微生物的分離與培養(yǎng)技術(shù)原理及其應(yīng)用

1、 一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成與類型劃分一、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成與類型劃分 營養(yǎng)構(gòu)成營養(yǎng)構(gòu)成劃分依據(jù)劃分依據(jù)培養(yǎng)基培養(yǎng)基 種類種類 制備方法制備方法用途用途 物理物理 性質(zhì)性質(zhì) 加凝固劑如：加凝固劑如： 半固體半固體 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 觀察微生物運觀察微生物運 動動 液體液體 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 不加凝固劑不加凝固劑 工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn) 化學化學 成分成分 天然天然 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 成分不明確的成分不明確的 天然物質(zhì)天然物質(zhì) 工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn) 成分明確已知成分明確已知 分離、純化、分離、純化、 鑒定、計數(shù)鑒定、計數(shù) 用途用途 功能功能 加入某種化學加入某種化學 物質(zhì)物質(zhì) 加入某種指示加入某種指示 試劑試劑 水、無機水、

2、無機 鹽、碳源鹽、碳源 和氮源和氮源 還要滿足還要滿足特特 殊營養(yǎng)物質(zhì)殊營養(yǎng)物質(zhì) （生長因（生長因 子）、氧氣子）、氧氣 以及以及溫度、溫度、 PH要求。要求。 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 瓊脂瓊脂 分離、純化、分離、純化、 鑒定、計數(shù)鑒定、計數(shù) 合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基 分離篩選特定分離篩選特定 微生物微生物 鑒別不同微生鑒別不同微生 物物 需分離需分離 微生物微生物 選擇培選擇培 養(yǎng)基養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)鑒別培養(yǎng) 基基 鑒定原理鑒定原理 尿素尿素 分解菌分解菌 纖維素纖維素 分解菌分解菌 大腸大腸 桿菌桿菌 一般一般 培養(yǎng)培養(yǎng) 基基 伊紅美伊紅美 藍培養(yǎng)藍培養(yǎng)

3、基基 大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色,， 帶有金屬光澤帶有金屬光澤 尿素作尿素作 為唯一為唯一 氮源氮源 酚紅指酚紅指 示劑示劑 細菌合成的細菌合成的脲酶脲酶將將尿素尿素分分 解生成解生成氨氨。使培養(yǎng)基的。使培養(yǎng)基的堿堿 性增強，性增強，pH升高，升高，指示劑指示劑 變紅變紅 纖維素纖維素 作為唯作為唯 一一碳源碳源 剛果紅剛果紅 染色法染色法 四種纖維素分解菌四種纖維素分解菌 在剛果紅培養(yǎng)基上在剛果紅培養(yǎng)基上 形成的透明圈形成的透明圈 大腸桿菌在伊紅美藍瓊大腸桿菌在伊紅美藍瓊 脂培養(yǎng)基上的黑色帶金脂培養(yǎng)基上的黑色帶金 屬光澤的菌落屬光澤的菌落 二、二、 操作技術(shù)操作技術(shù) 微生物分離

4、培養(yǎng)成功微生物分離培養(yǎng)成功關(guān)鍵關(guān)鍵（消毒與滅菌）（消毒與滅菌） 1、實驗操作者雙手：、實驗操作者雙手： 2、接種環(huán)、接種針或試管口、瓶口：、接種環(huán)、接種針或試管口、瓶口： 3、錐形瓶、培養(yǎng)皿：、錐形瓶、培養(yǎng)皿： 4、培養(yǎng)基：、培養(yǎng)基： ( (不能采用干熱滅菌不能采用干熱滅菌) ) 無菌無菌 70% 70%酒精消毒酒精消毒 灼燒滅菌灼燒滅菌 干熱滅菌和高壓蒸干熱滅菌和高壓蒸 汽滅菌（濕熱滅菌）汽滅菌（濕熱滅菌） 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 【例題例題1 1】為了獲得為了獲得-胡蘿卜素胡蘿卜素產(chǎn)品產(chǎn)品,某小組開某小組開 展了產(chǎn)展了產(chǎn)-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。實驗

