麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產生情況。3 .橙色的重銘酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學反應,在酸性條件下,變 成灰綠色。三.方法步驟:提出問題一作出假設一設計實驗一(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)一實
38、施實驗一分析與結論一表達與交流。1 .酵母菌培養(yǎng)液的配制取20g新鮮的食用酵母菌, 分成兩等份,分別放入錐形瓶 A (500mL)和錐形瓶B (500mL) 中,再分別向瓶中注入 240mL質量分數為5%的葡萄糖溶液2 .檢測CO2的產生用錐形瓶和其他材料用具組裝好實驗裝置 (看課本圖示),并連通橡皮球(或氣泵),讓空氣 間斷而持續(xù)地依次通過 3個錐形瓶(約50min)。然后將實驗裝置放到 25-350C的環(huán)境中培 養(yǎng) 8-10h。3 .檢測灑精的產生各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液,分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重銘酸鉀的濃硫酸溶液(體積分數為95%-97%)并
39、輕輕振蕩,使它們混合均勻,觀察試管中溶液的顏色變化。實驗十觀察細胞的有絲分裂 (必修一 P115)一.實驗目的:1 .制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片2 .觀察植物細胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細胞周期不同時期的時 間長短。3 .繪制植物細胞有絲分裂簡圖。二.實驗原理:1 .在高等植物體內,有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。2 .染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內染色體(或染色質)的存在狀態(tài),就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期,進而認識有絲分裂的
40、完整過程。三.實驗材料: 洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因為根尖生長點屬于分生組織,細胞分裂能力強,易觀察到有絲分裂各個時期的細胞。四.實驗步驟:注意問題一、根尖的培養(yǎng)實驗前34天,讓洋忽放在廣口瓶 上,底部接觸清水。根長約5cm時可 用。置于溫暖處,常換水。因為細胞分裂和生長需要水 分、適宜的溫度和氧氣。二、裝片的制作(解離-漂洗-染色一制片)1 .解離:上午10時至卜午2時,剪 取洋蔥根尖 23mm,立即放入盛后 質量分數為 15%的鹽酸和體積分數 為95%的酒精溶液的混合液(1:1) 的玻璃皿中,室溫下解離 35min。解離時間要保證,細 胞才能分散開來。解離時間也不宜過 長。目的:溶解細胞間
41、質,使組織 中的細胞相互分離開來。此 時,細胞已被鹽酸殺死。否則,根尖過于酥軟,無法取 出。2 .漂洗:待根尖酥軟后,用鐐子取 出,放入盛后清水的玻璃皿中漂洗約10 min。漂洗要充分,可換水12 次。目的:洗去解離液,便于染色。 (防止過分解離)3 .染色:把洋蔥根尖放進盛有質量 濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色 35min。染色時間不宜過長, 否則顯微鏡卜一片紫 色,無法觀察。龍膽紫等為堿性染料,可使染 色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體4.制片:用鐐子將這段洋蔥根尖取 出來,放在載玻片上,加一滴清水, 并用鐐子尖把洋蔥根尖弄碎, 蓋上蓋 玻片,在蓋玻片上
42、再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片, 使細 胞分散開來。要弄碎根尖,冉垂直 向卜均勻用力壓片, /、可移動蓋玻片,目的:使細胞分散,避免細胞 重疊,便于觀察。做得成功的 裝片,標本被壓成云霧狀。三、觀察1 .低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡 下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。2 .高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰,仔細觀察, 找出處于細 胞分裂期中期的細胞,再找出前期、 后期、末期的細胞。一定要找到分生區(qū)。在一個視野里,往往 不容易找全有絲分裂 過程中各個時期的細 胞。如果是這樣,可 以慢慢地移動裝片, 從鄰近的分生區(qū)細胞 中尋找。分生區(qū)細胞特點是:細
