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文檔簡(jiǎn)介

1、1青霉素過(guò)敏者的梅毒治療方法比較組員:趙潔,祝常青,翁雅慧,楊敏2課題研究背景 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋體感染人體而發(fā)生的常見(jiàn)性傳播疾病,已經(jīng)問(wèn)世數(shù)百年了,目前在世界范圍均有分布,是十分重要的性傳播疾?。豢梢苑譃楂@得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等。 梅毒病西醫(yī)治療方法梅毒的治療現(xiàn)在主要以西藥為主,自從青霉素用于治療梅毒有奇效之后,中藥基本不在作為主要醫(yī)療手段,只是起輔助作用。 然而對(duì)青霉素過(guò)敏者屢見(jiàn)不鮮,那么,對(duì)青霉素過(guò)敏的梅毒患者又該怎樣治療呢? 查閱了相關(guān)文獻(xiàn)資料,我們發(fā)現(xiàn),對(duì)于青霉素過(guò)敏的梅毒患者的代替治療藥物目前只有以下三種:紅霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素。 因而我們決

2、定對(duì)這三種藥物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和討論。3梅毒簡(jiǎn)介 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)l梅毒(梅毒(syphilis)由梅毒螺旋體引起的一種慢性傳染性疾病,當(dāng)螺旋體進(jìn)入人體后,迅速播散至全身各器官,產(chǎn)生各種癥狀與體征,也可呈潛伏狀態(tài),還可通過(guò)胎盤傳給下一代,故危害極大。l病原體病原體梅毒螺旋體梅毒螺旋體(TreponemaPallidun)是梅毒的病原體,因其透明,不易著色,故又稱蒼白螺旋體。梅毒是一種廣泛流行的性病,在中國(guó)發(fā)病率又有所回升。梅毒螺旋體只感染人類,分獲得性梅毒與胎傳梅毒。梅毒螺旋體4梅毒常用治療藥物 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)(一)青霉素類 為首選的高效抗梅毒的藥物,血清濃度達(dá)到0.03µg/ml即可殺死梅

3、毒螺旋體,且應(yīng)該持續(xù)2周以上,常用的有芐星青霉素、普魯卡因青霉素和水劑青霉素。(二)頭孢曲松鈉 有治療梅毒的報(bào)道,取得了良好的近期療效,但在劑量、療程和遠(yuǎn)期療效尚無(wú)確切的經(jīng)驗(yàn)。(三)四環(huán)素類和紅霉素類 療效較青霉素為差,通常作為青霉素過(guò)敏者的替代治療藥物。四環(huán)素類常用的有四環(huán)素、多西環(huán)素和米諾環(huán)素,孕婦及兒童禁用。紅霉素類常用的有紅霉素、阿奇霉素,孕婦慎用阿奇霉素。 青霉素5 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)1.早期梅毒(包括一期、二期梅毒和早期潛伏梅毒) 四環(huán)素500mg,4次/d,口服,療程15d;或 多西環(huán)素100mg,2次/d,口服,療程15d;或 紅霉素500mg,4次/d,口服,療程15d。2.晚期梅毒

4、(包括三期皮膚、黏膜或骨骼梅毒,晚期潛 伏梅毒,不能確定病期的潛伏梅毒及二期復(fù)發(fā)梅毒) 四環(huán)素500mg,4次/d,口服,療程30d;或 多西環(huán)素100mg,2次/d,口服,療程30d;或 紅霉素500mg,4次/d,口服,療程30d。青霉素過(guò)敏者常用藥物及治療方案6 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)青霉素過(guò)敏者常用藥物及治療方案3.心血管梅毒: 應(yīng)住院治療,如有心力衰竭,應(yīng)在控制心力衰竭后開(kāi)始抗梅毒治療。 治療方法同晚期梅毒。4.神經(jīng)梅毒 治療方法同晚期梅毒。5.妊娠梅毒 用紅霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒療程15d,二期復(fù)發(fā)及晚期 梅毒療程30d。妊娠初3個(gè)月與妊娠末3個(gè)月各治療一個(gè)療程,但所生 的嬰

