藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則[業(yè)界材料]

1、附件5藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則一、概述非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究是通過(guò)體外和動(dòng)物體內(nèi)的研究方法，揭示藥物在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，獲得藥物的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，闡明藥物的吸收、分布、代謝和排泄（Absorption, Distribution, Metabolism, Excretion, 簡(jiǎn)稱(chēng)ADME）的過(guò)程和特征。非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究在新藥研究開(kāi)發(fā)的評(píng)價(jià)過(guò)程中起著重要作用。在藥物制劑學(xué)研究中，非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果是評(píng)價(jià)藥物制劑特性和質(zhì)量的重要依據(jù)。在藥效學(xué)和毒理學(xué)評(píng)價(jià)中，藥代動(dòng)力學(xué)特征可進(jìn)一步深入闡明藥物作用機(jī)制，同時(shí)也是藥效和毒理研究動(dòng)物選擇的依據(jù)之一；藥物或活性代謝產(chǎn)物濃度數(shù)據(jù)及

2、其相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)是產(chǎn)生、決定或闡明藥效或毒性大小的基礎(chǔ)，可提供藥物對(duì)靶器官效應(yīng)（藥效或毒性）的依據(jù)。在臨床試驗(yàn)中，非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果能為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床試驗(yàn)給藥方案提供有關(guān)參考信息。 本指導(dǎo)原則是供中藥、天然藥物和化學(xué)藥物新藥的非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究的參考。研究者可根據(jù)不同藥物的特點(diǎn)，參考本指導(dǎo)原則，科學(xué)合理地進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。本指導(dǎo)原則的主要內(nèi)容包括進(jìn)行藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究的基本原則、試驗(yàn)設(shè)計(jì)的總體要求、生物樣品的測(cè)定方法、研究項(xiàng)目（血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)、吸收、分布、排泄、血漿蛋白結(jié)合、生物轉(zhuǎn)化、對(duì)藥物代謝酶活性及轉(zhuǎn)運(yùn)體的影響）、數(shù)據(jù)處理與分析、結(jié)果與評(píng)價(jià)等，并

3、對(duì)研究中其他一些需要關(guān)注的問(wèn)題進(jìn)行了分析。附錄中描述了生物樣品分析和放射性同位素標(biāo)記技術(shù)的相關(guān)方法和要求，供研究者參考。二、基本原則進(jìn)行非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究，要遵循以下基本原則：（一）試驗(yàn)?zāi)康拿鞔_；（二）試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理；（三）分析方法可靠；（四）所得參數(shù)全面，滿(mǎn)足評(píng)價(jià)要求；（五）對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析與評(píng)價(jià)；（六）具體問(wèn)題具體分析。三、試驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）總體要求1. 受試物中藥、天然藥物：受試物應(yīng)采用能充分代表臨床試驗(yàn)擬用樣品和/或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品。應(yīng)采用工藝路線(xiàn)及關(guān)鍵工藝參數(shù)確定后的工藝制備，一般應(yīng)為中試或中試以上規(guī)模的樣品，否則應(yīng)有充分的理由。應(yīng)注明受試物的名稱(chēng)、來(lái)源、批號(hào)、含量（或規(guī)

4、格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。由于中藥的特殊性，建議現(xiàn)用現(xiàn)配，否則應(yīng)提供數(shù)據(jù)支持配制后受試物的質(zhì)量穩(wěn)定性及均勻性。當(dāng)給藥時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，應(yīng)考察配制后體積是否存在隨放置時(shí)間延長(zhǎng)而膨脹造成終濃度不準(zhǔn)的因素。如果由于給藥容量或給藥方法限制，可采用原料藥進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)中所用溶媒和/或輔料應(yīng)標(biāo)明名稱(chēng)、標(biāo)準(zhǔn)、批號(hào)、有效期、規(guī)格及生產(chǎn)單位?；瘜W(xué)藥物：受試物應(yīng)采用工藝相對(duì)穩(wěn)定、純度和雜質(zhì)含量能反映臨床試驗(yàn)擬用樣品和/或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品。受試物應(yīng)注明名稱(chēng)、來(lái)源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。試驗(yàn)中所用溶媒和/或輔料應(yīng)標(biāo)明名稱(chēng)、標(biāo)準(zhǔn)、批號(hào)、

