其他革蘭陰性桿菌的常規(guī)檢驗(yàn)

1、其他革蘭陰性桿菌的常規(guī)檢驗(yàn)其他革蘭陰性桿菌的常規(guī)檢驗(yàn) 嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬 嗜肺軍團(tuán)菌屬嗜肺軍團(tuán)菌屬 布魯菌布魯菌 百日咳鮑特菌百日咳鮑特菌 彎曲菌彎曲菌 幽門(mén)螺桿菌幽門(mén)螺桿菌流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌 g-小桿菌，多形性小桿菌，多形性 有毒菌株形成莢膜有毒菌株形成莢膜 培養(yǎng)基中需加入血液，以提供培養(yǎng)基中需加入血液，以提供x因子因子和和v因子因子（巧克力色培養(yǎng)基巧克力色培養(yǎng)基） x因子血紅素因子血紅素 v因子輔酶因子輔酶或輔酶或輔酶 菌落光滑、無(wú)色透明、露滴狀菌落光滑、無(wú)色透明、露滴狀 co2培養(yǎng)培養(yǎng) “衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象”衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象 流感嗜血桿菌與金流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在黃色葡萄球

2、菌在血血平板平板上共同孵育時(shí)，上共同孵育時(shí)，由于后者能合成較由于后者能合成較多的多的v因子因子，在金黃，在金黃色葡萄球菌菌落周色葡萄球菌菌落周?chē)L(zhǎng)的流感嗜血圍生長(zhǎng)的流感嗜血桿菌的菌落較大，桿菌的菌落較大，離金黃色葡萄球菌離金黃色葡萄球菌菌落越遠(yuǎn)的越小。菌落越遠(yuǎn)的越小。 根據(jù)莢膜抗原分根據(jù)莢膜抗原分abcdef六型，六型，b型型毒力最強(qiáng)毒力最強(qiáng) 可產(chǎn)生自溶酶可產(chǎn)生自溶酶 致病物質(zhì)：莢膜、菌毛、內(nèi)毒素、致病物質(zhì)：莢膜、菌毛、內(nèi)毒素、 igaiga蛋蛋白酶白酶 所致疾病所致疾病 原發(fā)感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見(jiàn)于原發(fā)感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見(jiàn)于兒童兒童 繼發(fā)感染：鼻竇炎等，多見(jiàn)于成人繼發(fā)感染：鼻

3、竇炎等，多見(jiàn)于成人微生物學(xué)檢查微生物學(xué)檢查 標(biāo)本標(biāo)本（腦脊液、痰、血液、膿液）（腦脊液、痰、血液、膿液）涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告g-性桿菌性桿菌多形性多形性“衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象”檢出流感嗜血桿菌鑒定依據(jù)鑒定依據(jù) 革蘭陰性小桿菌、多形性革蘭陰性小桿菌、多形性 培養(yǎng)采用巧克力色培養(yǎng)基，培養(yǎng)采用巧克力色培養(yǎng)基，co2培養(yǎng)培養(yǎng) 血平板上有血平板上有“衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象” x、v因子需求試驗(yàn)因子需求試驗(yàn)軍團(tuán)菌軍團(tuán)菌 是引起軍團(tuán)菌病的病原體是引起軍團(tuán)菌病的病原體 首發(fā)于首發(fā)于1976年的美國(guó)一次軍人聚會(huì)，故年的美國(guó)一次軍人聚會(huì)，故稱(chēng)作軍團(tuán)病稱(chēng)作軍團(tuán)病 1982年

4、年,在我國(guó)南京首次證實(shí)了軍團(tuán)菌病。在我國(guó)南京首次證實(shí)了軍團(tuán)菌病。 形態(tài)染色形態(tài)染色 革蘭陰性，但不易被著色革蘭陰性，但不易被著色 桿菌，形態(tài)有多形性桿菌，形態(tài)有多形性 gimenen染色，菌體呈紅色，背景為綠染色，菌體呈紅色，背景為綠色色 不形成芽孢，無(wú)莢膜不形成芽孢，無(wú)莢膜 ， 有端生或側(cè)生鞭毛有端生或側(cè)生鞭毛培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 營(yíng)養(yǎng)要求高營(yíng)養(yǎng)要求高 專(zhuān)性需氧專(zhuān)性需氧 需需2.55co2 生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢 常用培養(yǎng)基及菌落特征常用培養(yǎng)基及菌落特征 bcye培養(yǎng)基：灰白色、圓形光滑濕潤(rùn)菌落培養(yǎng)基：灰白色、圓形光滑濕潤(rùn)菌落 f-g培養(yǎng)基：針尖大小、黃色熒光培養(yǎng)基：針尖大小、黃色熒光軍團(tuán)菌菌落形態(tài)軍