5、。 請回答下列問題：請回答下列問題： （1）實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是）實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是 ；為了防止冷凝水滲入；為了防止冷凝水滲入 及減少滅菌后器皿或培養(yǎng)基被污染，滅菌前應(yīng)及減少滅菌后器皿或培養(yǎng)基被污染，滅菌前應(yīng) 該該 。 (2)為了篩選出酵母菌為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素培養(yǎng)基中添加了青霉素 ，其目的是，其目的是 。 干熱滅菌和高壓蒸干熱滅菌和高壓蒸 汽滅菌（濕熱滅菌）汽滅菌（濕熱滅菌） 牛皮紙或幾層報紙包扎緊牛皮紙或幾層報紙包扎緊 抑制細菌生長抑制細菌生長 高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋 壓力表壓力表 安全閥安全閥放氣閥放氣閥 滅菌桶滅菌桶 排氣軟管排氣軟

6、管 【例題例題1 1】為了獲得為了獲得-胡蘿卜素胡蘿卜素產(chǎn)品產(chǎn)品,某小組開某小組開 展了產(chǎn)展了產(chǎn)-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。實驗。 請回答下列問題：請回答下列問題： (3) (3)右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖 中甲、乙、丙依次是中甲、乙、丙依次是 。(填序號填序號) 安全閥、放氣閥、壓力表安全閥、放氣閥、壓力表 放氣閥、安全閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表 安全閥、放氣閥、溫度表安全閥、放氣閥、溫度表 放氣閥、安全閥、溫度放氣閥、安全閥、溫度 【例題例題1 1】為了獲得為了獲得-胡蘿卜素胡蘿卜素產(chǎn)品產(chǎn)品,某小組開某小組

7、開 展了產(chǎn)展了產(chǎn)-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。實驗。 請回答下列問題：請回答下列問題： （4）為了將分離到菌株純化）為了將分離到菌株純化,挑取菌落挑取菌落在在3塊塊 相同平板上劃線相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平板各劃線區(qū)結(jié)果其中一塊平板各劃線區(qū) 均未見菌生長，最可能原因是均未見菌生長，最可能原因是 。 （5）為增加）為增加-胡蘿卜素提取量，在研磨酵母胡蘿卜素提取量，在研磨酵母 細胞時，添加石英砂的目的是細胞時，添加石英砂的目的是 ；研；研 磨時磨時 (填填“需要需要”或或“不需要不需要”) 添加添加CaCO3，理由是，理由是 。 接種環(huán)溫度過高，接種環(huán)溫度過高

8、， 菌被殺死菌被殺死 研磨充分研磨充分 不需要不需要 -胡蘿卜素較耐酸胡蘿卜素較耐酸 （較穩(wěn)定）（較穩(wěn)定） 計算計算 大腸桿菌的分離純化培養(yǎng)大腸桿菌的分離純化培養(yǎng) （一）制備（一）制備牛肉膏蛋白胨固體牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基 稱量稱量 溶化溶化( (調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)PH)PH) 滅菌滅菌 倒平板（倒平板（5050） 倒平板（倒平板（5050） 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染；防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染； 使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā) 平板倒置平板倒置 平板冷凝平板冷凝 打開一條縫隙打開一條縫隙 倒平板（倒平板（5050） 大腸桿菌的分離純化培養(yǎng)大腸桿菌的

9、分離純化培養(yǎng) （二）（二）分離純化分離純化大腸桿菌大腸桿菌 方法一、平板劃線法方法一、平板劃線法 方法一、平板劃線法方法一、平板劃線法 單菌落單菌落 丙丙 甲甲 乙乙 （一）系列稀釋（一）系列稀釋操作操作 101102103104 105106 移液管移液管 移液管移液管吸取菌液稀釋時吸取菌液稀釋時，輕壓橡皮頭，輕壓橡皮頭，吹吸三次吹吸三次 的目的是？的目的是？ 使菌液與水充分混勻使菌液與水充分混勻 方法二、稀釋涂布平板法方法二、稀釋涂布平板法 （二）涂布平板（二）涂布平板操作操作 【例題例題2】 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物 工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。據(jù)此回答：工程應(yīng)

10、用中的重要環(huán)節(jié)。據(jù)此回答： （1）甲操作稱為）甲操作稱為 ，指出乙、丙操作的，指出乙、丙操作的 錯誤：乙錯誤：乙 ， 丙丙 。 （2）判斷：固體培養(yǎng)基上由一個細胞繁殖而）判斷：固體培養(yǎng)基上由一個細胞繁殖而 來的肉眼可見的子細胞群體叫做來的肉眼可見的子細胞群體叫做 ，屬于，屬于 生命系統(tǒng)的生命系統(tǒng)的 層次。層次。 倒平板倒平板 未在酒精燈火焰附近（旁）劃線未在酒精燈火焰附近（旁）劃線 最后一區(qū)域劃線與第一區(qū)域相連最后一區(qū)域劃線與第一區(qū)域相連 菌落菌落 種群種群 （3 3）判斷：）判斷： 不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個 的菌落（的菌落（ ） 打開含菌種