5、有效期、規(guī)格和生產(chǎn)單位等，并符合試驗(yàn)要求。在藥物研發(fā)的過(guò)程中，若受試物的工藝發(fā)生可能影響其安全性的變化，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的安全性研究?；瘜W(xué)藥物試驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)進(jìn)行受試物樣品分析，并提供樣品分析報(bào)告。成分基本清楚的中藥、天然藥物也應(yīng)進(jìn)行受試物樣品分析。2. 試驗(yàn)動(dòng)物 一般采用成年和健康的動(dòng)物。常用動(dòng)物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型豬和猴等。動(dòng)物選擇的一般原則如下:2.1 首選動(dòng)物：在考慮與人體藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)相關(guān)性的前提下，盡可能選擇與毒理學(xué)和藥效學(xué)研究相同的動(dòng)物。2.2 盡量在動(dòng)物清醒狀態(tài)下進(jìn)行試驗(yàn)，最好從同一動(dòng)物多次采樣獲取藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。2.3 創(chuàng)新性藥物應(yīng)選用兩種或兩種以上的動(dòng)物，其中一種為嚙齒類(lèi)

6、動(dòng)物；另一種為非嚙齒類(lèi)動(dòng)物（如犬、小型豬或猴等）。其他藥物，可選用一種動(dòng)物，建議首選非嚙齒類(lèi)動(dòng)物。在動(dòng)物選擇上，建議采用體外模型比較動(dòng)物與人代謝的種屬差異性，包括代謝反應(yīng)類(lèi)型的差異和代謝產(chǎn)物種類(lèi)及量的差異。通過(guò)比較，選取與人代謝性質(zhì)相近的動(dòng)物進(jìn)行非臨床藥代評(píng)價(jià)；同時(shí)盡可能明確藥物代謝的研究對(duì)象（如：原形藥物、原形藥物與代謝產(chǎn)物、或幾個(gè)代謝產(chǎn)物同時(shí)作為藥代動(dòng)力學(xué)研究觀察的對(duì)象）。2.4 經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類(lèi)動(dòng)物。3. 劑量選擇動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少三個(gè)劑量組，低劑量與動(dòng)物最低有效劑量基本一致，中、高劑量按一定比例增加。不同物種之間可根據(jù)體表面積或藥物暴露量進(jìn)行劑量換算。主要考察在

7、所設(shè)劑量范圍內(nèi)，藥物的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)過(guò)程是屬于線(xiàn)性還是非線(xiàn)性，以利于解釋藥效學(xué)和毒理學(xué)研究中的發(fā)現(xiàn)，并為新藥的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和研究提供信息。4. 給藥途徑所用的給藥途徑和方式，應(yīng)盡可能與臨床用藥一致，也要兼顧藥效學(xué)研究和毒理研究的給藥途徑。（二）生物樣品的分析方法生物樣品中藥物及代謝產(chǎn)物的分析方法包括色譜法、放射性同位素標(biāo)記法和微生物學(xué)方法等。應(yīng)根據(jù)受試物的性質(zhì)，選擇特異性好、靈敏度高的測(cè)定方法。色譜法包括高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（如LC-MS，LC-MS/MS，GC-MS，GC-MS/MS方法）。在需要同時(shí)測(cè)定生物樣品中多種化合物的情況下，LC-MS/MS和G

