其他革蘭陰性桿菌的常規(guī)檢驗(yàn)課件

1、其他革蘭陰性桿菌的常規(guī)檢驗(yàn)其他革蘭陰性桿菌的常規(guī)檢驗(yàn)嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬嗜肺軍團(tuán)菌屬嗜肺軍團(tuán)菌屬布魯菌布魯菌百日咳鮑特菌百日咳鮑特菌彎曲菌彎曲菌幽門螺桿菌幽門螺桿菌流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌G-小桿菌，多形性小桿菌，多形性有毒菌株形成莢膜有毒菌株形成莢膜培養(yǎng)基中需加入血液，以提供培養(yǎng)基中需加入血液，以提供X因子因子和和V因子因子（巧克力色培養(yǎng)基巧克力色培養(yǎng)基） X因子血紅素因子血紅素 V因子輔酶因子輔酶或輔酶或輔酶菌落光滑、無色透明、露滴狀菌落光滑、無色透明、露滴狀CO2培養(yǎng)培養(yǎng)“衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象”衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象流感嗜血桿菌與金流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在黃色葡萄球菌在血血平板平板上共同孵育

2、時(shí)，上共同孵育時(shí)，由于后者能合成較由于后者能合成較多的多的V因子因子，在金黃，在金黃色葡萄球菌菌落周色葡萄球菌菌落周圍生長(zhǎng)的流感嗜血圍生長(zhǎng)的流感嗜血桿菌的菌落較大，桿菌的菌落較大，離金黃色葡萄球菌離金黃色葡萄球菌菌落越遠(yuǎn)的越小。菌落越遠(yuǎn)的越小。根據(jù)莢膜抗原分根據(jù)莢膜抗原分ABCDEF六型，六型，B型型毒力最強(qiáng)毒力最強(qiáng)可產(chǎn)生自溶酶可產(chǎn)生自溶酶致病物質(zhì)：莢膜、菌毛、內(nèi)毒素、致病物質(zhì)：莢膜、菌毛、內(nèi)毒素、 IgAIgA蛋蛋白酶白酶所致疾病所致疾病 原發(fā)感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見于原發(fā)感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見于兒童兒童 繼發(fā)感染：鼻竇炎等，多見于成人繼發(fā)感染：鼻竇炎等，多見于成人微生物學(xué)檢查微生

3、物學(xué)檢查 標(biāo)本標(biāo)本（腦脊液、痰、血液、膿液）（腦脊液、痰、血液、膿液）涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告G-性桿菌性桿菌多形性多形性“衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象”檢出流感嗜血桿菌鑒定依據(jù)鑒定依據(jù)革蘭陰性小桿菌、多形性革蘭陰性小桿菌、多形性培養(yǎng)采用巧克力色培養(yǎng)基，培養(yǎng)采用巧克力色培養(yǎng)基，CO2培養(yǎng)培養(yǎng)血平板上有血平板上有“衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象”X、V因子需求試驗(yàn)因子需求試驗(yàn)軍團(tuán)菌軍團(tuán)菌是引起軍團(tuán)菌病的病原體是引起軍團(tuán)菌病的病原體首發(fā)于首發(fā)于1976年的美國(guó)一次軍人聚會(huì)，故年的美國(guó)一次軍人聚會(huì)，故稱作軍團(tuán)病稱作軍團(tuán)病 1982年年,在我國(guó)南京首次證實(shí)了軍團(tuán)菌病。在我國(guó)南京首

4、次證實(shí)了軍團(tuán)菌病。 形態(tài)染色形態(tài)染色革蘭陰性，但不易被著色革蘭陰性，但不易被著色桿菌，形態(tài)有多形性桿菌，形態(tài)有多形性Gimenen染色，菌體呈紅色，背景為綠染色，菌體呈紅色，背景為綠色色不形成芽孢，無莢膜不形成芽孢，無莢膜 ，有端生或側(cè)生鞭毛有端生或側(cè)生鞭毛培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求高營(yíng)養(yǎng)要求高專性需氧專性需氧需需2.55CO2生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢常用培養(yǎng)基及菌落特征常用培養(yǎng)基及菌落特征 BCYE培養(yǎng)基：灰白色、圓形光滑濕潤(rùn)菌落培養(yǎng)基：灰白色、圓形光滑濕潤(rùn)菌落 F-G培養(yǎng)基：針尖大小、黃色熒光培養(yǎng)基：針尖大小、黃色熒光軍團(tuán)菌菌落形態(tài)軍團(tuán)菌菌落形態(tài)(CYE瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基)抗原結(jié)構(gòu)抗原結(jié)構(gòu)抗原：具

