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1、會(huì)計(jì)學(xué)1 成人高考數(shù)學(xué)試題及答案下高起點(diǎn)理工成人高考數(shù)學(xué)試題及答案下高起點(diǎn)理工 類類 第一節(jié)第一節(jié) 培養(yǎng)基選擇和配制的原則培養(yǎng)基選擇和配制的原則 n培養(yǎng)基培養(yǎng)基是人工配制的供微生物或動(dòng)植物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖和合是人工配制的供微生物或動(dòng)植物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖和合 成各種代謝產(chǎn)物所需要的、一定比例的多種成各種代謝產(chǎn)物所需要的、一定比例的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混 合物合物,同時(shí)培養(yǎng)基也為微生物等提供除營(yíng)養(yǎng)外的其他生長(zhǎng),同時(shí)培養(yǎng)基也為微生物等提供除營(yíng)養(yǎng)外的其他生長(zhǎng) 所必須的所必須的環(huán)境條件環(huán)境條件。 n培養(yǎng)基組成對(duì)菌體培養(yǎng)基組成對(duì)菌體生長(zhǎng)繁殖生長(zhǎng)繁殖、產(chǎn)物的、產(chǎn)物的生物合成生物合成、產(chǎn)品的、產(chǎn)品的分分 離精制

2、離精制乃至產(chǎn)品乃至產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量質(zhì)量和產(chǎn)量都有重要的影響。都有重要的影響。 n所有發(fā)酵培養(yǎng)基都必須提供微生物生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成所所有發(fā)酵培養(yǎng)基都必須提供微生物生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成所 需的需的碳源碳源、氮源氮源、無機(jī)元素?zé)o機(jī)元素、生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子、水水和和氧氣氧氣等。等。 n大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)中還必須重視培養(yǎng)基原料的大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)中還必須重視培養(yǎng)基原料的價(jià)格價(jià)格和和來源來源。 第1頁/共50頁 、培養(yǎng)基的類型和用途、培養(yǎng)基的類型和用途 1. 根據(jù)來源分:根據(jù)來源分: 2. 根據(jù)主要成分或使用目的分:根據(jù)主要成分或使用目的分: 3. 根據(jù)生產(chǎn)工業(yè)的要求分:根據(jù)生產(chǎn)工業(yè)的要求分: 天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基 合

3、成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基 半合成培養(yǎng)基半合成培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基 增殖培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基 孢子培養(yǎng)基孢子培養(yǎng)基供制備孢子用;供制備孢子用; 種子培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基滿足菌種生長(zhǎng);滿足菌種生長(zhǎng); 發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基滿足大生產(chǎn)中大量菌體生長(zhǎng)和繁殖以及代謝產(chǎn)物積累滿足大生產(chǎn)中大量菌體生長(zhǎng)和繁殖以及代謝產(chǎn)物積累 營(yíng)養(yǎng)不能太豐富,尤其是有機(jī)氮源;營(yíng)養(yǎng)不能太豐富,尤其是有機(jī)氮源; 無機(jī)鹽濃度要適量,否則會(huì)影響孢子量和孢子顏色;無機(jī)鹽濃度要適量,否則會(huì)影響孢子量和孢子顏色; 注意注意pH和濕度和濕度 營(yíng)養(yǎng)要求比較豐富和完全,氮源和維生素含量也要高一些營(yíng)養(yǎng)要求比較豐富

4、和完全,氮源和維生素含量也要高一些 除含有菌體生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)物外,還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體物質(zhì)和促進(jìn)劑等除含有菌體生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)物外,還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體物質(zhì)和促進(jìn)劑等 第2頁/共50頁 二、培養(yǎng)基類型的選擇二、培養(yǎng)基類型的選擇 1. 從微生物的特點(diǎn)來選擇從微生物的特點(diǎn)來選擇 2. 液體和固體培養(yǎng)基選擇液體和固體培養(yǎng)基選擇 3. 從生產(chǎn)實(shí)踐和科學(xué)試驗(yàn)的不同要求選擇從生產(chǎn)實(shí)踐和科學(xué)試驗(yàn)的不同要求選擇 4. 從經(jīng)濟(jì)效益方面考慮選擇生產(chǎn)原料從經(jīng)濟(jì)效益方面考慮選擇生產(chǎn)原料 第3頁/共50頁 三、培養(yǎng)基的配制原則三、培養(yǎng)基的配制原則 1.根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基根據(jù)不

5、同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基 2. 注意速效碳(氮)源和緩效碳(氮)源的配合使用,發(fā)注意速效碳(氮)源和緩效碳(氮)源的配合使用,發(fā) 揮各自的優(yōu)勢(shì)揮各自的優(yōu)勢(shì) 3. 營(yíng)養(yǎng)成分的恰當(dāng)配比(營(yíng)養(yǎng)成分的恰當(dāng)配比(C/N一般取一般取100 : 0.22.0) 4. 滲透壓,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要有合適的濃度滲透壓,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要有合適的濃度 5. 合適的合適的pH值(注意生理酸性鹽、生理堿性鹽和緩沖劑值(注意生理酸性鹽、生理堿性鹽和緩沖劑 的加入)的加入) 6. 氧化還原電位氧化還原電位 7. 考慮營(yíng)養(yǎng)成分的加入順序,避免生產(chǎn)沉淀考慮營(yíng)養(yǎng)成分的加入順序,避免生產(chǎn)沉淀 第4頁/共50頁 四、培養(yǎng)基成分配比的選擇四

6、、培養(yǎng)基成分配比的選擇 1.參照前人所使用的較適合于某一類菌種培養(yǎng)基的經(jīng)驗(yàn)配方參照前人所使用的較適合于某一類菌種培養(yǎng)基的經(jīng)驗(yàn)配方 2.結(jié)合所用菌種和產(chǎn)品的特性結(jié)合所用菌種和產(chǎn)品的特性 3.采用搖瓶、玻璃瓶等小型發(fā)酵設(shè)備,對(duì)碳、氮、無機(jī)鹽和前體采用搖瓶、玻璃瓶等小型發(fā)酵設(shè)備,對(duì)碳、氮、無機(jī)鹽和前體 等進(jìn)行逐個(gè)單因子試驗(yàn)等進(jìn)行逐個(gè)單因子試驗(yàn) 4.觀察這些因子對(duì)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成量的影響觀察這些因子對(duì)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成量的影響 5.綜合考慮各因素的影響綜合考慮各因素的影響 6.得到一個(gè)適合該菌種的培養(yǎng)基配方以得到高產(chǎn)得到一個(gè)適合該菌種的培養(yǎng)基配方以得到高產(chǎn) 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)減少試驗(yàn)次數(shù),確定

