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文檔簡介
1、1234血球計數(shù)板的使用方法步驟血球計數(shù)板的使用方法步驟1鏡檢計數(shù)室。在加樣前,先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。鏡檢計數(shù)室。在加樣前,先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物,則需清洗,吹干后才能進行計數(shù);若有污物,則需清洗,吹干后才能進行計數(shù);2加樣品。將清潔干燥的血球計數(shù)板的加樣品。將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片,用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液,蓋玻片,用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液,滴于蓋玻片邊緣,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入,一次性讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入,一次性充滿計數(shù)室充滿計數(shù)室,防止產生氣泡,防止產生氣泡,多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去;多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去
2、;3計數(shù)。稍待片刻(約計數(shù)。稍待片刻(約5min),待酵母菌細胞全部沉降到),待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部后,將計數(shù)板放在載物臺的中央,先在計數(shù)室底部后,將計數(shù)板放在載物臺的中央,先在低倍鏡下低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后,再轉換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄找到計數(shù)室所在位置后,再轉換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。51每天每天同一時間同一時間,各組取出本組的試管,用血球計數(shù)板計,各組取出本組的試管,用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù),并作記錄,數(shù)酵母菌個數(shù),并作記錄,連續(xù)觀察連續(xù)觀察7天天。2從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前,要將試管輕輕從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前,要將試管輕輕震蕩震蕩幾下,這樣使酵母菌分布均
3、勻,求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)幾下,這樣使酵母菌分布均勻,求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。量誤差小。3如果一個小方格內酵母菌過多,難以數(shù)清,應當對培養(yǎng)如果一個小方格內酵母菌過多,難以數(shù)清,應當對培養(yǎng)液進行液進行稀釋稀釋。具體方法是:搖勻試管,取。具體方法是:搖勻試管,取1ml酵母菌培養(yǎng)液,酵母菌培養(yǎng)液,加入成倍的無菌水稀釋,稀釋加入成倍的無菌水稀釋,稀釋n倍后,再用血球計數(shù)板計數(shù),倍后,再用血球計數(shù)板計數(shù),所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內含有所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內含有45個酵母細胞個酵母細胞為宜。為宜。4活酵母有芽殖現(xiàn)象,若芽體達到母細胞大小的一半時,活酵母有芽殖現(xiàn)象,若芽體達到
4、母細胞大小的一半時,即可作為兩個菌體計數(shù),若芽體小于母細胞一半時為即可作為兩個菌體計數(shù),若芽體小于母細胞一半時為1個酵個酵母細胞。母細胞。65對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數(shù)同側相鄰兩邊上對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數(shù)同側相鄰兩邊上的菌體數(shù),一般可采取的菌體數(shù),一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線,數(shù)左線不數(shù)右數(shù)上線不數(shù)下線,數(shù)左線不數(shù)右線線”的原則處理,另兩邊不計數(shù)。的原則處理,另兩邊不計數(shù)。6計數(shù)一個樣品要從計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的平均數(shù)值兩個計數(shù)室中計得的平均數(shù)值來計算,來計算,對每個樣品可計數(shù)三次,再取其平均值。對每個樣品可計數(shù)三次,再取其平均值。7血球計數(shù)板的清潔血球計數(shù)板的清
5、潔血球計數(shù)板使用后,用血球計數(shù)板使用后,用自來水沖洗自來水沖洗,切勿用硬物洗刷,洗,切勿用硬物洗刷,洗后后自行晾干自行晾干或用吹風機或用吹風機吹干吹干,或用,或用95%的乙醇、無水乙醇、的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內是丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復清洗直否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復清洗直到干凈為止。到干凈為止。7例例1、通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數(shù),若、通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數(shù),若計數(shù)室為計數(shù)室為1mm1mm0.1mm方格,由方格,由400個小方格組個
6、小方格組成,如果一個小方格內酵母菌過多,難以計數(shù),應先成,如果一個小方格內酵母菌過多,難以計數(shù),應先 后再計數(shù)。若多次重復計數(shù)后,算得每個小方格中平均有后再計數(shù)。若多次重復計數(shù)后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則個酵母菌,則10ml該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個。個。(參考答案:稀釋;(參考答案:稀釋;2108)540010000102108 。8例例2、 檢測員將檢測員將1 ml水樣稀釋水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管檢測每毫升藍藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)
7、室,并用濾紙吸去多余吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由液體。已知每個計數(shù)室由2516400個小格組成,容納個小格組成,容納液體的總體積為液體的總體積為01 mm3。現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格個中格80個個小格內共有藍藻小格內共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻個,則上述水樣中約有藍藻 個個ml。 (參考答案:(參考答案:5n105 )9解析三:從例解析三:從例4來看,是按照血球計數(shù)板的原理進來看,是按照血球計數(shù)板的原理進行設計試題的,還添加了相應的圖示,題意一目行設計試題的,還添加了相應的圖示,題意一目了然。按照前面所述的公式,不難得出正確答案:了然。按照前面所述的公式,不難得出正確答案:酵母細胞個數(shù)酵母細胞個數(shù)1ml80個小方格細胞總數(shù)個小方格細胞總數(shù)/ 80 40010000稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)n/8040010000105n105 。10例例3、(、(2008江蘇高考江蘇高考31)(4)在整個實驗過程中,直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培)在整個實驗過程中,直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數(shù)的做法是錯誤的,正確的方法是養(yǎng)原液計數(shù)的做法是錯誤的,正確的方法是 和和 。(5)實驗結束后,用試管刷蘸洗滌劑擦
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