知識專題-生物技術(shù)實踐.ppt

1、學案 培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用(發(fā)酵、微生物、植物組織培養(yǎng)),核心術(shù)語(記準、寫準、理解透、把握內(nèi)涵和外延) 1.發(fā)酵（果酒、果醋、酵母菌、醋酸菌、酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵、腐乳、毛霉、泡菜、乳酸菌發(fā)酵、亞硝酸鹽） 2.微生物（培養(yǎng)基、無菌技術(shù)、消毒、滅菌、倒平板、平板劃線法、稀釋涂布平板法、剛果紅、纖維素酶） 3.植物組織培養(yǎng)（脫分化、再分化、愈傷組織、叢芽、外植體、MS固體培養(yǎng)基）,發(fā)酵技術(shù)的知識整合,圖示果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作流程和亞硝酸鹽檢測操作流程。 答案 （1）果酒和果醋制作流程：,（4）亞硝酸鹽的檢測：配制溶液制備標準顯色液制備樣品處理液比色 （1）分析上述實驗過程所依據(jù)的原理是什么？ 答

2、案,亞硝酸鹽含量檢測：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。,（2）分析比較發(fā)酵菌種酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌。,答案,（3）繪制果酒和果醋發(fā)酵裝置并分析設(shè)計依據(jù)。 答案,因酵母菌的繁殖需要空氣，醋酸菌是好氧細菌，所以果酒制作的前期和果醋制作的整個過程都需要氧氣。因酵母菌產(chǎn)生酒精時是厭氧的，應(yīng)控制充入氧的量，故應(yīng)在充氣口設(shè)置開關(guān)。 由于在發(fā)酵過程中都產(chǎn)生CO2，因此又需設(shè)置排氣口；為防止空氣中微生物的污染，排氣口應(yīng)連接一個長而彎曲的膠管。 因應(yīng)

3、對發(fā)酵的情況進行及時監(jiān)測，應(yīng)設(shè)置出料口便于取料。,請在標有序號的空白處填空，并將序 號及相應(yīng)答案寫在答題紙上： 下面是有關(guān)食醋和泡菜制作的實驗。請回答： （1）食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作： 第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料 中的淀粉分解成 （填中間產(chǎn)物），然后進一 步分解成葡萄糖，這一過程可用 （填淀粉指示 劑）來檢測，因為該試劑遇淀粉呈藍色，遇上述中 間產(chǎn)物呈紅色。 第二步：用 菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā) 酵過程中，玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是 。,糊精,碘液,酵母,發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量CO2，使瓶內(nèi)壓力升高而可能引起爆裂,第三步：用 菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，這一過

4、程 氧氣。,醋化醋桿,需要消耗,（2）泡菜發(fā)酵過程中，會產(chǎn)生多種酸，其中主要是 ，還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽 的定量測定可以用 法，因為亞硝酸 鹽與對氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N1萘基乙二 胺偶聯(lián)成 色化合物。進行樣品測定時，還要取 等量水進行同樣的測定，目的是 。,乳酸（或有機酸）,（光電）比色,紫紅,作為對照,解析 （1）大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶（淀粉酶必須冷卻后加入，因為酶的催化活性受溫度的影響），大米的主要成分是淀粉，在淀粉酶催化作用下，分解成糊精（主要含麥芽糖等），這一過程可用碘液（或KI-I2溶液）來檢測反應(yīng)的情況。酵母菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇的過程中產(chǎn)生CO2，隨反應(yīng)的進行發(fā)酵瓶

