法醫(yī)物證學紅細胞血型[資料課件

1、紅細胞血型紅細胞血型第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 應用 : 1.法醫(yī)學個體識別和親子鑒定 2.臨床輸血，器官移植及人類學 研究特征： 個體特異性 終身不變性1900 Landsteiner A、B、O1902 Decastello、Sturli AB Blood group Antigen in erythrocyte Antibody in serum A A Anti-B B B Anti-A AB A and B O Anti-A and Anti-B人類血型系統(tǒng)一覽人類血型系統(tǒng)一覽 血型系統(tǒng) 發(fā)現(xiàn)年代 血型系統(tǒng) 發(fā)現(xiàn)年代 ABO 1901 MN 1927 P 1927 Rh 1939 Lut

2、heran 1945 Kell 1946 Lewis 1946 Duffy 1950 Kidd 1951 Diego 1955 rt 1956 I 1956 Xg 1962 Donbrock 1965 Colton 1967 UI 1968 EN 1969 Ahonen 1972 OK 1987 LKE 1987一、紅細胞血型的命名一、紅細胞血型的命名（一）（一） 抗原的命名抗原的命名 紅細胞血型抗原根據(jù)化學結(jié)構可分為紅細胞血型抗原根據(jù)化學結(jié)構可分為3類類 類類 型型 型特異性決定簇型特異性決定簇 例例 類似的血型抗原還可存在于某些動物，植物和微生物中類似的血型抗原還可存在于某些動物，植物和微

3、生物中 抗體，屬于血清丙種球蛋白，統(tǒng)稱為免疫球蛋白 IgA、 IgD、 IgE 人類Ig 根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構和抗原特異性的不同，分為五類： 產(chǎn)生機制：產(chǎn)生機制： 天然抗體、免疫抗體天然抗體、免疫抗體 血清學反應特點：血清學反應特點： 寒冷抗體寒冷抗體 、溫暖抗體、溫暖抗體 抗體類型：抗體類型： IgM抗體、抗體、IgG抗體抗體1 天然抗體天然抗體 2 免疫抗體免疫抗體 當紅細胞表面的抗原和抗體結(jié)合后，由于紅細胞被抗體分子交聯(lián)，使細胞凝集成團塊，出現(xiàn)肉眼可見的顆粒。反應過程反應過程 ：。 由離子間相反電荷、氫鍵、疏水鍵等而發(fā)生結(jié)合。 這種結(jié)合是可逆的。 細胞結(jié)構無改變，無肉眼可見的凝集團

4、塊。 抗原抗體特異性結(jié)合影響因素：抗原與抗體濃度和比例，反應介質(zhì)的PH值，離子強度，溫度。 抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗原抗體抗體氫鍵結(jié)合力氫鍵結(jié)合力 O ON NO ON NH HH H靜電引力靜電引力- - -+ + +范得華力范得華力- -+ + +- -+ +- - -+ +疏水作用力疏水作用力排斥的水排斥的水：結(jié)合了抗體的紅細胞形成網(wǎng)狀團塊 出現(xiàn)肉眼可見的凝集團塊。為不可逆反應 紅細胞被致敏后，可以發(fā)生凝集反應， 也可以不發(fā)生凝集反應。 取決于抗體的性質(zhì)、抗原決定簇的多少與部位、以及紅細胞動電位的大小。+ 紅細胞凝集反應示意圖 凝凝 1 天然抗體（完全抗體）天然抗體（完全抗體） IgM

5、 抗人球蛋白抗體抗人球蛋白抗體 2 免疫抗體（不完全抗體）免疫抗體（不完全抗體）IgG （完全）（完全） 12不凝不凝（二）紅細胞凝集反應的促進因素（二）紅細胞凝集反應的促進因素 1 間接抗球蛋白試驗的原理間接抗球蛋白試驗的原理 紅細胞凝集反應示意圖 A致敏致敏未致敏未致敏凝集凝集不凝集不凝集B二抗二抗抗-A抗-A 1900年由Landsteiner發(fā)現(xiàn) ，是第一個被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng) 特點：個體血清中含有與自身紅細胞ABO抗原相對應的“天然”抗體，恒定地存在于正常人的血清中，為“規(guī)則抗體” 利用抗A和抗B血清可以測定未知血液的ABO血型 基基因因型型表表現(xiàn)現(xiàn)型型抗抗體體漢漢族族表表現(xiàn)現(xiàn)型型頻頻率

