血型交叉配血

1、主要內(nèi)容： w紅細(xì)胞血型概述紅細(xì)胞血型概述 w抗體檢查和鑒定抗體檢查和鑒定 w交叉配血方法交叉配血方法 w日常工作中問題對策日常工作中問題對策 血型的發(fā)現(xiàn)血型的發(fā)現(xiàn) w 1900年，奧地年，奧地 利科學(xué)家利科學(xué)家蘭德蘭德 斯坦納斯坦納 紅細(xì)胞紅細(xì)胞血清血清 凝集凝集 不凝集不凝集 遇到遇到 紅細(xì)胞抗原紅細(xì)胞抗原 w 血型系統(tǒng)血型系統(tǒng)（Blood group systemsBlood group systems）29 24529 245 w 血型集合血型集合（ Blood group collectionsBlood group collections）6 126 12 w 血型系列血型系列（s

2、eriesseries）：）： 低頻率系列（低頻率系列（700 series700 series，low-incidence low-incidence antigens) 33 antigens) 33 高頻率系列高頻率系列 (901 serise,high-incidence (901 serise,high-incidence antigens) 12 antigens) 12 Rh血型系統(tǒng) w DuDu比正常比正常D D陽性細(xì)胞抗原弱，但一旦輸給陽性細(xì)胞抗原弱，但一旦輸給RhRh 陰性的受血者后，自然有免疫產(chǎn)生抗陰性的受血者后，自然有免疫產(chǎn)生抗D D的可的可 能。同時(shí)能。同時(shí)DuDu型

3、人者接受型人者接受RhRh陽性的細(xì)胞后，也陽性的細(xì)胞后，也 有可能產(chǎn)生抗有可能產(chǎn)生抗D D抗體?？贵w。 w 作為供血者，作為供血者，DuDu型歸類為型歸類為RhRh陽性，陽性， 作為受血者作為受血者DuDu型歸類為型歸類為RhRh陰性者。陰性者。 紅細(xì)胞抗體紅細(xì)胞抗體(1) w 預(yù)期抗體預(yù)期抗體：若已知紅細(xì)胞：若已知紅細(xì)胞ABOABO血型，按血型，按 LandsteinerLandsteiner s s法則可預(yù)知的法則可預(yù)知的ABOABO血型血型 抗體，即抗抗體，即抗-A-A和抗和抗-B-B。 預(yù)期抗體也叫做規(guī)則抗體預(yù)期抗體也叫做規(guī)則抗體 w 意外抗體意外抗體：抗：抗-A-A或抗或抗-B-B以

4、外的抗體。在以外的抗體。在ABOABO亞型亞型 中，變異的抗中，變異的抗-A-A1 1或某種抗或某種抗-B-B等抗體，等抗體， 也稱為意外抗體。也稱為意外抗體。 意外抗體過去也叫做不規(guī)則抗體意外抗體過去也叫做不規(guī)則抗體 紅細(xì)胞抗體紅細(xì)胞抗體(2) w 天然抗體天然抗體：沒有可察覺的抗原刺激，而機(jī)體對抗原免：沒有可察覺的抗原刺激，而機(jī)體對抗原免 疫應(yīng)答的產(chǎn)物。天然抗體多為疫應(yīng)答的產(chǎn)物。天然抗體多為IgMIgM抗體，能與含有相應(yīng)抗體，能與含有相應(yīng) 抗原的紅細(xì)胞結(jié)合，在鹽水介質(zhì)中出現(xiàn)肉眼可見的凝集抗原的紅細(xì)胞結(jié)合，在鹽水介質(zhì)中出現(xiàn)肉眼可見的凝集 反應(yīng)，所以也叫鹽水抗體。反應(yīng)，所以也叫鹽水抗體。IgM

5、IgM抗體的最適反應(yīng)溫度為抗體的最適反應(yīng)溫度為 0-250-25。 w 免疫抗體免疫抗體：抗原刺激機(jī)體而產(chǎn)生的。免疫抗體多為：抗原刺激機(jī)體而產(chǎn)生的。免疫抗體多為IgGIgG 抗體，在鹽水介質(zhì)中只能致敏含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞，抗體，在鹽水介質(zhì)中只能致敏含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞， 但不產(chǎn)生凝集，需要采用抗球蛋白搭橋、酶處理細(xì)胞或但不產(chǎn)生凝集，需要采用抗球蛋白搭橋、酶處理細(xì)胞或 聚凝胺介導(dǎo)等方法，才能產(chǎn)生凝集反應(yīng)。聚凝胺介導(dǎo)等方法，才能產(chǎn)生凝集反應(yīng)。IgGIgG抗體的最抗體的最 適反應(yīng)溫度為適反應(yīng)溫度為3737。 免疫血液學(xué)的傳統(tǒng)方法免疫血液學(xué)的傳統(tǒng)方法 w 凝集實(shí)驗(yàn)和溶血實(shí)驗(yàn)?zāi)瘜?shí)驗(yàn)和溶血實(shí)驗(yàn) w 玻片

6、法玻片法/ /試管法試管法/ /微孔板法微孔板法 w 抗人球?qū)嶒?yàn)抗人球?qū)嶒?yàn) 在抗原抗體反應(yīng)中的去離子和低離子在抗原抗體反應(yīng)中的去離子和低離子 鹽水凝集法：鹽水凝集法： 例如，例如，ABOABO血型鑒定試驗(yàn)血型鑒定試驗(yàn) 包括玻片法、試管包括玻片法、試管 法和微孔法法和微孔法 但靈敏度相對較低，只在但靈敏度相對較低，只在 一些基層醫(yī)院血庫使用一些基層醫(yī)院血庫使用 低離子強(qiáng)度鹽水法：低離子強(qiáng)度鹽水法： 通過降低介質(zhì)溶液離子通過降低介質(zhì)溶液離子 強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞膜外圍的強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞膜外圍的 離子云，促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，離子云，促進(jìn)紅細(xì)胞凝集， 因而其靈敏度有所提高。因而其靈敏度有所提高。 聚凝胺試驗(yàn)聚

7、凝胺試驗(yàn) w 原理原理：聚凝胺是一種高價(jià)陽離子季胺鹽多聚物，聚凝胺是一種高價(jià)陽離子季胺鹽多聚物， 溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表 面的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞之間距離減小，能引起面的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞之間距離減小，能引起 正常紅細(xì)胞可逆性的非特異性凝聚。如果是抗正常紅細(xì)胞可逆性的非特異性凝聚。如果是抗 體致敏的紅細(xì)胞，加入中和液后，凝集不可逆；體致敏的紅細(xì)胞，加入中和液后，凝集不可逆； 無抗體致敏的紅細(xì)胞，加入中和液后，凝集解無抗體致敏的紅細(xì)胞，加入中和液后，凝集解 散。散。 w 程序程序：按試劑盒說明書操作。：按試劑盒說明書操作。 聚凝胺凝集法：聚凝胺

8、凝集法： 通過多聚季氨鹽溶液提供大量正電荷來中通過多聚季氨鹽溶液提供大量正電荷來中 和紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥，和紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥， 促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，其靈敏度有較大提高。此方促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，其靈敏度有較大提高。此方 法目前在國內(nèi)使用較多。（法目前在國內(nèi)使用較多。（Rh,DuffyRh,Duffy） 抗人球試驗(yàn)抗人球試驗(yàn) - 檢測檢測 IgG 抗人球試驗(yàn)：抗人球試驗(yàn)： 在鹽水凝集法或低離在鹽水凝集法或低離 子強(qiáng)度鹽水法的基礎(chǔ)上，子強(qiáng)度鹽水法的基礎(chǔ)上， 加入抗人球蛋白抗體，通加入抗人球蛋白抗體，通 過抗人球蛋白抗體的特異過抗人球蛋白抗體的特異 性橋連作用，促進(jìn)紅細(xì)胞