5、中CO2逐漸增多，瓶內(nèi)壓力升高，可能引起破裂，所以不要完全密閉。醋酸桿菌是好氧型細菌，在將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸的過程中消耗氧氣。 （2）泡菜發(fā)酵過程離不開乳酸菌，其產(chǎn)生的酸主要是乳酸和少量的亞硝酸鹽，亞硝酸鹽總量達到0.30.5 g時就會引起人中毒，必須對泡菜中亞硝酸鹽的含量進行測定，其測定方法可用比色法。,圖示用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基進行大腸桿菌的純化培養(yǎng)、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)和分解纖維素的微生物的分離實驗流程。 答案,微生物培養(yǎng)技術(shù)整合,（1）為什么說培養(yǎng)基中基本成分為水、碳源、氮源、無機鹽,并比較四者的區(qū)別。 答案 原因是：微生物的化學組成與其他生物大體相同，也是主要由C、H、O、

6、N、P、S等元素組成，這些元素最終來自外界環(huán)境中的各種無機化合物和有機化合物，歸納為碳源、氮源、無機鹽、水。四者的區(qū)別見下表：,（2）上述實驗流程的原理分別是什么？ 答案 大腸桿菌純化原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個菌落，這個菌落就是一個細胞繁殖而來的子細胞群體。 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)原理是： a.土壤中的細菌體內(nèi)能合成脲酶，這種物質(zhì)能夠催化尿素分解成無機物。 b.篩選原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（營養(yǎng)、溫度和pH值等），同時抑制或阻止其他微生物生長。,c.計數(shù)原理：顯微鏡直接計數(shù)法：利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品

7、中微生物的數(shù)量；活菌計數(shù)法：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有多少活菌。,纖維素分解菌的篩選原理 a.剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。 b.纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素，從而使菌落周圍形成透明圈。,（3）平板冷凝后為何要倒置以及操作過程中何時灼燒接種環(huán)？ 答案 平板冷凝后倒置的原因：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 a.操作的第一步以及每次劃

8、線之前都要灼燒接種環(huán)：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單菌落。,b.劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)，可以及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。,從自然菌樣篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般 步驟是：采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。 （1）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物 的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的 方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從 環(huán)

9、境采集。 （2）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長 的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而 分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微 生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇 的培養(yǎng) 基，并在 條件下培養(yǎng)。,海灘等高鹽,以淀粉為唯一碳源,高溫,（3）下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請分析接種的具體方法。,獲得圖A效果的接種方法是 ，獲得圖B效果的接種方法是 。 （4）配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行 ，接種前要進行 ，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在 條件下進行。,稀釋涂布平板法,平板劃線法,pH調(diào)整,高壓蒸汽滅菌,無菌,關(guān)鍵信息 “嗜鹽菌”、

10、“富集培養(yǎng)”、“耐高溫淀粉酶”、“溶化分裝” 知識依據(jù) 純化培養(yǎng)和分離技術(shù),完整分析 （1）嗜鹽菌就生活在高鹽環(huán)境中，如：海灘等環(huán)境。（2）耐高溫淀粉酶應(yīng)在存于以淀粉為唯一碳源且在高溫環(huán)境中生存的微生物體內(nèi)。 （3）從不同菌落之間的關(guān)系可以看出，A純化微生物的接種方法是稀釋涂布平板法，B純化微生物的接種方法是平板劃線法。（4）培養(yǎng)基配制時應(yīng)先溶化，再調(diào)整pH，滅菌。,植物組織培養(yǎng)技術(shù),圖示菊花組織培養(yǎng)和月季的花藥培養(yǎng)過程，并思考下列問題。 答案,（1）影響上述過程的因素。 答案 內(nèi)因：植物種類。同一植物材料的年齡、保存時間的長短。,（2）上述過程中其固體培養(yǎng)基是否需要更換？ 答案 需要。因為在

11、形成愈傷組織、生芽、生根不同階段所需的固體培養(yǎng)基的條件是有區(qū)別的，所以要及時更換培養(yǎng)基。 （3）上述過程中都需要光照嗎？ 答案 在初期，菊花組織培養(yǎng)需要光照，而月季花藥的培養(yǎng)不需光照；而在后期均需光照。,（09廣州綜合測試）下圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：,（1）選用的材料合適與否是成功誘導出花粉植株的 重要因素，一般來說選用 期的花粉可提高成 功率。選擇花粉時，一般要通過 來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時需要 對花粉的細胞核進行染色，常用的染色劑是 。,單核,鏡檢（顯微鏡觀察）,醋酸洋紅,（2）上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織 主要取決于培養(yǎng)基中

