完整word版細(xì)胞工程試題

1、2014-2015第二學(xué)期細(xì)胞工程期中考試試卷與答案一、名詞解釋1細(xì)胞工程：以生物細(xì)胞、組織或器官為研究對象，運(yùn)用工程學(xué)原理，按照預(yù)定目標(biāo)，改變生物性狀生 產(chǎn)生物產(chǎn)品，為人類生產(chǎn)或生活服務(wù)的科學(xué)。2. 外植體：指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織、器官等材料3. 細(xì)胞株：將所得到的純凈細(xì)胞群，以一定的密度接種在Imm厚的薄層固體培養(yǎng)基上，進(jìn)行平板培養(yǎng)，使之形成細(xì)胞團(tuán)，盡可能地使每個細(xì)胞團(tuán)均來自一個單細(xì)胞，這種細(xì)胞團(tuán)稱為“細(xì)胞 株”。4. 愈傷組織：在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。 5離體無性繁殖：簡稱離體繁殖，是指利用組織培養(yǎng)方法進(jìn)行植物離體培養(yǎng)，在短期內(nèi)獲得

2、大量遺傳性一致個體的方法。6. 繼代培養(yǎng)：更換新鮮培養(yǎng)基來繁殖同種類型的材料（愈傷組織芽等）。7. 體細(xì)胞雜交：（原生質(zhì)體融合）指在人工控制條件下不經(jīng)過有性過程，兩種體細(xì)胞原 生質(zhì)體相互融合產(chǎn)生雜種的方法。8. 細(xì)胞分化：即由于細(xì)胞的分工而導(dǎo)致的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變，或發(fā)育方式改變的過程.9. 細(xì)胞系：經(jīng)過再培養(yǎng)后而形成的具有增殖能力、特性專一、類型均勻的培養(yǎng)細(xì)胞10. 細(xì)胞再分化：即脫分化后的分生細(xì)胞在特定的條件下，重新恢復(fù)細(xì)胞分化能力，并經(jīng)歷器官發(fā)生形成單極性的芽或根，或經(jīng)歷胚胎發(fā)生形成雙極性的胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成完整植物體，這 一過程稱為細(xì)胞再分化。11. 人工種子：指植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生

3、的胚狀體或不定芽包裹在含有養(yǎng)分和保護(hù)功能的 人工胚乳和人工種皮中所形成的能發(fā)芽出苗的顆粒體。12. 離體受精：（離體授粉）在無菌條件下培養(yǎng)未受精脂肪或胚珠和花粉，使花粉萌發(fā) 進(jìn)入胚珠，完成受精作用。13. 懸浮培養(yǎng)：是將植物游離細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。14. 看護(hù)培養(yǎng)：是用一塊活躍生長的愈傷組織來促進(jìn)培養(yǎng)細(xì)胞持續(xù)分裂和增值的方法。15. 生質(zhì)體：指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說一個被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。=16. 傳代：將細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到另外一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代或傳代培養(yǎng)分離單一細(xì)胞并使其繁殖17. 克隆：一個克隆的細(xì)胞群體是從一個單一母細(xì)胞繁殖而來。為一細(xì)胞群體方法1

4、8. 原代培養(yǎng)：也稱初代培養(yǎng)期。從體內(nèi)取出組織接種在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到第一次傳代前階段，一般持續(xù)1-4周。19. 有限細(xì)胞系：經(jīng)繼代培養(yǎng)后細(xì)胞系即使培養(yǎng)條件均能滿足細(xì)胞繁殖生長，它們也只能在有限的時間內(nèi)生存，經(jīng)過運(yùn)動世代后細(xì)胞將逐漸死亡。二20. 永久細(xì)胞系；大多數(shù)細(xì)胞系在有限的代數(shù)內(nèi)以不變的形式增殖，當(dāng)超過有限世代后，在體外永久存活 卜來發(fā)育成永久細(xì)胞系或稱連續(xù)細(xì)胞系。二、填空題1. 實(shí)驗(yàn)室的物理防護(hù)是由隔離的設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計、實(shí)驗(yàn)實(shí)施等三個方面組成，根據(jù)其密封程度的不同，分為P1、P2、P3、P4四個生物安全等級。典型的P4實(shí)驗(yàn)室由更衣區(qū)、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、.消毒區(qū)、核心區(qū)組成。能在體外長期生

