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文檔簡介
1、組織切片染色技術組織切片染色技術掌握:染色、常規(guī)染色的概念;掌握:染色、常規(guī)染色的概念;HE染色的基本步驟。染色的基本步驟。 熟悉:染色的目的、原理;常用染色熟悉:染色的目的、原理;常用染色術語;染色前后的處理;蘇木素術語;染色前后的處理;蘇木素- -伊伊紅染色液的配制。紅染色液的配制。 了解:染色的注意事項。了解:染色的注意事項。 染色概述三、染色原理三、染色原理使用極少使用極少 n查染色結果是否符合要求,并核對標本種類、號碼、數(shù)量查染色結果是否符合要求,并核對標本種類、號碼、數(shù)量是否無誤。是否無誤。常規(guī)染色蘇木精蘇木精伊伊 紅紅嗜堿性結構:嗜堿性結構:細胞核粗面內質網(wǎng)游離核糖體等嗜酸性結構
2、:嗜酸性結構:細胞質基質溶酶體、線粒體等細胞器膠原纖維等常規(guī)脫蠟常規(guī)脫蠟蘇木素染色(蘇木素染色(5-15min),水洗),水洗鹽酸乙醇溶液分化(鹽酸乙醇溶液分化(30s),水),水洗洗伊紅染色(伊紅染色(1-3min),水洗),水洗氨水反藍(氨水反藍(30s),水洗),水洗90%乙醇(乙醇(5min)80%乙醇(乙醇(30s)100%乙醇(乙醇(2次次10min)二甲苯(二甲苯(3次次5min)封片封片染色脫水透明封片脫蠟 染色的時間,應根據(jù)室溫,及組織的具體情況來確定,染色的時間,應根據(jù)室溫,及組織的具體情況來確定,做之前做預實驗。做之前做預實驗。 在染色后,重新進入酒精和二甲苯,最后用在染
3、色后,重新進入酒精和二甲苯,最后用中性樹膠中性樹膠封片封片,以便長期保存。,以便長期保存。* * 切片切片: : 固定固定梯度酒精上行梯度酒精上行二甲苯二甲苯石蠟。石蠟。* * 染色染色: : 石蠟石蠟二甲苯二甲苯梯度酒精下行梯度酒精下行水。水。* * 保存保存: : 水水梯度酒精梯度酒精二甲苯二甲苯中性樹膠。中性樹膠。* 蘇木素是蘇木素是堿性堿性染料,染料,藍紫色藍紫色,可以使細胞核等著色。被蘇木,可以使細胞核等著色。被蘇木素著色的結構本身為素著色的結構本身為酸性酸性,具有,具有嗜堿性嗜堿性。* 伊紅是伊紅是酸性染料酸性染料,粉紅色粉紅色。可以將大多數(shù)細胞的細胞質染成??梢詫⒋蠖鄶?shù)細胞的細胞質染成紅色。紅色。被伊紅著色的結構本身為被伊紅著色的結構本身為堿性堿性,具有,具有嗜酸性嗜酸性。* 不易被蘇木素和伊
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