12、 。 （3）胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于愈 傷組織的細胞排列疏松無規(guī)則，是一種高度 的薄壁細胞，胚狀體與 發(fā) 育形成的胚有類似的結(jié)構(gòu)，即具有胚芽、胚軸和胚 根。 （4）無菌技術(shù)也是成功誘導出花粉植株的重要因 素，請說明下列各項需要消毒，還是需要滅菌。 培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿，接種環(huán)，花蕾，實驗 操作者的雙手，三角錐形瓶。 （填編號） 需要滅菌， （填編號）需要消毒。,激素的種類及其濃度配比,液泡化,正常受精卵（或受精卵）,（5）試管苗移栽到土壤前，通常要進行壯苗處理，應(yīng)如何壯苗？ 答案 將試管苗移栽到經(jīng)消毒過的培養(yǎng)基中生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中。 關(guān)鍵信息 “花藥”、“愈傷組織

13、”、“消毒”、“滅菌”、“壯苗” 知識依據(jù) 月季花藥離體培養(yǎng)過程,完整分析 （1）單核期花粉對離體刺激敏感，選用該期花粉可提高培養(yǎng)的成功率，選擇花粉時可用顯微鏡觀察、篩選；對花粉細胞核染色應(yīng)該選擇堿性染料，常用醋酸洋紅。（2）細胞培養(yǎng)成植株的兩條途徑取決于植物激素的種類及比例，尤其是生長素和細胞分裂素。（3）愈傷組織細胞的特點是細胞排列疏松、無規(guī)則、高度液泡化；胚狀體是具有與胚相似的結(jié)構(gòu)，即具有胚芽、胚軸和胚根。（4）滅菌對象為培養(yǎng)基和實驗器材，消毒對象為要保持活性的材料和實驗者自身。（5）壯苗就是使試管苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境的做法。,1.生物的營養(yǎng) 營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。營養(yǎng)物質(zhì)

14、是指維持機體生命活動，保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。在人及動物，營養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類；在植物，營養(yǎng)物質(zhì)包括礦質(zhì)元素、水、二氧化碳三類；在微生物，則有水、無機鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。,2.消毒和滅菌的區(qū)別,3.生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點為：,4.平板劃線法和稀釋涂布平板法的注意事項,一、選擇題 1.（09江蘇四市）下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述，正確的是（） A.果酒和果醋的制作都是由酵母菌完成的 B.制果醋的溫度要比制果酒的溫度高些 C.傳統(tǒng)的葡萄酒制作一定需要人工接種菌種 D.葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要將瓶

15、裝滿,解析 果酒的制作是由酵母菌完成的，果醋的制作是由酵母菌和醋酸菌共同完成的。因醋酸菌的發(fā)酵最適溫度高于酵母菌，所以制果醋的溫度要比制果酒的溫度高些。傳統(tǒng)的葡萄酒釀造，都是采用自然發(fā)酵的工藝，就是不人為地添加任何菌種，靠葡萄本身攜帶的自然界的酵母菌，在葡萄漿或分離后的葡萄汁里自發(fā)地繁殖，最終發(fā)酵成葡萄酒。葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，果汁量一般不要超過瓶總體積的2/3，以保證酵母菌有氧呼吸快速繁殖，為以后的無氧發(fā)酵做準備。 答案 B,2.（09黃山質(zhì)檢）制果醋時，要適時通過充氣口進行充氣是因為（） A.醋酸菌是好氧菌，將酒精變成醋酸時需要O2的 參與 B.酵母菌進行酒精發(fā)酵時需要O2 C.通氣以防止發(fā)