11、的試管需通過火焰滅菌（打開含菌種的試管需通過火焰滅菌（ ） 溶化時將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入溶化時將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入 燒杯（燒杯（ ） 熔化瓊脂時，需要用玻璃棒不斷攪拌以防止熔化瓊脂時，需要用玻璃棒不斷攪拌以防止 糊底（糊底（ ） （4 4）分散細菌得到單菌落）分散細菌得到單菌落 法法 比比 法效果更好。法效果更好。 稀釋度足夠高的稀釋度足夠高的 口口 連同稱量紙一同連同稱量紙一同 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 平板劃線法平板劃線法 平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 研究者得到一個經(jīng)培養(yǎng)后菌落分布如圖研究者得到一個經(jīng)培養(yǎng)后菌落分布如圖 所示的平板，推測接種時

12、可能的操作失所示的平板，推測接種時可能的操作失 誤？誤？ 涂布不均勻涂布不均勻 （5）每次劃線前和劃線后，接種環(huán)都要通過）每次劃線前和劃線后，接種環(huán)都要通過 灼燒滅菌，完成右圖丙的劃線操作，灼燒滅菌，完成右圖丙的劃線操作， 共需灼燒接種環(huán)共需灼燒接種環(huán)_次。灼燒接種環(huán)之次。灼燒接種環(huán)之 后，要冷卻后再進行劃線操作的原因后，要冷卻后再進行劃線操作的原因 是是 。 （6）第二次以及其后的劃線操作時，總是從）第二次以及其后的劃線操作時，總是從 上一次劃線的末端開始劃線，原因是上一次劃線的末端開始劃線，原因是 _，多次劃線的目的，多次劃線的目的 是是 。 6 以免接種環(huán)溫度過高，殺死菌種以免接種環(huán)溫度

13、過高，殺死菌種 末端細菌數(shù)目比起始端少末端細菌數(shù)目比起始端少 使細菌數(shù)目隨劃線次數(shù)增加逐漸減少，使細菌數(shù)目隨劃線次數(shù)增加逐漸減少， 以便分離得到單菌落以便分離得到單菌落 （7 7）右圖是某同學修正丙操作后的正確的）右圖是某同學修正丙操作后的正確的“微生物平微生物平 板劃線板劃線”示意圖。示意圖。劃線順序為劃線順序為1234512345。下列有下列有 關(guān)敘述中正確的是（關(guān)敘述中正確的是（ ） D 大腸桿菌的分離純化培養(yǎng)大腸桿菌的分離純化培養(yǎng) （三）分離純化后（三）分離純化后培養(yǎng)培養(yǎng) 未接種培養(yǎng)基未接種培養(yǎng)基 接種培養(yǎng)基接種培養(yǎng)基 無菌落產(chǎn)生無菌落產(chǎn)生 有菌落產(chǎn)生有菌落產(chǎn)生 1、對照培養(yǎng)方法：將、

14、對照培養(yǎng)方法：將 。 2、對照培養(yǎng)結(jié)果：、對照培養(yǎng)結(jié)果： 若未接種培養(yǎng)基上若未接種培養(yǎng)基上 ， 接種培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)基上 ， 則說明符合要求。則說明符合要求。 （三）分離純化后（三）分離純化后培養(yǎng)培養(yǎng) 未接種培養(yǎng)基和已接種培養(yǎng)基都放入適未接種培養(yǎng)基和已接種培養(yǎng)基都放入適 宜溫度恒溫箱中培養(yǎng)適宜時間觀察結(jié)果宜溫度恒溫箱中培養(yǎng)適宜時間觀察結(jié)果 無菌落產(chǎn)生無菌落產(chǎn)生 有菌落產(chǎn)生，且菌落顏色、有菌落產(chǎn)生，且菌落顏色、 形狀、大小基本一致并符合形狀、大小基本一致并符合 大腸桿菌菌落特點大腸桿菌菌落特點 土壤土壤“纖維素分解菌纖維素分解菌”的分離與篩的分離與篩 選選 土壤土壤“尿素分解菌尿素分解菌”的分離

