[] 水飛薊賓-磷脂酰膽堿復(fù)合物與水飛薊賓對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷保護作用的對比

1、水飛薊賓-磷脂酰膽堿復(fù)合物與水飛薊賓對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷保護作用的比照中國生化藥物雜志chinesejournalofbiochemicalpharmaceutics2004年第25卷第4期221水飛薊賓一磷脂酰膽堿復(fù)合物與水飛薊賓對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷保護作用的比照陳正躍,吳子釗,許建文,張光軍,程鋼(1.華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系,湖北武漢430000;2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥物研究室,河南新鄉(xiāng)453003)摘要:目的比擬水飛薊賓一磷脂酰膽堿復(fù)合物(spc)與水飛薊賓對四氯化碳所致的小鼠肝損傷的保護作用.方法50只小鼠隨機分成5組,通過對對照組,給藥組小鼠血清中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)

2、移酶(ast),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)及肝組織學(xué)觀察,比擬spc與水飛薊賓對四氯化碳所致小鼠肝損傷之預(yù)防作用的效果.結(jié)果水飛薊賓和spc均能降低小鼠血清aijt,ast活性,能減輕肝臟病理學(xué)變化,但以spc作用最為明顯.結(jié)論spc對四氯化碳造成的急性肝損傷有明顯的保護作用,spc的作用強于水飛薊賓.關(guān)鍵詞:水飛薊賓一磷脂酰膽堿復(fù)合物;水飛薊賓;四氯化碳;肝損傷中圖分類號:r9755文獻標(biāo)識碼:a文章編號:10051678(2004)04022103thecomparisonbetweenhepatoprotectiveeffectsofsilybinphosphatidylcholinec

3、ompoundandthoseofsilybinagainstacutehepaticdamageinducedbycarbontetrachlorideinmicechenzhengyue,wuzizhao2,xujianwen2,zhangguangjun,chenggang2(1.departmentofpathophysiology,tongjimedicalcollegeofhuazhonguniversityofscience&technology,wuhan430000,china;2.departmentofpharmaceuticallaboratory,xinxia

4、ngmedicalcollege,xinxiang453003,china)abstract:purposetoobservetheprotectiveeffectsofsilybinphosphatidylcholinecompound(spc)andthoseofsilybinonacutehepaticdamageinducedbycarbontetrachloride(cc14)inmice.methodsthewelldefinedmodelofliverinjuryhasbeenutilizedtostudythehepatoprotectiveefficacyofsilybina

5、ndspc.liverenzymesast,aandhepatichistologyformedthebasisforevaluatingefficacyofthetreatments.resultsspcandsilybincouldobviouslydecreasethelevelsofseillmastandalt.furthermore,spcshowedstrongereffectthanthatofsilybin.conclusiontheresultssuggestedthatspcpossessesexcellentprotectiveeffectsoncci4一induced

6、acutehepaticdamageinmice.keywords:silybinphosphatidylcholinecompound;silybin;cci4;hepaticdamage水飛薊賓(silybin)是水飛薊素(silymarin)中具有生物活性的主要成分,是經(jīng)典的肝損傷修復(fù)藥物,但由于其幾乎不溶于水,脂,生物利用度低,大大降低了臨床療效.磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine.1ecithin)不溶于水,丙酮,但溶于脂類溶劑如氯仿,石油醚,正己烷,苯,已醚等.為了提高水飛薊賓的生物利用度,增進其療效,作者合成了水飛薊賓一磷脂收稿13期:20030627;修回日期:

7、200311-10基金工程:河南省科技攻關(guān)工程(991180204)作者簡介:陳正躍(1961一),男,河南南陽人,博士在讀,副教授主要從事天然活性物質(zhì)方面的研究.酰膽堿復(fù)合物(silybinphosphatidylcholinecompound,spc)一,并對spc的急性毒性進行了研究,本文就spc與水飛薊賓對小鼠急性肝損傷保護作用進行了比照研究.1材料健康昆明種小白鼠,體重(222)g,雌性,50只,新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心.水飛薊賓,遼寧盤錦第三制藥廠;spc,新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥物研究室制備;將spc,水飛薊賓分別用0.5%羧甲基纖維素鈉(cmcna)配成15,30mrill的懸液備用.dat