8、C-MS/MS聯(lián)用法在特異性、靈敏度和分析速度方面有更多的優(yōu)勢(shì)。對(duì)于前體藥物或有活性（藥效學(xué)或毒理學(xué)活性）代謝產(chǎn)物的藥物，以及主要通過(guò)代謝從體內(nèi)消除的藥物，建立生物樣品分析方法時(shí)應(yīng)考慮測(cè)定原形藥和主要代謝產(chǎn)物，考察物質(zhì)平衡（Mass Balance），闡明藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)歸。在這方面，放射性同位素標(biāo)記法和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法具有明顯優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用放射性同位素標(biāo)記法測(cè)定生物樣品可配合色譜法，以保證良好的檢測(cè)特異性。如某些藥物難以用上述的檢測(cè)方法，可選用其他方法，但要保證其可靠性。方法學(xué)驗(yàn)證（Validation）是生物樣品分析的基礎(chǔ)。所有藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果，都依賴(lài)于生物樣品分析，只有可靠的方法才能得出可靠

9、的結(jié)果。應(yīng)通過(guò)準(zhǔn)確度、精密度、特異性、靈敏度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等研究，對(duì)建立的方法進(jìn)行驗(yàn)證。制備隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并對(duì)質(zhì)控樣品進(jìn)行測(cè)定，以確保生物樣品分析數(shù)據(jù)的可靠性。本指導(dǎo)原則提供了生物樣品分析方法的基本要求見(jiàn)附錄（一），研究時(shí)可根據(jù)藥物特點(diǎn)及分析方法的具體類(lèi)型進(jìn)行選擇。（三）研究項(xiàng)目1. 血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)1.1 受試動(dòng)物數(shù)：以血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)的每個(gè)采樣點(diǎn)一般不少于5個(gè)數(shù)據(jù)為限計(jì)算所需動(dòng)物數(shù)。建議受試動(dòng)物采用雌雄各半。對(duì)于單一性別用藥，可選擇與臨床用藥一致的性別。1.2 采樣點(diǎn)：采樣點(diǎn)的確定對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果有重大影響，若采樣點(diǎn)過(guò)少或選擇不當(dāng)，得到的血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)可能與藥物在體內(nèi)的真實(shí)情況

10、產(chǎn)生較大差異。給藥前需要采血作為空白樣品。為獲得給藥后一個(gè)完整的血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)，采樣時(shí)間點(diǎn)的設(shè)計(jì)應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相（峰濃度附近）和消除相。對(duì)于吸收快的血管外給藥藥物，應(yīng)盡量避免第一個(gè)點(diǎn)是峰濃度（Cmax）；在Cmax附近需要3個(gè)時(shí)間點(diǎn)，盡可能保證Cmax的真實(shí)性。整個(gè)采樣時(shí)間應(yīng)持續(xù)到35個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的1/101/20。為保證最佳采樣點(diǎn)，建議在正式試驗(yàn)前進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，然后根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，審核并修正原設(shè)計(jì)的采樣點(diǎn)。同時(shí)應(yīng)注意采血途徑和整個(gè)試驗(yàn)周期的采血總量不影響動(dòng)物的正常生理功能和血液動(dòng)力學(xué)，一般不超過(guò)動(dòng)物總血量的1520%。例如，每只大鼠24h內(nèi)采血總量不宜超

11、過(guò)2 mL。在采血方式上，同時(shí)也要兼顧動(dòng)物福利（Animal welfare）。1.3 口服給藥：一般在給藥前應(yīng)禁食12小時(shí)以上，以排除食物對(duì)藥物吸收的影響。另外在試驗(yàn)中應(yīng)注意根據(jù)具體情況統(tǒng)一給藥后禁食時(shí)間，以避免由此帶來(lái)的數(shù)據(jù)波動(dòng)及食物的影響。1.4 多次（重復(fù)）給藥對(duì)于臨床需長(zhǎng)期給藥或有蓄積傾向的藥物，應(yīng)考慮進(jìn)行多次（重復(fù)）給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究。多次給藥試驗(yàn)時(shí), 一般可選用一個(gè)劑量(有效劑量)。 根據(jù)單次給藥藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)結(jié)果求得的消除半衰期，并參考藥效學(xué)數(shù)據(jù), 確定藥物劑量、給藥間隔和連續(xù)給藥的天（次）數(shù)。1.5 血藥濃度測(cè)定按照已驗(yàn)證的分析方法，對(duì)采集的生物樣品進(jìn)行處理及分析測(cè)定，獲得

