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文檔簡介

1、血常規(guī)SORt件全自動血細(xì)胞分析SOP一,檢驗?zāi)康募霸? ,目的:用BC-3000PIUS全自動血細(xì)胞分 析儀,在臨床和實驗室定量分析血液細(xì)胞,對人 體的血液中三種有形成分(紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血 小板)的19項參數(shù)和3個直方圖進行分析。是 人體血液的基本生理病理指標(biāo)之一。白細(xì)胞計數(shù)WBC淋巴細(xì)胞計數(shù)Lymph#中間細(xì)胞計數(shù)Mid#中性粒細(xì)胞計數(shù)Gran#淋巴細(xì)胞百分比Lymph%中間細(xì)胞百分比Mid%中性粒細(xì)胞百分比Gran%紅細(xì)胞計數(shù)RBC血紅蛋白HGB平均紅細(xì)胞體積MCV平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量MCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)RDW-CV紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差RDW-

2、SD紅細(xì)胞壓積HCT血小板計數(shù)PLT平均血小板體積MPV血小板分布寬度PDW血小板壓積PCT白細(xì)胞分布直方圖WBC Histogram紅細(xì)胞分布直方圖RBC Histogram血小板分布直方圖PLT Histogram對患者和健康人群來講,觀察有無各種原因 引起的貧血,出血和失血,目前機體有無細(xì)菌及病毒感染,可篩查出各種血液病,如 白血病,血小板減少性紫癜等。2, 原理:電阻法測量的血樣先用稀釋液進行指定比例的 稀釋,用以測量 WBC RBC PLT和HGB等參數(shù) WBC RBC計數(shù)池的稀釋標(biāo)本在負(fù)壓作用下,分別通過各自的計數(shù)微孔,流入管道,通過兩個光 電傳感器,在這兩個光電傳感器之間的液量就

3、是 儀器分析計數(shù)的標(biāo)本量。用阻抗法測量WBC RBC和PLT的體積分布 和數(shù)目。電極插在液體中計數(shù)微孔的兩邊,在計 數(shù)微孔的兩邊周圍建立了一個電場環(huán)境,根據(jù)血 細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì),當(dāng)有細(xì)胞通過計數(shù)微孔 時,將引起阻抗的變化,阻抗變化的大小與細(xì)胞 體積成正比。WBC根據(jù)體積的大小,它有多種形態(tài),由 于稀釋液、溶血劑和溶血時間的不同,WBC勺體 積大小會發(fā)生變化。在一定的程序控制下,顯示 出WBC的三分類一一淋巴細(xì)胞、中間細(xì)胞(嗜酸 +嗜堿+單核)和中性粒細(xì)胞被稀釋的血樣加入溶血劑后,紅細(xì)胞溶解, 釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑結(jié)合形成復(fù) 合物,用波長525nm的單色光在WBC計數(shù)池內(nèi) 測定此化

4、合物的透過光強,用這個透過光強與空白狀態(tài)的透過光強相比較,得到血紅蛋白濃度 (空白狀態(tài)是指 WBC十?dāng)?shù)池中只有稀釋液的狀態(tài))。二,標(biāo)本1, 標(biāo)本種類:末梢血為200-300微升, 靜脈血2毫升。2, 采集標(biāo)本容器及添加劑:容器:末梢血為 一次性朔料試管,靜脈血為真空采血管。添加劑: 不同實驗使用不同的抗凝劑,不能互相代替。血 常規(guī)用EDTA-k2抗凝。采集3, 采集方法:毛細(xì)血管采集或靜脈穿刺 采集時間:患者隨到隨時采集。4, 標(biāo)本運送:標(biāo)本采集后,應(yīng)及時送檢。5,標(biāo)本接受:標(biāo)本的編號與化驗單上的編號 要一致,清楚,正確及完整。6,準(zhǔn)備與保存:室溫靜置10-15分鐘,充分混勻后上機檢測。血液常

5、規(guī)標(biāo)本一般保存在室溫24小時。三,設(shè)備與試劑1, 設(shè)備:BC-3000 Plus全自動血細(xì)胞分析 儀。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限 公司生產(chǎn)。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字 2005 第 2400522號。2,專用試劑: 稀釋液:M-30PD等滲溶液,具有特定 的電導(dǎo)值,為細(xì)胞計數(shù)提供穩(wěn)定的環(huán)境。作為人 體血細(xì)胞計數(shù),體積測量以及白細(xì)胞分類計數(shù)時 的稀釋液使用。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀, 懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCI, Na2SO4緩 沖劑,抗菌劑。本品2-30 C保存期2年。開瓶后, 使用溫度15-30 C,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字 2005 第 2400276

