第六章體液葡萄糖檢驗(yàn)

1、1第五章第五章 體液葡萄糖檢驗(yàn)體液葡萄糖檢驗(yàn)2n本章內(nèi)容概要：本章內(nèi)容概要：第二節(jié)第二節(jié) 體液葡萄糖測(cè)定體液葡萄糖測(cè)定第一節(jié)第一節(jié) 概述概述3n本章教學(xué)要求：本章教學(xué)要求：1 1、掌握掌握血糖、糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白測(cè)定的推薦方法血糖、糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白測(cè)定的推薦方法及臨床意義，口服葡萄糖耐量試驗(yàn)的程序和臨床應(yīng)用。及臨床意義，口服葡萄糖耐量試驗(yàn)的程序和臨床應(yīng)用。2 2、熟悉熟悉糖尿病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目和診斷程序糖尿病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目和診斷程序 3 3、了解了解血糖濃度的調(diào)節(jié)機(jī)制、糖代謝紊亂。血糖濃度的調(diào)節(jié)機(jī)制、糖代謝紊亂。41 1、氧化供能：、氧化供能：分解代謝提供人體分解代謝提供人

2、體75%75%能量；能量； 2 2、人體組成成分之一：、人體組成成分之一：糖占人體干重的糖占人體干重的2%; 2%; 合成糖原儲(chǔ)存在肝臟與肌肉中；合成糖原儲(chǔ)存在肝臟與肌肉中； 形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受體等）、糖脂（神經(jīng)組織和細(xì)形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受體等）、糖脂（神經(jīng)組織和細(xì)胞膜重要組分）；胞膜重要組分）； 3 3、轉(zhuǎn)變：、轉(zhuǎn)變：其它糖及糖衍生物（核糖、脫氧核糖、氨基多糖）；非糖物其它糖及糖衍生物（核糖、脫氧核糖、氨基多糖）；非糖物質(zhì)（脂肪、氨基酸和核酸）。質(zhì)（脂肪、氨基酸和核酸）。 p糖的生理功能（能量資源和結(jié)構(gòu)材料）糖的生理功能（能量資源和結(jié)構(gòu)材料）糖代謝紊亂糖代謝紊亂

3、 一系列代謝變化一系列代謝變化5p體液糖的測(cè)定項(xiàng)目：體液糖的測(cè)定項(xiàng)目：血糖濃度測(cè)定血糖濃度測(cè)定口服糖耐量試驗(yàn)口服糖耐量試驗(yàn) 糖化血紅蛋白試驗(yàn)糖化血紅蛋白試驗(yàn)糖化血清白蛋白測(cè)定糖化血清白蛋白測(cè)定胰島素測(cè)定胰島素測(cè)定C-C-肽測(cè)定等肽測(cè)定等6第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述p血糖及正常血糖水平血糖及正常血糖水平:血糖：指血液中的葡萄糖血糖：指血液中的葡萄糖.正常血糖濃度：正常血糖濃度： 空腹波動(dòng)在空腹波動(dòng)在3.893.896.11mmol/L6.11mmol/L（7070110mg/dl110mg/dl） 餐后餐后2h2h內(nèi)應(yīng)內(nèi)應(yīng)7.8mmol/L7.8mmol/L（140mg/dl140mg/dl）。）

4、。 7p 8（一）（一） 血糖的來(lái)源、去路和調(diào)節(jié)血糖的來(lái)源、去路和調(diào)節(jié)一、血糖的來(lái)源、去路和調(diào)節(jié)一、血糖的來(lái)源、去路和調(diào)節(jié)3.896.11 如果血糖的濃度過(guò)高，超過(guò)了腎糖閾（8.9mmol/L）葡萄糖由尿液排出，出現(xiàn)糖尿 血糖的來(lái)源和去路要?jiǎng)討B(tài)的平衡,需要體內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)公泌激素、肝、腎等組織器官的協(xié)同作用10二、血糖濃度的調(diào)節(jié)二、血糖濃度的調(diào)節(jié)1 1、肝臟調(diào)節(jié)作用、肝臟調(diào)節(jié)作用: :肝內(nèi)有許多糖代謝的特異性酶，當(dāng)機(jī)體需要肝內(nèi)有許多糖代謝的特異性酶，當(dāng)機(jī)體需要時(shí)，通過(guò)神經(jīng)體液的作用，使這些酶的活性改變，來(lái)維持血糖濃度的時(shí)，通過(guò)神經(jīng)體液的作用，使這些酶的活性改變，來(lái)維持血糖濃度的相對(duì)恒定相對(duì)恒定

5、。雙向調(diào)控功能：從器官水平通過(guò)神經(jīng)雙向調(diào)控功能：從器官水平通過(guò)神經(jīng)- -激素的作用，使激素的作用，使肝細(xì)胞內(nèi)各種糖代謝的酶活性改變。肝細(xì)胞內(nèi)各種糖代謝的酶活性改變。升糖調(diào)節(jié)升糖調(diào)節(jié)1 1：具有活性很高的葡萄糖：具有活性很高的葡萄糖-6-6-磷酸酶，可促進(jìn)肝糖原水解，磷酸酶，可促進(jìn)肝糖原水解， 補(bǔ)充和升高血糖。補(bǔ)充和升高血糖。升糖調(diào)節(jié)升糖調(diào)節(jié)2 2：肝臟具有活性高且易誘導(dǎo)的糖異生酶類，禁食或饑餓時(shí)能肝臟具有活性高且易誘導(dǎo)的糖異生酶類，禁食或饑餓時(shí)能將非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖（占將非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖（占55-90%55-90%）。）。降糖調(diào)節(jié)降糖調(diào)節(jié)：促進(jìn)組織攝取葡萄糖，促進(jìn)肝糖原和脂肪合成、和抑制肝：促進(jìn)