12、各個(gè)受試動(dòng)物的各采樣點(diǎn)的血藥濃度數(shù)據(jù)。生物樣品的處理應(yīng)與分析方法驗(yàn)證中的處理方法一致。1.6 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)根據(jù)試驗(yàn)中測(cè)得的各受試動(dòng)物的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)，求得受試物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。靜脈注射給藥，應(yīng)提供消除半衰期（t1/2）、表觀分布容積（Vd）、血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)下面積（AUC）、清除率（CL）等參數(shù)值；血管外給藥，除提供上述參數(shù)外，還應(yīng)提供峰濃度（Cmax）和達(dá)峰時(shí)間（Tmax）等參數(shù)，以反映藥物吸收、消除的規(guī)律。另外，應(yīng)提供統(tǒng)計(jì)矩參數(shù)，如: 平均滯留時(shí)間（MRT）、AUC(0-t)和AUC(0-)等，對(duì)于描述藥物藥代動(dòng)力學(xué)特征也是有意義的。1.7 應(yīng)提供的數(shù)據(jù)1.7.1 單次給藥各

13、個(gè)受試動(dòng)物的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)及曲線(xiàn)和各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及曲線(xiàn)。各個(gè)受試動(dòng)物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。對(duì)受試物單次給藥非臨床藥代動(dòng)力學(xué)的規(guī)律和特點(diǎn)進(jìn)行討論和評(píng)價(jià)。1.7.2 多次（重復(fù)）給藥各個(gè)受試動(dòng)物首次給藥后的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)及曲線(xiàn)和主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和曲線(xiàn)。各個(gè)受試動(dòng)物的3次穩(wěn)態(tài)谷濃度數(shù)據(jù)及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。各個(gè)受試動(dòng)物血藥濃度達(dá)穩(wěn)態(tài)后末次給藥的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)和曲線(xiàn)和主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和曲線(xiàn)。比較首次與末次給藥的血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)和有關(guān)參數(shù)。對(duì)受試物多次給藥非臨床藥代動(dòng)力學(xué)的規(guī)律和特點(diǎn)進(jìn)行討論和評(píng)價(jià)。2. 吸收對(duì)于經(jīng)口給藥

14、的新藥，進(jìn)行整體動(dòng)物試驗(yàn)時(shí)應(yīng)盡可能同時(shí)進(jìn)行血管內(nèi)給藥的試驗(yàn)，提供絕對(duì)生物利用度。如有必要，可進(jìn)行體外細(xì)胞試驗(yàn)、在體或離體腸道吸收試驗(yàn)等以闡述藥物的吸收特性。對(duì)于其他血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物，應(yīng)根據(jù)立題目的，提供絕對(duì)生物利用度或相對(duì)生物利用度。建議采用非嚙齒類(lèi)動(dòng)物（如：犬或猴等）自身交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，用同一受試動(dòng)物比較生物利用度。3. 分布一般選用大鼠或小鼠進(jìn)行組織分布試驗(yàn)，但必要時(shí)也可在非嚙齒類(lèi)動(dòng)物（如犬）中進(jìn)行。通常選擇一個(gè)劑量（一般以有效劑量為宜）給藥后，至少測(cè)定藥物及主要代謝產(chǎn)物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的濃度，以了解藥物在體內(nèi)的主要分布組織和器

