溶血的檢驗(1)精編版

1、 酸化血清溶血試驗酸化血清溶血試驗 一、原理：酸化血清溶血試驗，也稱Hamtest。陣發(fā)性睡 眠性血紅蛋白尿癥（PNH）患者體內(nèi)存在對補體敏感的 紅細胞，即紅細胞在酸性（pH6.46.5）的正常血清中 孵育，補體被激活，PNH紅細胞破壞而產(chǎn)生溶血。而正 常紅細胞不被溶解，無溶血現(xiàn)象。如血清經(jīng)56加熱30 分鐘，使補體滅活，患者紅細胞即不被溶解。 二、參考范圍：健康人：陰性。 三、臨床意義：陽性主要見于PNH，敏感度較低，有 30%以上患者呈陰性反應(yīng)。自身免疫性溶血性貧血發(fā)作 嚴重時可呈陽性。 蔗糖溶血試驗蔗糖溶血試驗 一、原理：根據(jù)PNH患者的紅細胞，在低離子強度的蔗 糖溶液中對補體敏感性增強

2、，經(jīng)孵育后可使補體與紅細 胞膜結(jié)合加強，蔗糖溶液進入補體敏感的紅細胞內(nèi)，導 致滲透性溶血。 二、參考值：定性試驗：正常為陰性；定量試驗：正常 溶血率5%. 三、臨床意義： PNH患者為陽性或溶血率增加，可作為PNH的篩選試驗。 部分自身免疫性溶血性貧血患者可為陽性，白血病、骨 髓硬化時可出現(xiàn)假陽性。 抗人球蛋白試驗抗人球蛋白試驗 一、原理：抗人球蛋白試驗（Coombs試驗）檢測自身免疫性溶血 性貧血的自身抗體（IgG）。分為檢測紅細胞表面有無不完全抗體的 直接抗人球蛋白試驗（DAGT）和檢測血清中有無不完全抗體的間 接抗人球蛋白試驗（IAGT）。直接試驗應(yīng)用抗人球蛋白試劑（抗 IgG、IgM、

3、IgA和（或）抗C3）與紅細胞表面的IgG分子結(jié)合，如果 紅細胞表面存在自身抗體，出現(xiàn)凝集反應(yīng)。目的是檢查紅細胞表面 的不完全抗體。間接試驗應(yīng)用Rh(D)陽性O(shè)型紅細胞與受檢血清混合 孵育，如血清中存在不完全抗體，紅細胞致敏，再加入抗人球蛋白 血清，可出現(xiàn)凝集。 二、參考范圍：健康人直接和間接抗人球蛋白試驗均陰性。 三、臨床意義： 自身免疫性溶血性貧血、新生兒同種免疫性溶血和血型不合引起的 輸血反應(yīng)、藥物性免疫性溶血、冷凝集素綜合征、陣發(fā)性冷性血紅 蛋白尿等直接抗人球蛋白試驗陽性，當抗體與紅細胞結(jié)合后，有過 ?？贵w時直接和間接試驗均陽性。 紅細胞壽命測定紅細胞壽命測定 原理：紅細胞壽命測定將標

4、記放射性核素的紅細胞注入 血循環(huán)后，逐日觀察其消失率，記錄成活曲線，計算出 紅細胞壽命。 參考范圍：半壽期25-32天 應(yīng)用評價： 1.溶血性貧血：紅細胞壽命縮短，約為14天。 2.再生障礙性貧血：紅細胞壽命縮短，約為15-29天。 血漿游離血紅蛋白檢測血漿游離血紅蛋白檢測 原理：血紅蛋白可催化過氧化氫釋放新生態(tài)氧，使鄰苯 氧化為藍紫色。根據(jù)顯色深淺，與同時測定標準血紅蛋 白液對照，可測出血漿游離血紅蛋白的量。 參考范圍：0-40mg/L 應(yīng)用評價： 1.明顯增高是判斷血管內(nèi)溶血的指征。蠶豆病、PNH、 冷凝集素綜合征、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿、溶血性輸 血反應(yīng)等明顯增高；自身免疫性溶血性貧血、

5、珠蛋白生 成障礙性貧血可輕到中度增高。 2.血管外溶血、紅細胞膜缺陷不增高。 血清結(jié)合珠蛋白檢測血清結(jié)合珠蛋白檢測 原理：血清結(jié)合珠蛋白檢測（Hp）是在待測血清中加入 一定量的血紅蛋白液，使之與待測血清中的結(jié)合珠蛋白 形成Hp-Hb復合物。通過電泳法將結(jié)合的Hp-Hb復合物 與未結(jié)合的Hb分開，測定Hp-Hb復合物的量，可測得血 清中結(jié)合珠蛋白的含量。 參考范圍：0.5-1.5gHb/L 應(yīng)用評價：1.減低：常見于各種溶血，尤其是血管內(nèi)溶 血。嚴重肝病、先天性無珠蛋白血癥、傳染性單核細胞 增多癥等Hp也明顯減低，此時不能以此指標判斷有無溶 血。 2.增高：常見于感染、創(chuàng)傷、SLE、惡性腫瘤、類

6、固醇治 療、妊娠、膽道阻塞等（Hp為急性期反應(yīng)蛋白）。此時 如Hp正常，不能排除合并溶血的可能。 血漿高鐵血紅素白蛋白檢測血漿高鐵血紅素白蛋白檢測 原理：血漿中游離的血紅蛋白可被氧化為高鐵血紅蛋白， 再分解為珠蛋白和高鐵血紅素，后者先與血紅蛋白結(jié)合， 血紅蛋白消耗完后，再與白蛋白結(jié)合形成高鐵血紅素白 蛋白，與硫化銨形成一個易識別的銨血色原，用光譜儀 觀察結(jié)果，于綠光區(qū)558nm處有一最佳吸收區(qū)帶。 參考范圍：陰性 應(yīng)用評價：血管內(nèi)溶血時，血漿中游離血紅蛋白大量增 加，血漿中可檢測出高鐵血紅素白蛋白，血清中出現(xiàn)高 鐵血紅素白蛋白是溶血嚴重的指標。 尿含鐵血黃素試驗?zāi)蚝F血黃素試驗 實驗原理：尿含

7、鐵血黃素試驗又稱Rous試驗。當血紅蛋 白通過腎濾過時，部分鐵離子以含鐵血黃素的形式沉積 于上皮細胞，并隨尿液排出。尿中含鐵血黃素是不穩(wěn)定 的鐵蛋白聚合體，其中的高鐵離子與亞鐵氰化鉀作用， 在酸性環(huán)境下產(chǎn)生普魯士藍色的亞鐵氫化鐵沉淀。尿沉 渣腎小管細胞內(nèi)可見直徑13um的藍色顆粒。 參考范圍：健康人為陰性。 應(yīng)用評價：Rous試驗陽性提示慢性血管內(nèi)溶血，尿中有 鐵排出，無論有無血紅蛋白尿，只要存在慢性血管內(nèi)溶 血如PNH，本實驗即成陽性，并可持續(xù)數(shù)周，但在溶血 初期，雖然有血紅蛋白尿，上皮細胞內(nèi)尚未形成可檢出 的含鐵血黃素，此時本實驗可呈陰性反應(yīng)。 尿卟啉檢測尿卟啉檢測 實驗原理：尿中卟啉類物質(zhì)在酸性條件下，經(jīng)乙醚提取， 于405nm處顯紅色熒光，從而可對尿卟啉進行定性檢測。 參考范圍：健康人呈陰性。 應(yīng)用評價： 1.增加 主要見于先天性紅細胞生成型卟啉