9、性橋連作用，促進(jìn)紅細(xì)胞 的凝集。可分為直接和間的凝集?？煞譃橹苯雍烷g 接抗人球試驗(yàn)。接抗人球試驗(yàn)。 K, k, Fya, K, k, Fya, Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, S, s, Lua, Lub S, s, Lua, Lub 間接抗人球蛋白試驗(yàn)間接抗人球蛋白試驗(yàn)(IAT)(IAT) w 經(jīng)典經(jīng)典IATIAT w LISS-IAT:LISS-IAT:試管法試管法 卡卡 w PEG-IATPEG-IAT w 酶酶IATIAT w 聚凝胺聚凝胺IATIAT 經(jīng)典經(jīng)典IATIAT 程序程序：2 2滴血清、滴血清、1 1滴滴2

10、-5%2-5%的紅細(xì)胞，的紅細(xì)胞， 3737孵育孵育45-6045-60分鐘，生理鹽水洗滌分鐘，生理鹽水洗滌3 3遍遍 后傾倒上清液，控干，加后傾倒上清液，控干，加2 2滴抗人球蛋白滴抗人球蛋白 試劑，離心后判讀結(jié)果。用抗體致敏的試劑，離心后判讀結(jié)果。用抗體致敏的 紅細(xì)胞檢測試驗(yàn)結(jié)果的正確性紅細(xì)胞檢測試驗(yàn)結(jié)果的正確性。 LISS-IAT w 原理原理：通過降低紅細(xì)胞周圍的離子氛，使抗體易于接通過降低紅細(xì)胞周圍的離子氛，使抗體易于接 近抗原，促進(jìn)抗體在更短的時(shí)間內(nèi)致敏紅細(xì)胞，再使用近抗原，促進(jìn)抗體在更短的時(shí)間內(nèi)致敏紅細(xì)胞，再使用 抗人球蛋白試劑，使被致敏的紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集抗人球蛋白試劑，使被致敏的

11、紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集 w 程序程序：2 2滴血清、滴血清、1 1滴滴2-5%2-5%的紅細(xì)胞，加的紅細(xì)胞，加2-42-4滴滴LISSLISS液后液后 混勻，混勻，3737孵育孵育1515分鐘，離心觀察細(xì)胞的凝集情況，用分鐘，離心觀察細(xì)胞的凝集情況，用 生理鹽水洗滌生理鹽水洗滌3 3遍后傾倒上清液，控干，加遍后傾倒上清液，控干，加2 2滴抗人球蛋滴抗人球蛋 白試劑，離心后判讀結(jié)果。白試劑，離心后判讀結(jié)果。 PEG-IAT w 原理原理：PEG（聚乙二醇）是一種水溶性的中性 多聚體，當(dāng)含有抗原與相應(yīng)抗體的溶液中加入 PEG時(shí)，由于空間排斥效應(yīng)作用，使溶液中的抗 體飽和度提高，加速溶液中的抗原-抗體復(fù)合物

12、 的形成。 w 程序程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細(xì)胞，加4滴PEG 溶液后混勻，37孵育15分鐘，生理鹽水洗滌3 遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑， 離心后判讀結(jié)果。 微柱凝膠技術(shù)微柱凝膠技術(shù)( (卡卡) ) w原理原理：微管內(nèi)有凝膠顆粒和試劑。凝膠 顆粒具有分子篩作用，離心后，不凝集的 紅細(xì)胞通過全程進(jìn)入微管底部，而凝集的 紅細(xì)胞則懸浮停留在顆粒中。 w程序程序：按廠家說明操作 反應(yīng)原理反應(yīng)原理 微柱凝膠免疫反應(yīng)的本質(zhì)是紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，也可稱之微柱凝膠血凝微柱凝膠免疫反應(yīng)的本質(zhì)是紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，也可稱之微柱凝膠血凝 試驗(yàn)（試驗(yàn)（Microcolumn Gel Heamagglu

13、tination AssayMicrocolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHAMGHA）在微柱凝膠）在微柱凝膠 管中，紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體結(jié)合后，形成紅細(xì)胞凝集團(tuán)塊。在一定離心力下，管中，紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體結(jié)合后，形成紅細(xì)胞凝集團(tuán)塊。在一定離心力下， 該凝集團(tuán)塊位于膠表面或膠中；而紅細(xì)胞未和相應(yīng)抗體結(jié)合，仍為分散的該凝集團(tuán)塊位于膠表面或膠中；而紅細(xì)胞未和相應(yīng)抗體結(jié)合，仍為分散的 紅細(xì)胞，在同樣的離心力下，紅細(xì)胞沉降到微柱管尖底部。紅細(xì)胞，在同樣的離心力下，紅細(xì)胞沉降到微柱管尖底部。 4+ 紅細(xì)胞復(fù)合物（凝集）位于凝膠表面紅細(xì)胞復(fù)合物（凝集）位于凝膠表面 3+ 大

14、部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中部大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中部 2+ 大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中部，少部分位于凝膠中上部大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中部，少部分位于凝膠中上部 1+ 紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中下部紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中下部 與同一卡中陰性管結(jié)果對照，如與陰性結(jié)果有差別，即為與同一卡中陰性管結(jié)果對照，如與陰性結(jié)果有差別，即為 紅細(xì)胞完全沉積在凝膠管尖底部紅細(xì)胞完全沉積在凝膠管尖底部 完全溶血完全溶血 凝膠和液體無凝集或未凝集的紅細(xì)胞，液體出現(xiàn)透明清澈紅色凝膠和液體無凝集或未凝集的紅細(xì)胞，液體出現(xiàn)透明清澈紅色 不完全溶血不完全溶血 殘留紅細(xì)胞在膠表面

15、、膠中或膠底部，液體出現(xiàn)透明清澈紅色殘留紅細(xì)胞在膠表面、膠中或膠底部，液體出現(xiàn)透明清澈紅色 混合凝集混合凝集 紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面和凝膠底部紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面和凝膠底部 反應(yīng)強(qiáng)度反應(yīng)強(qiáng)度現(xiàn)象及說明現(xiàn)象及說明 完全完全 不完全不完全 混合凝集混合凝集 抗人球蛋白試驗(yàn)抗人球蛋白試驗(yàn)(Coombs(Coombs試驗(yàn)試驗(yàn)) ) w 直接抗人球蛋白試驗(yàn)直接抗人球蛋白試驗(yàn)(DAT)(DAT) 檢測紅細(xì)胞是否在體內(nèi)被抗體或補(bǔ)體致敏,用于 檢測自身免疫溶血性貧血、藥物引起的溶血、 新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng) w 間接抗人球蛋白試驗(yàn)間接抗人球蛋白試驗(yàn)(IAT)(IAT) 在體外抗體致敏紅細(xì)胞,用于抗

16、體篩選和鑒定、 交叉配血、血型鑒定 酶試驗(yàn)酶試驗(yàn) w 原理原理：蛋白水解酶可將紅細(xì)胞表面的多肽鏈打斷，使：蛋白水解酶可將紅細(xì)胞表面的多肽鏈打斷，使 多肽鏈帶負(fù)電荷的唾液酸也一起離開紅細(xì)胞表面，減少多肽鏈帶負(fù)電荷的唾液酸也一起離開紅細(xì)胞表面，減少 了紅細(xì)胞之間的排斥力，縮短了紅細(xì)胞之間的距離，容了紅細(xì)胞之間的排斥力，縮短了紅細(xì)胞之間的距離，容 易產(chǎn)生凝集反應(yīng)易產(chǎn)生凝集反應(yīng) w 程序程序：2 2滴血清、滴血清、1 1滴滴2-5%2-5%紅細(xì)胞，加入紅細(xì)胞，加入2 2滴酶，滴酶，3737孵孵 育育1515分鐘，離心看結(jié)果。分鐘，離心看結(jié)果。 注：酶會(huì)破壞一些抗原結(jié)構(gòu)，如注：酶會(huì)破壞一些抗原結(jié)構(gòu)，如M