6、率AA、AOA 型型B 抗抗體體0.3131BB、BOB 型型A 抗抗體體0.2806ABAB 型型無無抗抗體體0.0977OO 型型A 抗抗體體和和B 抗抗體體0.3086一一ABO抗原的結(jié)構抗原的結(jié)構ABO血型抗原有三種類型：血型抗原有三種類型： H物質(zhì)物質(zhì) 由19 號染色體上 FUT1 基因座編碼的 2 - L -巖藻糖轉(zhuǎn)移酶（ 2 FUT1 ）作用于血型前體物質(zhì)而產(chǎn)生的 前體物質(zhì)分布前體物質(zhì)分布 Gal-GlcNAc-Gal-GalNAcABH抗原生成的遺傳途徑抗原生成的遺傳途徑 Gal-GlcNAc-Gal-GalNAc FUC ABH抗原生成的遺傳途徑抗原生成的遺傳途徑 Berns

7、tein三復等位基因?qū)W說三復等位基因?qū)W說 ABO基因座位于人類第基因座位于人類第9號染色體（號染色體（9q34），主要有三），主要有三個等位基因個等位基因A、B和和O A、B對對O為為顯性顯性，O為隱性為隱性 紅細胞 血清中抗體 糖基轉(zhuǎn)移酶基因型 表型AA AO A 抗B 3-N-乙酰-D-氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶BB BO B 抗A 3-D-半乳糖轉(zhuǎn)移酶 AA AB _ 3-N-乙酰-D-氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶 和3-D-半乳糖轉(zhuǎn)移酶 OO O 抗A和抗B _ABO血型的分布血型的分布ABO血型的亞型與變異型血型的亞型與變異型 ABO血型的亞型與變異型血型的亞型與變異型 A亞型B型人血清植物血凝素 抗-

8、A 抗- A1雙花扁豆 A1 A2 ： 中國漢族絕大多數(shù)地區(qū)為BOAAB ABO血型血清學分型方法血型血清學分型方法 正定型試驗反定型試驗 型別判定 抗A 抗B A-RBC B-RBC O A B AB 血型前體物質(zhì)血型前體物質(zhì) H基因作用基因作用H抗原抗原A基因基因 B基因作用基因作用 A抗原抗原B抗原抗原H抗原抗原O基因基因 紅細胞上和唾液中形成紅細胞上和唾液中形成ABHABH物質(zhì)的前體物質(zhì)不同：物質(zhì)的前體物質(zhì)不同：所形成的所形成的ABHABH血型物質(zhì)不同：血型物質(zhì)不同： （二）（二） 表表 型型FUT1基因座基因座 FUT2基因座基因座 分泌型個體體液中的分泌型個體體液中的H H抗原也會

9、被抗原也會被ABOABO血型的糖基轉(zhuǎn)移血型的糖基轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)化為酶轉(zhuǎn)化為ABOABO抗原：抗原：矛盾分泌型：矛盾分泌型： 僅用抗僅用抗-A-A、抗、抗-B-B抗體檢測容易將抗體檢測容易將OhOh型誤判為型誤判為O O型，應加型，應加抗抗-H-H抗體進行檢測?？贵w進行檢測。凝集反應凝集反應 中和試驗中和試驗（凝集抑制試驗haemagglutination inhibition test, HAI）以唾液檢查為依據(jù)以唾液檢查為依據(jù)？HAI原理原理？ 抗抗 - A已知已知A型型RBC+抗抗-AA抗原抗原 人類19號染色體上存在著三個連鎖基因座： FUT1（H）、FUT2（SE）、 FUT3（LE）FUT3FUT3（LELE）基因座上有一對等位基因：）基因座上有一對等位基因：LeLe和和le le。 Le基因編碼-4-L巖藻糖轉(zhuǎn)移酶。 le基因為單堿基錯義突變，編碼的無酶活性蛋白。LewisLewis抗原合成與抗原合成與FUT2FUT2基因座基因座Se Se 和和se se有關有關 Le與Se同時存在，產(chǎn)生Leb抗原； Le與se同時存在，產(chǎn)生Lea抗原； lele純合子無Lewis抗原合成。具有明顯的種族差異紅細胞與抗血清的凝集反應用Lea抗體、 Leb抗體分別檢測Lea 、Leb抗原 抗原性質(zhì) 用用4 種抗血清判定種抗血清判定MNSs型型