15、與計數(shù)的分離與計數(shù) 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 【實驗設(shè)計實驗設(shè)計】 土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)* 樣品稀釋樣品稀釋 （梯度稀釋）（梯度稀釋） 將樣品涂布到將樣品涂布到鑒別纖維鑒別纖維 素分解菌的培養(yǎng)基素分解菌的培養(yǎng)基上上 挑選產(chǎn)生挑選產(chǎn)生透明透明 圈圈的菌落的菌落 什么樣的環(huán)什么樣的環(huán) 境取樣境取樣? 選擇培養(yǎng)的目的選擇培養(yǎng)的目的? ? 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 （2 2）分離纖維素分解菌的實驗過程中操作有誤）分離纖維素分解菌的實驗過程中操作有誤 的是（的是（ ） A.A.經(jīng)經(jīng)選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng) 后后將樣品涂布在鑒別纖維素分將樣品涂布在鑒別纖維素分 解菌的培養(yǎng)基上解菌的培養(yǎng)基上 B.B.選

16、培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)的纖維素分解選培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)的纖維素分解 菌少菌少 C.C.經(jīng)稀釋涂布培養(yǎng)后，用剛果紅染色經(jīng)稀釋涂布培養(yǎng)后，用剛果紅染色 D.D.對照組對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維不含纖維 素的培養(yǎng)基上素的培養(yǎng)基上 樣品稀釋（梯度稀釋）樣品稀釋（梯度稀釋） A 【實驗設(shè)計實驗設(shè)計】 土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)* 樣品稀釋樣品稀釋 （梯度稀釋）（梯度稀釋） 將樣品涂布在將樣品涂布在選擇尿素選擇尿素 分解菌的培養(yǎng)基分解菌的培養(yǎng)基上上 統(tǒng)計菌落數(shù)統(tǒng)計菌落數(shù) 計數(shù)細菌數(shù)計數(shù)細菌數(shù) 什么樣的環(huán)什么樣的環(huán) 境取樣境取樣? 選擇培養(yǎng)的目的選擇培養(yǎng)的目

17、的? ? 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 觀察菌落觀察菌落 同種微生物菌落特征：同種微生物菌落特征：顏色、形狀、大小、顏色、形狀、大小、 隆起程度（突起）、邊緣隆起程度（突起）、邊緣等方面基本一致，等方面基本一致， 這些都是區(qū)分細菌的重要手段。這些都是區(qū)分細菌的重要手段。 土壤土壤“尿素分解菌尿素分解菌”的分離與計數(shù)的分離與計數(shù) 【樣品稀釋樣品稀釋】 【平板涂布平板涂布】 【統(tǒng)計菌落統(tǒng)計菌落】 【計數(shù)菌數(shù)計數(shù)菌數(shù)】 90mL無菌水無菌水 9mL無菌水無菌水 9mL無菌水無菌水 【樣品稀釋樣品稀釋】 用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)， 在對應(yīng)在對應(yīng)稀釋

18、倍數(shù)為稀釋倍數(shù)為10106的培養(yǎng)基中，幾位同學分別得的培養(yǎng)基中，幾位同學分別得 到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果：到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果： A A同學：同學：涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230230 B B同學：同學：涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215215和和260260 ，取平均值，取平均值238238 C C同學：同學：涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是2121、 212212和和256256，取平均值，取平均值163163 D D同學：同學：涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別

19、是210210、 240240和和480480，取平均值，取平均值310310 E同學：同學：涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210210、 240240和和250250，取平均值，取平均值233233 90mL無菌水無菌水 9mL無菌水無菌水 9mL無菌水無菌水 0.1mL 0.1mL 0.1mL 至少涂布至少涂布3個平板；個平板；菌落數(shù)目在菌落數(shù)目在30-300個之個之 間的平板最適宜計數(shù)間的平板最適宜計數(shù) 【平板涂布與菌落統(tǒng)計平板涂布與菌落統(tǒng)計】 設(shè)置對照實驗設(shè)置對照實驗 判斷選擇培養(yǎng)基中是否有雜菌污染：判斷選擇培養(yǎng)基中是否有雜菌污染： 未接種培養(yǎng)基（