17、 M、N N、FyFya a、FyFyb b 等等 影響輸血效果的免疫血清學(xué)問題影響輸血效果的免疫血清學(xué)問題 w 速發(fā)型輸血后溶血反應(yīng)速發(fā)型輸血后溶血反應(yīng) 血管內(nèi)溶血血管內(nèi)溶血 主要原因主要原因: : ABOABO血型不和血型不和 w 遲發(fā)型輸血后溶血反應(yīng)遲發(fā)型輸血后溶血反應(yīng) 血管外溶血血管外溶血 主要原因主要原因: : 針對紅細(xì)胞抗原的同種抗體針對紅細(xì)胞抗原的同種抗體 血型抗原的同種免疫血型抗原的同種免疫 紅細(xì)胞抗原免疫強(qiáng)弱依次為紅細(xì)胞抗原免疫強(qiáng)弱依次為RhRh（DE C c e ）、 KellKell、DuffyDuffy、Kidd Kidd 傳統(tǒng)方法的局限性傳統(tǒng)方法的局限性 w不利于標(biāo)準(zhǔn)

18、化管理不利于標(biāo)準(zhǔn)化管理 w重復(fù)性較差重復(fù)性較差 w要求操作者的經(jīng)驗(yàn)豐富要求操作者的經(jīng)驗(yàn)豐富 w難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作 凝膠凝集試驗(yàn) 凝膠凝集試驗(yàn) - 原理 (1) w 通過離心使紅細(xì)胞被擠過裝有過濾介質(zhì)的小柱通過離心使紅細(xì)胞被擠過裝有過濾介質(zhì)的小柱 w 凝集的紅細(xì)胞被阻擋在小柱中過濾介質(zhì)的頂部或凝集的紅細(xì)胞被阻擋在小柱中過濾介質(zhì)的頂部或 中央，中央， 而未凝集的紅細(xì)胞則到達(dá)小柱的底部而未凝集的紅細(xì)胞則到達(dá)小柱的底部 w 血型或血型或AHGAHG試劑被加入到過濾介質(zhì)試劑被加入到過濾介質(zhì) w 由于紅細(xì)胞和血清成分以不同的速度通過小柱由于紅細(xì)胞和血清成分以不同的速度通過小柱 （重力加速

19、度不同），從而消除了血清中未結(jié)合（重力加速度不同），從而消除了血清中未結(jié)合 的球蛋白中和的球蛋白中和AHGAHG的可能性，因而，在抗人球試的可能性，因而，在抗人球試 驗(yàn)中，不用清洗紅細(xì)胞驗(yàn)中，不用清洗紅細(xì)胞 凝膠凝集試驗(yàn) 凝膠抗人球試驗(yàn) 新技術(shù)新技術(shù)卡式檢測法：卡式檢測法： 19861986年法國年法國Dr.Yves LappierreDr.Yves Lappierre發(fā)明了用于分離凝發(fā)明了用于分離凝 集紅細(xì)胞的凝膠卡式檢測法。經(jīng)過不斷改進(jìn)和臨床的集紅細(xì)胞的凝膠卡式檢測法。經(jīng)過不斷改進(jìn)和臨床的 大量應(yīng)用，目前在發(fā)達(dá)國家已作為大量應(yīng)用，目前在發(fā)達(dá)國家已作為臨床常規(guī)的紅細(xì)胞臨床常規(guī)的紅細(xì)胞 血型血

20、清學(xué)檢測新技術(shù)血型血清學(xué)檢測新技術(shù)。 1994 1994年凝膠卡式檢測法用于臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血年凝膠卡式檢測法用于臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血 型血清學(xué)檢測，已得到美國型血清學(xué)檢測，已得到美國FDAFDA權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證。權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證。 凝膠酶試驗(yàn) 酶法：酶法： 利用木瓜酶或菠蘿酶來破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，利用木瓜酶或菠蘿酶來破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸， 使細(xì)胞膜表面失去電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥；同時(shí)暴使細(xì)胞膜表面失去電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥；同時(shí)暴 露某些隱蔽抗原，增強(qiáng)凝集反應(yīng)。主要用于一些不完全露某些隱蔽抗原，增強(qiáng)凝集反應(yīng)。主要用于一些不完全 抗體的檢測。抗體的檢測。 凝膠凝集試驗(yàn) - 原理(2) w

21、標(biāo)準(zhǔn)化的孵育時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化的孵育時(shí)間 w 標(biāo)準(zhǔn)化的離心時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化的離心時(shí)間 w 標(biāo)準(zhǔn)化的判讀標(biāo)準(zhǔn)化的判讀 - - 消除主觀因素對弱反應(yīng)結(jié)消除主觀因素對弱反應(yīng)結(jié) 果的判讀果的判讀 w 結(jié)果穩(wěn)定保存結(jié)果穩(wěn)定保存 凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué) w 血型實(shí)驗(yàn)室中的一次革命血型實(shí)驗(yàn)室中的一次革命 w 在全世界許多發(fā)達(dá)國家已被公認(rèn)為是常規(guī)在全世界許多發(fā)達(dá)國家已被公認(rèn)為是常規(guī) 免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)的免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)”。 19901990年，卡式檢測法的發(fā)明人年，卡式檢測法的發(fā)明人Dr. Yves LapierreDr. Yves Lapierre等用等用 低離子強(qiáng)度鹽水法（試管法）、

22、聚凝胺試驗(yàn)（試管法）和低離子強(qiáng)度鹽水法（試管法）、聚凝胺試驗(yàn)（試管法）和 卡式檢測法（凝膠）研究了卡式檢測法（凝膠）研究了400400例已知抗體的樣本。血清與例已知抗體的樣本。血清與 細(xì)胞的比例是按照試管法標(biāo)準(zhǔn)配置。結(jié)果為：細(xì)胞的比例是按照試管法標(biāo)準(zhǔn)配置。結(jié)果為： 卡式檢測法檢出卡式檢測法檢出359359例（檢出率為例（檢出率為90%90%） 低離子強(qiáng)度鹽水法檢出低離子強(qiáng)度鹽水法檢出243243例（檢出率為例（檢出率為61%61%） 聚凝胺試驗(yàn)檢出聚凝胺試驗(yàn)檢出301301例（檢出率為例（檢出率為75%75%） 凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué) 結(jié)果判斷模式結(jié)果判斷模式 凝膠試

23、驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué) 臨床輸血技術(shù)規(guī)范 w 明確規(guī)定部分病人應(yīng)做明確規(guī)定部分病人應(yīng)做“抗體篩選抗體篩選”檢檢 測，第四章第測，第四章第1717條：條：“凡遇以下情況凡遇以下情況必須必須 按按全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程有關(guān)規(guī)定做有關(guān)規(guī)定做 抗體篩選試驗(yàn)：抗體篩選試驗(yàn)：1 1、交叉配血不合的；、交叉配血不合的； 2 2、 對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需接受多次對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需接受多次 輸血者。輸血者。 為什么要開展輸血前的“抗體篩選”檢 查 1 1、目前已知紅細(xì)胞有、目前已知紅細(xì)胞有2626個(gè)抗原系統(tǒng)（確個(gè)抗原系統(tǒng)（確 認(rèn)認(rèn)2121個(gè)，如個(gè)，如ABOA

