楊愛平腸道腺病毒檢測及臨床意義

1、2021/3/1312021/3/132 v 腸道病毒腸道病毒 ( (小小RNARNA病毒科病毒科) )v 輪狀病毒輪狀病毒v 腸道腺病毒腸道腺病毒 呼腸病毒科呼腸病毒科v 杯狀病毒杯狀病毒v 星狀病毒星狀病毒2021/3/133v2020世紀(jì)世紀(jì)5050年代初期年代初期, ,一位科學(xué)家對手術(shù)切除的人扁一位科學(xué)家對手術(shù)切除的人扁桃體增殖腺小塊進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時意外發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)的桃體增殖腺小塊進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時意外發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)的腺樣組織內(nèi)潛伏著一種未知的病毒腺樣組織內(nèi)潛伏著一種未知的病毒, ,這種病毒可引這種病毒可引起培養(yǎng)的單層細(xì)胞發(fā)生病變。由于這種病毒被首先起培養(yǎng)的單層細(xì)胞發(fā)生病變。由于這種病毒被首先發(fā)現(xiàn)

2、于腺樣組織中發(fā)現(xiàn)于腺樣組織中, ,19561956年國際病毒命名委員會將年國際病毒命名委員會將這類病毒命名為腺病毒這類病毒命名為腺病毒, ,19621962年正式命名為腺病毒年正式命名為腺病毒科科2021/3/134腺病毒血清型目前,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有100多種類型的腺病毒可以感染人、哺乳動物和禽類,其中能感染人類的腺病毒（人腺病毒）就有50多型,把人腺病毒的41個血清型分為A-F 6個組:A-E組:各型病毒均能在人的組織細(xì)胞 (如腎細(xì)胞) 常規(guī)培養(yǎng)中增殖,稱為普通腺病毒;F組（40和41型）:是從糞便中發(fā)現(xiàn),用常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)不能增殖的腺病毒,僅在選擇性細(xì)胞上生長,稱為腸道腺病毒。 2021/3/135

3、流行性腺病毒胃腸炎廣泛分布于世界各地,在小兒,發(fā)病情況僅次于輪狀病毒性腸炎。最小發(fā)病年齡為1月,絕大多數(shù)發(fā)生于3歲以下的嬰幼兒。Ad-40主要感染1歲左右嬰兒,Ad-41則感染稍大的幼兒,全年均可發(fā)病,但腺病毒性胃腸炎一般呈散發(fā)性。2021/3/136v腸道腺病毒通過消化道傳播,主要原因是因為樹突狀細(xì)胞缺乏腺病毒受體,不能感染附近淋巴結(jié)。 流行性2021/3/137v腺病毒胃腸炎的潛伏期約10天,主要表現(xiàn)為腹瀉,量少或多,呈水樣便或稀便,少數(shù)可排出粘液,病程4-8天,常伴嘔吐。部分患者有呼吸道癥狀,少數(shù)患者發(fā)熱,病程多自限,排毒時間約1周。某些患者失水較嚴(yán)重,個別重度失水者可死亡。 流行性20

4、21/3/138v各型腺病毒所致腹瀉持續(xù)時間不等,以腸腺病毒胃腸炎腹瀉時間最長,大多患者有嘔吐,持續(xù)1-2天,少數(shù)有發(fā)熱。非腸型腺病毒腹瀉患者發(fā)熱較多。約20腺病毒腸炎患者有呼吸道癥狀。 流行性2021/3/1392021/3/1310 2021/3/1311培養(yǎng)特性:人類腺病毒無敏感動物,也不能在雞胚中生長。但能在來源于人的多種細(xì)胞培養(yǎng)中增殖,引起明顯CPE:細(xì)胞腫脹變圓、集聚成葡萄串狀,并可在感染的細(xì)胞核內(nèi)形成嗜堿性包涵體。 生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀2021/3/1312v腺病毒外膜無類脂質(zhì)包膜,故能耐乙醚和氯仿等脂溶劑;并能耐受蛋白酶及膽汁的作用。但不耐熱在室溫中可存活10d以上,5630m

5、in滅活。生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀2021/3/1313v突出小結(jié)和六鄰體都必須插入細(xì)胞表面的受體分子,病毒才能被細(xì)胞攝入,被內(nèi)體包裹。v在內(nèi)體的酸性環(huán)境中降解,進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),將DNA釋放到細(xì)胞核內(nèi)。v腺病毒利用自身的DNA聚合酶進(jìn)行復(fù)制,先對一條親代鏈進(jìn)行互補(bǔ)復(fù)制,取代第二條親代鏈,然后DNA聚合酶再對第二條親代鏈進(jìn)行復(fù)制,因此,病毒 DNA的兩條鏈都是連續(xù)的。2021/3/13142021/3/1315v因為腺病毒復(fù)制緩慢,感染細(xì)胞容易受到宿主防御系統(tǒng)的攻擊,因此腺病毒有1/4的基因組用來對付宿主的防御系統(tǒng)。 v通過釋放兩種E1B蛋白來抑制細(xì)胞的凋亡,使受感染的細(xì)胞能支持到病毒完成復(fù)制。致病性和