5、存的不均二Z細(xì)胞系是原代培養(yǎng)經(jīng)初步純化獲得的以一種細(xì)胞為主的、 細(xì)胞群體。3. 細(xì)胞株是指從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法, 單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。I4. 干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。干細(xì)胞的增殖特性為緩慢性和自_ 穩(wěn)性。5. 培養(yǎng)細(xì)胞的生長特點(diǎn)為貼附、接觸抑制和密度抑制。6. 植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是基于動物細(xì)胞的全能性。_7. 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的方法為分批培養(yǎng)法、連續(xù)培養(yǎng)法和半連續(xù)培養(yǎng)。8. 植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)材料的消消毒的基本原則是既要?dú)⑺栏街渖系奈⑸?物又不損傷材料。9. 細(xì)胞生長測定的一般方法為：細(xì)胞計數(shù)、測定細(xì)胞密實(shí)體積、細(xì)胞鮮重或干重。1

6、0.11. 人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮。12. 細(xì)胞融合主要經(jīng)過了兩原生質(zhì)體或細(xì)胞互相靠近、細(xì)胞橋形成、胞質(zhì)滲透、細(xì)胞核_ 融合幾個步驟。其中細(xì)胞橋形成是最關(guān)鍵的一步。13. 花粉單倍體植株的鑒定方法有形態(tài)鑒定、細(xì)胞學(xué)鑒定、雜交鑒定、分子標(biāo)記鑒定。14. 胚胎工程主要是對哺乳類動物的胚胎進(jìn)行某種人為的工程技術(shù)操作，然后讓它繼續(xù) 發(fā)育獲得人們所需要的成體動物。15. 培養(yǎng)條件下動物貼壁細(xì)胞可分為成纖維細(xì)胞；上皮細(xì)胞；游走細(xì)胞；多形細(xì)胞四種 類型。16. 原生質(zhì)體酶解液中有高濃度的甘露醇，以保持一定的滲透壓；同時含質(zhì)膜 穩(wěn)定劑，以利質(zhì)膜穩(wěn)定。17.根據(jù)其分化潛能的大小，干細(xì)胞可分

7、為全能干細(xì)胞；多能干細(xì)胞；定向干細(xì)胞。其中全能干細(xì)胞干細(xì)胞培養(yǎng)時最易分化18. 誘變植物發(fā)生體細(xì)胞變異的方法有物理誘變；化學(xué)誘變；轉(zhuǎn)座子插入。19. 根據(jù)融合時細(xì)胞的完整程度，原生質(zhì)體融合可分為對稱融合和非對稱融合兩大類 型。20. 根據(jù)包被的程度，可將人工種子分為三大類：裸露的或休眠的繁殖體； 被的繁殖體；水凝膠包埋再包被人工種皮的繁殖體。三、選擇題1. 不適合用胰蛋白酶消化的組織是（D）A.肝 B.腎C.上皮組織 D.乳腺2. 下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述不正確的是（A.通過動物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白.動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理，以使細(xì)胞分散.細(xì)胞癌變都發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中.目

8、前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為人工種皮包C)D3.盡管各種合成培養(yǎng)基給動物細(xì)胞培養(yǎng)帶來極大方便， 成培養(yǎng)基細(xì)胞的貼壁增殖效果常常不理想。的（C）A.平衡鹽溶液B. 瓊脂糖C.4. 制備人工種子的關(guān)鍵是控制 （A）A.胚狀體的同步發(fā)育C.胚狀體的單獨(dú)發(fā)育10代以內(nèi)的，以保持其正常核型 但許多實(shí)驗(yàn)表明，單純使用合 因此，在使用時通常仍然需要加入一定量動物血清D.甘露醇B.人工種皮的同步發(fā)育D.人工種皮的單獨(dú)發(fā)育5. 細(xì)胞融合中使用（C）方法可以在顯微鏡下直接定向誘導(dǎo)細(xì)胞融合。A.仙臺病毒法B.PEG誘導(dǎo)C.電融合誘導(dǎo)法D.高Ca+和pH誘導(dǎo)法6. 中胚層來源的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時一般表現(xiàn)為哪種形態(tài)

