下頜前突與正常人群中Nell1基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs61150458的研究

1、專專 業(yè)：業(yè)： 口腔正畸學(xué)口腔正畸學(xué)導(dǎo)導(dǎo) 師：師： 王小琴王小琴 教授教授研研 究究 生：生： 趙趙 華華mp有家族聚集傾向mp可能為常染色體顯性遺傳病 局部因素有一個(gè)影響mp的主基因且符合孟德爾遺傳 多因素影響 gheriani marazita 許多學(xué)者ricardo silviene 20032003年年 20072007年年1919世紀(jì)世紀(jì)國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀snpsnp位點(diǎn)位點(diǎn)基因基因gc蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)glu asp 天冬氨酸谷氨酸研究目的研究目的材料與方法材料與方法實(shí)驗(yàn)試劑與儀器實(shí)驗(yàn)試劑與儀器對(duì)照組(正常)：sna 、snb、 anb、上頜長(zhǎng)、 上頜位置、mp-fh 在正常范 圍

2、之內(nèi)， 2anb4實(shí)驗(yàn)組( mp ) ：sna、上頜長(zhǎng)、上頜位置、 mp-fh在正常范圍之內(nèi)， anb0。實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組6060人人對(duì)照組對(duì)照組4545人人采靜脈血采靜脈血5ml5ml提取全部提取全部dnadna設(shè)計(jì)相應(yīng)目的基因的引物設(shè)計(jì)相應(yīng)目的基因的引物pcrpcr擴(kuò)增目的基因擴(kuò)增目的基因hinfhinf 酶切酶切統(tǒng)計(jì)學(xué)分析統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟dna提取50lpcr50lpcr反應(yīng)體系反應(yīng)體系 試劑名稱劑量10buffer5lmgcl2(25mm)4ldntp(10mm)1l上游引物(10m)1l下游引物(10m)1ltaq酶0.4l模板dna10l三蒸水28lpcrpcr反應(yīng)參數(shù)反應(yīng)參

3、數(shù) 溫度（溫度（）時(shí)間時(shí)間預(yù)熱預(yù)熱94942min2min變性變性949420s20s退火退火565630s30s延伸延伸727230s30s循環(huán)次數(shù)循環(huán)次數(shù)3636次次 酶的確定酶的確定 hinf 5 g a n t c 3 3 c t n a g 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)結(jié) 果果電泳結(jié)果電泳結(jié)果目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物200bpmarker目的基因?qū)嶒?yàn)組酶切后凝膠電泳圖實(shí)驗(yàn)組酶切后凝膠電泳圖 100bp200bpgggg型酶切后片段長(zhǎng)度：型酶切后片段長(zhǎng)度：83bp83bp、134bp134bp；cccc型酶切后片段長(zhǎng)度：型酶切后片段長(zhǎng)度：217bp 217bp gcgc型酶切后片

4、段長(zhǎng)度：型酶切后片段長(zhǎng)度：83bp83bp、134bp 134bp 、 217bp217bp對(duì)照組酶切后凝膠電泳圖 100bp200bpgggg型酶切后片段長(zhǎng)度：型酶切后片段長(zhǎng)度：83bp83bp、134bp134bp；cccc型酶切后片段長(zhǎng)度：型酶切后片段長(zhǎng)度：217bp 217bp gcgc型酶切后片段長(zhǎng)度：型酶切后片段長(zhǎng)度：83bp83bp、134bp 134bp 、 217bp217bp組別等位基因x2p基因頻數(shù)頻率實(shí)驗(yàn)組g410.67c190.33對(duì)照組g280.620.4260.514c170.38 注：p0.05，即實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間等位基因頻率差異無顯著性。 組別基因型頻數(shù)頻率

5、x2p實(shí)驗(yàn)組gg320.52gc180.30cc100.18對(duì)照組gg230.511.8350.400gc100.22cc120.27 注：p0.05，即實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間的基因型分布差異無顯著性。 討討 論論nell-1nell-1基因的特點(diǎn)基因的特點(diǎn)結(jié)果分析結(jié)果分析由于實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的病例有限，對(duì)由于實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的病例有限，對(duì)nell-1nell-1基基因與因與mpmp患者的內(nèi)在聯(lián)系需增加樣本量做進(jìn)一步患者的內(nèi)在聯(lián)系需增加樣本量做進(jìn)一步的研究，對(duì)其它位點(diǎn)及二者之間的內(nèi)在聯(lián)系仍的研究，對(duì)其它位點(diǎn)及二者之間的內(nèi)在聯(lián)系仍需深入探討。需深入探討。nell-1nell-1基因的基因的rs61150458rs61150458多態(tài)性位點(diǎn)在中國(guó)漢族多態(tài)性位點(diǎn)在中國(guó)漢族mpmp人群與正常人群之間的等位基因頻率及基因人群與正常人