7、培養(yǎng)基組分和濃度減少試驗(yàn)次數(shù),確定培養(yǎng)基組分和濃度 方差分析方差分析了解哪些因素影響大,以引起注意了解哪些因素影響大,以引起注意 第5頁/共50頁 四、培養(yǎng)基成分配比的選擇四、培養(yǎng)基成分配比的選擇 a)氮源過多,菌體繁殖旺盛,氮源過多,菌體繁殖旺盛,pH值偏高,不利于代謝產(chǎn)物的積累;值偏高,不利于代謝產(chǎn)物的積累; b)氮源不足,菌體繁殖量少,影響產(chǎn)量。氮源不足,菌體繁殖量少,影響產(chǎn)量。 a.碳源過多,容易形成較低的碳源過多,容易形成較低的pH值;值; b.碳源不足,菌體衰老和自溶。碳源不足,菌體衰老和自溶。 C/N不當(dāng)影響菌體按比例吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),直接影響菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物形成。不當(dāng)影響菌體按比例吸

8、收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),直接影響菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物形成。 注意速效碳、氮源和緩效碳、氮源的相互配合,選用適當(dāng)?shù)淖⒁馑傩?、氮源和緩效碳、氮源的相互配合,選用適當(dāng)?shù)腃/N。 一般發(fā)酵工業(yè)中一般發(fā)酵工業(yè)中C/NC/N為為100100: :(0.20.22.02.0) 但對(duì)于氨基酸生產(chǎn),由于產(chǎn)物中含氮較多,因此但對(duì)于氨基酸生產(chǎn),由于產(chǎn)物中含氮較多,因此C/NC/N就要適當(dāng)調(diào)整,如就要適當(dāng)調(diào)整,如100100: :(15152121) 第6頁/共50頁 在發(fā)酵工業(yè)中,必須使用廉價(jià)的原料來配制培養(yǎng)基,使在發(fā)酵工業(yè)中,必須使用廉價(jià)的原料來配制培養(yǎng)基,使 之盡可能滿足下列條件:之盡可能滿足下列條件: 第7頁/共50頁 發(fā)酵

9、培養(yǎng)基例子發(fā)酵培養(yǎng)基例子 代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物 衣康酸衣康酸赤霉素赤霉素核黃素核黃素青霉素青霉素 培培 養(yǎng)養(yǎng) 基基 甘蔗糖蜜,甘蔗糖蜜,150g/L; ZnSO4,1.0g/L; MgSO4,3.0g/L; CuSO4,0.01g/L 葡萄糖,葡萄糖,20g/L; MgSO4,1.0g/L; NH4NO3,1.0g/L; KH2PO4,5.0g/L; FeSO47H2O,0.01g/L; MnSO44H2O,0.01g/L; ZnSO47H20, 0.01g/L; CuSO45H2O, 0.01g/L; 玉米漿(干固形物),玉米漿(干固形物), 7.5g/L 大豆油,大豆油,20mL/L; 甘油,

10、甘油,20mL/L; 葡萄糖,葡萄糖,20g/L; 玉米漿,玉米漿,12mL/L; 酪蛋白,酪蛋白,12g/L; KH2PO4,1.0g/L 葡萄糖或糖蜜,總量的葡萄糖或糖蜜,總量的10; 玉米漿,總量的玉米漿,總量的45; 苯乙酸,總量的苯乙酸,總量的0.50.8; 豬油或植物油;豬油或植物油; 消泡劑,總量的消泡劑,總量的0.5 第8頁/共50頁 一、工業(yè)上常用的碳源一、工業(yè)上常用的碳源 碳源碳源來源來源 葡萄糖葡萄糖純葡萄糖,水解淀粉純葡萄糖,水解淀粉 乳糖乳糖純?nèi)樘?,乳清粉純?nèi)樘?,乳清?淀粉淀粉大麥,花生粉,燕麥粉,黑麥粉,大豆粉等大麥,花生粉,燕麥粉,黑麥粉,大豆粉等 蔗糖蔗糖甜菜

11、糖蜜,甘蔗糖蜜,粗紅糖,精白糖等甜菜糖蜜,甘蔗糖蜜,粗紅糖,精白糖等 在微生物發(fā)酵過程中,普遍以碳水化合物作為碳源。在微生物發(fā)酵過程中,普遍以碳水化合物作為碳源。 生產(chǎn)疫苗時(shí)通常用牛血清蛋白、牛肉汁等蛋白質(zhì)作為碳源。生產(chǎn)疫苗時(shí)通常用牛血清蛋白、牛肉汁等蛋白質(zhì)作為碳源。 酒精、簡(jiǎn)單的有機(jī)酸、烷烴等含碳物質(zhì)也可作為碳源。酒精、簡(jiǎn)單的有機(jī)酸、烷烴等含碳物質(zhì)也可作為碳源。 甲醇作為底物生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白(甲醇作為底物生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白(SCP) 用烷烴進(jìn)行有機(jī)酸、維生素等的生產(chǎn)用烷烴進(jìn)行有機(jī)酸、維生素等的生產(chǎn) 碳源供給菌體生命活動(dòng)所需的能量和構(gòu)成菌體細(xì)胞以及代謝產(chǎn)物。碳源供給菌體生命活動(dòng)所需的能量和構(gòu)成菌體細(xì)

12、胞以及代謝產(chǎn)物。 第9頁/共50頁 二、工業(yè)上常用的氮源二、工業(yè)上常用的氮源 無機(jī)氮源:氨水,銨鹽,硝酸鹽等無機(jī)氮源:氨水,銨鹽,硝酸鹽等 有機(jī)氮源:玉米漿,豆餅粉,花生餅粉,棉籽粉,魚粉,酵母浸出液等有機(jī)氮源:玉米漿,豆餅粉,花生餅粉,棉籽粉,魚粉,酵母浸出液等 氮源主要構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì),作為酶的組成成分或維持酶的活性,調(diào)節(jié)滲透壓、氮源主要構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì),作為酶的組成成分或維持酶的活性,調(diào)節(jié)滲透壓、pH、Eh等。等。 工業(yè)上常用的氮源及含氮量(質(zhì)量分?jǐn)?shù)工業(yè)上常用的氮源及含氮量(質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%) 氮源氮源含氮量含氮量氮源氮源含氮量含氮量 大麥大麥1.52.0花生粉花生粉8.0 甜菜糖蜜甜菜糖蜜