16、酵液霉變 D.防止發(fā)酵時產(chǎn)生的CO2氣體過多而引起發(fā)酵瓶的 爆裂 解析 制果醋時，酵母菌先在無氧條件下進行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精，而后需氧型醋酸桿菌在有氧條件下把酒精轉(zhuǎn)化成醋酸，充氣是為了保證需氧型的醋酸桿菌進行正常的代謝活動。,A,3.果酒的制作離不開酵母菌，在配制酵母菌的培養(yǎng)基時，常添加一定濃度的葡萄糖液，如果葡萄糖濃度過高，反而會抑制酵母菌的生長。其原因最可能是（） A.葡萄糖被合成了淀粉B.酵母菌細胞失水 C.改變了培養(yǎng)液的pHD.酵母菌發(fā)生了變異 解析 如果葡萄糖濃度過高，導致酵母菌細胞失水，從而不能正常生長繁殖。,B,4.（09南京調(diào)研）某同學在制作腐乳的過程中，發(fā)現(xiàn)豆腐腐敗變質(zhì)，下列不

17、屬于其原因的是（ ） A.用鹽腌制時，加鹽量太少 B.用來腌制腐乳的玻璃瓶，沒有用沸水消毒 C.制作鹵湯時，料酒加的量較多 D.裝瓶后，沒有將瓶口密封 解析 該題考查腐乳的制作。制作鹵湯時，加料酒只會抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味，加料酒過多不會使腐乳腐敗變質(zhì)。,C,5.利用如圖裝置進行果酒發(fā)酵實驗，下列說法錯誤的是（） A.整套裝置需作滅菌處理，過濾膜應(yīng)能阻止細胞通 過，方能防止雜菌污染 B.通氣一段時間后,b瓶中有氣泡產(chǎn)生 C.若繼續(xù)進行果醋發(fā)酵，應(yīng)接種醋酸菌，不斷通 氣，并適當降低溫度 D.向a瓶培養(yǎng)液中加入固定化酵母，發(fā)酵一段時間 凝膠珠可能上浮,解析 該題考查果酒的制作

18、。若繼續(xù)進行果醋發(fā)酵，應(yīng)該接種醋酸菌，不斷通氣，但需要提高溫度。 答案 C,6.（09合肥質(zhì)檢）右圖是 微生物平板劃線示意圖。 劃線的順序為12345。下 列操作方法正確的是（ ） A.只有操作前將接種環(huán)放在火焰旁灼燒滅菌 B.劃線操作需在火焰上進行 C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落 D.在12345區(qū)域中畫線前后都要對接種環(huán)滅菌,解析 操作的前后都要對接種環(huán)進行滅菌。劃線操作需在火焰旁進行，而不是火焰上；所有的劃線區(qū)都有可能得到所需菌落，只是5區(qū)相對較純。本題考查微生物培養(yǎng)過程中常用的方法之一即平板劃線法。 答案 D,7.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是（） A.計算、稱量、倒平板、溶化、

19、滅菌 B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板 D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板 解析 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計 算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。,C,8.檢驗培養(yǎng)基是否有雜菌污染的最有效方法是 （ ） A.將未接種的培養(yǎng)基放在實驗桌上培養(yǎng) B.將未接種的培養(yǎng)基放在窗臺上培養(yǎng) C.將未接種的培養(yǎng)基放在無菌的恒溫箱中培養(yǎng) D.將已接種的培養(yǎng)基放在恒箱中培養(yǎng) 解析 若培養(yǎng)基中有雜菌污染，那么將未接種的培養(yǎng)基放入無菌的恒溫箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)基表面會有菌落出現(xiàn)。,C,9.（09寧波期末）下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，不正確的是（） A.培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供