20、對照組）與接種培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基（對照組）與接種培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)， 若若對照組對照組無菌落生長，說明培養(yǎng)基未被雜菌污染。無菌落生長，說明培養(yǎng)基未被雜菌污染。 判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（對照組）與尿素選擇培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（對照組）與尿素選擇培養(yǎng)基都接種后同時培都接種后同時培 養(yǎng)養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，若對照組培養(yǎng)基菌落數(shù)目，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，若對照組培養(yǎng)基菌落數(shù)目明顯大明顯大 于于選擇培養(yǎng)基（實驗組）的數(shù)目，說明起到了篩選、選擇作用。選擇培養(yǎng)基（實驗組）的數(shù)目，說明起到了篩選、選擇作用。 不加尿素的培

21、養(yǎng)基（對照組）與尿素選擇培養(yǎng)基不加尿素的培養(yǎng)基（對照組）與尿素選擇培養(yǎng)基都接種后同時培養(yǎng)都接種后同時培養(yǎng)， 對照組培養(yǎng)基細菌不生長，菌落數(shù)目對照組培養(yǎng)基細菌不生長，菌落數(shù)目明顯少于明顯少于選擇培養(yǎng)基（實驗組）選擇培養(yǎng)基（實驗組） 的數(shù)目，說明起到了篩選、選擇作用。的數(shù)目，說明起到了篩選、選擇作用。 90mL無菌水無菌水 9mL無菌水無菌水 9mL無菌水無菌水 0.1mL 0.1mL 0.1mL 240個個 如何根據(jù)平板上統(tǒng)計的平均菌落數(shù)推測計數(shù)如何根據(jù)平板上統(tǒng)計的平均菌落數(shù)推測計數(shù) 出原來每克樣品中的活菌數(shù)（菌株數(shù)）？出原來每克樣品中的活菌數(shù)（菌株數(shù)）？ 每克樣品中每克樣品中 菌株數(shù)菌株數(shù) 某

22、一稀釋度下的某一稀釋度下的 平均菌落數(shù)（平均菌落數(shù)（C） 涂布平板時所涂布平板時所 用的稀釋液體用的稀釋液體 積積 mL （V） 稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù) （M） 高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋 壓力表壓力表 安全閥安全閥放氣閥放氣閥 滅菌桶滅菌桶 排氣軟管排氣軟管 【例題例題2】 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物 工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。據(jù)此回答：工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。據(jù)此回答： （1）甲操作稱為）甲操作稱為 ，指出乙、丙操作的，指出乙、丙操作的 錯誤：乙錯誤：乙 ， 丙丙 。 （2）判斷：固體培養(yǎng)基上由一個細胞繁殖而）判斷：固體培養(yǎng)基上由一個細胞繁殖而 來的肉眼可見的子細胞群體

23、叫做來的肉眼可見的子細胞群體叫做 ，屬于，屬于 生命系統(tǒng)的生命系統(tǒng)的 層次。層次。 倒平板倒平板 未在酒精燈火焰附近（旁）劃線未在酒精燈火焰附近（旁）劃線 最后一區(qū)域劃線與第一區(qū)域相連最后一區(qū)域劃線與第一區(qū)域相連 菌落菌落 種群種群 1、對照培養(yǎng)方法：將、對照培養(yǎng)方法：將 。 2、對照培養(yǎng)結(jié)果：、對照培養(yǎng)結(jié)果： 若未接種培養(yǎng)基上若未接種培養(yǎng)基上 ， 接種培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)基上 ， 則說明符合要求。則說明符合要求。 （三）分離純化后（三）分離純化后培養(yǎng)培養(yǎng) 未接種培養(yǎng)基和已接種培養(yǎng)基都放入適未接種培養(yǎng)基和已接種培養(yǎng)基都放入適 宜溫度恒溫箱中培養(yǎng)適宜時間觀察結(jié)果宜溫度恒溫箱中培養(yǎng)適宜時間觀察結(jié)果 無菌落產(chǎn)生無菌落產(chǎn)生 有菌落產(chǎn)生，且菌落顏色、有菌落產(chǎn)生，且菌落顏色、 形狀、大小基本一致并符合形狀、大小基本一致并符合 大腸桿菌菌落特點大腸桿菌菌落特點 （2 2）分離纖維素分解菌的實驗過程中操作有誤）分離纖維素分解菌的實驗過程中操作有誤 的是（的是（ ） A.A.經(jīng)經(jīng)選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng) 后后將樣品涂布在鑒別纖維素分將樣品涂布