24、BO、RhRh、MNMN、LWLW、MNSMNS、JKJK 等），等），500500多種抗原（確認(rèn)多種抗原（確認(rèn)200200多種）。紅多種）。紅 細(xì)胞抗原的多樣性決定了抗體的多樣性，細(xì)胞抗原的多樣性決定了抗體的多樣性， 檢測抗檢測抗A A、抗、抗B B、抗、抗D D（ABOABO血型、血型、RhRh血型）血型） 可確保絕大多數(shù)病人的輸血安全，但仍不可確保絕大多數(shù)病人的輸血安全，但仍不 能避免因血型不合（能避免因血型不合（ABOABO、RhRh血型以外）血型以外） 而引發(fā)的溶血。而引發(fā)的溶血。 2 2、臨床有的病人出現(xiàn)慢性（遲緩性）溶血反應(yīng)，易忽視、臨床有的病人出現(xiàn)慢性（遲緩性）溶血反應(yīng)，易忽視

25、 或引不起臨床醫(yī)師重視?；蛞黄鹋R床醫(yī)師重視。 （理論上講，成年人每輸（理論上講，成年人每輸1U1U的濃縮紅細(xì)胞，在不丟失、的濃縮紅細(xì)胞，在不丟失、 不被破壞（溶血）的前提下，應(yīng)能提升不被破壞（溶血）的前提下，應(yīng)能提升Hb5-10g/L Hb5-10g/L (0.5-1g/dl),(0.5-1g/dl),保持保持15-3015-30天。如果輸天。如果輸3-4U RBC3-4U RBC，病人，病人HbHb 上升不到上升不到10g/L10g/L，或幾天后（，或幾天后（1 1周內(nèi)）周內(nèi)）HbHb仍舊下降到原來仍舊下降到原來 水平，甚至更低。這種情況，就要考慮是否有慢性溶血水平，甚至更低。這種情況，就

26、要考慮是否有慢性溶血 反應(yīng)存在。）反應(yīng)存在。） 3 3、有利于早期發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)具有臨床意義的抗體，獲得充、有利于早期發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)具有臨床意義的抗體，獲得充 足的時(shí)間來選擇相配合的血，避免由于尋找不到相合的足的時(shí)間來選擇相配合的血，避免由于尋找不到相合的 血液而造成患者病情的延誤。血液而造成患者病情的延誤。 抗體篩選檢查 一、什么叫一、什么叫“抗體篩選抗體篩選”檢查檢查 1 1、不規(guī)則抗體的含義：通常把抗、不規(guī)則抗體的含義：通常把抗A A、抗、抗B B以外以外 的所有紅細(xì)胞血型抗體稱為不規(guī)則抗體。如抗的所有紅細(xì)胞血型抗體稱為不規(guī)則抗體。如抗D D、 抗抗N N、抗、抗M M、jk-jk-抗體?？贵w。

27、 2 2、“抗體篩選抗體篩選”的含義：用具備有臨床意義的含義：用具備有臨床意義 的血型抗原的的血型抗原的O O型紅細(xì)胞，檢測病人血清（含多型紅細(xì)胞，檢測病人血清（含多 種抗體）；如果出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，則提示病人有種抗體）；如果出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，則提示病人有 不規(guī)則抗體存在，可判為不規(guī)則抗體存在，可判為“抗體篩選抗體篩選”陽性。陽性。 抗體篩選技術(shù)要求 w 盡可能多的檢測出有臨床意義的抗體。盡可能多的檢測出有臨床意義的抗體。 w 盡可能少的檢測出無臨床意義的抗體。盡可能少的檢測出無臨床意義的抗體。 w 盡可能快的完成抗體檢測盡可能快的完成抗體檢測 方法選擇：每種方法都有自己的 特點(diǎn)，適應(yīng)于不同范圍及情況

28、 w 鹽水法：可以用于檢測干擾鹽水法：可以用于檢測干擾ABOABO定型的鹽水反應(yīng)定型的鹽水反應(yīng) 活性抗體，如：活性抗體，如：MNMN、P P血型抗體。但此方法會(huì)檢血型抗體。但此方法會(huì)檢 查出無臨床意義的抗體，如冷凝集素抗查出無臨床意義的抗體，如冷凝集素抗I I及抗及抗 IHIH等，而且會(huì)漏檢等，而且會(huì)漏檢IgGIgG性質(zhì)的抗體。性質(zhì)的抗體。 w 低離子聚凝胺法（低離子聚凝胺法（LIP-IATLIP-IAT）：所需試驗(yàn)時(shí)間少）：所需試驗(yàn)時(shí)間少 （3 35 5分鐘）、方法靈敏度高，準(zhǔn)確性高，但分鐘）、方法靈敏度高，準(zhǔn)確性高，但 無法排除無臨床意義抗體的干擾。無法排除無臨床意義抗體的干擾。 w 間接

29、抗人球方法：是很靈敏且有效的檢測抗體間接抗人球方法：是很靈敏且有效的檢測抗體 的方法，同時(shí)此方法可以有效的避免無臨床意的方法，同時(shí)此方法可以有效的避免無臨床意 義抗體的干擾義抗體的干擾。缺點(diǎn)：耗時(shí)間長，步驟多。缺點(diǎn)：耗時(shí)間長，步驟多。 抗體特異性鑒定 w 使用譜細(xì)胞確定抗體的特異性，譜細(xì)胞一使用譜細(xì)胞確定抗體的特異性，譜細(xì)胞一 般由般由8-168-16種含有不同抗原的種含有不同抗原的O O型紅細(xì)胞配型紅細(xì)胞配 套組成，根據(jù)譜細(xì)胞的反應(yīng)格局一般可以套組成，根據(jù)譜細(xì)胞的反應(yīng)格局一般可以 鑒定常見的抗體。鑒定常見的抗體。 檢測新生兒溶血的“三項(xiàng)試驗(yàn)” 直抗試驗(yàn)：即用直接抗球蛋白試驗(yàn)的方法，檢直抗試驗(yàn)

30、：即用直接抗球蛋白試驗(yàn)的方法，檢 測新生兒紅細(xì)胞上是否存在免疫抗體。測新生兒紅細(xì)胞上是否存在免疫抗體。 游離試驗(yàn)：是檢測新生兒血清中的血型抗體。游離試驗(yàn)：是檢測新生兒血清中的血型抗體。 釋放試驗(yàn)：和直抗試驗(yàn)相同，也是檢測新生兒釋放試驗(yàn)：和直抗試驗(yàn)相同，也是檢測新生兒 紅細(xì)胞上的致敏的血型抗體，只是方法不同。紅細(xì)胞上的致敏的血型抗體，只是方法不同。 交叉配血試驗(yàn)的涵義交叉配血試驗(yàn)的涵義 w 目的：是檢查供、受血者血液中是否含有不相合目的：是檢查供、受血者血液中是否含有不相合 的抗原的抗原 和抗體成分的試驗(yàn)。和抗體成分的試驗(yàn)。 發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)ABOABO血型鑒定的錯(cuò)誤：如將血型鑒定的錯(cuò)誤：如將O O型受

31、血者誤定為型受血者誤定為A A型，當(dāng)與型，當(dāng)與A A型獻(xiàn)型獻(xiàn) 血者交叉配血時(shí)，病人血清與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞即可出現(xiàn)凝集，從而避血者交叉配血時(shí)，病人血清與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞即可出現(xiàn)凝集，從而避 免嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。免嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。 發(fā)現(xiàn)不規(guī)則凝集素：如含抗發(fā)現(xiàn)不規(guī)則凝集素：如含抗A1A1不規(guī)則凝集素的不規(guī)則凝集素的A2A2型血清，與型血清，與A1A1型型 獻(xiàn)血者紅細(xì)胞配血時(shí)，可出現(xiàn)凝集，這種不規(guī)則凝集素一般為冷凝獻(xiàn)血者紅細(xì)胞配血時(shí)，可出現(xiàn)凝集，這種不規(guī)則凝集素一般為冷凝 集素，如效價(jià)不高，影響不大。但若為免疫性抗體，集素，如效價(jià)不高，影響不大。但若為免疫性抗體，3737條件下效條件下效 價(jià)較高，