6、組織攝取葡萄糖，促進(jìn)肝糖原和脂肪合成、和抑制肝糖原分解、抑制糖異生。糖原分解、抑制糖異生。112 2、神經(jīng)調(diào)節(jié)作用、神經(jīng)調(diào)節(jié)作用部位部位 1 1、下丘腦、下丘腦 2 2、自主神經(jīng)（交感和副交、自主神經(jīng)（交感和副交感神經(jīng)）感神經(jīng)） 內(nèi)臟神經(jīng)迷走神經(jīng) 方式：方式： 1、直接作用于肝臟發(fā)揮調(diào)控作用；直接作用于肝臟發(fā)揮調(diào)控作用； 2、下丘腦的腹內(nèi)側(cè)核和外側(cè)核具有相反的效應(yīng)、下丘腦的腹內(nèi)側(cè)核和外側(cè)核具有相反的效應(yīng)，它們通過(guò)內(nèi)臟神經(jīng)和迷走神經(jīng)，引起激素的分，它們通過(guò)內(nèi)臟神經(jīng)和迷走神經(jīng)，引起激素的分泌而影響血糖。泌而影響血糖。133 3、激素調(diào)節(jié)作用：兩組、激素調(diào)節(jié)作用：兩組降低血糖濃度的激素降低血糖濃度的

7、激素 胰島素胰島素（主要）（主要）胰島素樣生長(zhǎng)因子胰島素樣生長(zhǎng)因子胰島素降血糖機(jī)理胰島素降血糖機(jī)理: :1 1、加快葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)速率、加快葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)速率2 2、促進(jìn)糖原合成、促進(jìn)糖原合成3 3、加速糖氧化分解、加速糖氧化分解4 4、促進(jìn)糖轉(zhuǎn)化為脂肪、促進(jìn)糖轉(zhuǎn)化為脂肪5 5、抑制糖異生、抑制糖異生14 胰島胰島細(xì)胞細(xì)胞 前胰島素原前胰島素原 胰島素胰島素 C C肽肽 有活性有活性 無(wú)活性無(wú)活性胰島素結(jié)構(gòu)胰島素結(jié)構(gòu):51個(gè)個(gè)aa的蛋白類激素的蛋白類激素 等摩爾等摩爾15胰島素作用于靶細(xì)胞的機(jī)制胰島素作用于靶細(xì)胞的機(jī)制16胰島素的生物活性效應(yīng)取決于：胰島素的生物活性效應(yīng)取決于：1 1、靶細(xì)胞上胰島素受

8、體的絕對(duì)或相對(duì)數(shù)量、靶細(xì)胞上胰島素受體的絕對(duì)或相對(duì)數(shù)量2 2、到達(dá)靶細(xì)胞的胰島素濃度、到達(dá)靶細(xì)胞的胰島素濃度3 3、胰島素與靶細(xì)胞受體的親和力、胰島素與靶細(xì)胞受體的親和力4 4、胰島素與受體結(jié)合后的細(xì)胞內(nèi)改變情況、胰島素與受體結(jié)合后的細(xì)胞內(nèi)改變情況 升高血糖濃度的激素升高血糖濃度的激素 胰高血糖素胰高血糖素 腎上腺素腎上腺素 生長(zhǎng)激素生長(zhǎng)激素 皮質(zhì)醇皮質(zhì)醇 甲狀腺激素甲狀腺激素 升高血糖的機(jī)制：升高血糖的機(jī)制： 促進(jìn)肝糖原分解促進(jìn)肝糖原分解 加強(qiáng)糖異生加強(qiáng)糖異生 抑制肝糖原合成抑制肝糖原合成 減少葡萄糖氧化供能減少葡萄糖氧化供能18n糖代謝紊亂：糖代謝紊亂： 高血糖癥與糖尿病高血糖癥與糖尿病

9、低血糖癥低血糖癥 酮癥酮癥 半乳糖血癥半乳糖血癥二、二、 糖代謝紊亂糖代謝紊亂19( (一一) )高血糖癥與糖尿病高血糖癥與糖尿病、高血糖癥、高血糖癥: :空腹血漿血糖（空腹血漿血糖（FPGFPG）濃度超過(guò)）濃度超過(guò)7.27.2 mmol/Lmmol/L生理性：包括生理性：包括飲食性飲食性（高糖（高糖飲食）或飲食）或情感性情感性（情緒緊張，（情緒緊張，腎上腺分泌增加）腎上腺分泌增加）病理性：見(jiàn)于病理性：見(jiàn)于糖尿?。粌?nèi)分泌腺糖尿?。粌?nèi)分泌腺（甲（甲狀腺、腎上腺皮質(zhì)或髓質(zhì)、胰島細(xì)胞狀腺、腎上腺皮質(zhì)或髓質(zhì)、胰島細(xì)胞功能亢進(jìn)）；功能亢進(jìn)）；顱內(nèi)壓顱內(nèi)壓升高刺激血糖中升高刺激血糖中樞；嘔吐、腹瀉、高熱等

10、引起的樞；嘔吐、腹瀉、高熱等引起的脫水。脫水。尿糖：尿糖：若血糖濃度高于腎糖閾值若血糖濃度高于腎糖閾值8.9mmol/L8.9mmol/L，出現(xiàn)尿糖。，出現(xiàn)尿糖。20、糖尿?。?、糖尿病（diabetes mellitus,DMdiabetes mellitus,DM） 定義：定義：是一種慢性、復(fù)雜的代謝紊亂性疾病，系胰島素相對(duì)或絕對(duì)不是一種慢性、復(fù)雜的代謝紊亂性疾病，系胰島素相對(duì)或絕對(duì)不足，或利用缺陷引起。足，或利用缺陷引起。臨床特征：臨床特征：血糖持續(xù)升高，甚至出現(xiàn)糖尿。長(zhǎng)期患有糖尿病常有脂類、血糖持續(xù)升高，甚至出現(xiàn)糖尿。長(zhǎng)期患有糖尿病常有脂類、蛋白質(zhì)代謝紊亂以及眼、腎的微血管病變及神經(jīng)病變

