高效液相色譜法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚顆粒的含量

1、高效液相色譜法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚顆粒的含量1218?安徽醫(yī)藥 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2011Oct;15(10) 高效液相色譜法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚顆粒的含量邵超,沈黎(安徽省阜陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所 ,安徽阜陽(yáng) 236015)摘要 : 目的建立對(duì)乙酰氨基酚顆粒含量的高效液相測(cè)定方法 .方法色譜柱為WatersSuufireC 柱(4.6mm x 150mill,5m),流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液(pH4.5) 甲醇(80:20),流速為1.0ml?min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254am柱溫為30C.結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚在 0.050.40g?L 濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系

2、(r=1 .0) ,平均加樣回收率為99.9%(n:5),RSD 為 0.59%.結(jié)論該方法準(zhǔn)確 ,可靠,可用于對(duì)乙酰氨基酚顆粒的含量測(cè)定 . 關(guān)鍵詞:高效液相色譜法 ;對(duì)乙酰氨基酚顆粒 ;含量測(cè)定 DeterminationofparacetamolgranulesbyHPLCSHA0Chao,SHENLi(InstituteforFoodandDrugControl,Fuyang,Anhui236015,China) Abstract;AinlToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofparacetamolgranules. MethodsWa

3、tersSunfireCI8column(4.6millX150mm,5Ixm)wasusedwitIlphosphatebufferingsolution(pH4.5)一methanol(80:20)asthemobilephase.Theflowratewas1.0mL?min .TheUVdetectionwavelengthwas254nm.andthecoumntemperaturewas30C.ResultsThecalibrationcurveofparacetamolWaslinearintherangeof0.050.40gL(r:1.0).Theaveragerecover

4、y(n=5)was99.9%andRSDwas0.59%.ConclusionThemethodisaccurate,reliable,andcanbeusedforthedeterminationofparaceta molgranules.Keywords:HPLC;paracetamolgranules;determination 對(duì)乙酰氨基酚顆粒是目前臨床中常用的一種解熱鎮(zhèn)痛 藥，適用于感冒,發(fā)燒等癥狀.中國(guó)藥典2010年版J,對(duì) 乙酰氨基酚顆粒的含量測(cè)定采用紫外分光光度法 ,該方法 繁瑣影響因素較多 .本文建立了高效液相色譜法測(cè)定對(duì)乙 酰氨基酚顆粒含量的方法 ,并進(jìn)行了方法學(xué)考察 ,

5、同時(shí)用高 效液相色譜法與中國(guó)藥典規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行比較 ,結(jié)果 致.本方法操作簡(jiǎn)便 ,專屬性高 ,重現(xiàn)性好,可以替代紫 外分光光度法 .1 儀器與試藥Waterse2695高效液相色譜儀，Waters2998紫外檢測(cè)器, Empower色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（美國(guó)Waters公司）.對(duì)乙酰氨 基酚對(duì)照品 （批號(hào):100018200408,中國(guó)藥品生物制品檢定 所），對(duì)乙酰氨基酚顆粒，規(guī)格為0.1g（某制藥有限公司，批 號(hào):101001;100806;100413）甲. 醇為色譜純 ,磷酸二氫鈉 ,磷 酸氫二鈉等均為分析純 .2 方法與結(jié)果2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱為 watersSun-

6、fireC.柱（4.6mmx 150mill,5m）;流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液 （pH4.5）（取磷酸二氫鈉二水合物15.o4g磷酸氫二鈉0.062 7g,加水溶解并稀釋至1000ml,調(diào)節(jié)pH值至4.5） 甲醇 （80:20）,流速為1.0ml?min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm,柱溫為 30C,進(jìn)樣量為10l.在此條件下，理論塔板數(shù)按對(duì)乙酰氨 基酚峰計(jì)算不低于 5000,與其他峰的分離度符合要求 .見(jiàn)圖1.O.o01.OO2.003.004.005.00/min0.001.002.003.004.005.00/minAB 圖 1 對(duì)照品及樣品色譜圖注:A.空白溶液色譜圖；B.對(duì)照品溶液色譜圖；C.樣

7、品溶液色譜圖;1對(duì)乙酰氨基酚 準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) ,第 1 6冊(cè),2003: 1 73.4孫旌文.HPLC法測(cè)定醋酸地塞米松片含量的不確定度分析J.藥物分析雜志，2010,30(9):1777 80.孫莉.HPLC法測(cè)定藥物含量的不確定度分析J.安徽醫(yī)藥， 2010,14(7):77677.6 崔冬梅.HPLC測(cè)定諾氟沙星膠囊含量的不確定度評(píng)定J.安77 徽醫(yī)藥,2010,14(12):1398400.范文莉，劉會(huì)艷.HPLC法測(cè)定葉酸片含量的測(cè)量不確定度評(píng)定J.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,7(26):48 9.孫莉.HPLC法測(cè)定炔諾酮片含量及含量均勻度的不確定度分析J.中國(guó)藥房,2009,20(4

8、):294-6. (收稿日期:20110225)安徽醫(yī)藥 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2011Oct；15(10)?1219?2.2溶液的制備2.2.1 對(duì)照品溶液精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品 25mg, 置50ml容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精取5 m1,置25m1容量瓶中,用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作 為對(duì)照品溶液 .2.2.2供試品溶液取本品 10袋內(nèi)容物,混合均勻 ,精密稱 取適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚25mg),置50ml容量瓶中， 用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml,置 25ml 容量瓶中 ,用流動(dòng)相稀