32、就必須選用亞型相同的血液，否則可產(chǎn)生溶血性輸血應(yīng)。價(jià)較高，就必須選用亞型相同的血液，否則可產(chǎn)生溶血性輸血應(yīng)。 發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)ABOABO血型以外的其他抗體：如抗血型以外的其他抗體：如抗P1P1，抗，抗H H等天然抗體和抗等天然抗體和抗D D等等 免疫性抗體，雖然輸入的血液免疫性抗體，雖然輸入的血液ABOABO血型相同，但血型相同，但ABOABO血型以外的其他血型以外的其他 抗體存在時(shí)，同樣可能引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。特別是現(xiàn)在許抗體存在時(shí)，同樣可能引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。特別是現(xiàn)在許 多化驗(yàn)室因?yàn)闂l件的限制不可能對多化驗(yàn)室因?yàn)闂l件的限制不可能對ABOABO及及RHRH（D D）以外的血型全部進(jìn)）

33、以外的血型全部進(jìn) 行鑒定，全靠交叉配血發(fā)現(xiàn)血型的不同和行鑒定，全靠交叉配血發(fā)現(xiàn)血型的不同和ABOABO、RHRH（D D）血型以外的）血型以外的 其他抗體的存在。其他抗體的存在。 程序程序 n查詢受血者既往血型檢查紀(jì)錄；查詢受血者既往血型檢查紀(jì)錄； n對受血者血樣作對受血者血樣作ABOABO、RHRH血型鑒定及血型抗體篩選、血型鑒定及血型抗體篩選、 抗體鑒定；抗體鑒定； n選擇預(yù)先進(jìn)行血型檢查的合格供血者作交叉配血試驗(yàn)；選擇預(yù)先進(jìn)行血型檢查的合格供血者作交叉配血試驗(yàn)； wA.A.主側(cè)配血：受血者血清主側(cè)配血：受血者血清 + + 供血者紅細(xì)胞供血者紅細(xì)胞檢測對供檢測對供 者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體；者

34、紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體； wB.B.次側(cè)配血：受血者紅細(xì)胞次側(cè)配血：受血者紅細(xì)胞 + + 供血者血清供血者血清檢測對受檢測對受 者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體；者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體； wC.C.自身對照：受血者紅細(xì)胞自身對照：受血者紅細(xì)胞 + + 受血者血清受血者血清顯示自身顯示自身 抗體、直接抗體、直接Coomb,sCoomb,s陽性紅細(xì)胞緡錢狀凝集（假陽性）以陽性紅細(xì)胞緡錢狀凝集（假陽性）以 及在低溫下的冷凝集。及在低溫下的冷凝集。 結(jié)果結(jié)果 w 交叉配血試驗(yàn)的任何步驟中均不產(chǎn)生交叉配血試驗(yàn)的任何步驟中均不產(chǎn)生溶血溶血 和凝集和凝集的結(jié)果，供者的血液成分才可發(fā)給的結(jié)果，供者的血液成分才可發(fā)給 患者輸注。

35、紅細(xì)胞抗原與相對應(yīng)的免疫抗患者輸注。紅細(xì)胞抗原與相對應(yīng)的免疫抗 體相遇，在有補(bǔ)體存在就可發(fā)生溶血。溶體相遇，在有補(bǔ)體存在就可發(fā)生溶血。溶 血反應(yīng)與凝集反應(yīng)在交叉配血上意義相同，血反應(yīng)與凝集反應(yīng)在交叉配血上意義相同， 都是抗原抗體反應(yīng)。都是抗原抗體反應(yīng)。 溶血的標(biāo)本不應(yīng)用作配血。溶血的標(biāo)本不應(yīng)用作配血。 交叉配血中責(zé)任性錯(cuò)誤：交叉配血中責(zé)任性錯(cuò)誤： w 1. 1. 無論是對病人還是工作都要有高度的工作責(zé)任感，并嚴(yán)格無論是對病人還是工作都要有高度的工作責(zé)任感，并嚴(yán)格 按照規(guī)程操作。按照規(guī)程操作。 w 2. 2. 各種器材要干凈，干燥（或用等滲鹽水洗滌），防止溶血。各種器材要干凈，干燥（或用等滲鹽水

36、洗滌），防止溶血。 w 3. 3. 配血、發(fā)血和登記時(shí)要仔細(xì)核對病人的姓名、病房、床號(hào)、配血、發(fā)血和登記時(shí)要仔細(xì)核對病人的姓名、病房、床號(hào)、 住院號(hào)、血型。不要加錯(cuò)血清、紅細(xì)胞和試劑，防止由于滴管、住院號(hào)、血型。不要加錯(cuò)血清、紅細(xì)胞和試劑，防止由于滴管、 吸管、試管的紊亂，而造成被檢者之間、血清和紅細(xì)胞之間的吸管、試管的紊亂，而造成被檢者之間、血清和紅細(xì)胞之間的 相互污染。相互污染。 w 4. 4. 病人和獻(xiàn)血者的血標(biāo)本必須符合標(biāo)準(zhǔn)，不要長期放在室溫病人和獻(xiàn)血者的血標(biāo)本必須符合標(biāo)準(zhǔn)，不要長期放在室溫 下，以免污染和滋生細(xì)菌。等滲鹽水必須等滲、新鮮、無微生下，以免污染和滋生細(xì)菌。等滲鹽水必須等滲

37、、新鮮、無微生 物滋生。物滋生。 w 5 5 觀察結(jié)果要仔細(xì)，微弱凝集或肉眼觀察未凝集的標(biāo)本，要觀察結(jié)果要仔細(xì)，微弱凝集或肉眼觀察未凝集的標(biāo)本，要 用顯微鏡觀察。注意特異性凝集與繼發(fā)性血液凝固、緡錢狀凝用顯微鏡觀察。注意特異性凝集與繼發(fā)性血液凝固、緡錢狀凝 集形成的區(qū)別。集形成的區(qū)別。 w 6. 6. 觀察結(jié)果，要遵守規(guī)定時(shí)間，冬季要注意保溫，避觀察結(jié)果，要遵守規(guī)定時(shí)間，冬季要注意保溫，避 免冷凝集素干擾結(jié)果。免冷凝集素干擾結(jié)果。 w 7. 7. 注意病人的輸血史，有無不良反應(yīng)，女病人要注意注意病人的輸血史，有無不良反應(yīng)，女病人要注意 妊娠及分娩史。對反復(fù)輸血的病人，每取一次配血標(biāo)本，妊娠及分

38、娩史。對反復(fù)輸血的病人，每取一次配血標(biāo)本， 不要連用三天以上，更不能供反復(fù)多次配血用。因?yàn)槿尾灰B用三天以上，更不能供反復(fù)多次配血用。因?yàn)槿?何一次輸血都有產(chǎn)生抗體的可能，因此前次輸血使用過何一次輸血都有產(chǎn)生抗體的可能，因此前次輸血使用過 的配血標(biāo)本不能代表病人再次輸血時(shí)體內(nèi)的情況，所以，的配血標(biāo)本不能代表病人再次輸血時(shí)體內(nèi)的情況，所以， 超過三天，應(yīng)另取病人標(biāo)本配血。超過三天，應(yīng)另取病人標(biāo)本配血。 w 8. 8. 登記結(jié)果和填發(fā)報(bào)告要仔細(xì)正規(guī)，查對無誤后，才登記結(jié)果和填發(fā)報(bào)告要仔細(xì)正規(guī)，查對無誤后，才 能發(fā)出報(bào)告。特別要注意不要在配血結(jié)果尚未出來時(shí)就能發(fā)出報(bào)告。特別要注意不要在配血結(jié)果尚未出