8、ebehringrxl全自動生化分析儀,美國222中國生化藥物雜志chinesejoumalofbiociemicalpharmaceutics2004年第25卷第4期杜邦公司.2方法2.1模型的建立四氯化碳(cc1)溶于大豆色拉油,配成0.1%溶液,急性實驗時,腹腔注射10ml/kg,造成肝損傷模型.2.2動物分組及給藥方法小鼠50只隨機分成5組,每組10只,即正常對照組,cc1模型組,水飛薊賓組,spca組和spcb組.5組小鼠同時連續(xù)灌胃5d,1次/d,正常對照組和cc1模型組灌胃0.5%cmcna10ml/kg,水飛薊賓組灌胃15mg/ml水飛薊賓混懸液10ml/kg,spcb組和sp

9、ca組分別灌胃30mg/ml(約1/15ld50值,水飛薊賓凈含量為11.4mg/m1),15mg/ml(水飛薊賓凈含量為5.7mg/m1)spc混懸液10ml/kg.第6天,模型組,水飛薊賓組,spca組和spcb組均腹腔注射0.1%cc110ml/kg,正常對照組腹腔注射10ml/kg大豆色拉油.24h后(小鼠禁食12h,自由飲水),摘眼球采血,8000r/min離心5min,別離血清,用全自動生化分析儀測定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ast)的活性,并取每只小鼠同一葉肝臟部位大致相同的一小塊肝組織做病理組織學(xué)檢查,經(jīng)石蠟包埋切片和he染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察肝細

10、胞損傷程度.2.3實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)用xs表示,組間差異的顯著性采用t檢驗,應(yīng)用spss.10.0軟件進行分析.3結(jié)果3.1小鼠血清中alt和ast活性變化結(jié)果見表1.表1alt,ast活性的變化(n:10,s)組別,a(iu/l)ast/(iu/l)mg/(kg.d)與正常對照組比擬:p<0.01;與cc1模型組比擬:2p(o.05.p<0.01;與水飛薊賓組比擬:p<0.05由表1可見,cc1模型組alt,ast活性較正常對照組明顯升高(p<0.01);水飛薊賓組與cc1模型組比擬,alt,ast活性均有明顯下降,均有顯著性差異(p<0.05).spca組,sp

11、cb組與cc1模型組相比擬,ast,a活性均有極顯著差異(p<0.01).spcb組與水飛薊賓組的alt,ast活性相比均有顯著性差異(p<0.05),與正常對照組的ast,alt活性均無顯著差異.結(jié)果說明,spc具有抑制由cc1引起小鼠血清alt,ast活性升高的作用.3.2肝臟病理組織學(xué)檢查觀察發(fā)現(xiàn),正常對照組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)正常,肝細胞排列有序,肝小葉結(jié)構(gòu)完整,無肝細胞腫大及脂肪變性;cc1模型組小鼠中毒后組織學(xué)改變明顯,有肝小葉失去正常結(jié)構(gòu),肝細胞索排列紊亂,肝細胞疏松,有不同程度的水腫,體積增大,呈現(xiàn)氣球樣病變,血管充血(紅細胞較多),有炎癥細胞浸潤(中性粒細胞為主),嗜酸

12、性增強,局部細胞壞死等;水飛薊賓組,spca組,spcb組小鼠均有cc1模型組類似的組織病理改變,但病變程度均明顯減輕,尤其spcb組最輕.4討論cc1作為一個典型肝毒物質(zhì),進入體內(nèi)后,經(jīng)肝臟細胞色素p4激活,生成三氯甲基自由基(cc1?),通過氫吸附而攻擊內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的磷脂分子,引起膜的脂質(zhì)過氧化,cc1?繼而與膜脂和蛋白質(zhì)大分子進行共價結(jié)合,引起膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的破壞,cci?還可抑制細胞膜和微粒體膜上鈣泵的活性,使ca2離子內(nèi)流增加,從而引起細胞中毒死亡.水飛薊賓是一種抗氧自由基活性物質(zhì),其抗脂質(zhì)過氧化的作用已經(jīng)被實驗證實.水飛薊賓具有防止cc1誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化作用,即水飛薊賓減少cc1

