細胞融合和單克隆抗體PPT學習教案

1、會計學1細胞融合和單克隆抗體細胞融合和單克隆抗體6、動物細胞融合技術(shù)的應用第1頁/共30頁指用自然或人工方法使兩個或多個不同的細胞融合成一個細胞的過程。第2頁/共30頁滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通細胞膜連接細胞融合，形成雜種細胞原理：細胞膜的流動性第3頁/共30頁 細胞融合是正常的生命活動兩個細胞正在融合 受精作用第4頁/共30頁4、植物體細胞雜交和動物細胞融合第5頁/共30頁6、動物細胞融合技術(shù)的應用：細胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能。第6頁/共30頁 因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合，不滅活的話會感染

2、細胞，而不能誘導細胞融合。第7頁/共30頁二：動物細胞融合的成功應用 單克隆抗體的制備第8頁/共30頁輸入漿細胞動物體內(nèi) 某抗體 某抗原 第9頁/共30頁2.什么叫單克隆抗體 用單個B細胞進行克隆，得到的細胞群能夠分泌一種化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。怎樣才能獲得單克隆抗體？提示1：僅用細胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示2：我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的？提示3：有什么方法能使B細胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢？第10頁/共30頁雜交瘤細胞米爾斯坦(阿根廷)和科勒(德國)因此在1984年獲諾貝爾獎。第11頁/共30頁第12頁/共30頁提取用特定的選擇性培養(yǎng)

3、基 1. 動物特異性免疫2.注意B淋巴細胞是一個系列。（B1,B2,B3,-Bn）3.細胞融合: 三種融合方式4.第一次篩選：只有雜交瘤細胞存活。同種細胞的融合在此培養(yǎng)基上不能存活，但雜交瘤細胞也是一個系列, 。5.第二次篩選：每孔只放一個雜交瘤細胞?！翱寺』囵B(yǎng)”每個雜交瘤細胞，并進行“單一抗體檢測”，“檢測陽性”的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細胞。多孔培養(yǎng)板上6.選擇所需要的雜交瘤克隆細胞群第13頁/共30頁單抗的制備過程要點：第14頁/共30頁1)、本過程利用了哪些原理？免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2)、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的

4、遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體有無限增殖能力的細胞是腫瘤細胞，具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞，所以說，瘤細胞不能等于癌細胞。3)、骨髓瘤細胞是癌細胞嗎?第15頁/共30頁4)、整個制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選?第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種），第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。 由于該細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學性質(zhì)單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個細胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細胞，而是雜交瘤細胞。第16頁

5、/共30頁 特異性強，靈敏度高，可大量制備。第17頁/共30頁第18頁/共30頁一種誘導細胞融合的新方法一種新細胞滅活病毒雜交瘤細胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢第19頁/共30頁1在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）A結(jié)果是相同的B雜種細胞的形成過程基本相同C操作過程中酶的作用相同D誘導融合的手段相同第20頁/共30頁2. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（ ） 淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 B淋巴細胞自身融合細胞 小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞A BC D C第21頁/共3