20、營養(yǎng) B.培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素影響愈傷組織的 生長和分化 C.離體器官或組織的細胞都必須通過再分化才能形 成愈傷組織 D.高度分化的細胞只有處于離體狀態(tài)時才能表現(xiàn)出 全能性 解析 該題考查植物組織培養(yǎng)的條件、原理。離體組織、器官需要經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，經(jīng)過再分化形成根和芽。離體的細胞在體外培養(yǎng)的條件下才能表現(xiàn)全能性，細胞在植物體內(nèi)進行了細胞分化，形成不同形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能的細胞。,C,10.（09徐州調(diào)研）下列有關(guān)生物技術(shù)的敘述，不正確的是（） A.制作果醋時，必須向發(fā)酵裝置不斷地補充無菌空 氣，以保證醋酸菌的生長 B.制作腐乳時，加鹽腌制可使豆腐塊變硬且能抑制 雜菌生長 C.變酸的

21、酒表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的 D.用傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)制葡萄酒必須添加酵母菌菌種 解析 該題考查生物技術(shù)的利用。利用傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)制作葡萄酒，在培養(yǎng)液中不需要加入酵母菌，既然是傳統(tǒng)的，就是用自然界已存在的酵母菌，也就是分布在原材料上的野生酵母。,D,11.用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品的細菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是（） A.涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230 B.涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是215和 260，取平均值238 C.涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、 212、256，取平均值163 D.涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是

22、210、 240和250，取平均值233,解析 在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以A、B不準確。C項雖涂布了3個平板，但是其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。 答案 D,12.（09金華十校聯(lián)考）下列四個選項中，肯定沒有采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的一項是（） A.花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株 B.秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗得到多倍體植株 C.基因工程培育的抗棉鈴蟲的棉花植株 D.細胞工程培育“番茄馬鈴薯”雜種植株 解析 植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖的手段，可以將離體的單

23、個植物細胞培養(yǎng)成完整的植株，A、C、D三個選項中均要將單個細胞培養(yǎng)成植株。,B,二、非選擇題 13.（09撫順模擬）酵母菌是一種真菌，與人們的日常生活密切相關(guān)，也是現(xiàn)代技術(shù)研究常用的模式生物，請回答： （1）土壤中富含多種微生物，將其浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可得到酵母菌，這一過程叫做 ，這種特定培養(yǎng)基可稱為 。 （2）用酵母菌發(fā)面做饅頭時，在發(fā)酵的面團里加入一些純堿的主要作用是 。 （3）制作果酒時，將酵母菌加入到葡萄汁中，控制好發(fā)酵條件，10 d后得到散發(fā)著酒香的成品，此過程的原理是 。,酵母菌的,分離,選擇培養(yǎng)基,中和發(fā)酵時產(chǎn)生的酸類物質(zhì),在無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵,（4）蘋果醋也

24、是受現(xiàn)代人所青睞的健康飲品之一， 其生產(chǎn)過程中則利用了代謝類型為 的 的發(fā)酵作用，該過程需要控制的溫度條件是 。 （5）在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中，果醋的制作往往在果酒制作基礎(chǔ)上進行，請用相關(guān)反應(yīng)式表示： 。,異養(yǎng)需氧型,醋酸菌,3035,C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O+能量,酶,解析 土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可得到酵母 菌，這屬于酵母菌的分離，所用的特定培養(yǎng)基為選 擇培養(yǎng)基。用酵母菌發(fā)面做饅頭時，酵母菌呼吸作 用產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，發(fā)酵 的面團里加入一些純堿可中和碳酸。酵母菌釀酒是 利用酵母菌無氧呼吸能產(chǎn)生酒精。果醋是醋酸菌的 發(fā)酵產(chǎn)物，發(fā)酵溫度為3035，醋酸菌的

25、代謝類型 為異養(yǎng)需氧型。果醋的制作往往在果酒制作基礎(chǔ)上 進行，相關(guān)反應(yīng)式為：C2H5OH+O2 CH3COOH +H2O+能量。,酶,14.（09臨沂5月模擬）纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素。回答下列問題： （1）在培養(yǎng)纖維素分解菌的過程中，進行平板劃線時，每次劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，原因是 。 （2）在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用 染色法，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對纖維素分解菌進行篩選。甲同學在實驗時得到了如圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于 內(nèi)。 A.B. C.D.,及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境或感染實驗操作者,剛果紅,A,（3）乙同學打算從牛胃中分離纖維