11、等蛋白質(zhì)代謝紊亂以及眼、腎的微血管病變及神經(jīng)病變等并發(fā)癥并發(fā)癥。嚴(yán)重者。嚴(yán)重者還可出現(xiàn)水、電解質(zhì)紊亂及酸堿平衡紊亂，表現(xiàn)為高脂血癥，酮癥酸中還可出現(xiàn)水、電解質(zhì)紊亂及酸堿平衡紊亂，表現(xiàn)為高脂血癥，酮癥酸中毒等，重者可致死亡。毒等，重者可致死亡。2122發(fā)病機(jī)制：發(fā)病機(jī)制：1 1、胰腺、胰腺細(xì)胞的自身免疫性損傷細(xì)胞的自身免疫性損傷2 2、機(jī)體對(duì)胰島素的作用產(chǎn)生抵抗、機(jī)體對(duì)胰島素的作用產(chǎn)生抵抗DMDM的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目：的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目： 血糖測(cè)定、尿糖測(cè)定、血糖測(cè)定、尿糖測(cè)定、OGTTOGTT、血清糖化血紅蛋白和糖化、血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白測(cè)定、胰島素與胰島素抗體測(cè)定、肽測(cè)定、胰血清蛋白測(cè)定

12、、胰島素與胰島素抗體測(cè)定、肽測(cè)定、胰島素釋放試驗(yàn)以及相關(guān)代謝產(chǎn)物測(cè)定。島素釋放試驗(yàn)以及相關(guān)代謝產(chǎn)物測(cè)定。 糖尿病的分型(國(guó)標(biāo)糖尿病學(xué)會(huì)推薦)根據(jù)病因分四型 1.型糖尿病 多發(fā)生于兒童和年輕人,占糖尿病的5-10%,主要病變?cè)谟谝葝u細(xì)胞破壞使胰島素絕對(duì)缺乏,對(duì)胰導(dǎo)素治療敏感 2.型糖尿病 多見(jiàn)于中年人(肥胖者)病因不明確,可能是存在胰島素抗體或胰島細(xì)胞的功能減退,占糖尿病的90%以上 3.特殊類型糖尿病 見(jiàn)于一系列病因比較明確或繼發(fā)性的糖尿病 4.妊娠期糖尿糖 24糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：，不主張作第三次，不主張作第三次OGTT試驗(yàn)。試驗(yàn)。妊娠糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)妊娠24-28周有D

13、M傾向(肥胖、尿糖陽(yáng)性、糖尿病家族史等）的妊娠期婦女可在空腹條件下口服50克葡萄糖，測(cè)定1小時(shí)血糖濃度，若7.8mmol/L,需進(jìn)行糖耐量試驗(yàn)。 妊娠期空腹血糖5.3mmol/L糖尿病的代謝變化 糖尿病會(huì)導(dǎo)致血糖、蛋白質(zhì)、脂肪代謝的改變，表現(xiàn)為 1.高血糖癥:血糖來(lái)源增加而去路減少 2.糖尿:血糖過(guò)高超過(guò)腎糖閾而出現(xiàn)尿糖,進(jìn)一步出現(xiàn)酮體,多尿,水鹽的丟失 3.高脂血癥和高膽固醇血癥:由于糖尿病時(shí)脂肪動(dòng)員加強(qiáng),脂肪酸轉(zhuǎn)變成乙酰CoA生成酮體和膽固醇 4.酮血癥:當(dāng)酮體產(chǎn)生過(guò)多,超過(guò)肝外組織的氧化能力時(shí)會(huì)形成酮血癥和酮尿癥27（二）低血糖癥（二）低血糖癥 是指血糖濃度低于是指血糖濃度低于3.89m

14、mol/L3.89mmol/L（葡萄糖氧化酶法）（葡萄糖氧化酶法）時(shí)臨床出現(xiàn)時(shí)臨床出現(xiàn)( (心悸、出汗、精神失常、休克等）一系列因血糖心悸、出汗、精神失常、休克等）一系列因血糖濃度過(guò)低引起的癥候群。濃度過(guò)低引起的癥候群。n發(fā)病原因：來(lái)源發(fā)病原因：來(lái)源 去路去路激素效應(yīng)：升血糖激素缺乏，降血糖激素過(guò)剩。激素效應(yīng)：升血糖激素缺乏，降血糖激素過(guò)剩。肝病變：肝功嚴(yán)重?fù)p傷致肝糖原減少和糖異生嚴(yán)重障礙。肝病變：肝功嚴(yán)重?fù)p傷致肝糖原減少和糖異生嚴(yán)重障礙。長(zhǎng)期饑餓或劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)代謝率增加，血糖消耗過(guò)多。長(zhǎng)期饑餓或劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)代謝率增加，血糖消耗過(guò)多。28n分類：分類：低血糖癥低血糖癥空腹性低血糖：臨床常見(jiàn)（如果反