15、官。特別注意藥物濃度高、蓄積時(shí)間長(zhǎng)的組織和器官，以及在藥效靶組織或毒性靶組織的分布（如對(duì)造血系統(tǒng)有影響的藥物，應(yīng)考察在骨髓的分布）。必要時(shí)建立和說(shuō)明血藥濃度與靶組織藥物濃度的關(guān)系。參考血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)的變化趨勢(shì)，選擇至少3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表吸收相、平衡相和消除相的藥物分布。若某組織的藥物或代謝產(chǎn)物濃度較高，應(yīng)增加觀測(cè)點(diǎn)，進(jìn)一步研究該組織中藥物消除的情況。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，一般應(yīng)有6個(gè)動(dòng)物（雌雄各半）的數(shù)據(jù)。以下情況可考慮進(jìn)行多次給藥后特定組織的藥物濃度研究：（1）藥物/代謝產(chǎn)物在組織中的半衰期明顯超過(guò)其血漿消除半衰期，并超過(guò)毒性研究給藥間隔的兩倍；（2）在短期毒性研究、單次給藥的組織分布研究或其他藥

16、理學(xué)研究中觀察到未預(yù)料的，而且對(duì)安全性評(píng)價(jià)有重要意義的組織病理學(xué)改變；（3）定位靶向釋放的藥物。進(jìn)行組織分布試驗(yàn)，必須注意取樣的代表性和一致性。4. 排泄建議同時(shí)提供嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)動(dòng)物的排泄數(shù)據(jù)，嚙齒類(lèi)（大鼠、小鼠等）每個(gè)性別3只動(dòng)物，非嚙齒類(lèi)（如犬）每個(gè)性別23只動(dòng)物。根據(jù)藥物特性，也可選擇單一性別動(dòng)物，但需說(shuō)明。4.1 尿和糞的藥物排泄：將動(dòng)物放入代謝籠內(nèi)，選定一個(gè)有效劑量給藥后，按一定的時(shí)間間隔分段收集尿或糞的全部樣品，直至收集到的樣品中藥物和主要代謝產(chǎn)物低于定量下限或小于給藥量的1%。糞樣品收集后按一定比例制成勻漿，記錄總重量或體積，取部分尿或糞樣品進(jìn)行藥物和主要代謝產(chǎn)物濃度測(cè)定或代

17、謝產(chǎn)物譜（Metabolite profile）分析，計(jì)算藥物和主要代謝產(chǎn)物經(jīng)此途徑排泄的速率及排泄量。每個(gè)時(shí)間段至少有5只動(dòng)物的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。4.2 膽汁排泄：一般在動(dòng)物麻醉下作膽管插管引流，待動(dòng)物清醒且手術(shù)完全恢復(fù)后給藥，并以合適的時(shí)間間隔分段收集膽汁，進(jìn)行藥物和主要代謝產(chǎn)物測(cè)定。4.3 記錄藥物及主要代謝產(chǎn)物自糞、尿、膽汁排出的速度及總排出量（占總給藥量的百分比），提供物質(zhì)平衡的數(shù)據(jù)。5. 與血漿蛋白的結(jié)合一般情況下，只有游離型藥物才能通過(guò)脂膜向組織擴(kuò)散，被腎小管濾過(guò)或被肝臟代謝，因此藥物與蛋白的結(jié)合會(huì)明顯影響藥物分布與消除的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，并降低藥物在靶部位的濃度。建議根據(jù)藥理毒理研究所采用的

18、動(dòng)物種屬，進(jìn)行動(dòng)物與人血漿蛋白結(jié)合率比較試驗(yàn)，以預(yù)測(cè)和解釋動(dòng)物與人在藥效和毒性反應(yīng)方面的相關(guān)性。研究藥物與血漿蛋白結(jié)合可采用多種方法，如平衡透析法、超過(guò)濾法、分配平衡法、凝膠過(guò)濾法、色譜法等。根據(jù)藥物的理化性質(zhì)及試驗(yàn)室條件，可選擇使用一種方法進(jìn)行至少3個(gè)濃度（包括有效濃度）的血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)，每個(gè)濃度至少重復(fù)試驗(yàn)次，以了解藥物與血漿蛋白結(jié)合率以及可能存在的濃度依賴(lài)性和血漿蛋白結(jié)合率的種屬差異。對(duì)血漿蛋白結(jié)合率高，且安全范圍窄的藥物，建議開(kāi)展體外藥物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)，即選擇臨床上有可能合并使用的高蛋白結(jié)合率藥物，考察對(duì)所研究藥物蛋白結(jié)合率的影響。6. 生物轉(zhuǎn)化對(duì)于創(chuàng)新性的藥物，尚需了解在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)