9、（A）A. 成纖維細(xì)胞型細(xì)胞 B.多形型細(xì)胞C.上皮型細(xì)胞D.游走型細(xì)胞7. 在每一代貼附生長細(xì)胞的生長過程中，哪一個時期的細(xì)胞數(shù)隨時間變化成倍增長,活力最佳，最適合進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究（D）A.穩(wěn)定期B.衰亡期C.潛伏期D.對數(shù)生長期8. 以下哪種方法或技術(shù)適合進(jìn)行動物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)？ （D）A.懸滴培養(yǎng)法B.培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法C.旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法 D.多孔載體培養(yǎng)技術(shù)9. 單克隆抗體制備選擇親本時應(yīng)選擇（A）A. 骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動物屬于同一品系淋巴細(xì)胞和骨髓瘤屬細(xì)胞屬于不同品系淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞無親緣關(guān)系下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（ 卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加

10、胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn) 胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞，可從早期胚胎中分離獲取B. 骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動物屬于不同品系C. BD. BD)10.A .B .C .D .10. （C）的建立是動物細(xì)胞規(guī)模化培養(yǎng)的前體。12.細(xì)胞平板培養(yǎng)的效果一般用（D）來衡量。A.生長率B.分裂率 C.再生率D.植板率13.影響體細(xì)胞胚發(fā)生的激素因素中,應(yīng)用最為廣泛的是（D)A.IBABIAAC.EAD.2,4-DA)。A.原代細(xì)胞系B.繼代細(xì)胞系C.永久細(xì)胞系.有限細(xì)胞系14. 動物細(xì)胞培養(yǎng)滲透壓的維持一般采用（A液D.有機(jī)物溶液15. 盡管各種

11、合成培養(yǎng)基給動物細(xì)胞培養(yǎng)帶來極大方便，但許多實(shí)驗(yàn)表明， 單純使用合成培養(yǎng)基細(xì)胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此，在使用時通常仍然需要加入一 定量的（C）。A.平衡鹽溶液B.瓊脂糖C.動物血清D.甘露醇16. 高壓滅菌引起培養(yǎng)基pH變化，一般滅菌后培養(yǎng)基pH將（A）。A.下降0.5左右B.上升0.5左右C.下降1.5左右D.上升1.5左右17. 細(xì)胞株的特點(diǎn)是（B）。A 遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代B 遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，且有癌變特點(diǎn)，可以無限傳代C .遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代D 遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代18. 不屬于干細(xì)胞特征的是（D）A.多呈圓形或橢圓形 B.核/質(zhì)比大C.具有多能

12、性D.增殖速度極快19. 不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合的是（D）A.PEG B. 電激C.仙臺病毒 D.慢病毒20. 不能用于分離外周血中血細(xì)胞的方法（CA.自然沉降法B.差異沉降法C.低速離心法D.氯化銨分離法 四.判斷題I1 _、接種器械一般采用照射滅菌。（X）2、IAA通常采用濕熱滅菌。（X）3、紫外照射滅菌的時間為5h(X)4、細(xì)胞松弛素B能引起植物原生質(zhì)體排核，因此可以獲得胞質(zhì)體。（5、6、能被酚臧紅花染成紅色的細(xì)胞為活細(xì)胞。（X）控制細(xì)胞內(nèi)外水的凍結(jié)狀態(tài)是細(xì)胞冰凍保存技術(shù)的關(guān)鍵。7、選擇性抗生素濃度越高，假轉(zhuǎn)化體比例越低，選擇效果越好。（X）胚培養(yǎng)可用于克服雜種不活性。（V）9、分離原生質(zhì)體的