15、復(fù)發(fā)作常提示有器質(zhì)性疾病如空腹性低血糖：臨床常見(jiàn)（如果反復(fù)發(fā)作常提示有器質(zhì)性疾病如胰島素瘤）胰島素瘤）刺激性刺激性低血糖低血糖反應(yīng)性低血糖癥反應(yīng)性低血糖癥外源性低血糖癥外源性低血糖癥酒精性低血糖癥酒精性低血糖癥半乳糖性低血糖癥半乳糖性低血糖癥餐后性低血糖癥餐后性低血糖癥功能性低血糖癥功能性低血糖癥型糖尿病或糖耐量型糖尿病或糖耐量受損伴有的低血糖癥受損伴有的低血糖癥營(yíng)養(yǎng)性低血糖營(yíng)養(yǎng)性低血糖29（三）酮癥（三）酮癥1、概念：概念：n酮體：酮體：乙酰乙酸、乙酰乙酸、-羥丁酸及丙酮三者統(tǒng)稱為酮體羥丁酸及丙酮三者統(tǒng)稱為酮體20%78%2%n酮血癥：酮血癥：酮體形成過(guò)多引起血中含量增高，稱為酮血癥。酮體形

16、成過(guò)多引起血中含量增高，稱為酮血癥。酮體形酮體形成過(guò)多成過(guò)多的原因的原因糖尿?。禾悄虿。禾菙z取不足：脂肪動(dòng)員糖攝取不足：脂肪動(dòng)員糖原貯積病：脂肪動(dòng)員糖原貯積?。褐緞?dòng)員堿中毒：代償堿中毒：代償302 2、酮體的生成：、酮體的生成：糖代謝障礙糖代謝障礙脂肪酸分解脂肪酸分解3 3、酮體的測(cè)定及臨床意義：、酮體的測(cè)定及臨床意義：（不能同時(shí)檢測(cè)酮體三種成分）（不能同時(shí)檢測(cè)酮體三種成分）Gerhardts 氧化鐵試驗(yàn)氧化鐵試驗(yàn)乙酰乙酸乙酰乙酸硝普納反應(yīng)硝普納反應(yīng)丙酮丙酮n測(cè)定測(cè)定n臨床意義：臨床意義：1、如有酮體存在，需確定酮酸中毒狀態(tài)、如有酮體存在，需確定酮酸中毒狀態(tài) 2、酮血癥的診斷對(duì)指導(dǎo)胰島素治療

17、最有價(jià)值。、酮血癥的診斷對(duì)指導(dǎo)胰島素治療最有價(jià)值。31（四）半乳糖血癥（四）半乳糖血癥1、概念：概念： 半乳糖血癥是機(jī)體半乳糖血癥是機(jī)體不能轉(zhuǎn)化利用半乳糖及其中間代謝產(chǎn)物不能轉(zhuǎn)化利用半乳糖及其中間代謝產(chǎn)物的一種常的一種常染色體隱性遺傳病，主要特征為染色體隱性遺傳病，主要特征為血和尿中半乳糖增高血和尿中半乳糖增高。2、生化缺陷：生化缺陷：酶的缺陷酶的缺陷半乳糖半乳糖半乳糖半乳糖-1-磷酸磷酸葡萄糖葡萄糖-1-磷酸磷酸UDPGUDP-半乳糖半乳糖葡萄糖葡萄糖-6-磷酸磷酸半乳糖激酶半乳糖激酶半乳糖半乳糖-1-磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶 （最常見(jiàn)）（最常見(jiàn)）UDP-半乳糖半乳糖-4-差向酶差向酶n

18、臨床表現(xiàn)：臨床表現(xiàn)：酶缺乏導(dǎo)致酶缺乏導(dǎo)致半乳糖和半乳糖半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉積在磷酸沉積在肝臟、腎腦、眼晶狀體肝臟、腎腦、眼晶狀體和紅細(xì)胞和紅細(xì)胞中，引起相應(yīng)的病變。中，引起相應(yīng)的病變。n代謝過(guò)程：代謝過(guò)程：32第二節(jié)第二節(jié) 體液葡萄糖測(cè)定體液葡萄糖測(cè)定血液標(biāo)本的采集與處理：血液標(biāo)本的采集與處理：標(biāo)本采集：空腹靜脈血，血清或血漿，抗凝劑選擇草酸鉀標(biāo)本采集：空腹靜脈血，血清或血漿，抗凝劑選擇草酸鉀-氟化鈉抗凝劑氟化鈉抗凝劑標(biāo)本處理：標(biāo)本處理：1小時(shí)內(nèi)分離血清或血漿（血糖在室溫下以每小時(shí)小時(shí)內(nèi)分離血清或血漿（血糖在室溫下以每小時(shí)5%的速度在下的速度在下降），如不能及時(shí)檢測(cè)要分離后放置降），如不

19、能及時(shí)檢測(cè)要分離后放置2-8度冰霜保存度冰霜保存一、血糖測(cè)定一、血糖測(cè)定測(cè)定測(cè)定方法方法無(wú)機(jī)化學(xué)法無(wú)機(jī)化學(xué)法有機(jī)化學(xué)法有機(jī)化學(xué)法酶法酶法33（一）無(wú)機(jī)化學(xué)法：（一）無(wú)機(jī)化學(xué)法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的還原性法，基于葡萄糖醛基的還原性（二）有機(jī)化學(xué)法：鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等（二）有機(jī)化學(xué)法：鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等Cu2+OH-Cu+ Glu磷鉬酸磷鉬酸顯色顯色鄰甲苯胺鄰甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺葡萄糖基胺 希夫氏堿希夫氏堿 藍(lán)綠色化合物藍(lán)綠色化合物縮合縮合脫水脫水分子重排分子重排特異性差特異性差干擾因素多干擾因素多（三）酶法（三）酶法（1 1）己糖激酶法（

