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文檔簡介
1、家畜生理學實驗血液生理之白細胞張宇飛指點教師:趙懷平高級實驗室一、實驗?zāi)康豱了解白細胞計數(shù)原理,掌握其技術(shù)方法、紅細胞沉降速率的測定方法及測定、測定紅細胞膜對低滲溶液的抵抗才干。二、實驗原理n白細胞舊稱白血球,也被稱為免疫細胞,體和動物血液及組織中的無色細胞,能吞噬異物或產(chǎn)生抗體,以協(xié)助機體防御感染。白細胞普通有活潑的挪動才干,它們可以從血管內(nèi)遷移到血管外,或從血管外組織遷移到血管內(nèi)。因此,白細胞除存在于血液和淋巴中外,也廣泛存在于血管、淋巴管以外的組織中。 n血液中的白細胞有五種,按照體積從小到大是:淋巴細胞,嗜堿粒細胞,中性粒細胞,單核細胞和嗜酸細胞。白細胞是無色有核的血細胞,在血液中普通
2、呈球形,根據(jù)形狀差別可分為顆粒和無顆粒兩大類。 n故白細胞計數(shù)具有重要的生理意義。n懸浮于低張溶液中的紅細胞,由于溶液張力差別,可使紅細胞外的水漸漸進入紅細胞中。紅細胞先變?yōu)榍蛐?;當?shù)竭_臨界容量時,那么紅細胞破裂溶解。察看上清液游離Hb量即可反映出紅細胞脆性。n n將抗凝血放入血沉管中垂直靜置,紅細胞由于密度較大而下沉。通常以紅細胞在第一小時末下沉的間隔表示紅細胞的沉降速度,稱為紅細胞沉降率,即血沉。三、實驗資料n家兔血、血細胞計數(shù)板、顯微鏡、試管、血沉管四、實驗工程n1. 白細胞計數(shù)白細胞計數(shù) WBC n2. 紅細胞沉降率的測定紅細胞沉降率的測定 n3. 紅細胞的脆性實驗紅細胞的脆性實驗五、
3、實驗方法n1、白細胞計數(shù)、白細胞計數(shù) n3、白細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)n吸血及血液的稀釋:吸血及血液的稀釋均在紅細胞吸管中進展。吸血及血液的稀釋:吸血及血液的稀釋均在紅細胞吸管中進展。n推片及充液:在推片和充液前,先在顯微鏡下檢查計數(shù)板和蓋玻片能否清推片及充液:在推片和充液前,先在顯微鏡下檢查計數(shù)板和蓋玻片能否清潔,假設(shè)不干凈那么清潔后運用。推片是指用手指將蓋玻片固定在計數(shù)板的潔,假設(shè)不干凈那么清潔后運用。推片是指用手指將蓋玻片固定在計數(shù)板的正中間計數(shù)室邊緣,然后大拇指將其緩慢的推行,使蓋玻片貼在計數(shù)室兩側(cè)正中間計數(shù)室邊緣,然后大拇指將其緩慢的推行,使蓋玻片貼在計數(shù)室兩側(cè)的槽上,充液是指將稀釋好的
4、血液搖勻后,先棄去吸管內(nèi)的前兩滴,然后用的槽上,充液是指將稀釋好的血液搖勻后,先棄去吸管內(nèi)的前兩滴,然后用半滴放到計數(shù)室和蓋玻片的間隙,同毛吸作用使血液進入計數(shù)室內(nèi)。半滴放到計數(shù)室和蓋玻片的間隙,同毛吸作用使血液進入計數(shù)室內(nèi)。n計數(shù):稀釋的血液進入計數(shù)室后,靜置計數(shù):稀釋的血液進入計數(shù)室后,靜置23分鐘后,在低倍顯微鏡下找中分鐘后,在低倍顯微鏡下找中央大方格,然后在高倍鏡下數(shù)央大方格,然后在高倍鏡下數(shù)4個角上的小方格和中央小方格中紅細胞數(shù)目。個角上的小方格和中央小方格中紅細胞數(shù)目。n結(jié)果計算:結(jié)果計算:N指細胞總數(shù)指細胞總數(shù)n稀釋稀釋200倍:倍:x=N107n稀釋稀釋100倍:倍:x=N2.