6、免疫性致病性和免疫性2021/3/1316v感染后期病毒復(fù)制組裝完成時,腺病毒產(chǎn)生病毒死亡蛋白給細(xì)胞致命一擊徹底釋放病毒。v腺病毒制造VARNA來免遭干擾素的破壞,通過結(jié)合PKR,使之失活,使病毒蛋白質(zhì)合成。2021/3/1317v阻止MHC-I類分子在病毒感染細(xì)胞上表達(dá)以阻止CTL的攻擊。v腺病毒合成RID蛋白結(jié)合病毒感染細(xì)胞的死亡受體以逃避天然殺傷細(xì)胞的攻擊。v病毒利用自身的聚合酶進(jìn)行基因組復(fù)制,增加了抗原漂移的機(jī)會。2021/3/1318v腺病毒對腺病毒對呼吸道呼吸道、胃腸道、胃腸道、尿道尿道和和膀胱膀胱、眼、眼、肝臟肝臟等均可感染等均可感染, ,人腺病毒約人腺病毒約1/31/3的的已知

7、血清型通常與人類疾病相關(guān)已知血清型通常與人類疾病相關(guān), ,但一但一種血清型可引起不同的臨床疾患種血清型可引起不同的臨床疾患; ;相反相反, ,不同血清型也可引起同一種疾患。不同血清型也可引起同一種疾患。2021/3/1319v呼吸道感染的典型癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎呼吸道感染的典型癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎, ,同時伴有同時伴有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛和肌肉發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛和肌肉 痛等痛等, ,包括以下包括以下4 4種不同的綜種不同的綜合征合征: :v1 1急性發(fā)熱性咽喉炎由急性發(fā)熱性咽喉炎由C C組病毒引起組病毒引起, ,出現(xiàn)咳嗽出現(xiàn)咳嗽, ,鼻塞、鼻塞、發(fā)熱和咽喉部潰瘍等癥狀發(fā)熱和咽喉部潰瘍等癥狀, ,

8、這些表現(xiàn)難以與其他病毒引這些表現(xiàn)難以與其他病毒引起的輕型呼吸道感染鑒別起的輕型呼吸道感染鑒別v2 2咽結(jié)膜熱多由咽結(jié)膜熱多由B B組腺病毒組腺病毒3 3和和7 7型所致型所致, ,愈后尚好愈后尚好, ,一一般無后遺癥。般無后遺癥。 v3 3急性呼吸道疾病急性呼吸道疾病 多由腺病毒多由腺病毒4 4、7 7型引起型引起, ,也可見于也可見于3 3型型v4 4、肺炎、肺炎 腺病毒肺炎約占兒童期肺炎的腺病毒肺炎約占兒童期肺炎的10%10%, ,多由腺病多由腺病毒毒3 3、7 7型引起型引起; ;在青年人腺病毒肺炎的病死率為在青年人腺病毒肺炎的病死率為8%8%10%10%2021/3/1320v腺病毒致

9、輕型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎腺病毒致輕型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎的并發(fā)癥。濾泡性結(jié)膜炎可由許多型腺病毒引起的并發(fā)癥。濾泡性結(jié)膜炎可由許多型腺病毒引起, ,類似于衣原體性結(jié)膜炎類似于衣原體性結(jié)膜炎, ,而且為自限性。由腺病毒而且為自限性。由腺病毒8 8、1919和和3737型引起的角結(jié)膜炎為重型感染型引起的角結(jié)膜炎為重型感染, ,具高傳染性具高傳染性, ,以急性結(jié)膜炎開始以急性結(jié)膜炎開始, ,擴(kuò)至耳前淋巴結(jié)擴(kuò)至耳前淋巴結(jié), ,隨后發(fā)生角膜隨后發(fā)生角膜炎。炎。 v胃腸炎胃腸炎v許多腺病毒在腸道細(xì)胞中復(fù)制許多腺病毒在腸道細(xì)胞中復(fù)制, ,隨糞便排出隨糞便排出, ,但但大多血清型與胃腸道疾病無關(guān)

10、。而大多血清型與胃腸道疾病無關(guān)。而4040型和型和4141型腺病型腺病毒可引起嬰幼兒與年少（毒可引起嬰幼兒與年少（4 4歲以下）兒童的胃腸炎歲以下）兒童的胃腸炎, ,致腹痛、腹瀉。致腹痛、腹瀉。C C組腺病毒能引起某些嬰幼兒腸套組腺病毒能引起某些嬰幼兒腸套疊。疊。 2021/3/1321v腺病毒腺病毒1111、1212型能引起兒童急性出血性膀胱炎型能引起兒童急性出血性膀胱炎, ,尿中出尿中出現(xiàn)病毒?，F(xiàn)病毒。3737型可引起女性宮頸炎和男性尿道炎型可引起女性宮頸炎和男性尿道炎, ,常由性常由性傳播感染。在免疫功能低下者可引起偶發(fā)或嚴(yán)重的病傳播感染。在免疫功能低下者可引起偶發(fā)或嚴(yán)重的病毒感染毒感染

