稻谷玉米脂肪酸值測定操作練習-實操

1、.稻谷、玉米脂肪酸值測定操作練習實驗項目稻谷、玉米脂肪酸值測定時 長: 4h目的要求1. 熟悉和掌握脂肪酸值檢驗流程；2. 掌握微量滴定管的使用和滴定終點的判斷。練習重點1. 調節(jié)配制0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液所需95%乙醇至中性；2. 0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液的配制；3. 樣品制備：去雜、粉碎、稱量、提取、過濾；4. 脂肪酸值滴定速度控制；5. 滴定終點的判斷；6. 脂肪酸值檢測結果的的報出。練習難點1. 滴定速度控制； 2. 滴定終點的判斷。 預習要點1. 脂肪酸值測定原理。2. 脂肪酸值測定方法中對錘式旋風磨的要求有哪些？3. 脂肪酸值測定用樣品粉碎

2、粒度要求？4. 如何配制脂肪酸值測定所用0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇溶液？5. 如何將稀釋氫氧化鉀標準溶液用的95%乙醇溶液調節(jié)至中性？6. 影響脂肪酸值測定因素有哪些？7. 脂肪酸值滴定應在什么條件下進行？8. 脂肪酸值滴定速度應如何控制？9. 如何判斷脂肪酸值滴定終點？10. 應怎樣報出脂肪酸值檢測結果？實驗原理在一定溫度（1525）條件下，以無水乙醇提取谷物及制品中的游離脂肪酸，用氫氧化鉀標準溶液滴定，游離脂肪酸與氫氧化鉀發(fā)生中和反應，以中和100 g試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數表示。谷物脂肪酸值測定的實質是酸堿滴定。但由于谷物成分比較復雜，溶于乙醇的組分比較多，用乙醇提取游

3、離脂肪酸的同時，還有其他醇溶性物質，如：醇溶蛋白、色素、植酸等也被提取出來，而且提取的游離脂肪酸不是單一的脂肪酸，因此，提取液組分非常復雜，酸堿滴定也就與通常的強堿滴定單一的弱酸有所不同，是強堿滴定混合弱酸。試 劑與儀器無水乙醇：A.R；1%酚酞-乙醇溶液：1.0g酚酞溶于100 mL 95（V/V）乙醇；不含二氧化碳的蒸餾水：將蒸餾水煮沸10min，加蓋冷卻；0.5mol/L氫氧化鉀標準儲備液；0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇標準滴定溶液。 錘式旋風磨：具有風門可調和自清理功能，不易發(fā)熱，粉碎后的樣品一次通過CQ16（40目）篩的達95%以上；往返式振蕩器，振蕩頻率為100次/min ；微量

4、滴定管：5mL，最小刻度為0.02mL；10mL，最小刻度為0.02mL；移液管：50mL，25mL；天平：感量為0.01g； 具塞錐形瓶：250mL；錐形瓶：150mL。實驗步驟10.01mol/L KOH-乙醇標準滴定溶液的配制準確移取20mL已經標定好的0.5mol/L氫氧化鉀標準儲備液，用事先調節(jié)至中性的95（V/V）乙醇稀釋定容至1000mL，盛放于聚乙烯塑料瓶中。臨用前稀釋。（V濃=c稀V稀/c濃）注：需要組織單位提供事先配制并已經標定的0.5mol/L氫氧化鉀標準儲備液。2試樣制備稻谷試樣的制備：從混合均勻的平均樣品中分取100 g左右，去除雜質（保留谷外糙米），得到凈稻谷樣品。

5、用錘式旋風磨粉碎，粉碎后的樣品一次通過CQ16（相當于40目）篩的應達到95%以上。粉碎樣品（篩上、篩下的全部篩分范圍樣品）經充分混合后裝入磨口瓶中備用。 玉米試樣的制備：從混合均勻的平均樣品中分取100 g左右，去除雜質，得到凈玉米樣品。用錘式旋風磨粉碎，粉碎后的樣品一次通過CQ16（相當于40目）篩的應達到95%以上。收集篩上、篩下的全部篩分范圍的粉碎樣品樣品，經充分混合后裝入磨口瓶中備用。3. 試樣處理稱取制備好的試樣約10 g，精確到0.01 g，于250 mL具塞磨口錐形瓶中，并用大肚移液管（或同等精度加液器）加入50.0 mL無水乙醇，置于往返式振蕩器上振蕩提取30 min，（振蕩