19、化情況，包括轉(zhuǎn)化類(lèi)型、主要轉(zhuǎn)化途徑及其可能涉及的代謝酶表型。對(duì)于新的前體藥物, 除對(duì)其代謝途徑和主要活性代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究外, 尚應(yīng)對(duì)原形藥和活性代謝產(chǎn)物進(jìn)行系統(tǒng)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。而對(duì)主要在體內(nèi)以代謝消除為主的藥物(原形藥排泄1%的單一雜質(zhì)。3.放射性同位素標(biāo)記藥物的藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)放射性化合物藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)與非標(biāo)記藥物藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)相似，如劑量、給藥途徑、受試動(dòng)物等等。劑量除按常規(guī)劑量水平(mg/kg)表示外，還需提供放射性劑量（Ci/kg）。給藥制劑的配制和給藥途徑一般也應(yīng)與非標(biāo)記藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)相似，特殊情況需說(shuō)明。為減少實(shí)驗(yàn)誤差，常采用稱(chēng)重法確定實(shí)際給藥量。樣品收集常包括全血、血漿、尿液

20、、膽汁、糞便、籠具清洗液及組織等樣本。血液樣本的收集時(shí)間點(diǎn)可根據(jù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)決定，排泄物一般采樣710天（對(duì)于長(zhǎng)半衰期的藥物，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)采樣時(shí)間），或采樣至排出的放射性量超過(guò)給藥量的90%或連續(xù)2天的排出放射性量小于放射性給藥劑量的1%。進(jìn)行小動(dòng)物（如小鼠、大鼠等）物質(zhì)平衡試驗(yàn)時(shí)，如總放射性回收率90%，應(yīng)測(cè)定尸體殘留總放射量，必要時(shí)應(yīng)解剖動(dòng)物，觀察藥物的主要儲(chǔ)留部位和組織。為防止原形藥及代謝產(chǎn)物降解，尿液和膽汁收集過(guò)程中容器置放于干冰內(nèi)。樣品處理（如液體樣品離心去固體雜質(zhì)、血漿、糞便及組織提取等）和分析（如應(yīng)用HPLC和在線(xiàn)或離線(xiàn)放射性檢測(cè)儀聯(lián)用獲得放射性代謝產(chǎn)物譜）應(yīng)密切關(guān)注放射性

21、的回收率，一般總回收率應(yīng)85%。應(yīng)根據(jù)放射性代謝產(chǎn)物譜研究獲得的各代謝產(chǎn)物的血漿暴露量百分比和在排泄物中占給藥百分率選擇需要鑒定的代謝產(chǎn)物，并使用HPLC在線(xiàn)或離線(xiàn)放射性檢測(cè)儀幫助鑒定工作中對(duì)代謝產(chǎn)物的監(jiān)測(cè)。放射性ADME試驗(yàn)報(bào)告除包括常規(guī)藥代動(dòng)力學(xué)研究?jī)?nèi)容外，還應(yīng)提供放射性同位素標(biāo)記藥物的標(biāo)記位置、放化純度、化學(xué)純度、比活度等以及在給藥制劑中的放化穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)提供放射性回收率，代謝產(chǎn)物鑒定需提供質(zhì)譜和在線(xiàn)或離線(xiàn)放射性檢測(cè)儀關(guān)聯(lián)數(shù)據(jù)。（三）幾個(gè)需要關(guān)注的問(wèn)題1.關(guān)于中藥、天然藥物藥代動(dòng)力學(xué)研究在中藥、天然藥物新藥研究開(kāi)發(fā)的過(guò)程中，通過(guò)對(duì)活性成分或活性代謝產(chǎn)物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究，了解