5、兒應(yīng)用青霉素補(bǔ)治。 孕婦禁用四環(huán)素和多西環(huán)素。7 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.提取青霉素過(guò)敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒標(biāo)本。2.對(duì)梅毒螺旋體進(jìn)行體外培養(yǎng),得到Nichols株。3.通過(guò)加入青霉素、紅霉素、四環(huán)素與多西環(huán)素來(lái)改變其生長(zhǎng)環(huán)境,然 后檢測(cè)梅毒螺旋體的數(shù)量。4.通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析哪一種藥物對(duì)于治療梅毒的效果最佳,并得出最適 藥物劑量。8 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握梅毒螺旋體的人工培養(yǎng)技術(shù)。掌握梅毒螺旋體的人工培養(yǎng)技術(shù)。2.通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作掌握梅毒螺旋體的染色方法及微生物學(xué)檢查法。通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作掌握梅毒螺旋體的染色方法及微生物學(xué)檢查法。3.通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出最有效的代替青霉素治療梅毒的藥物。通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出

6、最有效的代替青霉素治療梅毒的藥物。9 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法及路線一、梅毒螺旋體的提取一、梅毒螺旋體的提取1.到醫(yī)院征得院方同意后,對(duì)青霉素過(guò)敏的梅毒患者進(jìn)行標(biāo)本采集: 期梅毒-由于一期梅毒的臨床表現(xiàn)為硬下疳、腹股溝 或近衛(wèi)淋巴結(jié)腫大,因而可取患者硬下疳滲 、 出液; 期梅毒-此時(shí)患者的臨床表現(xiàn)為多形性皮膚損害及淺 表淋巴結(jié)腫大,因而可采集梅毒疹滲出液或 局部淋巴結(jié)抽出液。2.采集樣本后妥善保管10 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法及路線1.留下足夠的標(biāo)本妥善保管,以備后面的實(shí)驗(yàn)使用,只取一部分進(jìn)行本次 實(shí)驗(yàn)。將一期標(biāo)本與二期標(biāo)本分別接種在兩只家兔睪丸中或眼前房?jī)?nèi) 繁殖,約需30小時(shí)才能分裂一次,能保持毒力。2

7、.待梅毒螺旋體繁殖到原來(lái)的16倍以后(約150個(gè)小時(shí)),分組進(jìn)行實(shí) 驗(yàn)。二、梅毒螺旋體的人工培養(yǎng)二、梅毒螺旋體的人工培養(yǎng)三、分組三、分組1.將一期與二期培養(yǎng)物分別平均分為32組,共64組。2.一期中取每8組為一個(gè)小組,共四組(即紅霉素組,四環(huán)素組,多西 環(huán)素組與青霉素對(duì)照組)。二期同上。3.將紅霉素組、四環(huán)素組、多西環(huán)素組、青霉素組設(shè)置8個(gè)劑量梯度進(jìn) 行實(shí)驗(yàn)。(詳見(jiàn)表格)11 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法及路線1.方法一:直接顯微鏡檢查 將上述檢材置于玻片上用暗視野顯微鏡檢查,如見(jiàn)有呈現(xiàn)運(yùn)動(dòng)活潑,沿其長(zhǎng)軸滾動(dòng)、屈伸、旋轉(zhuǎn)、前后移行等的螺旋體即有診斷意義。 也可做鍍銀染色、熒光抗體染色或Giemsa染色。

8、四、分時(shí)間段檢查梅毒螺旋體數(shù)量四、分時(shí)間段檢查梅毒螺旋體數(shù)量2.方法二:核酸檢測(cè) 用PCR技術(shù)直接檢測(cè)臨床標(biāo)本中梅毒螺旋體的特異性DNA片段,用于檢測(cè)的引物和探針是編碼外膜蛋白47kD的基因,其擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)斑點(diǎn)印跡,或電泳Southern 印跡法鑒定。12 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法及路線3.抗體檢測(cè)(1)非密螺旋體抗原試驗(yàn) 多用牛心肌的心脂質(zhì)作為抗原,測(cè)定病人血清中的反應(yīng)素。將抗原包被到載體顆粒上,如:膽固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺紅(TRUST)。均為初篩試驗(yàn)。 初期梅毒病灶出現(xiàn)后1-2周時(shí),陽(yáng)性率為5383,二期梅毒的陽(yáng)性率可達(dá)100。1)性病研究所實(shí)驗(yàn)室(VDRL)玻片試驗(yàn)