13、1.52.0燕麥粉燕麥粉1.52.0 甘蔗糖蜜甘蔗糖蜜1.52.0大豆粉大豆粉8.0 玉米漿玉米漿4.5乳清粉乳清粉4.5 第10頁/共50頁 三、無機(jī)鹽三、無機(jī)鹽 無機(jī)鹽是微生物活動(dòng)不可缺少的物質(zhì)。無機(jī)鹽是微生物活動(dòng)不可缺少的物質(zhì)。 其主要功能是構(gòu)成菌體成分、作為酶的組成部分、酶的激活劑或抑制劑、調(diào)節(jié)培養(yǎng)滲透壓、調(diào)節(jié)其主要功能是構(gòu)成菌體成分、作為酶的組成部分、酶的激活劑或抑制劑、調(diào)節(jié)培養(yǎng)滲透壓、調(diào)節(jié)pH值和值和Eh等。等。 微生物對(duì)無機(jī)鹽的需要量很少,但無機(jī)鹽含量對(duì)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物的生成影響很大。微生物對(duì)無機(jī)鹽的需要量很少,但無機(jī)鹽含量對(duì)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物的生成影響很大。 1.磷酸鹽磷酸鹽 2.

14、硫酸鎂硫酸鎂 3. 鉀鹽鉀鹽 4. 微量元素微量元素 磷是某些蛋白質(zhì)和核酸的組成成分。磷是某些蛋白質(zhì)和核酸的組成成分。 磷酸鹽在培養(yǎng)基中還具有緩沖作用。磷酸鹽在培養(yǎng)基中還具有緩沖作用。 工業(yè)上常用工業(yè)上常用K3PO43H2O、K3PO4和和Na2HPO412H2O、NaH2PO42H2O等磷酸鹽,也可用磷酸。等磷酸鹽,也可用磷酸。 除了組成某些細(xì)胞的葉綠素成分外,并不參與任何細(xì)胞物質(zhì)的合成;除了組成某些細(xì)胞的葉綠素成分外,并不參與任何細(xì)胞物質(zhì)的合成; 處于離子狀態(tài)時(shí),是許多重要的酶(己糖磷酸化酶,檸檬酸脫氫酶、羧化酶等)的激活劑;處于離子狀態(tài)時(shí),是許多重要的酶(己糖磷酸化酶,檸檬酸脫氫酶、羧化

15、酶等)的激活劑; 不但影響基質(zhì)的氧化,還影響蛋白質(zhì)的合成不但影響基質(zhì)的氧化,還影響蛋白質(zhì)的合成 鉀離子與細(xì)胞滲透壓和透性有關(guān);鉀離子與細(xì)胞滲透壓和透性有關(guān); 是許多酶的激活劑;是許多酶的激活劑; 促進(jìn)糖代謝促進(jìn)糖代謝 Zn、Co、Mn、Cu等元素大部分作為酶的輔基和激活劑;等元素大部分作為酶的輔基和激活劑; 一般作為碳、氮源的農(nóng)副產(chǎn)品天然原料中,本身就含有某些微量元素,不必另加;一般作為碳、氮源的農(nóng)副產(chǎn)品天然原料中,本身就含有某些微量元素,不必另加; 特例:特例:VB12的生產(chǎn),由于鈷是其組成成分,的生產(chǎn),由于鈷是其組成成分,Co的需要量隨產(chǎn)物的增加而增加,因此在培養(yǎng)基中需加入氯化鈷以補(bǔ)充鈷的

16、需要量隨產(chǎn)物的增加而增加,因此在培養(yǎng)基中需加入氯化鈷以補(bǔ)充鈷 第11頁/共50頁 四、生長(zhǎng)因子四、生長(zhǎng)因子 從廣義來說,凡是微生物不可缺少的微量有機(jī)物質(zhì),如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱為生長(zhǎng)因子。從廣義來說,凡是微生物不可缺少的微量有機(jī)物質(zhì),如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱為生長(zhǎng)因子。 其功能是構(gòu)成細(xì)胞的組成分,促進(jìn)生命活動(dòng)的進(jìn)行。其功能是構(gòu)成細(xì)胞的組成分,促進(jìn)生命活動(dòng)的進(jìn)行。 生長(zhǎng)因子不是所有微生物都必需的,它只是對(duì)于某些自己不能合成這些成分的微生物才是必不可少的營(yíng)養(yǎng)物。生長(zhǎng)因子不是所有微生物都必需的,它只是對(duì)于某些自己不能合成這些成分的微生物才是必不可少的營(yíng)養(yǎng)物。 目前以糖質(zhì)原料為碳

17、源的谷氨酸產(chǎn)生菌均為生物素缺陷型,以生物素為生長(zhǎng)因子。目前以糖質(zhì)原料為碳源的谷氨酸產(chǎn)生菌均為生物素缺陷型,以生物素為生長(zhǎng)因子。 提供生長(zhǎng)因子的農(nóng)副產(chǎn)品原料提供生長(zhǎng)因子的農(nóng)副產(chǎn)品原料 1)玉米漿玉米漿 2)麩皮水解液麩皮水解液 3)糖蜜糖蜜 4)酵母:可用酵母膏、酵母浸出液或直接用酵母粉。酵母:可用酵母膏、酵母浸出液或直接用酵母粉。 第12頁/共50頁 第13頁/共50頁 五、前體物質(zhì)和促進(jìn)劑五、前體物質(zhì)和促進(jìn)劑 前體物質(zhì)前體物質(zhì) 某些化合物加到發(fā)酵培養(yǎng)基中,能直接被微生物在生物合成過程結(jié)合到產(chǎn)物分子中去,而其自身結(jié)構(gòu)并沒有多大變化,但產(chǎn)物的量卻因加入而有較大的提高。某些化合物加到發(fā)酵培養(yǎng)基中,