6、 號。 沖洗液:M-30PR 不含蛋白酶和次氯 酸鈉(NaCIO等強蛋白清除劑的電解質(zhì)溶液, 用于儀器的進樣孔,閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖 洗。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCI, KCI, Na2SO4緩 沖劑,抗菌劑和表面活性劑。本品 2-30 C保存 期2年。開瓶后,使用溫度15-30 C,有效期 60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字 2005 第 2400303 號。 無氰溶血劑:M-30PCFL能溶解紅 細(xì)胞,與血紅蛋白形成復(fù)合物。用于白細(xì)胞計 數(shù),白細(xì)胞分群和血紅蛋白測定。本品應(yīng)為透 明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要 成份,NaCI,KCI,Na

7、2SO4緩沖劑,抗菌劑 和表面活性劑。本品2-30 C保存期2年。開瓶 后,使用溫度15-30 C,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字 2005 第 2400274 號。 E-Z清洗液(酶清洗液):M-30PE含 有蛋白水解酶的電解質(zhì)溶液,能有效地清除蛋 白污漬,用于儀器的進樣器,閥和管路系統(tǒng)的 清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀, 懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCI,緩沖劑, 抗菌劑,表面活性劑,蛋白水解酶。本品2-30 C 保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30 C,有效 期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字 2005 第 2400303 號。 探頭清潔液:M-30PR

8、本品為含有次 氯酸鈉的電解質(zhì)溶液,用于儀器的進樣器,的 清潔和沖洗。主要成份,NaOH次氯酸鈉 (NaCIO),表面活性劑。本品2-30 C保存期2 年。開瓶后,使用溫度15-30 C,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字 2005 第 2400303 號。四,操作步驟1,開機前的準(zhǔn)備: 檢查試劑(稀釋液,沖洗液,溶血劑) 是否足量,有無渾濁變質(zhì)。 試劑管路連接正常否,管道有無扭結(jié) 并倒空廢液瓶。 電源連接是否正常。2,開機啟動: 打開儀器主機后面的電源開關(guān)。 電源指示燈燃亮,儀器內(nèi)部進行初始化, 進行自檢。 自動沖洗內(nèi)部管路,自動測量本底。 80秒鐘后進入計數(shù)界面。3,本底檢查:出現(xiàn)

9、計數(shù)界面后,儀器自動測量本底 數(shù)值顯示在屏幕上,本底結(jié)果要求:WBC 0.3RBCC 0.03HG& 1PLT 10如果本底沒有達(dá)到儀器的要求,儀器將會 提示“本底異?!?,請執(zhí)行清洗或維護程序。4,室內(nèi)質(zhì)控操作:5,全血測量: 在計數(shù)界面下,按模式鍵,將 模式設(shè)置為“全血”。 用K2EDTA抗凝劑作抗凝血標(biāo)本 混勻抗凝血后,送到采樣針下,讓采樣針插入抗凝血。 按開始鍵,開始對樣本計數(shù)。 58秒后測試結(jié)果顯示在屏幕上。 按“打印”鍵,結(jié)果打印出來。6,末梢血測量: 在計數(shù)界面下,按模式鍵,將模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”。 按“稀釋液”,按開始鍵,用試管 從采樣針下取0.7ml稀釋液。 將毛細(xì)血管采取的2

10、0卩l(xiāng)末梢血標(biāo)本, 迅速注入盛有0.7ml的稀釋液的試管中,制成稀 釋血樣(注意針刺得要深,用不起毛的紙巾拭去 第一滴血) 制好的稀釋血樣要搖勻(注意不要劇烈 震蕩,否則有可能會因產(chǎn)生微小氣泡導(dǎo)致計數(shù) 值不準(zhǔn)) 將預(yù)稀釋血樣放置3分鐘后,再次 搖勻,放于采樣針下,按開始鍵計數(shù)。 58秒后測試結(jié)果顯示在屏幕上。 按“打印”鍵,結(jié)果打印出來。7,關(guān)機:每天測試完畢一定要用E-Z清洗液執(zhí)行關(guān) 機”程序,等待屏幕提示關(guān)閉電源”后關(guān)掉 主機電源。WBC RBG HGB HCT MCV MCH MCHCPLT Lymph# Lymph% Gran#、Gran%六,結(jié)果分析與報告1,復(fù)查標(biāo)準(zhǔn):HGB凡低于8

