DC及CIK抗腫瘤作用探究進(jìn)展

1、dc及cik抗腫瘤作用探究進(jìn)展【摘要】樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell,dc)是已知的效能 最強(qiáng)的抗原呈遞細(xì)胞(antigen presenting cells, apc),可 有效的刺激幼稚t細(xì)胞活化和誘導(dǎo)特異的抗原免疫反應(yīng)，從 而將先天和獲得性免疫有機(jī)聯(lián)系在一起，是免疫反應(yīng)的始動(dòng) 者。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine induced killer cells,cik)是由il-2、ifn-v和cd3單克隆抗體等誘導(dǎo)而 成的對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有殺傷活性的細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞， 其溶瘤活性具有非mhc限制性?！娟P(guān)鍵詞】樹(shù)突狀細(xì)胞；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞； 腫瘤疫苗；免疫治療1973

2、年steinman和cohn首次發(fā)現(xiàn)dc,因其表面的指 狀突起稱其為樹(shù)突狀細(xì)胞。dc已被證明是目前發(fā)現(xiàn)的功能最 強(qiáng)大的apc。它可有效的誘導(dǎo)靜止t細(xì)胞增值和應(yīng)答，促進(jìn) 細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞(cytotoxic t lymphocytes, ctl)和輔 助性t淋巴細(xì)胞的生成，是機(jī)體免疫反應(yīng)的啟動(dòng)者和參與者 llocik細(xì)胞是人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子 與cd3 mab共同培養(yǎng)后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞2。cik具有t 淋巴細(xì)胞的抗腫瘤活性和n k細(xì)胞的非mhc限制性殺瘤活 性。將具有高效殺傷活性的cik細(xì)胞和具有強(qiáng)大腫瘤抗原遞 呈能力的dc聯(lián)合應(yīng)用于治療惡性腫瘤，有助于解除腫瘤患 者t細(xì)胞

3、免疫無(wú)能，起到抗腫瘤作用3。1 dc在抗腫瘤中的作用骨髓中的dc前體細(xì)胞釋放至外周血后遷移到外周非淋 巴組織，具有很強(qiáng)的抗原攝取能力，能有效的捕獲、加工內(nèi) 源性和外源性抗原，在此過(guò)程中dc的表面標(biāo)志及功能發(fā)生 改變，共刺激分子cd80、cd86等表達(dá)水平增高，捕獲抗原 的能力降低，抗原提呈能力明顯增強(qiáng)，成為成熟dco成熟 dc高表達(dá)mhci、mhcii類分子，分別與捕獲加工的內(nèi)源和 外源性抗原結(jié)合形成抗原肽復(fù)合物，在dc表面表達(dá)，提呈 給t細(xì)胞，共刺激分子與其配體結(jié)合，為t細(xì)胞的活化提供 第二信號(hào)，并與t細(xì)胞受體接受的抗原第一信號(hào)共同作用， 刺激t細(xì)胞活化，從而啟動(dòng)ctl反應(yīng)和cd4+thl反

4、應(yīng)4。腫瘤的發(fā)生與dc數(shù)量的減少和功能的缺陷關(guān)系密切。 2005年y訂maz t等5發(fā)現(xiàn)，患者體內(nèi)的dc數(shù)量與腫瘤的 臨床分期及周圍浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)。主要原因在于：腫瘤細(xì)胞直 接接觸dc抑制其成熟；腫瘤細(xì)胞釋放多種影響dc成熟和功 能的細(xì)胞因子，如vegf、il-10等；腫瘤細(xì)胞的免疫原性減 弱，mhc類分子表達(dá)異常，dc缺乏共刺激因子的表達(dá)，致使 t細(xì)胞不能被激活，最終導(dǎo)致了免疫耐受和腫瘤免疫逃逸。2 dc的培養(yǎng)及疫苗類型當(dāng)前多用外周血單核細(xì)胞在gm-csf和il-4等誘導(dǎo)培養(yǎng) 成為具有抗腫瘤作用的成熟dco dauer m等6報(bào)道，用常 規(guī)細(xì)胞因子組合培養(yǎng)外周血cd 144-細(xì)胞，48 h后便