20、）己糖激酶法（HKHK）（2 2）葡萄糖氧化酶法（）葡萄糖氧化酶法（GODGOD法）法）（3 3）葡萄糖脫氫酶法（）葡萄糖脫氫酶法（GDHGDH）34 葡萄糖葡萄糖ATP己糖激酶己糖激酶葡萄糖葡萄糖-磷酸磷酸ADP 葡萄糖葡萄糖-6-磷酸磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖內(nèi)酯磷酸葡萄糖內(nèi)酯+NADPH NADPH在在340nm有吸收峰，其吸光度增加與標(biāo)本中的葡萄糖濃度成正比。有吸收峰，其吸光度增加與標(biāo)本中的葡萄糖濃度成正比。n原理：原理：、己糖激酶法（法）、己糖激酶法（法）評(píng)評(píng) 價(jià)價(jià) 本法特異性高，靈敏度高，本法特異性高，靈敏度高， 干擾因素少，干擾因素少，不受溶血、脂血、黃疸、尿酸、維

21、不受溶血、脂血、黃疸、尿酸、維生素生素C、肝素、肝素、EDTA等干擾，等干擾，適用于自動(dòng)化適用于自動(dòng)化分析，為分析，為葡萄糖測(cè)定的參考方法葡萄糖測(cè)定的參考方法， 試劑較貴。試劑較貴。362、葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法(GOD)分為質(zhì)譜法（速率法）、比色法分為質(zhì)譜法（速率法）、比色法n原理：原理：葡萄糖葡萄糖O2+H2O GOD 葡萄糖酸內(nèi)酯葡萄糖酸內(nèi)酯2O2質(zhì)譜分析法質(zhì)譜分析法是用氧電極監(jiān)測(cè)溶液中氧的消耗量，氧消耗量與葡萄糖濃是用氧電極監(jiān)測(cè)溶液中氧的消耗量，氧消耗量與葡萄糖濃度成正比度成正比22O2 + 4-氨基安替比林氨基安替比林+酚酚 POD 紅色醌類化合物紅色醌類化合物 + 2O +O

22、2比色分析法比色分析法是與過(guò)氧化物酶（是與過(guò)氧化物酶（POD）偶聯(lián)，將過(guò)氧化氫分解為水和）偶聯(lián)，將過(guò)氧化氫分解為水和氧，同時(shí)使色素原性氧受休氧，同時(shí)使色素原性氧受休4-氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醌類氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醌類化合物，即化合物，即Trinder反應(yīng)反應(yīng)，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比比評(píng)評(píng) 價(jià)價(jià) 特異性較低特異性較低，一些還原性物質(zhì)如尿酸、，一些還原性物質(zhì)如尿酸、VC、膽、膽紅素、溶血、紅素、溶血、 GSH等可消耗過(guò)氧化氫，使結(jié)果等可消耗過(guò)氧化氫，使結(jié)果偏低，偏低， 操作簡(jiǎn)單操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度與精確度都能達(dá)到臨床要求，準(zhǔn)確度

23、與精確度都能達(dá)到臨床要求， 線性范圍較好，適用于常規(guī)檢驗(yàn)，是線性范圍較好，適用于常規(guī)檢驗(yàn)，是衛(wèi)生部臨床衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦方法檢驗(yàn)中心推薦方法。38二、血糖測(cè)定的臨床意義二、血糖測(cè)定的臨床意義（一）（一） 生理性高血糖生理性高血糖 見(jiàn)于情緒激動(dòng)時(shí)交感神經(jīng)興奮促使腎上腺素等分泌增加，也可見(jiàn)于見(jiàn)于情緒激動(dòng)時(shí)交感神經(jīng)興奮促使腎上腺素等分泌增加，也可見(jiàn)于 一次性食入大量糖。一次性食入大量糖。（二）（二） 病理性高血糖病理性高血糖1. 1. 糖尿病糖尿病 血糖測(cè)定是糖尿病最簡(jiǎn)單的篩查試驗(yàn)血糖測(cè)定是糖尿病最簡(jiǎn)單的篩查試驗(yàn) 糖尿病治療效果評(píng)價(jià)糖尿病治療效果評(píng)價(jià) 血糖水平監(jiān)控有利于糖尿病患者調(diào)整飲食攝入量和

24、胰島素注射量，對(duì)血糖水平監(jiān)控有利于糖尿病患者調(diào)整飲食攝入量和胰島素注射量，對(duì)降低其長(zhǎng)期并發(fā)癥有積極作用。降低其長(zhǎng)期并發(fā)癥有積極作用。2. 2. 內(nèi)分泌腺功能障礙內(nèi)分泌腺功能障礙 甲狀腺功能、腎上腺皮質(zhì)及髓質(zhì)功能亢進(jìn)等引起的升高血糖的激素分甲狀腺功能、腎上腺皮質(zhì)及髓質(zhì)功能亢進(jìn)等引起的升高血糖的激素分泌過(guò)多出現(xiàn)高血糖。泌過(guò)多出現(xiàn)高血糖。3.應(yīng)激性高血糖應(yīng)激性高血糖 如如 顱內(nèi)壓增高。顱內(nèi)壓增高。4. 脫水引起的高血糖嘔吐、腹瀉和高熱等也可脫水引起的高血糖嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。使血糖輕度增高。5.嚴(yán)重的肝病嚴(yán)重的肝病,使葡萄糖不能轉(zhuǎn)化為肝糖原。使葡萄糖不能轉(zhuǎn)化為肝糖原。6.胰腺病變胰