18、能直接被微生物在生物合成過程結(jié)合到產(chǎn)物分子中去,而其自身結(jié)構(gòu)并沒有多大變化,但產(chǎn)物的量卻因加入而有較大的提高。 有些氨基酸、核苷酸和抗生素發(fā)酵必須添加前體物質(zhì)才能獲得較高的產(chǎn)率。有些氨基酸、核苷酸和抗生素發(fā)酵必須添加前體物質(zhì)才能獲得較高的產(chǎn)率。 氨基酸發(fā)酵的前體物質(zhì)氨基酸發(fā)酵的前體物質(zhì) 氨基酸氨基酸菌體菌體前體物質(zhì)前體物質(zhì)產(chǎn)量產(chǎn)量/% 絲氨酸絲氨酸嗜甘油棒狀桿菌嗜甘油棒狀桿菌甘氨酸甘氨酸1.6 色氨酸色氨酸異常漢遜酵母異常漢遜酵母氨茴酸氨茴酸0.8 色氨酸色氨酸麥角菌麥角菌吲哚吲哚1.3 蛋氨酸蛋氨酸脫氫極毛桿菌脫氫極毛桿菌2-羥基羥基4-甲基硫代丁醇甲基硫代丁醇1.1 異亮氨酸異亮氨酸粘質(zhì)賽

19、桿菌粘質(zhì)賽桿菌-氨基丁酸氨基丁酸0.8 異亮氨酸異亮氨酸阿氏棒狀桿菌阿氏棒狀桿菌D-蘇氨酸蘇氨酸1.5 蘇氨酸蘇氨酸谷氨酸小球菌谷氨酸小球菌高絲氨酸高絲氨酸2.0 第14頁/共50頁 抗生素發(fā)酵常用的前體物質(zhì)抗生素發(fā)酵常用的前體物質(zhì) 抗生素抗生素前體物質(zhì)前體物質(zhì)抗生素抗生素前體物質(zhì)前體物質(zhì) 青霉素青霉素G苯乙酸或在發(fā)酵中能形成苯苯乙酸或在發(fā)酵中能形成苯 乙酸的物質(zhì),如乙基酰胺等乙酸的物質(zhì),如乙基酰胺等 金霉素金霉素氯化物氯化物 青霉素青霉素O烯丙基硫基乙酸烯丙基硫基乙酸溴四環(huán)素溴四環(huán)素溴化物溴化物 青霉素青霉素V苯氧乙酸苯氧乙酸紅霉素紅霉素丙酸、丙醇、丙酸鹽、丙酸、丙醇、丙酸鹽、 乙酸鹽乙酸鹽

20、 放線菌素放線菌素C3肌氨酸肌氨酸灰黃霉素灰黃霉素氯化物氯化物 鏈霉素鏈霉素肌醇、精氨酸、甲硫氨酸肌醇、精氨酸、甲硫氨酸 第15頁/共50頁 2. 發(fā)酵過程中的促進(jìn)劑和抑制劑發(fā)酵過程中的促進(jìn)劑和抑制劑 在氨基酸、抗生素和酶制劑發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)過程中,可以在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入某些對(duì)發(fā)酵起一定促進(jìn)作用的物質(zhì),稱為促進(jìn)劑或抑制劑。在氨基酸、抗生素和酶制劑發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)過程中,可以在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入某些對(duì)發(fā)酵起一定促進(jìn)作用的物質(zhì),稱為促進(jìn)劑或抑制劑。 常用促進(jìn)劑常用促進(jìn)劑 v表面活性劑表面活性劑洗凈劑(脂肪酰胺磺酸鈉)、吐溫洗凈劑(脂肪酰胺磺酸鈉)、吐溫80、植酸等、植酸等 v二乙胺四乙酸二乙胺四乙酸 v大豆

21、油抽提物大豆油抽提物 v黃血鹽黃血鹽 v甲醇甲醇 促進(jìn)劑能促進(jìn)產(chǎn)量增加的原因:促進(jìn)劑能促進(jìn)產(chǎn)量增加的原因: 主要是改進(jìn)了細(xì)胞的滲透性,增強(qiáng)了氧的傳遞速度,改善了菌體對(duì)氧的有效利用。主要是改進(jìn)了細(xì)胞的滲透性,增強(qiáng)了氧的傳遞速度,改善了菌體對(duì)氧的有效利用。 A.在酶制劑發(fā)酵過程中,加入某些誘導(dǎo)物、表面活性劑及其他一些產(chǎn)酶促進(jìn)劑,可以大大增加菌體的產(chǎn)酶量。在酶制劑發(fā)酵過程中,加入某些誘導(dǎo)物、表面活性劑及其他一些產(chǎn)酶促進(jìn)劑,可以大大增加菌體的產(chǎn)酶量。 第16頁/共50頁 B.抗生素工業(yè)在發(fā)酵過程中加入某些促進(jìn)劑或抑制劑,常可促進(jìn)抗生素的生物合成。抗生素工業(yè)在發(fā)酵過程中加入某些促進(jìn)劑或抑制劑,常可促進(jìn)抗

22、生素的生物合成。 抗生素的抑制劑抗生素的抑制劑 抗生素抗生素被抑制的產(chǎn)物被抑制的產(chǎn)物抑制劑抑制劑 鏈霉素鏈霉素甘露糖鏈霉素甘露糖鏈霉素甘露聚糖甘露聚糖 去甲基鏈霉素去甲基鏈霉素鏈霉素鏈霉素乙硫氨酸乙硫氨酸 四環(huán)素四環(huán)素金霉素金霉素溴化物、巰基苯并噻唑、溴化物、巰基苯并噻唑、 硫脲嘧啶、硫脲硫脲嘧啶、硫脲 去甲基金霉素去甲基金霉素金霉素金霉素磺胺化合物、乙硫氨酸磺胺化合物、乙硫氨酸 頭孢菌素頭孢菌素C頭孢菌素頭孢菌素NL-蛋氨酸蛋氨酸 利福霉素利福霉素B其他利福霉素其他利福霉素巴比妥藥物巴比妥藥物 不同促進(jìn)劑所起的作用:不同促進(jìn)劑所起的作用: i.起生長(zhǎng)因素的作用;起生長(zhǎng)因素的作用; ii.可推

23、遲菌體的自溶;可推遲菌體的自溶; iii.抑制某些合成其他產(chǎn)物的途徑而使之向所需產(chǎn)物的途徑轉(zhuǎn)化;抑制某些合成其他產(chǎn)物的途徑而使之向所需產(chǎn)物的途徑轉(zhuǎn)化; iv.降低了生產(chǎn)菌的呼吸,使之有利于抗生素的合成;降低了生產(chǎn)菌的呼吸,使之有利于抗生素的合成; v.改變發(fā)酵液的物理性質(zhì),改善通氣效果;改變發(fā)酵液的物理性質(zhì),改善通氣效果; vi.可與抗生素形成復(fù)鹽,降低發(fā)酵液中抗生素的濃度和促進(jìn)抗生素的合成等。可與抗生素形成復(fù)鹽,降低發(fā)酵液中抗生素的濃度和促進(jìn)抗生素的合成等。 第17頁/共50頁 第18頁/共50頁 一、滅菌的方法一、滅菌的方法 第19頁/共50頁 l進(jìn)行干熱滅菌時(shí),微生物細(xì)胞發(fā)生氧化,微生物