11、0g/L ,高于 仃Og/L者應(yīng)進 行復(fù)查。WBC凡低于 3*10 9/L 或高于 20*109/L 者 應(yīng)復(fù)查。凡直方圖有明顯異常者,必須推片染色 油鏡分類。PLT低于5X 109/L或高于35X 109/L應(yīng)復(fù)查2,按照儀器模式出血細(xì)胞分析檢驗報告七,參考值與臨床意義:1.血紅蛋白測定(HGB : 120-160g/L降低:貧血、白血病、大量失血及鉤蟲 病等。增高:慢性缺氧(肺氣腫和先天性心臟病 等)、嚴(yán)重脫水、大面積燒傷、慢性一氧化碳中 毒及真性紅細(xì)胞增多癥等時。2. 紅細(xì)胞計數(shù)(RBC : 4.0-5.5 X 1012/L臨床意義同血紅蛋白,巨幼紅細(xì)胞貧血 時減少更為明顯。3. 紅細(xì)胞

12、壓積(HCT : 0.42-0.49增高:失水和大面積燒傷等所致的血液濃 縮以及真性紅細(xì)胞增多癥時。降低:貧血及血液 稀釋時。4. 紅細(xì)胞平均容積(MCV:82-92fl用于貧血分類:增大為巨紅細(xì)胞性貧血, 減小為小細(xì)胞性貧血(如嚴(yán)重缺鐵性貧血)和遺傳性球型紅細(xì)胞增多癥;正常紅細(xì)胞性貧血時正 常。5. 紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量 (MCH:27-31pg用于貧血分類:增加見于大細(xì)胞性貧血, 減少見于單純小細(xì)胞性貧血和小細(xì)胞低色素貧 血。6. 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCH): 320-360g/L大細(xì)胞性貧血正常,單純小細(xì)胞性貧血時 正常,小細(xì)胞低色素性貧血時減小。貧血形態(tài) 分類MCVMCH;MC

13、HC病因大細(xì)胞性 貧血巨紅細(xì)胞性貧血,惡性 貧血正細(xì)胞性 貧血急性失血,急性溶血, 再障,白血病單純小細(xì) 胞性貧血慢性感染,炎癥,肝病, 惡性腫瘤,風(fēng)濕疾病小細(xì)胞低 色素性血J缺鐵性,地中海性,鐵 粒幼細(xì)胞性貧血7. 紅細(xì)胞分布寬度(RDW:11.5-14.5%RDV與V是反映血液中紅細(xì)胞體積變異的參數(shù), 以測得紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)表示。 MCV吉合可將貧血分為小細(xì)胞均一性貧血 (MC J RDWE常,如地中海貧血),小細(xì)胞不均一 性貧血(MCJ RDW,如缺鐵性貧血),正細(xì) 胞均一性貧血(MCV RDW均正常,常見急性失 血和再生障礙性貧血),正細(xì)胞不均一性貧血 (MCVE常RDW,如早

14、期缺鐵性貧血和急性溶 血性貧血),大細(xì)胞均一性貧血( MCA RDW 正常,如慢性再障)。大細(xì)胞不均一性貧血(MC 和RDW均 t,如巨幼細(xì)胞性貧血和惡性貧血)。8. 白細(xì)胞計數(shù)(WBC : 4.0-10.0 X 109/L增多:細(xì)菌性感染、尿毒癥、嚴(yán)重?zé)齻?傳染性單核細(xì)胞增多癥、白血病和應(yīng)激狀態(tài)(急 性出血和大手術(shù))等增多(妊娠后期、月經(jīng)期、 飯后、劇烈運動后可有生理性增加)。減少:病毒感染、傷害及副傷寒、瘧疾、再生障 礙性貧血、極嚴(yán)重感染、放射性輻照、腫瘤化療 后和非白血性白血病等。9.白細(xì)胞分類(DC :正常參考值見下表檢測項目英文縮寫參考值中性粒細(xì)胞百分比NEUT %0.5-0.7淋