5、有型特異性抗原：具有型特異性 軍團(tuán)菌病約軍團(tuán)菌病約90%的是由嗜肺軍團(tuán)菌所致的是由嗜肺軍團(tuán)菌所致,已發(fā)現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)15個(gè)血清型個(gè)血清型 ，其中以，其中以Lp1血清型血清型最常見最常見, Lp6次之。次之。抵抗力抵抗力分布廣泛、抵抗力強(qiáng)分布廣泛、抵抗力強(qiáng)水中存活時(shí)間長(zhǎng)水中存活時(shí)間長(zhǎng)軍團(tuán)菌病的主要污染源是供水系統(tǒng)及冷軍團(tuán)菌病的主要污染源是供水系統(tǒng)及冷卻塔和空調(diào)系統(tǒng)卻塔和空調(diào)系統(tǒng) 定期清洗空調(diào)定期清洗空調(diào) 預(yù)防軍團(tuán)菌病預(yù)防軍團(tuán)菌病臨床意義臨床意義致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、侵襲性酶致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、侵襲性酶?jìng)魅就緩剑汉粑溃ㄎ牒熊妶F(tuán)菌的傳染途徑：呼吸道（吸入含有軍團(tuán)菌的氣溶膠）氣溶膠）所致疾病

6、：軍團(tuán)菌病所致疾?。很妶F(tuán)菌病 肺炎型肺炎型 非肺炎型（類似感冒）非肺炎型（類似感冒）免疫性：感染者血清中出現(xiàn)特異性免疫性：感染者血清中出現(xiàn)特異性IgG、 IgM抗體抗體微生物學(xué)檢查微生物學(xué)檢查 標(biāo)本標(biāo)本（痰、支氣管分泌物、血液、）（痰、支氣管分泌物、血液、） 涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢 （Giemsa染色染色） 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)（BEYE瓊脂）瓊脂）鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告形態(tài)染色形態(tài)染色菌落特征菌落特征氧化酶、觸酶氧化酶、觸酶熒光抗體染色等熒光抗體染色等血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)：檢測(cè)患者血清中特異性抗體檢測(cè)指標(biāo)：檢測(cè)患者血清中特異性抗體方法：方法：ELISA意義：意義： 檢測(cè)特異性

7、檢測(cè)特異性IgM：診斷軍團(tuán)菌?。涸\斷軍團(tuán)菌病 檢測(cè)特異性檢測(cè)特異性IgG：軍團(tuán)菌病流行病學(xué)調(diào)查：軍團(tuán)菌病流行病學(xué)調(diào)查布魯菌屬布魯菌屬引起布魯菌病（波狀熱）引起布魯菌?。ú顭幔┛梢鹑诵蠊不疾】梢鹑诵蠊不疾∥覈?guó)流行菌種主要是羊、牛、豬布魯菌，我國(guó)流行菌種主要是羊、牛、豬布魯菌，以羊布魯菌最常見以羊布魯菌最常見屬細(xì)胞被寄生菌屬細(xì)胞被寄生菌形態(tài)染色形態(tài)染色革蘭陰性球桿菌革蘭陰性球桿菌光滑型有微莢膜，無芽孢，無鞭毛光滑型有微莢膜，無芽孢，無鞭毛常用染色法：常用染色法：改良改良Ziehl-Neelsen染色法：菌體染色法：菌體紅色紅色，背景為藍(lán)色背景為藍(lán)色柯茲洛夫斯基染色法：菌體柯茲洛夫斯基染色法：菌體紅色紅色，背景，背景綠色綠色培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性專性需氧、專性需氧、510CO2營(yíng)養(yǎng)要求高，常用肝浸液培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)要求高，常用肝浸液培養(yǎng)基生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢菌落細(xì)小、無色透明、光滑菌落細(xì)