24、體內(nèi)蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃進(jìn)行干熱滅菌時(shí),微生物細(xì)胞發(fā)生氧化,微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃 縮引起中毒等作用,氧化作用導(dǎo)致微生物死亡是主要依據(jù)??s引起中毒等作用,氧化作用導(dǎo)致微生物死亡是主要依據(jù)。 l由于微生物對(duì)于熱的耐受力比對(duì)濕熱強(qiáng)得多,故干熱滅菌所需的溫度要高,由于微生物對(duì)于熱的耐受力比對(duì)濕熱強(qiáng)得多,故干熱滅菌所需的溫度要高, 時(shí)間要長(zhǎng),一般時(shí)間要長(zhǎng),一般160160170170、1 11.5h1.5h。 l實(shí)際應(yīng)用時(shí),對(duì)一些要求保持干燥的實(shí)驗(yàn)器具和材料可以采用干熱滅菌法。實(shí)際應(yīng)用時(shí),對(duì)一些要求保持干燥的實(shí)驗(yàn)器具和材料可以采用干熱滅菌法。 l利用火焰直接殺死微生物的滅菌法稱為火焰滅菌法。該

25、法方法簡(jiǎn)單,滅菌徹利用火焰直接殺死微生物的滅菌法稱為火焰滅菌法。該法方法簡(jiǎn)單,滅菌徹 底,但使用范圍有限,僅適用于接種針、玻璃棒、三角瓶口等的滅菌。底,但使用范圍有限,僅適用于接種針、玻璃棒、三角瓶口等的滅菌。 l利用電磁波、紫外線、利用電磁波、紫外線、X X射線、射線、射線或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的高能粒子進(jìn)行射線或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的高能粒子進(jìn)行 滅菌,以紫外線最常用。滅菌,以紫外線最常用。 l紫外線對(duì)芽胞和營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞都能起作用,但細(xì)菌芽胞和霉菌孢子對(duì)紫外線的紫外線對(duì)芽胞和營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞都能起作用,但細(xì)菌芽胞和霉菌孢子對(duì)紫外線的 抵抗力強(qiáng)。抵抗力強(qiáng)。 l紫外線的穿透力低,僅適用于表面滅菌和無菌室、培養(yǎng)室等空間

26、的滅菌,紫外線的穿透力低,僅適用于表面滅菌和無菌室、培養(yǎng)室等空間的滅菌, 對(duì)固體物料滅菌不徹底,也不能用于液體物料的滅菌。對(duì)固體物料滅菌不徹底,也不能用于液體物料的滅菌。 l250250270nm270nm之間殺菌效率高,以波長(zhǎng)在之間殺菌效率高,以波長(zhǎng)在260nm260nm左右滅菌效率最高。左右滅菌效率最高。 l除紫外線外,除紫外線外,X X射線和射線和射線也可進(jìn)行滅菌。射線也可進(jìn)行滅菌。 一、滅菌的方法一、滅菌的方法 l利用利用飽和蒸汽飽和蒸汽進(jìn)行滅菌進(jìn)行滅菌 l原理原理:水的沸點(diǎn)隨水蒸氣壓力的增加而上升,高壓情況下可獲得高溫的:水的沸點(diǎn)隨水蒸氣壓力的增加而上升,高壓情況下可獲得高溫的 水蒸

27、汽。借助蒸汽的高溫和蒸汽釋放的潛熱使微生物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、酶水蒸汽。借助蒸汽的高溫和蒸汽釋放的潛熱使微生物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、酶 和核酸分子內(nèi)部的化學(xué)鍵,特別是氫鍵受到破壞,引起不可逆的變性,使和核酸分子內(nèi)部的化學(xué)鍵,特別是氫鍵受到破壞,引起不可逆的變性,使 微生物死亡微生物死亡 l從從滅菌效果滅菌效果來看,由于蒸汽有很強(qiáng)的穿透能力,濕熱滅菌對(duì)耐熱芽胞桿來看,由于蒸汽有很強(qiáng)的穿透能力,濕熱滅菌對(duì)耐熱芽胞桿 菌來說,溫度升高菌來說,溫度升高10時(shí),滅菌速度常數(shù)可增加時(shí),滅菌速度常數(shù)可增加8 81010倍,對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞更高倍,對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞更高 。另外蒸汽冷凝為水時(shí)還要釋放出潛熱,因此溫度可進(jìn)一步提高。另外

28、蒸汽冷凝為水時(shí)還要釋放出潛熱,因此溫度可進(jìn)一步提高 l蒸汽來源方便,價(jià)格低廉,滅菌效果可靠蒸汽來源方便,價(jià)格低廉,滅菌效果可靠 l濕熱滅菌法是目前最常用的滅菌方法,一般的濕熱滅菌條件為濕熱滅菌法是目前最常用的滅菌方法,一般的濕熱滅菌條件為121, 30min l某些化學(xué)藥劑能與微生物發(fā)生反應(yīng)而具有殺菌的作用。某些化學(xué)藥劑能與微生物發(fā)生反應(yīng)而具有殺菌的作用。 l化學(xué)藥劑適用于生產(chǎn)車間環(huán)境的滅菌,接種操作前小型器化學(xué)藥劑適用于生產(chǎn)車間環(huán)境的滅菌,接種操作前小型器 具的滅菌等。具的滅菌等。 l化學(xué)藥品的滅菌使用方法,根據(jù)滅菌對(duì)象的不同有浸泡、化學(xué)藥品的滅菌使用方法,根據(jù)滅菌對(duì)象的不同有浸泡、 添加、

29、擦拭、噴灑、氣態(tài)熏蒸等。添加、擦拭、噴灑、氣態(tài)熏蒸等。 第20頁/共50頁 藥劑藥劑殺菌原理殺菌原理使用濃度使用濃度 高錳酸鉀高錳酸鉀使蛋白質(zhì)、氨基酸氧化從而使微生物死亡。使蛋白質(zhì)、氨基酸氧化從而使微生物死亡。0.13 漂白粉漂白粉 次氯酸鈉在水溶液中分解為新生態(tài)氧和氯,使細(xì)次氯酸鈉在水溶液中分解為新生態(tài)氧和氯,使細(xì) 菌受強(qiáng)烈氧化作用而導(dǎo)致死亡。菌受強(qiáng)烈氧化作用而導(dǎo)致死亡。 1 5% 酒精溶液酒精溶液 使細(xì)胞脫水,引起蛋白質(zhì)凝固變性。對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞、使細(xì)胞脫水,引起蛋白質(zhì)凝固變性。對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞、 病毒、霉菌孢子均有殺死作用。病毒、霉菌孢子均有殺死作用。 75 新潔而滅新潔而滅 表面活性劑類潔凈消毒劑