5、團(tuán)菌菌落形態(tài)(cye瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基)抗原結(jié)構(gòu)抗原結(jié)構(gòu) 抗原：具有型特異性抗原：具有型特異性 軍團(tuán)菌病約軍團(tuán)菌病約90%的是由嗜肺軍團(tuán)菌所致的是由嗜肺軍團(tuán)菌所致,已發(fā)現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)15個(gè)血清型個(gè)血清型 ，其中以，其中以lp1血清型血清型最常見(jiàn)最常見(jiàn), lp6次之。次之。抵抗力抵抗力 分布廣泛、抵抗力強(qiáng)分布廣泛、抵抗力強(qiáng) 水中存活時(shí)間長(zhǎng)水中存活時(shí)間長(zhǎng) 軍團(tuán)菌病的主要污染源是供水系統(tǒng)及冷軍團(tuán)菌病的主要污染源是供水系統(tǒng)及冷卻塔和空調(diào)系統(tǒng)卻塔和空調(diào)系統(tǒng) 定期清洗空調(diào)定期清洗空調(diào) 預(yù)防軍團(tuán)菌病預(yù)防軍團(tuán)菌病臨床意義臨床意義 致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、侵襲性酶致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、侵襲性酶 傳染途徑：呼吸

6、道（吸入含有軍團(tuán)菌的傳染途徑：呼吸道（吸入含有軍團(tuán)菌的氣溶膠）氣溶膠） 所致疾?。很妶F(tuán)菌病所致疾病：軍團(tuán)菌病 肺炎型肺炎型 非肺炎型（類(lèi)似感冒）非肺炎型（類(lèi)似感冒） 免疫性：感染者血清中出現(xiàn)特異性免疫性：感染者血清中出現(xiàn)特異性igg、 igm抗體抗體微生物學(xué)檢查微生物學(xué)檢查 標(biāo)本標(biāo)本（痰、支氣管分泌物、血液、）（痰、支氣管分泌物、血液、） 涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢 （giemsa染色染色） 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)（beye瓊脂）瓊脂）鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告形態(tài)染色形態(tài)染色菌落特征菌落特征氧化酶、觸酶氧化酶、觸酶熒光抗體染色等熒光抗體染色等血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn) 檢測(cè)指標(biāo)：檢測(cè)患者血清中特異性

7、抗體檢測(cè)指標(biāo)：檢測(cè)患者血清中特異性抗體 方法：方法：elisa 意義：意義： 檢測(cè)特異性檢測(cè)特異性igm：診斷軍團(tuán)菌病：診斷軍團(tuán)菌病 檢測(cè)特異性檢測(cè)特異性igg：軍團(tuán)菌病流行病學(xué)調(diào)查：軍團(tuán)菌病流行病學(xué)調(diào)查布魯菌屬布魯菌屬 引起布魯菌?。ú顭幔┮鸩剪斁。ú顭幔?可引起人畜共患病可引起人畜共患病 我國(guó)流行菌種主要是羊、牛、豬布魯菌，我國(guó)流行菌種主要是羊、牛、豬布魯菌，以羊布魯菌最常見(jiàn)以羊布魯菌最常見(jiàn) 屬細(xì)胞被寄生菌屬細(xì)胞被寄生菌形態(tài)染色形態(tài)染色 革蘭陰性球桿菌革蘭陰性球桿菌 光滑型有微莢膜，無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛光滑型有微莢膜，無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛 常用染色法：常用染色法：改良改良ziehl-neelsen染色法：菌體染色法：菌體紅色紅色，背景為藍(lán)色背景為藍(lán)色柯茲洛夫斯基染色法：菌體柯茲洛夫斯基染色法：菌體紅色紅色，背景，背景綠色綠色培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 專(zhuān)性需氧、專(zhuān)性需氧、510co2 營(yíng)養(yǎng)要求高，常用肝浸液培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)要求高，常用肝浸液培養(yǎng)基 生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢 菌落細(xì)小、無(wú)色透明、光滑菌落細(xì)