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1、第五章第五章 凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)第一節(jié)第一節(jié) 凝集反應(yīng)的特點(diǎn)凝集反應(yīng)的特點(diǎn)第二節(jié)第二節(jié) 直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)第三節(jié)第三節(jié) 間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng) 一、間接凝集反應(yīng)的類型一、間接凝集反應(yīng)的類型 二、間接血凝試驗二、間接血凝試驗 三、膠乳凝集試驗三、膠乳凝集試驗 四、明膠凝集試驗四、明膠凝集試驗 五、間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用五、間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用第四節(jié)第四節(jié) 自身紅細(xì)胞凝集試驗自身紅細(xì)胞凝集試驗第五節(jié)第五節(jié) 抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗思考題思考題小結(jié)小結(jié)第一節(jié)第一節(jié) 凝集反應(yīng)的特點(diǎn)凝集反應(yīng)的特點(diǎn)凝集反應(yīng)定義凝集反應(yīng)定義 細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆粒性抗原,
2、或可溶性抗原(或抗體)與載體顆粒性抗原,或可溶性抗原(或抗體)與載體顆粒結(jié)合成致敏顆粒后,它們與相應(yīng)抗體(或抗粒結(jié)合成致敏顆粒后,它們與相應(yīng)抗體(或抗原)發(fā)生特異性反應(yīng),在適當(dāng)電解質(zhì)存在下,原)發(fā)生特異性反應(yīng),在適當(dāng)電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。反應(yīng)階段:反應(yīng)階段:抗原抗體的特異性結(jié)合抗原抗體的特異性結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象反應(yīng)特點(diǎn):反應(yīng)特點(diǎn):igmigm的作用比的作用比iggigg大數(shù)百倍大數(shù)百倍iggigg與抗原結(jié)合后,常不出現(xiàn)凝集反應(yīng),稱不完與抗原結(jié)合后,常不出現(xiàn)凝集反應(yīng),稱不完全抗體全抗體凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)可見反應(yīng)形成可見反應(yīng)形成第
3、二節(jié)第二節(jié) 直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)(direct agglutination): 顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合,在電解顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合,在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。(一)玻片凝集試驗(一)玻片凝集試驗+ +方法評價方法評價: :定性試驗定性試驗簡便和快速簡便和快速敏感度低敏感度低臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用: :菌種鑒定菌種鑒定血清學(xué)分型血清學(xué)分型血型鑒定血型鑒定 在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合,在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合,在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象?,F(xiàn)象。(二)試管凝
4、集試驗(二)試管凝集試驗試管凝集試驗試管凝集試驗試管凝集試驗試管凝集試驗方法評價:方法評價:半定量試驗半定量試驗簡便、快速簡便、快速敏感度低敏感度低可有假陽性可有假陽性臨床應(yīng)用:臨床應(yīng)用:widal reactionweil-felix reactionwright test:布魯菌病布魯菌病交叉配血試驗交叉配血試驗第三節(jié)第三節(jié) 間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)(indirect agglutination): 將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面,然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng),體表面,然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng),在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的
5、凝集在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象現(xiàn)象載體種類載體種類:rbcrbc(醛化)醛化)聚苯乙烯膠乳顆粒(羧化)聚苯乙烯膠乳顆粒(羧化)正向間接凝集試驗正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗間接凝集抑制試驗協(xié)同凝集試驗協(xié)同凝集試驗一、間接凝集反應(yīng)的類型一、間接凝集反應(yīng)的類型用抗原致敏載體用抗原致敏載體-檢測抗體檢測抗體正向間接凝集試驗正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗反向間接凝集試驗用抗體致敏載體用抗體致敏載體-檢測抗原檢測抗原間接凝集抑制試驗間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體用抗原致敏載體-檢測抗原檢測抗原spa:spa-igg fc;spa抗體致敏抗體致敏-測抗原測