39、來時(shí)就 已填好報(bào)告，防止很忙時(shí)將配血試管遺忘在離心機(jī)內(nèi)。已填好報(bào)告，防止很忙時(shí)將配血試管遺忘在離心機(jī)內(nèi)。 w 9. 9. 配血后應(yīng)將配血標(biāo)本置冰箱保存，保留至血液輸完配血后應(yīng)將配血標(biāo)本置冰箱保存，保留至血液輸完 至少七天后，以備復(fù)查。至少七天后，以備復(fù)查。 假陽性及其控制對策：假陽性及其控制對策： 1. 1. 紅細(xì)胞緡錢狀凝集：紅細(xì)胞緡錢狀凝集： 紅細(xì)胞相互重疊，連接成串，象一串重疊的錢幣，又稱紅細(xì)胞相互重疊，連接成串，象一串重疊的錢幣，又稱 串錢狀凝集?？捎梢韵略蛞??；颊呃w維蛋白原升高串錢狀凝集。可由以下原因引起。患者纖維蛋白原升高 或異常蛋白血癥（多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥），新或異常

40、蛋白血癥（多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥），新 生兒臍帶血中含有華頓膠，實(shí)驗(yàn)室中溫度過高、作用時(shí)生兒臍帶血中含有華頓膠，實(shí)驗(yàn)室中溫度過高、作用時(shí) 間太長致水分蒸發(fā)、血清濃縮。紅細(xì)胞緡錢狀凝集不是間太長致水分蒸發(fā)、血清濃縮。紅細(xì)胞緡錢狀凝集不是 抗原抗體反應(yīng)，不是配血禁忌，如獻(xiàn)血者正常，明確是抗原抗體反應(yīng)，不是配血禁忌，如獻(xiàn)血者正常，明確是 假凝集后，可以輸血。假凝集后，可以輸血。 控制對策：多加生理鹽水可稀釋血液使緡錢狀紅控制對策：多加生理鹽水可稀釋血液使緡錢狀紅 細(xì)胞散開用高倍顯微鏡仔細(xì)觀察紅細(xì)胞凝集塊的形態(tài)細(xì)胞散開用高倍顯微鏡仔細(xì)觀察紅細(xì)胞凝集塊的形態(tài) （紅細(xì)胞未被破壞）察看病人診斷用洗滌后的

41、紅細(xì)（紅細(xì)胞未被破壞）察看病人診斷用洗滌后的紅細(xì) 胞配血。胞配血。 2 2. . 冷凝集冷凝集：在較低溫度下出現(xiàn)凝集而溫度：在較低溫度下出現(xiàn)凝集而溫度2525時(shí)凝時(shí)凝 集即可消失的凝集稱為冷凝集。多數(shù)正常人的血清在集即可消失的凝集稱為冷凝集。多數(shù)正常人的血清在 0044時(shí)能凝集本人的紅細(xì)胞，所以又稱自身凝集，時(shí)能凝集本人的紅細(xì)胞，所以又稱自身凝集， 這種冷凝集素的效價(jià)一般不超過這種冷凝集素的效價(jià)一般不超過1 1：1616，這種凝集是可，這種凝集是可 逆的。但一些自身免疫性疾病、非典型性肺炎、病毒逆的。但一些自身免疫性疾病、非典型性肺炎、病毒 性肝炎、肝硬化、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤等疾病性肝炎

42、、肝硬化、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤等疾病 患者的血清中，可以出現(xiàn)高效價(jià)的冷凝集素且能與本患者的血清中，可以出現(xiàn)高效價(jià)的冷凝集素且能與本 人及其它各型人的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。注意配血報(bào)告要人及其它各型人的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。注意配血報(bào)告要 注明有冷凝集現(xiàn)象。注明有冷凝集現(xiàn)象。 控制對策：標(biāo)本在血清沒有完全析出之前不要放入控制對策：標(biāo)本在血清沒有完全析出之前不要放入 冰箱可將配血結(jié)果置冰箱可將配血結(jié)果置3737水浴箱溫浴之后看，并反水浴箱溫浴之后看，并反 復(fù)觀幾次將紅細(xì)胞用復(fù)觀幾次將紅細(xì)胞用3737生理鹽水洗滌或用生理鹽水洗滌或用2 2MeMe處處 理血清以消除冷凝集素之后進(jìn)行配血可用自身或兔理血清以消除

43、冷凝集素之后進(jìn)行配血可用自身或兔 紅細(xì)胞反復(fù)吸收放散的方法除去血清中的冷凝集素。紅細(xì)胞反復(fù)吸收放散的方法除去血清中的冷凝集素。 3. 3. 自身免疫性溫型抗體：自身免疫性溫型抗體： 自身免疫性溶血性貧血的病人血清中可有溫型自身抗自身免疫性溶血性貧血的病人血清中可有溫型自身抗 體。其特點(diǎn)是反應(yīng)溫度在體。其特點(diǎn)是反應(yīng)溫度在3737比室溫作用強(qiáng)或相同，能比室溫作用強(qiáng)或相同，能 凝集自身和其他各型紅細(xì)胞，病人紅細(xì)上吸附了這種抗凝集自身和其他各型紅細(xì)胞，病人紅細(xì)上吸附了這種抗 體，在自身或他人血清中，均可出現(xiàn)凝集。體，在自身或他人血清中，均可出現(xiàn)凝集。 控制對策：可用遞增溫度（由控制對策：可用遞增溫度（

44、由22223737 45 45） 生理鹽水洗滌紅細(xì)胞后再進(jìn)行配血。如果最后仍有凝集，生理鹽水洗滌紅細(xì)胞后再進(jìn)行配血。如果最后仍有凝集， 可選用凝集較弱的血與患者輸注。緩慢輸注，密切觀察，可選用凝集較弱的血與患者輸注。緩慢輸注，密切觀察， 一旦病人出現(xiàn)反應(yīng)應(yīng)立即停止輸注。此類病人萬不得已一旦病人出現(xiàn)反應(yīng)應(yīng)立即停止輸注。此類病人萬不得已 不要輸血不要輸血, ,可用其他辦法替代可用其他辦法替代. . 4. 4. 全凝集與多凝集：全凝集與多凝集： 全凝集：人的紅細(xì)胞都含有全凝集：人的紅細(xì)胞都含有H H抗原，如果標(biāo)本被棒狀桿菌污染，血抗原，如果標(biāo)本被棒狀桿菌污染，血 清中可出現(xiàn)清中可出現(xiàn)H H抗體，這種

45、抗體與含有抗體，這種抗體與含有H H抗原的各型紅細(xì)胞發(fā)生凝集，這抗原的各型紅細(xì)胞發(fā)生凝集，這 種血清稱為全凝集血清。取多個(gè)已知種血清稱為全凝集血清。取多個(gè)已知O O型血人的紅細(xì)胞與此懷疑的血清型血人的紅細(xì)胞與此懷疑的血清 作試驗(yàn)，如都能凝集，即可證明為全凝集血清。作試驗(yàn)，如都能凝集，即可證明為全凝集血清。 多凝集：人的紅細(xì)胞上含有一種無活性的多凝集：人的紅細(xì)胞上含有一種無活性的T T隱性受體，在實(shí)驗(yàn)室中隱性受體，在實(shí)驗(yàn)室中 某些細(xì)菌或細(xì)菌產(chǎn)生的酶污染紅細(xì)胞后可以使某些細(xì)菌或細(xì)菌產(chǎn)生的酶污染紅細(xì)胞后可以使T T受體致活，而正常人血受體致活，而正常人血 清中多數(shù)都含有抗清中多數(shù)都含有抗T T抗體，