15、巴細(xì)胞百分比LY MPH %d0.2-0.4單核細(xì)胞百分比MONO %)0.03-0.08嗜酸性粒細(xì)胞百分 比EO %0.005-0.05嗜堿性粒細(xì)胞百分 比BASO %0.000-0.005中性粒細(xì)胞絕對值2, NEUT #3.0-5.0 X 109/L1淋巴細(xì)胞絕對值LY MPH #1.0-3.0 X 109/L1單核細(xì)胞絕對值MONO #0.067-0.325 X109/L嗜酸性粒細(xì)胞絕對值EO #0.02-0.05 X 109/L嗜堿性粒細(xì)胞絕對值BASO #0.005-0.05 X 109/L中性粒細(xì)胞:增多見于急性化膿性細(xì)菌感 染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后和尿毒癥等;其

16、減少見于傷寒和副傷寒、瘧疾、粒 細(xì)胞缺乏癥、放射性輻照和腫瘤化療。嗜酸性粒細(xì)胞增多見于過敏性疾病、寄生蟲病等;其減 少見于傷寒和副傷寒等。嗜堿性粒細(xì)胞增多見于 慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金氏病和鉛中毒等。淋 巴細(xì)胞增多見于病毒感染,其減少見于免疫缺陷 病。單核細(xì)胞增多見于某些細(xì)菌感染及單核細(xì)胞 白血病等。10. 血小板計數(shù)(PLT: 100-350 X 109/L減少:造血功能障礙(如急生白血病和 再生障礙性貧血等)、血小板破壞過多(如原發(fā) 性血小板減少性紫癜、脾功能亢進和系統(tǒng)性紅斑 狼瘡等)及消耗增加(如 DIC、血栓性血小板減 少性紫癜等)時。增多:急性大出血、急性溶血、 真性紅細(xì)胞增多癥、原

17、發(fā)性血小板增多癥和慢性 粒細(xì)胞性白血病等時11. 血小板平均容積(MPV : 9-17fl(1 )血小板數(shù)低而MPV增高:骨髓自身正 常,但外周血血小板破壞增多造成血小板降低的 刺激后反應(yīng)性增生時,巨核細(xì)胞 DNA倍體數(shù)及 細(xì)胞大小都增加,MPV也增高。由于骨髓受抑 制而造成血小板減少的病人在恢復(fù)初期 MPV也升高,這主要因外周血血小板數(shù)減低應(yīng)激性地致使巨核細(xì)胞倍體數(shù)增加所致。(2)血小板數(shù)高、 MPVE常:骨髓增生性疾病如血小板增多,紅細(xì) 胞增多但MPVE常。(3 )血小板數(shù)與MPV均下降: AIDS (艾滋病)病毒直接影響巨核細(xì)胞并導(dǎo)致 血小板減少。大約2/3的病人血小板數(shù)降低,92% 的

18、病人MPV直下降,與骨髓受抑時的血小板狀態(tài) 相似?;及l(fā)育不良性貧血的病人積壓小板數(shù)通常 都降低,其MPV值也低,但PDW升高。當(dāng)骨髓 纖維化或被脈沖瘤細(xì)胞浸潤危及正常造血時,血 小板數(shù)減少,隨即MPV值也降低。再生障礙性 貧血,骨髓瘤或白血病化療后,敗血癥所致血小 板沽少等骨髓受抑性疾病中,雖然仍可能有一些 大血小板,但血小板的平均體積減小。(4 ) MP值與血小板數(shù)都升高:反應(yīng)性血小板增多癥病人 中,其MPV值升高,因血液的流失和本內(nèi)損傷 造成的急性大失血都可使血小板值上升。(5 )MP 髓纖維化、脾切除均可周到MPV升高,慢性髓細(xì) 胞性白血病和骨髓纖維化主要使骨髓增生異常,兩種疾病中,血小板體積經(jīng)常增大并大小不均。 外周血涂片中可出現(xiàn)大血小板。半數(shù)a-型和3 -型珠蛋白生成障礙性貧血的患者有 4種明顯 的血液學(xué)改變;血小板大小改變、紅細(xì)胞大小改 變、肝珠蛋白改變和對瘧原蟲抵抗力改變。其 MPV直增高而血小板數(shù)正常。12.

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