6、頻率為100次/min）。靜置1 min 2 min，在玻璃漏斗中放入折疊濾紙過濾。棄去最初幾滴濾液，收集濾液25 mL以上。 注：樣品粉碎后應在2h內進行提取。4. 測定用大肚移液管移取25.0 mL濾液于150 mL錐形瓶中，加50 mL不含二氧化碳的蒸餾水，滴加34滴酚酞指示劑后，用氫氧化鉀標準滴定溶液滴定至呈微紅色，30 s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀標準滴定溶的體積（V1）。注1：滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快，一般控制在（68）mL/min，即每秒（23） 滴，滴定液成串不成線。臨近滴定終點時，要適當放慢滴定速度，注意觀察樣液的顏色變化。注2：有的樣品由于受提取液本身顏色的影

7、響，到達滴定終點時樣液不可見微紅色，當樣液顏色與參照樣液有明顯色差時，即為滴定終點。5. 空白試驗用移液管移取25.0 mL無水乙醇于150 mL錐形瓶中，加50 mL不含二氧化碳的蒸餾水，滴加35滴酚酞指示劑，用氫氧化鉀標準滴定溶液滴定至呈微紅色，30 s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積（V0）。6. 結果計算按公式 計算結果。7. 報出結果每份試樣取兩個平行樣進行測定，兩個測定結果之差的絕對值符合重復性要求時，以其平均值為測定結果；不符合重復性要求時，應再取兩個平行樣進行測定。若4個結果的極差不大于n=4的重復性臨界極差CrR95(4)，則取4個結果的平均值作為最終測試結果；

8、若4個結果的極差大于n=4的重復性臨界極差CrR95(4)，則取4個結果的中位數作為最終測試結果，結果保留三位有效數字。實驗記錄1（稻谷）稻谷脂肪酸值測定記錄樣品名稱編號試樣質量(g)試樣耗標液體積（mL）空白耗標液體積（mL）制備樣水分（%）脂肪酸值（mg/100g）雙試驗差值（mg/100g）四平行極差（mg/100g）脂肪酸值報出結果（mg/100g） 注:制備樣水分按13.0%計。實驗記錄2（玉米）玉米脂肪酸值測定記錄樣品名稱編號試樣質量(g)試樣耗標液體積（mL）空白耗標液體積（mL）制備樣水分（%）脂肪酸值（mg/100g）雙試驗差值（mg/100g）四平行極差（mg/100g）脂

9、肪酸值報出結果（mg/100g） 注:制備樣水分按14.0%計。思考題1. 脂肪酸值測定方法中對錘式旋風磨的要求有哪些？答：要求具有風門可調和自清理功能，不易發(fā)熱，粉碎后的樣品一次通過CQ16（40目）篩的達95%以上。2. 測定脂肪酸值所用的粉碎樣品是通過CQ16（相當于40目）篩的樣品嗎？答：測定脂肪酸值所用的粉碎樣品不僅僅是通過CQ16（相當于40目）篩的篩下物，而是篩上、篩下的全部篩分范圍樣品，也即除了篩下物而外，還應該包括殘留在篩上的樣品。3. 脂肪酸值測定為什么要做空白試驗？答：為了消除試劑的影響，減少系統誤差。4. 脂肪酸值滴定應在什么條件下進行？答：滴定應在散射日光或日光型日光

10、燈下對著光源方向進行，光線不能太強或太暗，陽光不能直射；環(huán)境溫度應控制在1525之間。5. 脂肪酸值滴定速度應如何控制？答：滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快，一般控制在（68）mL/min，即每秒（23） 滴，滴定液成串不成線。臨近滴定終點時，要適當放慢滴定速度，注意觀察樣液的顏色變化。滴定手法應盡量一致，振搖速度一致，滴定操作要熟練，整個滴定過程一氣呵成。6. 如何判斷脂肪酸值滴定終點？答：對提取液顏色很淺的樣品，可將滴定至微紅色出現視為到達滴定終點；但有些樣品由于受提取液本身顏色的影響，到達滴定終點時樣液不可見微紅色，終點難以判定，可用一個已加入提取液和去二氧化碳蒸餾水尚未滴定的錐形瓶作參照，當被滴定樣液顏色與參照樣液有明顯色差時，即可視為已到滴定終點。7. 影響脂肪酸值測定結果準確性的因素有哪些？答：脂肪酸值測定是較低濃度的強堿滴定多種混合弱酸的體系，加之提取液中除了酸性物質以外，還有一些其他的醇溶性物質如色素等也被提取出來，使提取液本身有一定顏色，而顏色及顏色的深淺因糧食種類和品種的不同而有所不同，從而增加了準確測定脂肪酸值的難度。因此，影響脂肪酸值測定結果準確性的因素很多，如：粉碎磨