30、,在水溶液中以陽離子表面活性劑類潔凈消毒劑,在水溶液中以陽離子 形式與菌體表面結(jié)合,引起菌體外膜損傷和蛋白形式與菌體表面結(jié)合,引起菌體外膜損傷和蛋白 質(zhì)變性。一般用于器具和生產(chǎn)環(huán)境的消毒,不能質(zhì)變性。一般用于器具和生產(chǎn)環(huán)境的消毒,不能 與合成洗滌劑合用。與合成洗滌劑合用。 0.25 甲醛甲醛強(qiáng)還原劑,與氨基結(jié)合使蛋白質(zhì)或酶變性。強(qiáng)還原劑,與氨基結(jié)合使蛋白質(zhì)或酶變性。 2份份37甲醛溶甲醛溶 液液1份份KMnO4; 37甲醛溶液加甲醛溶液加 熱熱 過氧乙酸過氧乙酸 強(qiáng)氧化劑,廣譜、高效、速效,對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)強(qiáng)氧化劑,廣譜、高效、速效,對(duì)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞、細(xì) 菌芽胞、真菌孢子和病毒都有殺滅作用。菌芽胞、真

31、菌孢子和病毒都有殺滅作用。 戊二酸戊二酸在堿性條件下具有殺死芽胞的能力在堿性條件下具有殺死芽胞的能力2 酚類酚類如石炭酸(來蘇爾)如石炭酸(來蘇爾)15 第21頁/共50頁 二、濕熱滅菌的原理二、濕熱滅菌的原理 1. 微生物的熱阻微生物的熱阻 每一種微生物都有一定的最適生長(zhǎng)溫度范圍,當(dāng)微生物處于最低限每一種微生物都有一定的最適生長(zhǎng)溫度范圍,當(dāng)微生物處于最低限 溫度以下時(shí),代謝作用幾乎停止而處于休眠狀態(tài)。當(dāng)溫度超過最高限度溫度以下時(shí),代謝作用幾乎停止而處于休眠狀態(tài)。當(dāng)溫度超過最高限度 時(shí),微生物細(xì)胞中的原生質(zhì)體和酶的基本成分時(shí),微生物細(xì)胞中的原生質(zhì)體和酶的基本成分蛋白質(zhì)發(fā)生不可逆的蛋白質(zhì)發(fā)生不可

32、逆的 變化,即凝固變性,使微生物在很短時(shí)間內(nèi)死亡。變化,即凝固變性,使微生物在很短時(shí)間內(nèi)死亡。 濕熱滅菌就是根據(jù)微生物的這種特性進(jìn)行的濕熱滅菌就是根據(jù)微生物的這種特性進(jìn)行的 l一般無芽胞細(xì)菌,在一般無芽胞細(xì)菌,在60下經(jīng)過下經(jīng)過10min即可全部殺死;即可全部殺死; l芽胞細(xì)菌的芽胞在芽胞細(xì)菌的芽胞在100下經(jīng)過幾分鐘至數(shù)小時(shí)才能殺死;下經(jīng)過幾分鐘至數(shù)小時(shí)才能殺死; l某些嗜熱菌能在某些嗜熱菌能在120下耐受下耐受2030min。 l一般講,一般講,滅菌的徹底與否滅菌的徹底與否 以以 能否殺死芽胞細(xì)菌為標(biāo)準(zhǔn)。能否殺死芽胞細(xì)菌為標(biāo)準(zhǔn)。 第22頁/共50頁 二、濕熱滅菌的原理二、濕熱滅菌的原理 致

33、死溫度致死溫度:殺死微生物的最低溫度。:殺死微生物的最低溫度。 致死時(shí)間致死時(shí)間:在致死溫度下,殺死全部微生物所需的時(shí)間。:在致死溫度下,殺死全部微生物所需的時(shí)間。 在致死溫度以上,溫度愈高,致死時(shí)間愈短。在致死溫度以上,溫度愈高,致死時(shí)間愈短。 由于一般細(xì)菌、產(chǎn)芽胞細(xì)菌、微生物細(xì)胞和微生物孢子對(duì)熱的抵抗力不同由于一般細(xì)菌、產(chǎn)芽胞細(xì)菌、微生物細(xì)胞和微生物孢子對(duì)熱的抵抗力不同 ,因此,它們的致死溫度和致死時(shí)間也有差別。,因此,它們的致死溫度和致死時(shí)間也有差別。 微生物對(duì)熱的抵抗力常用微生物對(duì)熱的抵抗力常用“熱阻熱阻”表示表示 熱阻熱阻:微生物在某一特定條件下(主要是溫度和加熱方式)下的致死時(shí)間:

34、微生物在某一特定條件下(主要是溫度和加熱方式)下的致死時(shí)間 。 相對(duì)熱阻相對(duì)熱阻:某一微生物在某條件下的致死時(shí)間與另一微生物在相同條件下:某一微生物在某條件下的致死時(shí)間與另一微生物在相同條件下 的致死時(shí)間的比值。的致死時(shí)間的比值。 微生物對(duì)濕熱微生物對(duì)濕熱 的相對(duì)抵抗力的相對(duì)抵抗力 微生物微生物大腸桿菌大腸桿菌細(xì)菌芽胞細(xì)菌芽胞霉菌孢子霉菌孢子病毒病毒 相對(duì)抵抗力相對(duì)抵抗力1300000021015 第23頁/共50頁 二、濕熱滅菌的原理二、濕熱滅菌的原理 2. 微生物的熱死規(guī)律微生物的熱死規(guī)律對(duì)數(shù)殘留定律對(duì)數(shù)殘留定律 微生物熱死微生物熱死:指微生物受熱失活直到死亡,主要是由于微:指微生物受熱失