25、腺病變（三）血糖降低（三）血糖降低: : 1.生理性:見(jiàn)于饑餓、劇烈運(yùn)動(dòng)等 2.病理性: (1)胰島細(xì)胞增生、腫瘤引起胰島素分泌過(guò)多 （2）對(duì)抗胰島素分泌不足 （3）嚴(yán)重肝病使肝的異生作用降低或肝糖原儲(chǔ)存缺乏 藥物影響：41 葡萄糖耐量試驗(yàn)葡萄糖耐量試驗(yàn) 概概 念念是一種葡萄糖負(fù)荷試驗(yàn)，用于了解是一種葡萄糖負(fù)荷試驗(yàn)，用于了解胰島胰島細(xì)細(xì)胞功能和機(jī)體對(duì)血糖的調(diào)節(jié)能力。胞功能和機(jī)體對(duì)血糖的調(diào)節(jié)能力。 二二 口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）42一、糖耐量和葡萄糖耐量試驗(yàn)一、糖耐量和葡萄糖耐量試驗(yàn)（一）糖耐量（一）糖耐量正常人由于體內(nèi)有一套完善的調(diào)節(jié)血糖濃度的機(jī)制，正常人由于體內(nèi)有一

26、套完善的調(diào)節(jié)血糖濃度的機(jī)制，即使一次攝入大量的葡萄糖，血糖濃度也僅暫時(shí)升高（一即使一次攝入大量的葡萄糖，血糖濃度也僅暫時(shí)升高（一般不超過(guò)般不超過(guò)8.9mmol/L)8.9mmol/L)，不出現(xiàn)糖尿，且于，不出現(xiàn)糖尿，且于2h2h內(nèi)恢復(fù)到正常內(nèi)恢復(fù)到正常血糖水平，此即為血糖水平，此即為耐糖現(xiàn)象。耐糖現(xiàn)象。若調(diào)節(jié)功能失調(diào)，口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后，若調(diào)節(jié)功能失調(diào)，口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后，血糖急劇升高，在一定時(shí)限內(nèi)不能恢復(fù)到原有水平，此種血糖急劇升高，在一定時(shí)限內(nèi)不能恢復(fù)到原有水平，此種現(xiàn)象稱為現(xiàn)象稱為糖耐量降低糖耐量降低。反之給予大量葡萄糖后，血糖升高不明顯，或緩慢地反之給予大量葡萄

27、糖后，血糖升高不明顯，或緩慢地輕度上升，稱輕度上升，稱糖耐量增加糖耐量增加。 43口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）靜脈葡萄糖耐量試（靜脈葡萄糖耐量試（IGTT）（二）葡萄糖耐量試驗(yàn)（二）葡萄糖耐量試驗(yàn)葡萄糖耐量試驗(yàn)是指口服或注射一定量葡萄糖后，每葡萄糖耐量試驗(yàn)是指口服或注射一定量葡萄糖后，每間隔一定時(shí)間測(cè)定血糖水平進(jìn)行分析。臨床常用間隔一定時(shí)間測(cè)定血糖水平進(jìn)行分析。臨床常用OGTTOGTT，靜，靜脈葡萄糖耐量試驗(yàn)是測(cè)定糖尿病患者胰島素分泌的反應(yīng)性脈葡萄糖耐量試驗(yàn)是測(cè)定糖尿病患者胰島素分泌的反應(yīng)性和能力的試驗(yàn)，但不適用于臨床常規(guī)診斷。和能力的試驗(yàn)，但不適用于臨床常規(guī)診斷。 44

28、1 1、空腹血糖水平在臨界值（、空腹血糖水平在臨界值（6 67 7mmol/L)mmol/L)而又疑為糖尿病患者；而又疑為糖尿病患者；2 2、空腹或餐后血糖濃度正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群；、空腹或餐后血糖濃度正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群；3 3、以前糖耐量異常的危險(xiǎn)人群；、以前糖耐量異常的危險(xiǎn)人群；4 4、妊娠性糖尿病的診斷；、妊娠性糖尿病的診斷；5 5、臨床上出現(xiàn)腎病、神經(jīng)病變和視網(wǎng)膜病而又無(wú)法做出合理解、臨床上出現(xiàn)腎病、神經(jīng)病變和視網(wǎng)膜病而又無(wú)法做出合理解釋者；釋者；6 6、作為流行病學(xué)研究的手段。、作為流行病學(xué)研究的手段。pOGTT試驗(yàn)適應(yīng)證：試驗(yàn)適應(yīng)證：二、口服葡萄糖耐量試驗(yàn)

29、二、口服葡萄糖耐量試驗(yàn) 45 試驗(yàn)前三天，受試者每日食物中糖含量不應(yīng)低于試驗(yàn)前三天，受試者每日食物中糖含量不應(yīng)低于150g150g，且維持正?；?，且維持正?；顒?dòng)影響試驗(yàn)的藥物應(yīng)在三天前停用，受試前應(yīng)空腹動(dòng)影響試驗(yàn)的藥物應(yīng)在三天前停用，受試前應(yīng)空腹101016h.16h. 坐位取血后坐位取血后5 5分鐘內(nèi)飲入分鐘內(nèi)飲入250250mlml含含7575g g無(wú)水葡萄糖的糖水，無(wú)水葡萄糖的糖水，妊娠婦女用量妊娠婦女用量為為100g100g，兒童按，兒童按1.75g/kg1.75g/kg體重給予，不超體重給予，不超75g75g。從服第一口糖開(kāi)始計(jì)時(shí)。從服第一口糖開(kāi)始計(jì)時(shí), ,每隔每隔3030分鐘取血分