13、原始細(xì)胞狀態(tài)影響其脫分化的進(jìn)行。（V）10、般認(rèn)為原生質(zhì)體出芽與培養(yǎng)基成分有密切關(guān)系。（V）11、植物快速繁殖中，繁殖系數(shù)越高越好。（X）12、褐變是植物離體組織中的多酚氧化酶被激活造成的。（V）13、繼代培養(yǎng)次數(shù)越多，變異率越高。（V ）14、油污嚴(yán)重的器皿應(yīng)采用酸洗法。（X）15、不同來源的原生質(zhì)體融合需要誘導(dǎo)才能實(shí)現(xiàn)。（V）X)X)16、種質(zhì)超低溫保存成功的關(guān)鍵是降溫冰凍過程中避免細(xì)胞內(nèi)脫水。（17、細(xì)胞密度是影響細(xì)胞培養(yǎng)的重要因素。（V）18、原生質(zhì)體受體系統(tǒng)是最好和應(yīng)用最廣的遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)。（19、玻璃化法保存的材料宜采用慢速化凍，以減少次生結(jié)冰對細(xì)胞的傷害。（20、原生質(zhì)體培養(yǎng)是

14、體纟田胞雜父的基礎(chǔ)。（V）五.簡答題1.簡述DNSO在細(xì)胞凍存時的應(yīng)用。DMS健細(xì)胞凍存保護(hù)劑，是一種滲透保護(hù)劑，對細(xì)胞無明顯的毒性，可迅速透入細(xì)胞， 降低冰點(diǎn)，提高細(xì)胞膜對水的通透性,延緩凍結(jié)過程，能使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)牽透出細(xì)胞外， 在細(xì)胞外形成冰晶， 提高細(xì)胞內(nèi)電解質(zhì)的濃度，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶，從而減少冰晶對細(xì)胞的損 傷。2. MTT比色法的主要原理是什么？MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒 體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。 二甲基亞砜能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在 490n

15、m波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。3. 影響細(xì)胞生長的因素有哪些？為什么?溫度：在低溫下，細(xì)胞的代謝活力及核分裂降低；過高，對細(xì)胞生長不利滲透壓： 細(xì)胞在高滲或低滲溶液中，都會立即發(fā)生皺縮或腫脹氣體環(huán)境和 PH:氧氣和二氧化碳制細(xì)胞生存必需的條件之一； PH過高或過低都會影響纟田胞生長無毒和無菌：在例題環(huán)境中，一旦有害物質(zhì)或細(xì)菌污染，可導(dǎo)致細(xì)胞死亡輻射線和超聲波：都會導(dǎo)致某些細(xì)胞死亡細(xì)胞接種濃度： 適宜的接種濃度可以促使細(xì)胞增殖容器轉(zhuǎn)動速度和懸浮攪動速度：營養(yǎng)流動和充分的氧化作用。4. 胚狀體同步發(fā)育方法及原理（1）抑制劑法：在細(xì)胞培養(yǎng)初期加入細(xì)胞分裂抑制劑，去除抑制劑后細(xì)胞可同步

16、發(fā)育。（2）低溫法：低溫處理抑制細(xì)胞分裂，再恢復(fù)正常溫度使細(xì)胞分裂同步化。（3）滲透壓法：不同發(fā)育時期的胚狀體對滲透壓的要求不同，用一定的滲透壓使胚狀 體停止在某一階段，然后再使其同步發(fā)育。（4）通氣法：細(xì)胞分裂旺盛時有大量氣體（如乙烯）生成。可以通過在培養(yǎng)基中通入 乙烯或氮?dú)饪刂萍?xì)胞同步分裂。（5）分離篩選法：用不同孔徑的篩網(wǎng)將不同發(fā)育時期的胚狀體分離開來，也可以采用 密度梯度離心法來選擇不同發(fā)育時期的胚狀體。5. 試分析論述利用細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)植物次生產(chǎn)物時，提高細(xì)胞次生產(chǎn)物產(chǎn)量的途徑。（1）選擇適宜的起始材料：首先選擇能夠高效合成目的產(chǎn)物的植物種類。選取自然狀 態(tài)下能夠積累次生產(chǎn)物部位的細(xì)胞，這樣的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)以后常常具有合成目的產(chǎn)物的能力, 或較容易誘導(dǎo)合成目的產(chǎn)物。（2）培養(yǎng)基成分的影響： 培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分一方面要滿足植物細(xì)胞的生物量增長, 方面要使細(xì)胞能合成和積累次生產(chǎn)物。一般來說，增加培養(yǎng)基的 N、P和K的濃度能促進(jìn)細(xì)胞 生長，而適當(dāng)增加糖濃度