
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1、書山有路勤為徑,學(xué)海無涯苦作舟。電離輻射防護(hù)與輻射源安全基本標(biāo)準(zhǔn) 關(guān)于藥學(xué)院同位素實(shí)驗(yàn)室申請(qǐng)豁免的報(bào)告 設(shè)備處: 因科研工作需要,我院需要建立一個(gè)同位素實(shí)驗(yàn)室,用于放射性同位素的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。 我院結(jié)構(gòu)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的重要課題基于結(jié)構(gòu)的pde抑制劑設(shè)計(jì)和研究受到國(guó)家自然科學(xué)基金(面上項(xiàng)目)、中國(guó)博士后基金(面上項(xiàng)目和特別資助)及廣東省自然科學(xué)基金(面上項(xiàng)目)的資助,該實(shí)驗(yàn)將繼續(xù)進(jìn)行至少3年的時(shí)間,主要使用3h標(biāo)記的camp或cgmp作為示蹤底物測(cè)定環(huán)核苷酸磷酸二酯酶pde酶活性。另外,我院藥理毒理學(xué)、藥物化學(xué)等學(xué)科也需要迫切需要使用放射性同位素3h進(jìn)行科學(xué)研究。 基于上述目的,目前我院已經(jīng)購(gòu)買了
2、一臺(tái)perkinelmertri-carb2910tr液體閃爍分析儀,以方便開展同位素實(shí)驗(yàn)。該儀器目前由藥學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室管理,可對(duì)外開放,校內(nèi)外各單位老師都可在儀器負(fù)責(zé)人的監(jiān)管下,在符合國(guó)家相關(guān)法律法規(guī)規(guī)定的情況下使用。根據(jù)我們的預(yù)期,擬建立的同位素實(shí)驗(yàn)室將采用一般濕式操作進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。預(yù)計(jì)放射性核素的最大等效日操作量低于2107bq, 10最大等效年操作量低于10bq。 鑒于我們擬使用的同位素活度較低,且是在組織良好、人員訓(xùn)練有素的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究,因此特申請(qǐng)豁免。 望批準(zhǔn)。謝謝。 附件:pde活性測(cè)定方法 pde活性測(cè)定方法 1.2l0.20m氚代底物3h-camp或者3h-cgmp(sig
3、ma-aldrich,usa,20210-30000cpm/assay)用assaybuffer1(組成20mmtrishcl,10mmmgcl2,1mmdtt,ph值為7.5)或者assaybuffer2(組成20mmtrishcl,4mmmncl2,1mmdtt,ph值為7.5)稀釋至60l。 2.加入40l已用assaybuffer1或者assaybuffer2稀釋的蛋白質(zhì)緩沖液。 3.混合液在25下靜置反應(yīng)15min。 4.依次加入200l0.2mznso4和200l0.2mba(oh)2溶液,振蕩混合。 5.將混合物離心(14000rpm,5min)。 6.取上清液430l加入3.5mlliquidscintillationcocktails(scintisafeplustm50,fisherscientific,usa)7.振蕩混合后用petricarb2910計(jì)數(shù)器測(cè)量混合物。 8.camp水解率控制在20-35。 關(guān)于測(cè)定的說明: 1.所有反應(yīng)均在25下進(jìn)行。 2.所有容器均為一次性用品,無需洗滌。用完后按有無放射性分類收集。對(duì)有放射性的廢物,按固體、液體分別收集。無放射性污水從下水道排出。 3.放射性操作均在指定位置進(jìn)行,每次完成實(shí)驗(yàn)后需測(cè)定各操作位置的輻射情況,并記錄。 4.操作應(yīng)
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