30、鐘取血1 1次，共次，共4 4次。必要時(shí)可延長(zhǎng)時(shí)間，可長(zhǎng)達(dá)服糖后小時(shí)。于采血次。必要時(shí)可延長(zhǎng)時(shí)間，可長(zhǎng)達(dá)服糖后小時(shí)。于采血同時(shí)，每隔同時(shí)，每隔1 1小時(shí)留取尿液作尿糖試驗(yàn)。整個(gè)過(guò)程不可吸煙、和咖啡、喝茶小時(shí)留取尿液作尿糖試驗(yàn)。整個(gè)過(guò)程不可吸煙、和咖啡、喝茶或進(jìn)食。或進(jìn)食。pOGGT方法：方法：H標(biāo)準(zhǔn)化標(biāo)準(zhǔn)化p曲線繪制：曲線繪制：一般應(yīng)有一般應(yīng)有5 5次測(cè)定結(jié)果。以測(cè)定血糖的時(shí)間為橫坐標(biāo)（空次測(cè)定結(jié)果。以測(cè)定血糖的時(shí)間為橫坐標(biāo)（空腹時(shí)為腹時(shí)為0h0h），血糖濃度為縱坐標(biāo)，繪制曲線。），血糖濃度為縱坐標(biāo)，繪制曲線。 46p參考范圍：參考范圍：空腹血糖空腹血糖6.1mmol6.1mmol；服糖后；服

31、糖后30306060分鐘血糖升高達(dá)峰值，分鐘血糖升高達(dá)峰值，一般一般10mmol10mmol；2h2h7.8mmol。同時(shí)測(cè)定上述各時(shí)間的尿。同時(shí)測(cè)定上述各時(shí)間的尿糖均為陰性。糖均為陰性。p臨床意義：臨床意義：糖尿病性糖耐量糖尿病性糖耐量空腹血糖濃度空腹血糖濃度7.0mmol/L7.0mmol/L，服糖后，服糖后303060min60min血糖急劇升高，血糖急劇升高，峰值超過(guò)峰值超過(guò)10mmol/L10mmol/L，并出現(xiàn)尿糖；隨后血糖濃度恢復(fù)緩慢，并出現(xiàn)尿糖；隨后血糖濃度恢復(fù)緩慢，2 h2 h后仍高于空腹水平。后仍高于空腹水平。 空腹血糖濃度7.0mmol/L，但2h血糖在7.8 mmol/

32、L-11.1mmol/L為糖耐量減退（IGT）； 空腹血糖濃度在6.1 mmol/L-7.0mmol/L，OGTT 2h血糖7.8mmol/L為空腹血糖損害（IFG）。 糖耐量受損糖耐量受損48三、妊娠期糖尿病三、妊娠期糖尿病診斷方法：診斷方法： 在孕在孕24242828周內(nèi)，周內(nèi)，口服口服50g50g葡萄糖后，測(cè)定葡萄糖后，測(cè)定1 1小時(shí)血糖濃度小時(shí)血糖濃度, ,若在若在7.8mmol/L7.8mmol/L以上者，則提示妊娠性糖尿病的可能性，應(yīng)作以上者，則提示妊娠性糖尿病的可能性，應(yīng)作OGTTOGTT：測(cè)定空：測(cè)定空腹血糖濃度，腹血糖濃度，糖負(fù)荷量糖負(fù)荷量100g100g，然后每小時(shí)檢測(cè)一次

33、血糖濃度，連續(xù)，然后每小時(shí)檢測(cè)一次血糖濃度，連續(xù)3 3小小時(shí)。時(shí)。診斷標(biāo)準(zhǔn)：診斷標(biāo)準(zhǔn)： 空腹空腹5.8mmol/L5.8mmol/L、1h1h10.5 mmol/L10.5 mmol/L、2h2h9.2 mmol/L9.2 mmol/L、3h3h8.0 mmol/L8.0 mmol/L，2 2個(gè)結(jié)果超過(guò)以上檢測(cè)值，方可診斷為妊娠性糖尿病。個(gè)結(jié)果超過(guò)以上檢測(cè)值，方可診斷為妊娠性糖尿病。49四、糖尿病診斷程序四、糖尿病診斷程序7.87.87.8 正常人正常人Hb是由是由HbA1、 HbA2、 HbF組成。層析分析組成。層析分析HbA1顯示它含有數(shù)種微量顯示它含有數(shù)種微量Hb成分（成分（ HbA1c

34、、HbA1b 、HbA1c), HbA1c是是HbA1的主要成分。紅細(xì)胞內(nèi)的的主要成分。紅細(xì)胞內(nèi)的Hb可緩可緩慢地與糖類結(jié)合而形成糖化血紅蛋白（慢地與糖類結(jié)合而形成糖化血紅蛋白（GHb），）， GHb是是HbA1合成后化學(xué)修飾的結(jié)果。合成后化學(xué)修飾的結(jié)果。 GHb的形成取決于血液中葡萄糖的濃度及血糖與的形成取決于血液中葡萄糖的濃度及血糖與Hb的接的接觸時(shí)間觸時(shí)間，其生成量與血中葡萄糖濃度成正比，而糖基化，其生成量與血中葡萄糖濃度成正比，而糖基化過(guò)程非常緩慢且不可逆，過(guò)程非常緩慢且不可逆， GHb一旦形成不再解離。紅細(xì)一旦形成不再解離。紅細(xì)胞壽命約為胞壽命約為120天，因此天，因此GHb的濃度可

35、以反應(yīng)測(cè)定前的濃度可以反應(yīng)測(cè)定前1-2個(gè)月內(nèi)受試者血糖的平均水平，而與血糖的短期波動(dòng)無(wú)個(gè)月內(nèi)受試者血糖的平均水平，而與血糖的短期波動(dòng)無(wú)關(guān)。關(guān)。第三節(jié)第三節(jié) 糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白 方法：一類是將一類是將HbA1從從HbA中分離出來(lái)對(duì)中分離出來(lái)對(duì)HbA1進(jìn)行定量分析，常用比色法進(jìn)行定量分析，常用比色法、電泳法、離子交換層析微柱法、層析法、電泳法、離子交換層析微柱法、層析法一類是分離和定量分析一類是分離和定量分析HbA1c ，常用高效液相色譜法（，常用高效液相色譜法（HPLC）、等）、等電聚焦法、免疫學(xué)方法電聚焦法、免疫學(xué)方法 評(píng)價(jià)： HbA1c分離過(guò)程耗時(shí)，要求技術(shù)水平高、必須有高精密分離過(guò)程