5、可成功獲 得成熟dc。此法獲得的dc與常規(guī)方法所得到的dc具有同樣 的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，免疫表型分子的表達(dá)百分率相似，且縮短了 培養(yǎng)時(shí)間，減少了培養(yǎng)體系污染幾率，并避免反復(fù)凍存對(duì)細(xì) 胞的影響，同時(shí)減少費(fèi)用，具有未來(lái)研究和治療應(yīng)用的使用 價(jià)值。目前在臨床應(yīng)用的dc疫苗主要有：腫瘤全細(xì)胞抗原 負(fù)載的dc疫苗，用腫瘤細(xì)胞裂解物、凋亡腫瘤細(xì)胞及活細(xì) 胞等方法，使dc負(fù)載多價(jià)腫瘤抗原，避免了呈遞單一抗原 導(dǎo)致的免疫逃逸，但是此法有誘發(fā)自身免疫性疾病的危險(xiǎn)； 腫瘤抗原肽負(fù)載的dc疫苗，能誘導(dǎo)具有腫瘤抗原特異性 性的免疫反應(yīng)；腫瘤細(xì)胞rna、dna負(fù)載的dc疫苗，可持 續(xù)的將腫瘤抗原表位表達(dá)于dc表面，有效的激活

6、t細(xì)胞產(chǎn) 生抗腫瘤效應(yīng)。但目前已知的抗原決定簇不多，使得臨床應(yīng) 用受到了限制；dc與cik細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用，2005年張錦英 等8研究抗原負(fù)載的dc聯(lián)合cik治療晚期胃癌的結(jié)果顯 示，患者癥狀明顯減輕，機(jī)體免疫功能得到了改善，且無(wú)明 顯的不良反應(yīng)，進(jìn)一步證實(shí)了 dc與cik聯(lián)合應(yīng)用的臨床意 義。3 cik的生物特性schmidt-wolf等9于1991年首次發(fā)現(xiàn)在外周血淋巴細(xì) 胞(pbl)中加入ifn- y > il-2和cd3mab,可培養(yǎng)出大量cd3 和cd56雙陽(yáng)性t細(xì)胞，是非mhc限制性細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞 10,兼具有t淋巴細(xì)胞的抗腫瘤活性和nk細(xì)胞的非限制 性殺瘤活性，稱其為cik。

7、t細(xì)胞可分為thl和th2類細(xì)胞，thl類細(xì)胞因子的主 要作用為增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，th2類細(xì)胞因子則主要 對(duì)體液免疫起作用lllocik細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后可分泌大量的thl 類細(xì)胞因子12,如il-2, ifn-v及il-12,可調(diào)節(jié)體內(nèi) 其他細(xì)胞因子的分泌以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞對(duì)cik殺傷作用的敏感 性；cik可通過(guò)上調(diào)腫瘤細(xì)胞的mhc分子及共刺激分子的表 達(dá)，激活腫瘤特異性ctl、自然殺傷細(xì)胞等，起到間接殺瘤 作用。cik還參與腫瘤細(xì)胞的凋亡，cooper等13的研究顯 示，培養(yǎng)的cik細(xì)胞表面表達(dá)的fas-l（fas配體）與相應(yīng)腫 瘤細(xì)胞識(shí)別結(jié)合后，可激活細(xì)胞內(nèi)源性dna內(nèi)切酶，從而起 到殺瘤作

8、用。4 dc與cik聯(lián)合應(yīng)用dc和cik是腫瘤免疫治療的兩個(gè)重要部分，前者識(shí)別抗 原、激活獲得性免疫系統(tǒng)，后者通過(guò)發(fā)揮自身細(xì)胞毒性和分 泌細(xì)胞因子殺傷腫瘤細(xì)胞，二者聯(lián)合確保了一個(gè)高效和諧的 免疫體系。jomantaite等在活體研究中發(fā)現(xiàn)，cik能使小鼠 肝臟中dc增殖3到4倍14。很多研究表明，dc和cik共 同培養(yǎng)后具有更強(qiáng)的腫瘤殺傷活性，殺瘤譜更廣，并且還能 在低效靶比條件下清除腫瘤細(xì)胞。2006年孟凡東等15的研 究顯示，dc和cik共同培養(yǎng)能促使dc成熟，高表達(dá)共刺激 因子和抗原提呈分子，更有效的向t淋巴細(xì)胞提呈抗原，提 供t細(xì)胞激活所須的第二信號(hào)；同時(shí)分泌更多的il-12,增 強(qiáng)機(jī)