46、因此這種被活化了的抗體，因此這種被活化了的T T受體的紅細(xì)胞能被各受體的紅細(xì)胞能被各 型人的紅細(xì)胞凝集（新生兒的血清除外）。這種現(xiàn)象稱又稱為型人的紅細(xì)胞凝集（新生兒的血清除外）。這種現(xiàn)象稱又稱為T T凝集現(xiàn)凝集現(xiàn) 象。象。T T凝集現(xiàn)象也可偶見于某些有明顯細(xì)菌感染的病人且多為凝集現(xiàn)象也可偶見于某些有明顯細(xì)菌感染的病人且多為O O型病人，型病人， 其次為其次為A A和和B B型，型，ABAB型病人出現(xiàn)型病人出現(xiàn)T T凝集現(xiàn)象的則未見報(bào)道。病人的凝集現(xiàn)象的則未見報(bào)道。病人的T T凝集凝集 現(xiàn)象具有以下特點(diǎn)：病人的紅細(xì)胞不被本人的紅細(xì)胞凝集，冷凝集現(xiàn)象具有以下特點(diǎn)：病人的紅細(xì)胞不被本人的紅細(xì)胞凝集，

47、冷凝集 的病人血清能凝集自己的紅細(xì)胞；的病人血清能凝集自己的紅細(xì)胞；T T凝集在室溫較強(qiáng)，凝集在室溫較強(qiáng)，3737較弱或消較弱或消 失，冷凝集在失，冷凝集在3737消失，在消失，在44最強(qiáng)；病人有感染史，多凝集的表現(xiàn)最強(qiáng)；病人有感染史，多凝集的表現(xiàn) 未暫時(shí)性的，一般在病愈后即自行消失；血庫儲(chǔ)存的血液制品出現(xiàn)未暫時(shí)性的，一般在病愈后即自行消失；血庫儲(chǔ)存的血液制品出現(xiàn) 全凝時(shí)，細(xì)菌培養(yǎng)可為陽性；多凝集的凝塊較大，但游離紅細(xì)胞較全凝時(shí)，細(xì)菌培養(yǎng)可為陽性；多凝集的凝塊較大，但游離紅細(xì)胞較 多。多。 控制對策：控制對策：試管、滴管等應(yīng)經(jīng)常保持清潔，不被細(xì)菌污染如試管、滴管等應(yīng)經(jīng)常保持清潔，不被細(xì)菌污染如

48、 懷疑為全凝集或多凝集，首先用多份懷疑為全凝集或多凝集，首先用多份ABAB型血清加以證明。注意標(biāo)本型血清加以證明。注意標(biāo)本 的保存，新鮮不被污染。的保存，新鮮不被污染。 5. 5. 類類B B抗原形成抗原形成( (即獲得性即獲得性B B抗原抗原) )： 某些某些A A型老年癌癥患者和腸道革蘭氏陰性桿菌（如大腸桿菌型老年癌癥患者和腸道革蘭氏陰性桿菌（如大腸桿菌O86O86、 普通變形桿菌等）感染的病人，其紅細(xì)胞除能被抗普通變形桿菌等）感染的病人，其紅細(xì)胞除能被抗A A血清凝集外，血清凝集外， 也能與抗也能與抗B B血清發(fā)生凝集。血清中仍含有正常的抗血清發(fā)生凝集。血清中仍含有正常的抗B B，好像紅

49、細(xì)胞，好像紅細(xì)胞 獲得了一種與獲得了一種與B B類似的抗原稱為類類似的抗原稱為類B B抗原。此類病人可能導(dǎo)致血型抗原。此類病人可能導(dǎo)致血型 鑒定錯(cuò)誤鑒定錯(cuò)誤, ,所以必須要有正反定型才能判定血型所以必須要有正反定型才能判定血型. .交叉配血、輸血交叉配血、輸血 時(shí)一定要謹(jǐn)慎。有人認(rèn)為有些細(xì)菌的酶含有乙酰基酶能使特異性時(shí)一定要謹(jǐn)慎。有人認(rèn)為有些細(xì)菌的酶含有乙酰基酶能使特異性 A A物質(zhì)末端的物質(zhì)末端的N N乙酰氨基半乳糖水解成半乳糖。類乙酰氨基半乳糖水解成半乳糖。類B B抗原有以下抗原有以下 特點(diǎn)：類特點(diǎn)：類B B與抗與抗B B的反應(yīng)與正常的反應(yīng)與正常B B抗原與抗抗原與抗B B的反應(yīng)弱，一般無

50、溶的反應(yīng)弱，一般無溶 血現(xiàn)象。類血現(xiàn)象。類B B是獲得性的，不符合遺傳規(guī)律，病情好轉(zhuǎn)，類是獲得性的，不符合遺傳規(guī)律，病情好轉(zhuǎn)，類B B就消就消 失。類失。類B B與抗與抗B B結(jié)合疏松，用紅細(xì)作吸收放散試驗(yàn)，可放散出大結(jié)合疏松，用紅細(xì)作吸收放散試驗(yàn)，可放散出大 量抗量抗B B。類。類B B病人的唾液不含該血型物質(zhì)。在病人的唾液不含該血型物質(zhì)。在ABAB血的交叉配血時(shí)，血的交叉配血時(shí)， 如發(fā)現(xiàn)主側(cè)凝集，應(yīng)考慮類如發(fā)現(xiàn)主側(cè)凝集，應(yīng)考慮類B B存在，應(yīng)重新定血型并檢查唾液中存在，應(yīng)重新定血型并檢查唾液中 的血型物質(zhì)。類的血型物質(zhì)。類B B與多凝集不同，前者只與抗與多凝集不同，前者只與抗B B反應(yīng)，在

51、反應(yīng)，在ABAB型血型血 清中不凝集，后者與清中不凝集，后者與ABAB型血清中凝集。型血清中凝集。 6. 6. 抗儲(chǔ)存紅細(xì)胞抗體：抗儲(chǔ)存紅細(xì)胞抗體： 紅細(xì)胞在紅細(xì)胞在3737儲(chǔ)存儲(chǔ)存2 2天，在室溫室溫儲(chǔ)存天，在室溫室溫儲(chǔ)存 4747天，在天，在44冰箱儲(chǔ)存冰箱儲(chǔ)存2323個(gè)月以后，能與個(gè)月以后，能與 少數(shù)人的血清發(fā)生非特異性凝集。這種血清少數(shù)人的血清發(fā)生非特異性凝集。這種血清 中抗體叫做抗儲(chǔ)存紅細(xì)胞抗體，能與酶處理中抗體叫做抗儲(chǔ)存紅細(xì)胞抗體，能與酶處理 紅細(xì)胞發(fā)生非特異凝集或溶血，造成交叉配紅細(xì)胞發(fā)生非特異凝集或溶血，造成交叉配 血的紊亂。此抗體對輸血無影響。血的紊亂。此抗體對輸血無影響。

52、7. 7. 自發(fā)性或繼發(fā)性凝固：自發(fā)性或繼發(fā)性凝固： 這種凝固不是這種凝固不是 抗原抗體的反應(yīng)，而是因?yàn)椴裳獎(jiǎng)幼骶徛?，抗原抗體的反應(yīng)，而是因?yàn)椴裳獎(jiǎng)幼骶徛?血液自行凝固，或是用血漿配血時(shí)，當(dāng)用血液自行凝固，或是用血漿配血時(shí)，當(dāng)用 具或生理鹽水中具或生理鹽水中CaCa離子較多，即可發(fā)生繼離子較多，即可發(fā)生繼 發(fā)性凝固。這種凝固往往看到白色的纖維發(fā)性凝固。這種凝固往往看到白色的纖維 蛋白網(wǎng)。蛋白網(wǎng)。 控制對策：防止控制對策：防止CaCa離子污染，注意判斷結(jié)離子污染，注意判斷結(jié) 果時(shí)繼發(fā)性凝固與紅細(xì)胞凝集的區(qū)別。果時(shí)繼發(fā)性凝固與紅細(xì)胞凝集的區(qū)別。 假陰性及其控制對策假陰性及其控制對策 1. 紅細(xì)胞