43、胞呈正 方形,排列緊密,有的細胞正 處于分裂期。討論:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵有以下幾點:(1)剪取洋蔥根尖材料時, 應該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細胞殺死,細胞間質被溶解,使細胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當,要使根尖被壓平,細胞分散開。提醒 (1)先漂洗再染色,這兩步不能顛倒,否則影響實驗效果。(2)漂洗的目的防止解離過度,根尖過分酥軟。洗去鹽酸,防止與堿性染液發(fā)生作用,便于染色。(3)使根尖細胞相互分散的方法解離時,鹽酸可破壞細胞壁的果膠層,使組織細胞分離。制片時用鐐子搗碎。壓片。(4)顯微
44、鏡下觀察的都是死細胞,不能看到細胞分裂動態(tài)變化,若視野中找不到某一時期的細胞 可通過移動裝片從鄰近的區(qū)域中找。(5漁顯微鏡下觀察到間期細胞數目最多,原因是間期歷時最長??键c提示:(1)培養(yǎng)根尖時,為何要經常換水?(2)培養(yǎng)根尖時,應選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?(3)為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時間是何時?為何?(4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片?(5)若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?(6)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎?(7)為何要漂洗? 洗去鹽酸便于染色。(8)細胞中染色最深的結構是什么?(9)若所觀察的細胞各部分全是紫色,其
45、原因是什么?(10)為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點是什么?能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么?(11)分生區(qū)細胞中,什么時期的細胞最多?為什么?(12)所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎?為什么?(13)觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體?為什么?(14)若觀察時不能看到染色體,其原因是什么?(1)增加水中的氧氣,防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。(2)培養(yǎng)根尖時,應選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?(3)為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時間是何時?為何?(4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片?(5)壓片時用力過大。(6)分解和溶解細胞間質;不能,而硝酸可代替。(7)洗去鹽酸便于染色。(
46、8)染色最深的結構是染色質或染色體。(9)染液濃度過大或染色時間過長。(10)因為在根尖只有分生區(qū)的細胞能夠進行細胞分裂;分生區(qū)的特點是:細胞呈正方 形,排列緊密,有的細胞處于分裂狀態(tài); 不能用高倍鏡找分生區(qū),因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小,難以發(fā)現分生區(qū)。(11)間期;因為在細胞周期中,間期時間最長。(12)不能,因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。(13)不能,因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。(14)沒有找到分生區(qū)細胞;沒有找到處于分裂期的細胞;染液過??;染色時間過短。實驗十一 模擬探究細胞表面積與體積的關系(必修一 P110)一.實驗目的:通過探究細胞大小,即細胞的表面積與體積, 與
47、物質運輸效率之間的關系,探討細胞不能無限長大的原因。二.實驗原理:用瓊脂塊模擬細胞。瓊脂塊越小,其表面積越大,則其與外界效換物質的表面積越大,經交換進來的物質在瓊脂塊中擴散的速度快;瓊脂塊中含有酚儆,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(NaOH)在瓊脂塊中的擴散速度。三.操作步驟:操作方法注意問題解釋用塑料餐刀將含酚血:的瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的止方體將3塊瓊脂塊放在燒杯內, 加入NaOH溶液,將瓊脂 塊淹沒,浸泡10min。用塑料勺不時翻動瓊脂塊。不要用勺子將瓊脂塊 切開或挖動其表面避免干擾實 驗結果戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出。用紙巾把它們吸干,