11、, ,尤其在器官移植病人中發(fā)生嚴(yán)重呼吸道感染和尤其在器官移植病人中發(fā)生嚴(yán)重呼吸道感染和病毒性肝炎病毒性肝炎, ,多由多由1 1、5 5和和7 7型腺病毒引起。艾滋病患者型腺病毒引起。艾滋病患者可感染多種血清型腺病毒可感染多種血清型腺病毒, ,并能出現(xiàn)抗原性介于中間的并能出現(xiàn)抗原性介于中間的雜合型毒株雜合型毒株, ,而且常為致死性腺病毒感染。主要原因是而且常為致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的腺病毒的E1AE1A蛋白可反式激活蛋白可反式激活HIVHIV的轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄, ,加速加速HIVHIV的復(fù)的復(fù)制。臨床發(fā)現(xiàn)制。臨床發(fā)現(xiàn)37%37%的艾滋病患者病毒性腹瀉是由腺病毒的艾滋病患者病毒性腹瀉是由腺病

12、毒所致。所致。 2021/3/1322免疫性免疫性腺病毒感染后,產(chǎn)生特異性抗體,對同型病毒的感染有保護(hù)作用,免疫力持久。 致病性和免疫性致病性和免疫性2021/3/13232021/3/1324v病原分離培養(yǎng)后, 應(yīng)用亞屬特異的免疫熒光測定法、放射免疫測定、ELISA、DNA雜交等進(jìn)行腺病毒亞屬的鑒定。再應(yīng)用型特異性血清進(jìn)行中和試驗。v缺點:不僅費時費力, 結(jié)果也不夠理想2021/3/1325 病毒分離病毒分離:標(biāo)本（患者咽喉、眼分泌物、糞便等） 敏感細(xì)胞 CPE 分離株為抗原,用抗病毒診斷血清作CF試驗,確定是否為腺病毒;用已知腺病毒型特異性免疫血清做NT試驗可定型。 亦可用直接或間接免疫熒

13、光方法,檢測臨床診斷疑為腺病毒肺炎的嬰幼兒鼻咽部脫落細(xì)胞中的腺病毒抗原。微生物學(xué)檢查法微生物學(xué)檢查法 2021/3/1326 采取患者早期和恢復(fù)期雙份血清做CF試驗、HI試驗及NT試驗?；謴?fù)期血清抗體滴度比早期增長4倍以上有診斷意義。其中CF試驗最為常用。微生物學(xué)檢查法微生物學(xué)檢查法 2021/3/1327ELISAELISA方法方法 檢測ADV抗原、抗體操作簡單、快速、特異性強(qiáng),有助于臨床對疾病的早期明確診斷,結(jié)果判定用簡單的分光光度計,客觀準(zhǔn)確,3 4h即可出結(jié)果,可大批檢測,陽性率遠(yuǎn)優(yōu)于病毒分離,亦優(yōu)于血清學(xué)技術(shù),適用于流行病學(xué)調(diào)查。IgM產(chǎn)生早于IgG,有利于早期診斷,IgG產(chǎn)生稍晚,

14、雖不能早期診斷,但相當(dāng)一部分在7一14天內(nèi)檢測單份血IgG陽性再結(jié)合臨床也可診斷。2021/3/1328胸部胸部X X線及線及CTCT影像表現(xiàn)影像表現(xiàn) 肺內(nèi)表現(xiàn)以多肺葉受累的肺實變?yōu)橹饕卣?其中團(tuán)簇狀影尤為突出,此類團(tuán)簇狀影有較明顯的特征性,常密度較高、邊緣模糊、強(qiáng)化均勻。肺外表現(xiàn)以胸膜增厚和少量胸腔積液為主,少數(shù)患者出現(xiàn)縱隔氣腫或氣胸。小氣道改變多見。2021/3/1329vAlland 和 Saitoh-Inagawa 在六鄰體基因的- 管狀物形成 P1區(qū)設(shè)計了一對引物,應(yīng)用 PCR 結(jié)合 RFLP, 即將腺病毒的特定序列用 PCR 擴(kuò)增后, 其產(chǎn)物再用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切圖譜分析v優(yōu)點

15、:法分辨率高、重復(fù)性好、簡單快速2021/3/1330v腺病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）陽性率3.7% （12/322）平均年齡:8月齡,最大15月齡,最小4月齡。北京萬泰vPCR-熒光探針（EV71、腸道病毒通用引物、柯薩奇病毒）陽性率12.5%（1/8） 湖南 圣湘2021/3/13312021/3/1332v腺病毒感染主要在冬春季流行腺病毒感染主要在冬春季流行, ,通過呼吸道和通過呼吸道和接觸傳播接觸傳播, ,其預(yù)防措施和預(yù)防其他呼吸道傳染其預(yù)防措施和預(yù)防其他呼吸道傳染病相似病相似, ,主要是勤洗手主要是勤洗手, ,勤消毒勤消毒, ,避免接觸患者避免接觸患者及其呼吸道飛沫及其呼吸道飛沫; ;平常多飲水平常多飲水, ,多吃蔬菜和水多吃蔬菜和水果果, ,注意鍛煉