5、5107n2. 紅細胞沉降率的測定紅細胞沉降率的測定n用清潔、枯燥的血沉管,小心吸血至最高用清潔、枯燥的血沉管,小心吸血至最高刻度刻度“0處。絕對不能有氣泡,假設(shè)有氣處。絕對不能有氣泡,假設(shè)有氣泡重新做。將吸有血液的血沉管置于血沉泡重新做。將吸有血液的血沉管置于血沉管架上,分別在管架上,分別在15min、30min、1h時讀時讀取血沉管上部血漿的高度,以毫米表示。取血沉管上部血漿的高度,以毫米表示。n3. 紅細胞的脆性實驗紅細胞的脆性實驗n不同濃度氯化鈉溶液的配制:不同濃度氯化鈉溶液的配制: 管號123456789101%氯化鈉/mL1.801.401.301.201.10 1.000.900
6、.800.700.60蒸餾水/mL0.200.600.700.800.90 1.001.101.201.301.40氯化鈉濃度/%0.900.700.650.600.55 1.000.450.400.350.30n取決10支小試管;分別配制上述不同濃度的氯化鈉溶液;各管再參與全血一滴;混勻后靜置1小時察看結(jié)果。 六、結(jié)果分析n1、白細胞計數(shù)n臨床意義1生理變化1猛烈的膂力勞動或心情激動都使白細胞添加。2新生兒的白細胞數(shù)較成人高,3日后降到每微升10,000左右。3在妊娠期中,白細胞常輕度增多,分娩時增多能夠更顯著。4慢性特發(fā)性白細胞增多癥,其白細胞總數(shù)可繼續(xù)在10,00020,000l,但無其
7、他異常發(fā)現(xiàn)。5高溫作業(yè)、飲酒及飯后亦能夠有輕度添加。n病理變化增高見于急性化膿性感染所引起的急性周身性感染,部分炎癥膿腫、腦膜炎、大葉性肺炎、蘭尾炎、扁桃體炎、膿胸、敗血癥等以及其他一些細菌感染如猩紅熱、霍亂、白喉等。此外,白血病、骨髓纖維化、惡性腫瘤、真性紅細胞增多癥、尿毒癥、酸中毒、手術(shù)后、急性失血后、某些藥物中毒和燒傷等亦常增高。其中尤以慢性白血病增高最多,有時可達幾十萬;骨髓纖維化大多在10,00020,000;真性紅細胞增多癥大多在12,00030,000。由于感染等所引起的類白血病反響,有時亦可高達數(shù)萬。減少見于1某些感染:細菌如傷寒、付傷寒、布氏菌病等;病毒如流感、麻疹、風疹、登
8、革熱等及各種重度感染如粟粒性肺結(jié)核病、嚴重敗血癥等。2脾功能亢進:見于肝硬化、班替氏綜合征等。3血液?。涸偕恋K性貧血,急性粒細胞缺乏癥可減到只剩數(shù)百l,非白血病性白血病、惡性網(wǎng)狀細胞增多癥。4 化學要素:可致白細胞減少的有抗癌藥物氮芥、環(huán)磷酰胺、長春花堿及長春新堿等、解熱鎮(zhèn)痛藥氨基比林、氨替比林、保太松、復(fù)方阿斯匹林及水揚酸鈉等、抗甲狀腺藥兩基硫氧嘧啶、甲基硫氧嘧啶,他巴唑、甲亢平等、抗癲癇藥苯妥英鈉、巴比妥類等、磺胺類磺胺噻唑、磺胺嘧啶、長效磺胺、磺胺異惡唑等、抗生素氯霉素、合霉素、新生霉素、青霉素、鏈霉素、金霉素等、抗瘧藥奎寧、撲瘧奎寧、伯氨奎寧等、抗癆藥異煙肼、異煙宗、對氨基水揚酸、氨
9、硫脲等、抗組織胺藥苯海拉明、苯沙明等、抗糖尿病藥D860、P607等、抗高血壓藥氯噻嗪氫氯噻嗪、甲基多巴、利血平、氯丙嗪等、利尿藥汞利尿劑、利尿酸、乙酰唑胺等、其它苯、金鹽、鉍、有機砷、山道年、二硝基酚、DDT 、青霉胺等。5物理要素 (X線、放射性物質(zhì)。注:白細胞計數(shù),對病情動態(tài)察看具有一定的意義。鑒于白細胞的正常數(shù)值幅度較大,因此,臨床在分析結(jié)果時,須與分類和原來的白細胞基數(shù)結(jié)合起來,否那么易呵斥延誤診斷。n2. 紅細胞沉降率的測定紅細胞沉降率的測定n紅細胞沉降率紅細胞沉降率ESR測定測定臨床意義臨床意義ESR的變化主要同血漿中球蛋白,如的變化主要同血漿中球蛋白,如2和和球蛋白,尤其是與纖
10、維蛋白原的球蛋白,尤其是與纖維蛋白原的含量多少有關(guān),假設(shè)球蛋白與纖維蛋白原含量多于正常,血沉就增快,所以含量多少有關(guān),假設(shè)球蛋白與纖維蛋白原含量多于正常,血沉就增快,所以變化無特異性。但對任何一種血沉增速的疾病,在病程內(nèi)定期察看血沉的動變化無特異性。但對任何一種血沉增速的疾病,在病程內(nèi)定期察看血沉的動態(tài)變化,可以協(xié)助推斷病變的開展情況。態(tài)變化,可以協(xié)助推斷病變的開展情況。增高見于:增高見于:生理性:婦女月經(jīng)期,妊娠后生理性:婦女月經(jīng)期,妊娠后3個月到產(chǎn)后個月到產(chǎn)后1個月,小兒和個月,小兒和50歲以上的老人。歲以上的老人。病理性:病理性:1各種急性的全身和部分感染,如活動性結(jié)核病、瘧疾、風溫熱和
11、肺炎。各種急性的全身和部分感染,如活動性結(jié)核病、瘧疾、風溫熱和肺炎。2結(jié)締組織性疾患,如多發(fā)性肌炎。結(jié)締組織性疾患,如多發(fā)性肌炎。3在產(chǎn)重貧血、白血病、某些惡性腫瘤、甲亢、腎炎以及鉛、砷、酒精在產(chǎn)重貧血、白血病、某些惡性腫瘤、甲亢、腎炎以及鉛、砷、酒精中毒時亦常增高。中毒時亦常增高。減低見于:減低見于:真性紅細胞增多癥及繼發(fā)性紅細胞增多癥、低纖維蛋白原血癥、球形紅細胞真性紅細胞增多癥及繼發(fā)性紅細胞增多癥、低纖維蛋白原血癥、球形紅細胞增多癥、心臟代償功能妨礙等。增多癥、心臟代償功能妨礙等。 n 3. 紅細胞的脆性實驗n結(jié)果:n 開場溶血:上層液開場呈透明紅色且管底有紅細胞者;n 完全溶血:溶液為透明紅色且管底無紅細胞者;必要時可
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