53、過濃或過淡：紅細(xì)胞過濃或過淡： 抗原抗體比例適當(dāng)，反應(yīng)最明顯。如果紅細(xì)胞抗原抗體比例適當(dāng)，反應(yīng)最明顯。如果紅細(xì)胞 懸液（最適為懸液（最適為3%5%3%5%）過濃，血清中的抗體全被）過濃，血清中的抗體全被 吸收呈后帶現(xiàn)象，以致凝集不明顯，不凝集；吸收呈后帶現(xiàn)象，以致凝集不明顯，不凝集； 如果紅細(xì)胞懸液過淡，血清中的抗體濃度相對如果紅細(xì)胞懸液過淡，血清中的抗體濃度相對 太高呈前帶現(xiàn)象，以致凝集不明顯，不凝集。太高呈前帶現(xiàn)象，以致凝集不明顯，不凝集。 控制對策：按規(guī)定配制紅細(xì)胞懸液，微弱凝集控制對策：按規(guī)定配制紅細(xì)胞懸液，微弱凝集 用顯微鏡看結(jié)果。用顯微鏡看結(jié)果。 2. 2. 溶血性抗原或血型物質(zhì)的

54、中和作用溶血性抗原或血型物質(zhì)的中和作用 未經(jīng)洗滌的紅細(xì)胞懸液中，帶有血漿中的未經(jīng)洗滌的紅細(xì)胞懸液中，帶有血漿中的 血型物質(zhì)。特別是輕度溶血時(shí)，部分紅細(xì)血型物質(zhì)。特別是輕度溶血時(shí)，部分紅細(xì) 胞溶解，釋放出大量溶解性抗原，可將血胞溶解，釋放出大量溶解性抗原，可將血 清中對應(yīng)抗體中和，導(dǎo)致抗體不足，使紅清中對應(yīng)抗體中和，導(dǎo)致抗體不足，使紅 細(xì)胞不凝集。細(xì)胞不凝集。 控制對策：不使用溶血標(biāo)本，紅細(xì)胞洗控制對策：不使用溶血標(biāo)本，紅細(xì)胞洗 滌后使用。滌后使用。 3.3.血型抗體水平下降：血型抗體水平下降： 老年人血型抗體水平下降某些免疫缺陷老年人血型抗體水平下降某些免疫缺陷 的病人或慢性淋巴細(xì)胞白血病、遺

55、傳性無的病人或慢性淋巴細(xì)胞白血病、遺傳性無 丙種球蛋白血癥以及某些使用免疫抑制劑丙種球蛋白血癥以及某些使用免疫抑制劑 的患者，由于免疫球蛋白下降，抗體水平的患者，由于免疫球蛋白下降，抗體水平 下降甚至缺如。可出現(xiàn)交叉配血假陰性。下降甚至缺如?？沙霈F(xiàn)交叉配血假陰性。 控制對策：注意病人的年齡、診斷，用控制對策：注意病人的年齡、診斷，用 顯微鏡觀察結(jié)果顯微鏡觀察結(jié)果。 4. 4. 抗原減弱：抗原減弱： 由于白血病或某些惡性腫瘤使由于白血病或某些惡性腫瘤使A A或或B B抗原抗原 變?nèi)?，易判為不凝集。嬰兒及老人的紅細(xì)變?nèi)?，易判為不凝集。嬰兒及老人的紅細(xì) 胞抗原也較青年人弱。在實(shí)驗(yàn)室保存過久胞抗原也較

56、青年人弱。在實(shí)驗(yàn)室保存過久 的標(biāo)本中紅細(xì)胞抗原性也會(huì)減弱。的標(biāo)本中紅細(xì)胞抗原性也會(huì)減弱。 控制對策：用顯微鏡觀察結(jié)果，注意病控制對策：用顯微鏡觀察結(jié)果，注意病 人年紀(jì)，盡量不用儲(chǔ)存過久的標(biāo)本。人年紀(jì)，盡量不用儲(chǔ)存過久的標(biāo)本。 5. 5. 試驗(yàn)溫度不適當(dāng)：試驗(yàn)溫度不適當(dāng)： 完全抗體作用的最適溫度多在完全抗體作用的最適溫度多在420420 左右，如達(dá)左右，如達(dá)3737則凝集力下降；不完全抗則凝集力下降；不完全抗 體作用的最適溫度多在體作用的最適溫度多在3737左右。左右。 控制對策：嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度?？刂茖Σ撸簢?yán)格控制反應(yīng)溫度。 6. 6. 不完全抗體遮斷：不完全抗體遮斷： 新生兒溶血病的病兒紅細(xì)

57、胞的血型抗原新生兒溶血病的病兒紅細(xì)胞的血型抗原 被母親體內(nèi)的不完全抗體致敏，從而遮斷被母親體內(nèi)的不完全抗體致敏，從而遮斷 其與相特異性的完全抗體的反應(yīng)（如其與相特異性的完全抗體的反應(yīng)（如IgGIgG 抗抗A A遮斷遮斷A A抗原與抗原與IgMIgM抗抗A A的反應(yīng)）。的反應(yīng)）。 控制對策：將患兒標(biāo)本作放散試驗(yàn)后再控制對策：將患兒標(biāo)本作放散試驗(yàn)后再 進(jìn)行配血試驗(yàn)。進(jìn)行配血試驗(yàn)。 7. 7. 試管占染了洗滌劑會(huì)造成假陰性。試管占染了洗滌劑會(huì)造成假陰性。 交叉配血試驗(yàn)有關(guān)結(jié)果及其解釋交叉配血試驗(yàn)有關(guān)結(jié)果及其解釋 一、試驗(yàn)結(jié)果一、試驗(yàn)結(jié)果 ：主側(cè)：主側(cè)：+ + 次側(cè)：次側(cè)： 自身對照抗體篩選：自身對照

58、抗體篩選： 可能的解釋可能的解釋 ：病人或供血者：病人或供血者ABOABO血型定錯(cuò)血型定錯(cuò) 病人血清中可能含有一種病人血清中可能含有一種ABOABO抗體抗體 病人血清的同種抗體與供血者紅細(xì)胞的抗原發(fā)生反應(yīng)，但在篩選病人血清的同種抗體與供血者紅細(xì)胞的抗原發(fā)生反應(yīng)，但在篩選 紅細(xì)胞上無此抗原。紅細(xì)胞上無此抗原。 供血者若為供血者若為DATDAT陽性陽性 討討 論論 ：重新鑒定病人和供血者：重新鑒定病人和供血者ABOABO血型血型 鑒定病人亞血型鑒定病人亞血型 對病人血清進(jìn)行抗體鑒定對病人血清進(jìn)行抗體鑒定 供血者可能為供血者可能為DATDAT陽性，應(yīng)重新選擇與病人相配的血液陽性，應(yīng)重新選擇與病人相配的血液 二、二、試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果 ：主側(cè)：主側(cè)：+ + 次側(cè)：次側(cè)： 自身對照抗體篩選：自身對照抗體篩選： 可能的解釋可能的解釋 ：病人血清中的同種抗體與供血者紅：病人血清中的同種抗體與供血者紅 細(xì)胞及篩選細(xì)胞上的抗原反應(yīng)細(xì)胞及篩選細(xì)胞上的抗原反應(yīng) 討論討論 ：對病人進(jìn)行抗體鑒定，重新配血：對病人進(jìn)行抗體鑒定，重新配血 三、試驗(yàn)結(jié)果：主側(cè)：三、試驗(yàn)結(jié)果：主側(cè)：+ + 次側(cè)：自身對照：抗體篩選：次側(cè)：自身對照：抗體篩選： 可能的解釋可能的解釋 ：病人血清