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1、實(shí)驗(yàn)五葉綠體的分離與熒光觀察實(shí)驗(yàn)五葉綠體的分離與熒光觀察 一一. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?1 通過(guò)植物細(xì)胞葉綠體的分離，了解細(xì)胞通過(guò)植物細(xì)胞葉綠體的分離，了解細(xì)胞 器分離的一般原理與方法；了解差速離心器分離的一般原理與方法；了解差速離心 Differential centrifugation特點(diǎn)與用途 2 了解菠菜葉綠體的形態(tài)、分布與數(shù)量了解菠菜葉綠體的形態(tài)、分布與數(shù)量。 二實(shí)驗(yàn)原理二實(shí)驗(yàn)原理 采用差速離心分離細(xì)胞器； 沉降順序：核線(xiàn)粒體溶酶體與過(guò)氧化物酶 體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體核蛋白體； 葉綠體具有熒光現(xiàn)象，可利用熒光顯微鏡觀察。 菠菜葉富含葉綠體，可采用徒手切片觀察 其形態(tài) 和分布； Low spee

2、d High speed Differential centrifugation 三、實(shí)驗(yàn)用品三、實(shí)驗(yàn)用品 1器材 離心機(jī)、研缽或組織搗碎機(jī)、顯微鏡、天平、 離心管、紗布、燒杯、量筒、滴管、載玻片、 蓋玻片 2材料 新鮮菠菜葉 3試劑 0.35mol/L氯化鈉溶液 四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法 （一）葉綠體的分離與觀察（一）葉綠體的分離與觀察 取新嫩菠菜葉，洗凈檫干、去梗，稱(chēng)30g，分批放入研缽。 加入0.35mol/L氯化鈉溶液， 共150ml，研磨，制成勻漿； 將勻漿用層紗布過(guò)濾于燒杯中； 取濾液ml在1000r/min離心min，取上清； 上清液3000r/min離心min去上清，沉淀即為葉綠體； 加0.35mol/L氯化鈉溶液懸浮沉淀； 取葉綠體懸液滴于載玻片上，加蓋片： 普通光鏡下觀察；熒光顯微鏡下演示 （二）菠菜葉徒手切片觀察（二）菠菜葉徒手切片觀察 1. 新嫩菠菜葉斜切面片，0.35mol/L氯化鈉溶液滴；加蓋片輕壓：光鏡下觀 察葉綠體在表皮細(xì)胞和保衛(wèi)細(xì)胞中的分布；熒光顯微鏡下演示。 五實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析五實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

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