35、活直到死亡,主要是由于微 生物細(xì)胞內(nèi)酶蛋白受熱凝固,喪失活力所致。生物細(xì)胞內(nèi)酶蛋白受熱凝固,喪失活力所致。 在微生物受熱失活的過程中,微生物不斷被殺死,活菌數(shù)不斷被減少在微生物受熱失活的過程中,微生物不斷被殺死,活菌數(shù)不斷被減少 。 微生物熱死速率可以用分子反應(yīng)速率來表示,即微生物活體個(gè)數(shù)減少微生物熱死速率可以用分子反應(yīng)速率來表示,即微生物活體個(gè)數(shù)減少 的速度與任一瞬間殘存的菌數(shù)成正比。的速度與任一瞬間殘存的菌數(shù)成正比。 d N d t = -k N N培養(yǎng)基中殘留活菌數(shù),個(gè);培養(yǎng)基中殘留活菌數(shù),個(gè); t受熱時(shí)間,受熱時(shí)間,min; k反應(yīng)速率常數(shù),或比死亡速率常數(shù),反應(yīng)速率常數(shù),或比死亡速率

36、常數(shù),min-1。 反應(yīng)速率常數(shù)反應(yīng)速率常數(shù)k隨微生物種類和加熱溫度而變化。隨微生物種類和加熱溫度而變化。 t= 2.303 k lgN0 Nt 對(duì)數(shù)殘留定律對(duì)數(shù)殘留定律 N0開始滅菌時(shí)原菌數(shù),個(gè)開始滅菌時(shí)原菌數(shù),個(gè) Nt經(jīng)時(shí)間經(jīng)時(shí)間t后殘留菌數(shù),個(gè)。后殘留菌數(shù),個(gè)。 第24頁/共50頁 二、濕熱滅菌的原理二、濕熱滅菌的原理 1/10衰減時(shí)間衰減時(shí)間D: 活菌數(shù)在受熱過程中減少到原菌數(shù)的活菌數(shù)在受熱過程中減少到原菌數(shù)的1/10時(shí)所需的時(shí)間。時(shí)所需的時(shí)間。 D= 2.303 k l隨時(shí)間的延長(zhǎng),加熱滅菌后的殘存菌數(shù)呈對(duì)數(shù)減少,且溫度越高,死亡隨時(shí)間的延長(zhǎng),加熱滅菌后的殘存菌數(shù)呈對(duì)數(shù)減少,且溫度越

37、高,死亡 越快。越快。通常必要的滅菌時(shí)間是通常必要的滅菌時(shí)間是110130,5 520min20min。 l芽胞對(duì)熱耐受力強(qiáng),為此需要更高的溫度并維持更長(zhǎng)的時(shí)間。芽胞對(duì)熱耐受力強(qiáng),為此需要更高的溫度并維持更長(zhǎng)的時(shí)間。 l對(duì)細(xì)菌芽胞來說,并不始終符合對(duì)數(shù)殘留規(guī)律,特別是在受熱后很短的對(duì)細(xì)菌芽胞來說,并不始終符合對(duì)數(shù)殘留規(guī)律,特別是在受熱后很短的 時(shí)間內(nèi),培養(yǎng)液中油脂、糖類及一定濃度的蛋白質(zhì)會(huì)增加微生物的耐熱性時(shí)間內(nèi),培養(yǎng)液中油脂、糖類及一定濃度的蛋白質(zhì)會(huì)增加微生物的耐熱性 ;高濃度鹽類、色素能削減其耐熱性。;高濃度鹽類、色素能削減其耐熱性。 l隨著滅菌條件的加強(qiáng),培養(yǎng)基成分的熱變性加速,特別是維

38、生素,因此隨著滅菌條件的加強(qiáng),培養(yǎng)基成分的熱變性加速,特別是維生素,因此 培養(yǎng)液滅菌一般都采用培養(yǎng)液滅菌一般都采用高溫短時(shí)間加熱高溫短時(shí)間加熱的方式的方式,這樣可以達(dá)到徹底滅菌和,這樣可以達(dá)到徹底滅菌和 把營(yíng)養(yǎng)成分的破壞減少到最低限度的目的。把營(yíng)養(yǎng)成分的破壞減少到最低限度的目的。 第25頁/共50頁 一般考慮產(chǎn)芽胞細(xì)菌和細(xì)菌的芽胞之和作為計(jì)算依據(jù)。一般考慮產(chǎn)芽胞細(xì)菌和細(xì)菌的芽胞之和作為計(jì)算依據(jù)。 在設(shè)計(jì)時(shí)常采用在設(shè)計(jì)時(shí)常采用Nt0.001(即(即1000次滅菌中有一次失敗的機(jī)會(huì))。次滅菌中有一次失敗的機(jī)會(huì))。 n反應(yīng)速率常數(shù)反應(yīng)速率常數(shù)k是微生物耐熱性的一種特征,它隨微生物的種類和滅菌溫是微生

39、物耐熱性的一種特征,它隨微生物的種類和滅菌溫 度而異。度而異。 n在相同的溫度下,在相同的溫度下,k值愈小,則此微生物愈耐熱。值愈小,則此微生物愈耐熱。 n同一種微生物在不同的滅菌溫度下,同一種微生物在不同的滅菌溫度下,k值不同,滅菌溫度愈低,值不同,滅菌溫度愈低,k值愈低值愈低 。 某些芽胞細(xì)菌某些芽胞細(xì)菌 的的k值值 細(xì)菌名稱細(xì)菌名稱k值值/min-1 枯草芽胞桿菌枯草芽胞桿菌3.82.6 硬脂嗜熱芽胞桿菌硬脂嗜熱芽胞桿菌FS15180.77 硬脂嗜熱芽胞桿菌硬脂嗜熱芽胞桿菌FS6172.9 產(chǎn)氣梭狀芽胞桿菌產(chǎn)氣梭狀芽胞桿菌PA36791.8 第26頁/共50頁 二、濕熱滅菌的原理二、濕熱

40、滅菌的原理 3. 培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程 阿倫尼烏斯方程阿倫尼烏斯方程 dc dt =-kc k=Ae-E/RT 反應(yīng)速率常數(shù)與溫度的關(guān)系反應(yīng)速率常數(shù)與溫度的關(guān)系 c反應(yīng)物濃度,反應(yīng)物濃度,mol/L; t反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)時(shí)間,min; k化學(xué)反應(yīng)常數(shù)(隨溫度及反應(yīng)類型而變),化學(xué)反應(yīng)常數(shù)(隨溫度及反應(yīng)類型而變),min-1。 A頻率因子;頻率因子; E反應(yīng)所需的活化能,反應(yīng)所需的活化能,J/mol; T絕對(duì)溫度,絕對(duì)溫度,K。 p雜菌的死亡也屬于一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程,與上式類似。雜菌的死亡也屬于一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程,與上式類似。 p一般殺滅微生物營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的一