36、耗時(shí)，要求技術(shù)水平高、必須有高精密度的專門儀器，一般不作為常規(guī)測(cè)定方法度的專門儀器，一般不作為常規(guī)測(cè)定方法免疫學(xué)方法現(xiàn)已有成品試劑盒供應(yīng)，可以通過(guò)全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)免疫學(xué)方法現(xiàn)已有成品試劑盒供應(yīng)，可以通過(guò)全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。行測(cè)定。離子交換層析微柱法、親和層析法技術(shù)簡(jiǎn)單、操作快速、結(jié)果可滿離子交換層析微柱法、親和層析法技術(shù)簡(jiǎn)單、操作快速、結(jié)果可滿足臨床對(duì)糖尿病監(jiān)控的要求，是目前推薦的常規(guī)方法足臨床對(duì)糖尿病監(jiān)控的要求，是目前推薦的常規(guī)方法高效液相色譜法（高效液相色譜法（HPLC）為參考方法）為參考方法 參與區(qū)間： 離子交換層析法：健康成年人5.0-8.0%均值6.5% HbA1c免疫法:

37、IFCC:2.8-3.8%53臨床意義：作為糖尿病患者長(zhǎng)期控制的評(píng)價(jià)指標(biāo)。臨床意義：作為糖尿病患者長(zhǎng)期控制的評(píng)價(jià)指標(biāo)。 1.GHb1.GHb可反映可反映測(cè)定前測(cè)定前1-21-2個(gè)月（個(gè)月（6 68 8周）的血糖水平周）的血糖水平 , ,而與抽血時(shí)間、患者是否空腹、是否使用胰島素等因而與抽血時(shí)間、患者是否空腹、是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)，是糖尿病監(jiān)控達(dá)標(biāo)的金標(biāo)準(zhǔn)。素?zé)o關(guān)，是糖尿病監(jiān)控達(dá)標(biāo)的金標(biāo)準(zhǔn)。 2.2. GHbGHb測(cè)定也可用于測(cè)定也可用于鑒別糖尿病性高血糖及應(yīng)激性高鑒別糖尿病性高血糖及應(yīng)激性高血糖血糖，前者，前者GHbGHb水平多增高，后者正常。水平多增高，后者正常。 3.3.在糖尿病門診在

38、糖尿病門診, , 常用常用GHbGHb評(píng)價(jià)糖尿病患者血糖控制水評(píng)價(jià)糖尿病患者血糖控制水平平，當(dāng)糖尿病控制不佳時(shí)，當(dāng)糖尿病控制不佳時(shí)GHbGHb可高達(dá)正常可高達(dá)正常2 2倍以上。倍以上。 4 4. . GHbGHb測(cè)定對(duì)測(cè)定對(duì)監(jiān)測(cè)糖尿病微小血管并發(fā)癥、慢性并發(fā)監(jiān)測(cè)糖尿病微小血管并發(fā)癥、慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展癥的發(fā)生和發(fā)展都有積極意義。都有積極意義。 5 5. GHb. GHb測(cè)定在糖尿病篩選普查中測(cè)定在糖尿病篩選普查中對(duì)輕型、對(duì)輕型、“隱性隱性”糖糖尿病有早期提示尿病有早期提示作用。作用。四 糖化血清蛋白測(cè)定n糖化血清蛋白(GSP): 血清清蛋白和其他蛋白質(zhì)與葡萄糖通過(guò)非酶促糖基化血清清蛋白和其

39、他蛋白質(zhì)與葡萄糖通過(guò)非酶促糖基化反應(yīng)形成的高分子酮胺結(jié)構(gòu)。反應(yīng)形成的高分子酮胺結(jié)構(gòu)。清蛋白是血清中最多的成分清蛋白是血清中最多的成分,葡萄糖與清蛋白結(jié)合產(chǎn)物葡萄糖與清蛋白結(jié)合產(chǎn)物為果糖胺，濃度與血糖呈正比。為果糖胺，濃度與血糖呈正比。半衰期為半衰期為15-19天天,可通過(guò)測(cè)定可通過(guò)測(cè)定糖化血清蛋白水平來(lái)反糖化血清蛋白水平來(lái)反映映1-2周前的血糖控制情況周前的血糖控制情況.n方法: 化學(xué)比色法、親和層析法、果糖胺法化學(xué)比色法、親和層析法、果糖胺法55臨床意義：臨床意義：清蛋白比血紅蛋白半衰期短，約為清蛋白比血紅蛋白半衰期短，約為1 1天，測(cè)定天，測(cè)定AlbAlb可有效反映患者過(guò)去可有效反映患者過(guò)去周內(nèi)周內(nèi)平均血糖水平，平均血糖水平，是糖尿病近期內(nèi)控制的一個(gè)敏感指標(biāo)，對(duì)糖尿病人近是糖尿病近期內(nèi)控制的一個(gè)敏感指標(biāo)，對(duì)糖尿病人近期治療方案的制定和實(shí)施有指導(dǎo)作用。期治療方案的制定和實(shí)施有指導(dǎo)作用。56五五 胰島素（胰島素（INSINS）及）及胰島素釋放試驗(yàn)胰島素釋放試驗(yàn)INSINS