9、 所用抗原(0.03心擬脂、0.21卵磷脂、0.9膽固醇,用無(wú)水乙醇配制)03ml加入裝有0.3ml緩沖鹽水的小瓶?jī)?nèi)(1015ml容積),加塞混勻。再加2.4ml緩沖鹽水即為抗原懸液。 待檢血清經(jīng)5630min滅活,滴加于玻片的漆圈內(nèi)加等量抗原液,搖轉(zhuǎn)玻片5min充分混勻反應(yīng)后觀察結(jié)果。有大片絮狀凝聚物為(3+),中等凝聚物為(2+),細(xì)小凝聚物為(+),液體混濁為()。13 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法及路線2)快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR) 用活性炭顆粒吸附VDRL抗原。與反應(yīng)素結(jié)合形成黑色凝集塊,可肉眼觀察結(jié)果。 取待檢血清加于環(huán)狀卡圓圈內(nèi),加VDRL抗原致敏活性炭1滴,旋轉(zhuǎn)搖勻8min,觀

10、察結(jié)果。在白色底板出現(xiàn)明顯黑色凝集顆粒為陽(yáng)性,試驗(yàn)結(jié)果用肉眼很容易判斷,不需顯微鏡,也易于推廣。3)不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR) 注意:以上試驗(yàn)常有假陽(yáng)性反應(yīng):結(jié)核、麻風(fēng)、瘧疾、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、老年人、妊娠、吸毒者等。14 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法及路線(2)密螺旋體抗原試驗(yàn) (確證試驗(yàn)) 用密螺旋體抗原檢測(cè)病人血清中特異性抗體,由于梅毒螺旋體、雅司螺旋體等抗原性相似,故血清學(xué)試驗(yàn)不能區(qū)別這些密螺旋體及其所致疾病。 1)熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS) 先用吸收劑去除病人血清非特異性抗原,提高特異性,稀釋成不同稀釋度,加于預(yù)先涂有梅毒螺旋體抗原的玻片上,置濕盒內(nèi),37孵育30min,洗片

11、后再用熒光素標(biāo)記的羊抗人丙球蛋白抗體,在熒光顯微鏡下觀察。陽(yáng)性者可見(jiàn)發(fā)熒光的梅毒螺旋體。FTA-ABS試驗(yàn)具高度特異性和敏感性,在第一期梅毒的頭幾天就可測(cè)出特異性抗體。2)梅毒螺旋體血凝試驗(yàn) (treponemal pallidum hemaggulation assay, TPHA) 用抗原致敏紅細(xì)胞作間接血凝試驗(yàn)是檢測(cè)抗體最簡(jiǎn)易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋體(Nichols株)提取物去致敏經(jīng)醛化處理的綿羊紅細(xì)胞,病人的血清先與非致病性Reiter細(xì)胞。血清若含有抗體則與這些細(xì)胞反應(yīng)形成平鋪孔底的凝集;用非致敏紅細(xì)胞作對(duì)照,以除外非特異性凝集。梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)15 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表劑量劑量1劑量劑量2劑量劑量3劑量劑量4劑量劑量5劑量劑量6劑量劑量7劑量劑量8一期紅霉素四環(huán)素多西環(huán)素青霉素二期紅霉素四環(huán)素多西環(huán)素青霉素16 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果及展望1.通過(guò)對(duì)比紅霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素與青霉素環(huán)境下梅毒螺旋體的存 在數(shù)量得出最有效的藥物。(也許可能發(fā)現(xiàn)其中某種藥物治療梅毒的 效果與青霉素相當(dāng)或者甚至超過(guò)青霉素)2.再觀察這種藥物的不同劑量梯度中哪一個(gè)劑量的藥效最好。3.得出結(jié)論:

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