13、的代謝激活生成的自由基和對這些自由基有去除作用.水飛薊賓能使cc1對脂質(zhì)的共價結(jié)合明顯減少.本實驗中,作者預(yù)先用spc和水飛薊賓對小鼠灌胃進行保護,可減輕cc1引起的小鼠血清ast,a活性的升高(與cc1模型組比擬p<0.01或p<0.05),從肝臟病理組織切片看,水飛薊賓和spc均能減輕肝組織損傷變化.說明spc和水飛薊賓對cc1所致小鼠急性肝損傷都有明顯的保護作用,其機理可能是通過抗脂質(zhì)過氧化的作用來保護肝細胞膜結(jié)構(gòu)的完整性,維持細胞膜的流動性;另外有報道j水飛薊賓能促進細胞dna及結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)等的合成,從而促進肝細胞修復(fù)和再生.從實驗結(jié)果看,spca組(以水飛薊賓計57mg/k

14、g)與水飛薊賓組(150mg/kg)對降低cc1引起的ast,alt活性比擬均無顯著差異(p>0.05),但從單純水飛薊賓含量上看,spc中的有效成分水飛薊中國生化藥物雜志chinesejournalofbiochemicalpharmaceutics2004年第25卷第4期223賓只占總量的38%,即spc150mg中只含水飛薊賓57mg.spcb組與水飛薊賓組(150mg/kg)對降低cc14引起的ast,alt活性比擬均有顯著差異(p<0.05),spc300mg中只含水飛薊賓114mg,相當(dāng)于水飛薊賓組用量的76%;此外,從肝臟病理組織學(xué)檢查結(jié)果看,spcb組病變程度最輕,

15、顯示spc的保護作用要強于單純水飛薊賓的保護作用,證明了spc的高效性.參考文獻:1florak,hahnm,roseh,eta1.milkthistle(silybumnaarianum)forthetherapv0fliverdiseasej.amjgastroenteral,1998,93(2):139143lupers.areviewofplantsusedinthetreatmentofliverdisease:pan1j.ahemmedrev,1998,3(6):410412.陳正躍,張光軍,許建文,等.水飛薊賓.磷脂酰膽堿復(fù)合物的制備及理化性質(zhì)j.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院,2000,17(4)

16、:237239.許建文,張光軍,陳正躍.水飛薊賓.卵磷脂復(fù)合物制備工藝比較研究j.中國生化藥物雜志,2002,23(5):245246.陳正躍,吳子釗,張光軍,等.水飛薊賓一磷脂酰膽堿復(fù)合物的急性毒性研究j.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院,2002,19(5):3522354.于樂成,顧長海.水飛薊素藥理學(xué)效應(yīng)研究進展j.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2001,21(8):493.494.孫鐵民,李銑.水飛薊素藥理研究進展j.中草藥,2000,31(3):229230.超臨界二氧化碳萃取和低溫工藝提取富集一亞麻酸沈曉京,賴炳森,吳紅梅,陳鎮(zhèn)童(解放軍北京軍醫(yī)學(xué)院全軍超臨界萃取技術(shù)醫(yī)學(xué)重點實驗室,北京100071)摘要:目的用

17、超臨界二氧化碳萃取和低溫濃縮技術(shù)提取富集亞麻酸.方法以超臨界提取的天然月見草油為原料,用低溫濃縮法富集高濃度亞麻酸;用氣相色譜法測定亞麻酸,并對溫度,時間,溶劑配比等條件進行比擬.結(jié)果一60c,原油:溶劑為1:10,冷凍8h,7-亞麻酸含量由6.82%提高到24.71%.結(jié)論該工藝簡便,無污染,利于工業(yè)化生產(chǎn).關(guān)鍵詞:超臨界萃取;低溫技術(shù);7-亞麻酸;富集;月見草油中圖分類號:r282.71文獻標(biāo)識碼:a文章編號:1005.1678(2004)04022303extractionandenrichment丫一linolenicacidbysupercriticalco2extractionan

18、dcryogenictechnologyshenxiaojing,laibingsen,wuhongmei,chenzhentong(medicalkeylaboratoryofsupercriticalfluidextractiontechnologyofpla,beijingmilitarymedic0lcollegeofp,beijing100071,china)abstract:purposetoextractandtoenrich7-linolenicacid(gla)bysupercriticalco,extractionanderyoeoneentrationtechnology.methodsnaturaleveningprimroseoilextractedbysupercriticalfluidwasusedasrawmateria1.highconcentrationofglawasenric