6、抗原協(xié)同凝集試驗協(xié)同凝集試驗二、間接血凝試驗二、間接血凝試驗1/21/21/41/41/81/81/161/161/321/321/641/641/1281/1281/2561/2561/5121/5121/10241/1024pos.pos.neg.neg.titertiter64648 851251222323212812832324 4patientpatient1 12 23 34 45 56 67 78 8反向間接血凝試驗反向間接血凝試驗血凝試驗強(qiáng)度血凝試驗強(qiáng)度三、膠乳凝集試驗三、膠乳凝集試驗四、明膠凝集試驗四、明膠凝集試驗 將病毒抗原或重組抗原吸附于粉將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅
7、色明膠顆粒上,當(dāng)致敏顆粒與樣品紅色明膠顆粒上,當(dāng)致敏顆粒與樣品血清作用時,若血清含有抗病毒抗體血清作用時,若血清含有抗病毒抗體則可形成肉眼可見的粉紅色凝集則可形成肉眼可見的粉紅色凝集 五、間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用五、間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用抗原的檢測抗原的檢測 反向間接凝集試驗可用于檢測病反向間接凝集試驗可用于檢測病原體的可溶性抗原,也可用于檢測各原體的可溶性抗原,也可用于檢測各種蛋白質(zhì)成分。種蛋白質(zhì)成分??贵w的檢測抗體的檢測檢測細(xì)菌、病毒、寄生蟲等感染檢測細(xì)菌、病毒、寄生蟲等感染后產(chǎn)生的抗體。后產(chǎn)生的抗體。 第四節(jié)第四節(jié) 自身紅細(xì)胞凝集試驗自身紅細(xì)胞凝集試驗未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細(xì)胞未經(jīng)致敏的受檢者新鮮
8、紅細(xì)胞試劑:試劑:抗人抗人o o型紅細(xì)胞的單克隆抗體型紅細(xì)胞的單克隆抗體臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用:hivhiv檢測、檢測、hbvhbv檢測檢測自身紅細(xì)胞凝集試驗自身紅細(xì)胞凝集試驗抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗又稱又稱coombs試驗試驗第五節(jié)第五節(jié) 抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗(一)直接(一)直接coombscoombs試驗試驗不完全抗體不完全抗體檢測紅細(xì)胞上抗體檢測紅細(xì)胞上抗體(二)(二)間接間接coombscoombs試驗試驗檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體臨床應(yīng)用:臨床應(yīng)用:在輸血上的應(yīng)用在輸血上的應(yīng)用血型抗原抗體的檢查血型抗原抗體的檢查對新生兒溶血性貧血性疾病的診斷對新生兒溶血性貧血性疾
9、病的診斷對溶血性貧血的研究對溶血性貧血的研究對細(xì)菌或立克次體的不完全抗體檢查對細(xì)菌或立克次體的不完全抗體檢查1 1凝集反應(yīng)的特點(diǎn)是什么?凝集反應(yīng)的特點(diǎn)是什么?2 2什么叫直接凝集反應(yīng),什么叫間接凝集反什么叫直接凝集反應(yīng),什么叫間接凝集反 應(yīng)?它們之間有何異同?應(yīng)?它們之間有何異同?3 3敘述間接血凝試驗的原理。敘述間接血凝試驗的原理。4 4彩色膠乳凝集試驗的特點(diǎn)是什么?彩色膠乳凝集試驗的特點(diǎn)是什么?5 5什么是不完全抗體?什么是不完全抗體?6 6什么是直接什么是直接coombs? coombs? 什么是間接什么是間接coombscoombs, 它們之間有何區(qū)別?它們之間有何區(qū)別?7 7敘述抗人
10、球蛋白試驗的類型及其原理?敘述抗人球蛋白試驗的類型及其原理?8 8敘述抗人球蛋白試驗的臨床應(yīng)用敘述抗人球蛋白試驗的臨床應(yīng)用9 9凝集反應(yīng)的優(yōu)缺點(diǎn)是什么?凝集反應(yīng)的優(yōu)缺點(diǎn)是什么?1010凝集反應(yīng)的發(fā)展趨勢是什么?凝集反應(yīng)的發(fā)展趨勢是什么?思考題思考題小結(jié)小結(jié) 凝集反應(yīng)是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被抗凝集反應(yīng)是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒性載體與相應(yīng)抗體結(jié)合后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝原的顆粒性載體與相應(yīng)抗體結(jié)合后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。集現(xiàn)象。 可以分為直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)??梢苑譃橹苯幽磻?yīng)和間接凝集反應(yīng)。 在臨床檢驗中最常用的為間接血凝試驗、膠乳凝集試驗在臨床檢驗中最常用的為間接血凝試驗、膠乳凝集試驗和明膠試驗。和明膠試驗。 抗球蛋白試驗又稱
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