9、釋至刻度 ,搖勻,取續(xù)濾液作為供 試品溶液 .2.2.3空白溶液按處方工藝要求配制不含主藥的陰性樣 品,同供試品溶液的制備方法制成空白溶液后進(jìn)樣.結(jié)果表明 ,空白溶液對(duì)測(cè)定無(wú)干擾 .2.3 方法學(xué)考察線性關(guān)系考察 :按上述色譜條件 ,取對(duì)照 品溶液 ,分別進(jìn)樣 5,10,15,20,25,30,401注, 入液相色譜 儀 ,記錄色譜圖 .測(cè)得的峰面積分別為 1577456,3243281, 4909373,6562990,8207217,9882370,13189794以, 濃度（C）為橫坐標(biāo),峰面積（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸.得回歸 方程為A=33167813.8C 74407,r=1.0結(jié)

10、果表明,對(duì)乙 酰氨基酚在0.050.40g?l濃度范圍內(nèi)，其濃度與峰面積 呈良好的線性關(guān)系進(jìn)樣精密度試驗(yàn) :按上述色譜條件 ,取對(duì)照品溶液 ,重復(fù) 進(jìn)樣6次,每次 10,注入液相色譜儀 ,記錄色譜圖 ,其峰面 積分別為 3245227,3231728,3248963,3244262,3250063,3242289測(cè)得RSD值為0.21%.結(jié)果表明,本方法精 密度良好.穩(wěn)定性試驗(yàn) :按上述色譜條件 ,取對(duì)照品溶液 ,分別在 0,3,6,9,12,24h每次101,注入液相色譜儀，記錄色譜圖，其 峰面積分別為 3244262,3229452,3217395,3222396,3218215, 318

11、4652,測(cè)得 RSD 值為 0.62%.結(jié)果表明 ,對(duì)乙酰氨基酚在 24h內(nèi)穩(wěn)定.精密度一重現(xiàn)性試驗(yàn) :精密稱取同一樣品 （批號(hào)為 101001）5份,按上述色譜條件測(cè)定 .按供試品溶液的制備的 方法操作 ,測(cè)得其峰面積分別為 3038957,3044185,3006 901,3038600,3005220,3036015,RSD為 0.58%.結(jié)果表 明 ,本方法重現(xiàn)性良好 .加樣回收率試驗(yàn) :精密稱取已知含量的樣品 （批號(hào)為101001）細(xì)粉適量（約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚25mg）5份,置50 ml 容量瓶中 ,用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度 ,濾過(guò),精密量取續(xù) 濾液5m1,置50ml容量瓶中，再

12、分別精密加入濃度為0.5g? L的對(duì)照品溶液5ml,加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻.按上述 色譜條件，每次101,注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定加 樣回收率結(jié)果見(jiàn)表1.表 1 對(duì)乙酰氨基酚加樣回收率試驗(yàn) 2.4樣品含量測(cè)定的對(duì)比試驗(yàn)分別取 3 批樣品(批號(hào): 101001,100806,100413)按, 上述溶液的制備方法操作 ,取對(duì) 照品溶液與樣品溶液各101,注入液相色譜儀，記錄色譜 圖,按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量，并與中國(guó)藥典規(guī)定的 紫外分光光度法 (UV 法)測(cè)定的結(jié)果比較 .結(jié)果見(jiàn)表 2.表 2 樣品測(cè)定結(jié)果比較3 討論本文建立了 HPLC 法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚顆粒含量的方 法,重現(xiàn)性好

13、,準(zhǔn)確度高 .該高效液相色譜條件是參考相關(guān)文 獻(xiàn)對(duì)乙酰氨基酚泡騰片而確定的 .曾對(duì)流動(dòng)相用 0.05 moL-L 醋酸銨溶液一甲醇 (85:15)檢測(cè)波長(zhǎng) 257nm 進(jìn)行多 次比較，本文流動(dòng)相在254nm波長(zhǎng)處溶劑峰千擾小，主峰吸 收強(qiáng),此流動(dòng)相比例能使主峰在較短時(shí)間內(nèi)出峰 ,且分離度 好,最后確定使用本文流動(dòng)相 .本文使用的檢測(cè)器為二極管陣列檢測(cè)器 ,采用高效液相 色譜法,操作簡(jiǎn)單易行 ,線性關(guān)系良好 ,提高了含量測(cè)定結(jié)果 的準(zhǔn)確度 ,與中國(guó)藥典紫外分光光度法測(cè)定的結(jié)果無(wú)明顯差 異,可用于對(duì)乙酰氨基酚顆粒的含量測(cè)定 .參考文獻(xiàn) :1國(guó)家藥典委員會(huì)中國(guó)藥典:二部S北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版 社,2010:237.2國(guó)家藥典委員會(huì)中國(guó)藥典:二部S.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版 社,2010:236.3田磊.HPLC法同時(shí)測(cè)定復(fù)方銀翹氫敏膠囊中維生素C及對(duì)乙酰氨基酚的含量J.安徽醫(yī)藥，2010,14(9):1026-7.4甄錄旭，吳海林,方宗華，等.HPLC法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚維生素C分散片中的對(duì)乙酰氨基酚和維生素C含量J.安徽醫(yī)藥,2007,11(9):7924.夏方亮,王青青.HPLC法測(cè)定復(fù)方感冒靈膠囊中對(duì)乙酰氨基酚 和綠原酸的含量J中國(guó)藥事,2009,23(10):1009-10.胡海廷敬永升，王瑩.HPLC法測(cè)定治感佳膠囊中對(duì)乙酰氨 基酚的含量Jj河南大學(xué),2009,