48、用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。仔 細觀察切面的顏色變化, 變成紅色的部分代表 NaOH 擴散的深度,測量每一塊上NaOH擴散后著色的濃度。記錄測量結果應避免NaOH與皮膚 和眼睛等接觸。如潑 灑出來,應立即用水 沖洗潑灑處。每兩次操作之間必須 把刀擦干NaOH有腐蝕性避免干擾實 驗結果根據測量結果進行計算,并將結果填在記錄表中結論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小;NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。四.課后討論題答案:1 .當NaOH與含酚血:的瓊脂塊相遇時, 其中的酚血:變成紫紅色, 這是常用的檢測 NaOH的方 法,從瓊脂塊的顏色變化就知道NaOH擴
49、散到多遠;在相同時間內,NaOH在每一瓊脂塊內擴散的深度基本相同,說明NaOH在每一瓊脂塊內擴散的速率是相同的。2 .根據球體的體積公式 V=4/3兀r3,表面積公式S=4ti r2,計算結果如下表。細胞直徑 (m m)表面積(m m2)體積(m m3)比值(表面積/體積)201 2564 1870.30302 82614 1300.203.細胞越大,物質運輸的效率越低,所以多細胞生物體是由許多細胞而不是由少數體積更大的細胞構成的。細胞越大,需要與外界環(huán)境交流的物質越多;但是細胞體積越大,其表面積相對越小,細胞與周圍環(huán)境之間物質交流的面積相對小了,所以物質運輸的效率越低。實驗十二觀察細胞的減數
50、分裂 (必修二P21)一.實驗目的:通過觀察蝗蟲精母細細胞減數分裂固定裝片,識別減數分裂不同的階段染色體的形態(tài)、位置和數目,加深對減數分裂過程的理解。二.實驗原理:蝗蟲的精母細胞進行減數分裂形成精細胞,再形成精子。此過程要經過兩次連續(xù)的細胞分裂:減數第一次分裂和減數第二次分裂。在此過程中,細胞中的染色體形態(tài)、 位置和數目都在不三.方法步驟:低儲鋪斷地發(fā)生變化,因而可據此識別減數分裂的各個時期。在旺倍短下里蟠遑蟲卿我I困僦分裂固定裝片詡1 秋要清邸皿&式疑圾瓠用和髏甩我在低倍慎F依次找越矮第七分型由用、后刻韻 讀翻第二枚分堤印期,后期的珊#疏高偌道下仔 如琥冕奧際的形生位甯曦目松腿創(chuàng)期黑
51、.盡可魄及隨膽費分裂泅同時期的 細胞簡圖CE(一個精母細胞經兩次有絲分裂形成四個精母細胞再經減數分裂形成十六個精子細胞)A.精巢管頂端B.減數第一次分裂C.減數第二次分裂D.精子細胞 E.精子四.課后討論題:1 .減數第一次分裂會出現同源染色體聯會、四分體形成、同源染色體在赤道板位置成對排列、同源染色體分離、移向細胞兩極的染色體分別由兩條染色單體組成(著絲點不分裂)、非同源染色體自由組合等現象。減數第二次分裂的中期, 非同源染色體成單排列在細胞赤道板位置,移向細胞兩極的染色體不含染色單體(著絲點分裂)2 .減數第一次分裂的中期,兩條同源染色體分別排列在細胞赤道板的兩側,末期在細胞兩極 的染色體
52、由該細胞一整套非同源染色體組成,其數目是體細胞染色體數的一半,每條染色體均由兩條染色單體構成。減數第二次分裂的中期, 所有染色體的著絲點排列在細胞的赤道板的位置。末期細胞兩極的染色體不含染色單體。3 .同一生物的細胞,所含遺傳物質相同;增殖的過程相同;不同細胞可能處于細胞周期的不 同階段。因此,可以通過觀察多個精原細胞的減數裂,推測出一精原細胞減數分裂過中色體的連續(xù)變化。理用特母細胞癖分裂不融實驗十三低溫誘導染色體加倍(必修二P88)一.實驗目的:1.學習低溫誘導植物染色體數目變化的方法2.理解低溫誘導植物細胞染色體數目變化的作用機制二.實驗原理:1 .進行正常有絲分裂的植物分生組織細胞,在有
53、絲分裂后期,染色體的著絲點分裂,子染 色體在紡纏絲的作用下分別移向兩極,最終被平均分配到兩個子細胞中去。2 .用低溫處理植物組織細胞,使紡纏體的形成受到抑制,以致影響染色體被拉向兩極,細 胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞染色體數目發(fā)生變化。三.方法步驟:四.課后討論題答案:兩者都是通過抑制分裂細胞內紡錘體的形成(前期),使染色體不能移向細胞兩極,而引起細胞內染色體數目加倍。實驗十四調查常見的人類遺傳?。ū匦薅91)一.實驗目的:1 .初步學會調查和統(tǒng)計人類遺傳病的方法2 .通過對幾種人類遺傳病的調查,了解這幾種遺傳病的發(fā)病情況3 .通過實際調查,培養(yǎng)接觸社會,并從社會中直接獲取資料或
54、數據的能力 .實驗原理:顯性遺傳病具有世代相傳的特點,隱性遺傳病隔代出現。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點是交叉遺傳,隔代出現,患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點是世代相傳,患者女性多于男性。三.方法步驟:可以以小組為單位開展調查工作。其程序是:(如組織問題調查小組一確定課題一分頭調查研究一撰寫調查報告一匯報交流調查結果 右流程圖)以處為單位,確定組內人員確定調止痛例制定調五記就收明勖調式方式討論調查時版注意的網超注意事項:1 .調查時,最好選取群體中 發(fā)病率較高 的單基因遺傳病,如紅綠色盲、白化病、高度 近視(600度以上)等2 .為保證調查的群體足夠大,小組調查的數據,應在班級和年級中進行匯總3 .某遺傳病的發(fā)病率疑雌病的豌
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