22、其相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，可作為闡明藥效或毒性產(chǎn)生的基礎(chǔ)及了解藥效或毒性反應(yīng)靶器官的依據(jù)，并為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床試驗(yàn)給藥方案提供有關(guān)參考信息。中藥活性成分情況較為復(fù)雜，有些活性成分較為單一，有些物質(zhì)基礎(chǔ)比較清楚但成分較多，有些活性成分復(fù)雜且不清楚。對(duì)于活性成分單一的中藥、天然藥物，其非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究與化學(xué)藥物基本一致。對(duì)于非單一活性成分但物質(zhì)基礎(chǔ)基本清楚的中藥、天然藥物，其中藥效或毒性反應(yīng)較強(qiáng)、含量較高的成分，一般需要進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)探索性研究。對(duì)于活性成分復(fù)雜且物質(zhì)基礎(chǔ)不太清楚的中藥、天然藥物，應(yīng)根據(jù)對(duì)其中部分已知成分文獻(xiàn)研究的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)考慮是否進(jìn)行有明確毒性成分的非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究。若有足夠

23、證據(jù)表明某類(lèi)結(jié)構(gòu)相似的一類(lèi)成分中某一個(gè)成分的藥代動(dòng)力學(xué)屬性可以代表該類(lèi)成分的藥代動(dòng)力學(xué)特征，可從同類(lèi)成分中選擇一個(gè)代表性成分進(jìn)行測(cè)定。被測(cè)成分應(yīng)根據(jù)機(jī)體的暴露水平和暴露形式，以及藥效作用/安全性相關(guān)性等因素來(lái)確定。此外，在進(jìn)行中藥、天然藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，應(yīng)充分考慮中藥、天然藥物所含化學(xué)成分不同于化學(xué)合成藥物的特點(diǎn)，結(jié)合其特點(diǎn)選擇適宜的方法開(kāi)展體內(nèi)過(guò)程或活性代謝產(chǎn)物的研究，為后續(xù)研發(fā)提供參考。若擬進(jìn)行的臨床試驗(yàn)中涉及到與其他藥物（特別是化學(xué)藥）聯(lián)合應(yīng)用，應(yīng)考慮通過(guò)體外、體內(nèi)試驗(yàn)開(kāi)展藥物相互作用研究。2.關(guān)于藥代動(dòng)力學(xué)研究的體外方法隨著體外生物技術(shù)的發(fā)展，為深層次地了解和闡明藥物的某一性質(zhì)以及與藥效和毒性的相關(guān)性，不少藥代動(dòng)力學(xué)的體外方法有效地應(yīng)用于藥物代謝和相互作用評(píng)價(jià)，如體外吸收模型（Caco-2細(xì)胞模型）、體外肝系統(tǒng)研究、體外轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)等。這些體外方法學(xué)在推測(cè)人藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和特征時(shí)，提供了同種屬的體外到體內(nèi)的推測(cè)。體外方法學(xué)可以通過(guò)應(yīng)用不同輔酶、不同選擇性抑制物，不同重組基因純酶，在試驗(yàn)設(shè)計(jì)上，可以彌補(bǔ)動(dòng)物體內(nèi)方法學(xué)的缺陷。人和動(dòng)物的體外方法學(xué)結(jié)合動(dòng)物的體內(nèi)方法學(xué)，在新藥研發(fā)的臨床前階段，可以較準(zhǔn)確和有效地評(píng)價(jià)藥物的吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)、分布、代謝，比如藥物代謝產(chǎn)物鑒定、代謝途徑鑒定、藥物對(duì)代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的抑制和誘導(dǎo)等，為闡明藥理和毒理作