41、般殺滅微生物營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的E值約為值約為2.091052.71105J/mol; p殺死微生物芽胞的殺死微生物芽胞的E值約為值約為4.48105J/mol; p一般酶及維生素等營(yíng)養(yǎng)成分分解的一般酶及維生素等營(yíng)養(yǎng)成分分解的E值為值為8.361038.36104J/mol。 第27頁/共50頁 p由于滅菌時(shí)的活化能由于滅菌時(shí)的活化能E大于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分破壞的活化能大于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分破壞的活化能E,因此,隨,因此,隨 著溫度升高,滅菌速率常數(shù)增加的倍數(shù)著溫度升高,滅菌速率常數(shù)增加的倍數(shù)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分分解的速率常培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分分解的速率常 數(shù)的增加倍數(shù)。即當(dāng)滅菌溫度升高時(shí),微生物殺滅速度提高,超過了培

42、養(yǎng)數(shù)的增加倍數(shù)。即當(dāng)滅菌溫度升高時(shí),微生物殺滅速度提高,超過了培養(yǎng) 基營(yíng)養(yǎng)成分破壞的速度?;鶢I(yíng)養(yǎng)成分破壞的速度。 p據(jù)測(cè)定,每升高據(jù)測(cè)定,每升高10,速率常數(shù)的增加倍數(shù)為,速率常數(shù)的增加倍數(shù)為Q Q10 10。 。 p在熱滅菌的過程中,同時(shí)發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基成分破壞兩個(gè)過程。在熱滅菌的過程中,同時(shí)發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基成分破壞兩個(gè)過程。 p溫度能加速其過程進(jìn)行的速度,當(dāng)溫度升高時(shí),微生物死亡的速度更快溫度能加速其過程進(jìn)行的速度,當(dāng)溫度升高時(shí),微生物死亡的速度更快 , p因此可以因此可以采用較高的溫度,較短的滅菌時(shí)間采用較高的溫度,較短的滅菌時(shí)間,以減少培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的,以減少培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分

43、的 破壞,這就是通常所說的破壞,這就是通常所說的“高溫瞬時(shí)滅菌法高溫瞬時(shí)滅菌法”。 一般化學(xué)反應(yīng)一般化學(xué)反應(yīng)Q10為為1.52.0; 殺滅芽胞的反應(yīng)殺滅芽胞的反應(yīng)Q10為為510; 殺滅微生物細(xì)胞的反應(yīng)殺滅微生物細(xì)胞的反應(yīng)Q10為為35左右。左右。 第28頁/共50頁 不同滅菌條件下培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分破壞情況不同滅菌條件下培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分破壞情況 溫度溫度/滅菌時(shí)間滅菌時(shí)間/min營(yíng)養(yǎng)成分破壞營(yíng)養(yǎng)成分破壞/% 10040099.3 1103067 1151550 120427 1300.58 1400.082 1500.018080,進(jìn)蒸氣口(蒸氣閥)關(guān)掉,出蒸氣口(排氣閥,進(jìn)蒸氣口(蒸氣閥)關(guān)掉,

44、出蒸氣口(排氣閥 )關(guān)小。打開空氣閥,蒸氣直接進(jìn)罐,)關(guān)小。打開空氣閥,蒸氣直接進(jìn)罐,121121,202030min30min。 從從8080100100上升很快,大于上升很快,大于100100后溫度上升很慢,到后溫度上升很慢,到118118時(shí)時(shí) 就開始計(jì)時(shí),到計(jì)時(shí)就開始計(jì)時(shí),到計(jì)時(shí)25min25min時(shí)立即關(guān)掉蒸氣閥。時(shí)立即關(guān)掉蒸氣閥。 關(guān)掉蒸氣閥后通入無菌空氣,使罐內(nèi)一直保持正壓(高于大氣壓關(guān)掉蒸氣閥后通入無菌空氣,使罐內(nèi)一直保持正壓(高于大氣壓 ,空氣不會(huì)倒灌入罐內(nèi))。,空氣不會(huì)倒灌入罐內(nèi))。 (在夾套中)(在夾套中)立即加自來水冷卻,從下向上,使溫度盡快降到立即加自來水冷卻,從下向上

45、,使溫度盡快降到 5555左右,到左右,到37373838時(shí)關(guān)掉水,也有緩沖性。時(shí)關(guān)掉水,也有緩沖性。 因?yàn)橛芯彌_性,蒸氣會(huì)沖到因?yàn)橛芯彌_性,蒸氣會(huì)沖到121。 在在80以上沖入蒸氣不容易產(chǎn)生冷凝水,罐內(nèi)體積不會(huì)增加很大,培養(yǎng)基不會(huì)被稀釋很大。以上沖入蒸氣不容易產(chǎn)生冷凝水,罐內(nèi)體積不會(huì)增加很大,培養(yǎng)基不會(huì)被稀釋很大。 過程過程 : 第39頁/共50頁 四、大量培養(yǎng)基的滅菌四、大量培養(yǎng)基的滅菌 1. 培養(yǎng)基濕熱滅菌方法培養(yǎng)基濕熱滅菌方法 (3)固體培養(yǎng)基滅菌)固體培養(yǎng)基滅菌 第40頁/共50頁 四、大量培養(yǎng)基的滅菌四、大量培養(yǎng)基的滅菌 2. 影響培養(yǎng)基滅菌的因素影響培養(yǎng)基滅菌的因素 影響培養(yǎng)基滅菌的因素除了所污染雜菌的種類、數(shù)量、影響培養(yǎng)基滅菌的因素除了所污染雜菌的種類、數(shù)量、 滅菌溫度和時(shí)間外,還有其它一些因素:滅菌溫度和時(shí)間外,還有其它一些因素: 第41頁/共50頁 四、大量培養(yǎng)基的滅菌四、大量培養(yǎng)基的滅菌 2. 影響培養(yǎng)基滅菌的因素影響培養(yǎng)基滅菌的因素 (1)培養(yǎng)基成分)培養(yǎng)基成分 環(huán)境環(huán)境耐熱性耐熱性 大腸桿菌大腸桿菌 水水6065便死亡便死亡 10糖液糖液70,4 46min6min 30糖液糖液70,30min30min 第42頁/共50頁 四、大量培養(yǎng)基的滅菌四、大量培養(yǎng)基的滅菌 2. 影響培養(yǎng)基滅菌的因素影響培養(yǎng)基

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