9、體的抗腫瘤免疫應(yīng)答。dc與cik共同培養(yǎng)既激活了抗原 負(fù)載dc介導(dǎo)的mhc限制性細(xì)胞毒性作用，又發(fā)揮了 cik細(xì) 胞的非mhc限制性細(xì)胞毒作用，增加了對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作 用，為腫瘤免疫治療提供更多的效應(yīng)細(xì)胞，對(duì)腫瘤臨床治療 有重要意義。5問(wèn)題與展望dc和cik在抗腫瘤治療中具有廣泛的應(yīng)用前景。目前， cik聯(lián)合dc治療惡性腫瘤的臨床實(shí)例還不多，確切療效需要 進(jìn)一步評(píng)價(jià)，cik細(xì)胞的抗腫瘤作用機(jī)制有待于深入研究。 如何使輸注的效應(yīng)細(xì)胞特異性地到達(dá)靶部位及如何使其穿 越腫瘤細(xì)胞周圍的重重屏障而保證數(shù)量、功效不衰減等問(wèn)題 尚待解決。繼續(xù)探討dc、cik增殖影響因素、體內(nèi)分布情況 及臨床適應(yīng)證等，將有

10、助于該療法的成熟和完備。參考文獻(xiàn)1 sandra tuyaerts,sonja van meirvenne,aude bonehill,et al. expression of human gitrl on myeloid dendritic cells enhances their immunostimulatory function but does not abrogate the suppressive effect of cd4+cd25+regulatory t cells,journal of leukocytebiology,2007,82：1-13.2 nagaraj s,z

11、iske c,schmidt wolf ig. human cytokine-induced killer cells have enhanced in vitro cytolytic activity via non-viral interleukin gene transfer .genet vaccines ther,2004,2 (1):123隋承光，孟凡東，王曉華，等.cik細(xì)胞的制作及對(duì)不同 腫瘤細(xì)胞株體外抗腫瘤作用的研究.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué) 報(bào),2005,34(3):210.4 cheng-shyong chang,julia h chang,nicholas c hsu,hsuan

12、-yu lin,chih-yuan chung,et al. expression of cd80 and cd86 costimulatory molecules is potential markers for better survival in nasopharyngeal carcinoma. bmc cancer,2007,7:88,1186-1471.5 yilmaz t,gedikoglu g,celik a,et al.prognostic significance of 1 angerhans cell infiltration in cancer of the larya

13、x. otolaryngol head neck surg,2005,132 (2):309.6 dauer m,obermaier b,herten j, et al. mature dendritic cells derived from human monocytes within 48 hours：a novel strategy for dendritic cell differentiation from blood precursors. j immunol2003,170:4069-40767 xin guan,xs leng, ji-run peng et al. a nov

14、el, rapid strategy to form dendritomas from human dendritic cells and hepatocellular carcinoma cell line hcclm3 cells using mature dendritic cells derived from human peripheral blood cd14+monocytes within 48 hours of in vitro culture .world jgastroenterol,2004,10(24):3564-3568.8張錦英，束永前，黃普文，等抗原負(fù)載樹(shù)突狀細(xì)

15、胞刺激細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療晚期胃癌的臨床觀察.中國(guó) 生化藥物雜志，2005,26 (6): 336.9 chmidt-wolf ig,negrin rs,kiem hp,et al.use of a scid mouse/human lymphoma model to evaluate cytokine-induced killer cells with potent antitumor activity. j exp med,1991, 174：139-149.10蒲驍麟，束永前，張錦英，等.抗原負(fù)載的樹(shù)突細(xì)胞對(duì) 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞的影響江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué) 版),2005,15(1

16、):6-9.11 dere q doherty,suzanne norris .the human liver contains multiple population of nk cells,tcells,and cd3+cd56+natural t cell with distinet cytotoxic activities and thl,th2,and tho evtokine secretionnatterns the journal of immunoloqv ,1999 ,6(81):2315-2321.12 marten a, ziske c,schottker b, et al. interaction between dendritic cells and cytokine-induced killer cells lead to an activation of both populations. j immunother,2001,24 (6):502-510.13 cooper ma, fehniger ta, fuc