26、素分解菌并計 數(shù)，與分離醋酸菌相比，進行培養(yǎng)時除了營養(yǎng)不同 外，最主要的實驗條件差別是 ，該同 學采用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際 數(shù)目 。 （4）丙同學在提取和分離纖維素酶的過程中，為了 保證抵制外界酸和堿對酶活性的影響，采取的措施 是向提取液和分離液中添加 。若探究纖 維素酶活性的最適溫度，如何設(shè)置對照？ 。 （5）丁同學采用固定化纖維素分解菌技術(shù)產(chǎn)生葡萄 糖，則在溶解海藻酸鈉溶液時，操作要領(lǐng)是采用 的方法。,保證無氧環(huán)境,少（低）,緩沖溶液,不同的溫,度梯度之間就可以相互對照,小火間斷加熱,解析 （1）為了避免細菌污染環(huán)境和感染操作者，在劃線結(jié)束后要灼燒接種環(huán)殺死其上殘留的菌種

27、。 （2）在篩選纖維素分解菌的過程中，常采用剛果紅染色；纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素，從而使菌落周圍形成透明圈，所以纖維素分解菌位于中。 （3）牛胃中纖維素分解菌生存環(huán)境為無氧環(huán)境，而醋酸菌必須是有氧環(huán)境，采用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)，往往比真正活菌個體實際數(shù)目少，因為有可能一個菌落來自多個菌體。,（4）添加緩沖液有助于調(diào)節(jié)改善酸堿環(huán)境，來抵制外界因素對酶活性的影響，若探究最適溫度，可以不同的溫度梯度之間相互對照。 （5）因為海藻酸鈉在水中溶解速度較慢，需要小火間斷加熱的方法促進其溶解。 拓展 接種環(huán)第一次灼燒目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線之前灼燒目的是殺死上次劃

28、線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線菌種來自上次劃線末端；劃線結(jié)束后灼燒的目的：殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。,15.請回答下列關(guān)于微生物的問題： （1）腐乳制作過程中所用的微生物主要是 ，腐乳表面往往有一層致密的皮，這層皮實際上是微生物的 ，它對人體是無害的。 （2）欲從土壤中分離能高效降解 的細菌，可在培養(yǎng)基中加入有機磷農(nóng)藥制成選擇培養(yǎng)基進行分離；如果想進一步對初步篩選得到的菌株進行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是 。 （3）微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 ，其中對培養(yǎng)皿進行滅菌常用的方法是 。,毛霉,匍匐菌絲,有機磷農(nóng)藥,稀釋涂布平,板法,防止外來雜菌的

29、污染（無菌技術(shù)）,干熱滅菌法,（4）工廠化生產(chǎn)果酒時，為了提高果酒的品質(zhì)，更好地抑制其他微生物生長，采取的措施是 。具有耐高糖特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后，在選擇培養(yǎng)基中添加 ，通過篩選可以得到具有耐高糖性的突變菌。 （5）突變菌往往帶有一些特殊的基因。在獲得這些基因的過程中，PCR技術(shù)相當重要。PCR擴增反應(yīng)中加入引物和DNA聚合酶的作用分別是 。,直接,在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌,高濃度的糖,結(jié)合 在模板DNA上，提供DNA延伸起始點、從引物3端開始催化DNA鏈的延伸,解析 （1）腐乳制作中所用微生物主要是毛霉，腐乳表面致密皮實際上是匍匐菌絲。 （2）若要分離降解有機磷農(nóng)藥的細菌，可加入有機磷農(nóng)藥制成選擇培養(yǎng)基。純化、計數(shù)過程中可采用的接種方法為稀釋涂布平板法。 （3）若要獲得純