花生中植物螯合肽PC的研究__本科畢業(yè)論文

1、題 目： 花生中植物螯合肽PC的研究 學(xué) 院： 專 業(yè)： 姓 名： 指導(dǎo)教師： 完成日期： 摘要重金屬是我們熟知的環(huán)境污染物之一，近些年， 工礦業(yè)的發(fā)展，農(nóng)藥、 化肥的使用，使得重金屬對(duì)水體，土壤的污染愈來愈嚴(yán)重，而在植物的器官中累積的重金屬，最終經(jīng)過食物鏈迫害人類。利用植物減輕重金屬污染是國(guó)內(nèi)外研究開發(fā)的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)鎘被人體吸收后，在體內(nèi)變成鎘硫蛋白，鎘硫蛋白具有選擇性，可累積于腎、肝中。其中，進(jìn)入體內(nèi)的1/3的鎘可被腎臟吸收，腎臟是鎘中毒的靶器官。其它臟器例如胰、脾、甲狀腺和毛發(fā)等也會(huì)累積一定量。鎘在體內(nèi)可與含氨基、羥基、硫基的蛋白質(zhì)分子結(jié)合，抑制許多酶系統(tǒng)，從而使肝、腎器官中酶系統(tǒng)的正

2、常功能受阻。由于鎘會(huì)損傷腎小管，病人會(huì)出現(xiàn)糖尿、蛋白尿和氨基酸尿的癥狀。更嚴(yán)重的會(huì)使使骨骼的代謝受阻，造成骨質(zhì)疏松、萎縮等一系列癥狀，鎘的危害已經(jīng)受到人們極大地關(guān)注。本研究以花生形成的植物螯合肽含量為指標(biāo)，探索了不同濃度的鎘誘導(dǎo)花生產(chǎn)生植物螯合肽含量的影響。以在不同重金屬鉻的環(huán)境下生長(zhǎng)的花生為原料，利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀來測(cè)定花生中植物螯合肽的含量。本實(shí)驗(yàn)利用C反相柱，用乙腈和1.5%的三氟乙酸檢測(cè)了花生中在不同濃度鎘誘導(dǎo)下形成的植物螯合肽含量。在以上的實(shí)驗(yàn)條件下，檢出限為0.25mg/L；線性范圍分布在0.60-0.25mg/L( R2=0.9988)之間，回收率在80% 以上，靈敏度

3、相對(duì)較高。選用該方式對(duì)花生中的螯合肽做定量分析，證明了花生中有植物螯合肽。結(jié)果表明，重金屬鎘污染的花生中都檢出不同濃度的植物螯合肽。本實(shí)驗(yàn)的目的在于為重金屬鎘污染的減弱做一份貢獻(xiàn)。 關(guān)鍵字：鎘污染；花生；植物螯合肽（PC）；高效液相色譜-質(zhì)譜Abstractheavy metals is known asone of environmental pollutants, in recent years, the development of industrials, the use of pesticides, fertilizers, makes the heavy metals in the

4、 aquatic and soil pollution becomes more and more serious, and heavy metals are accumulated in the plant organs, the finally, human is persecuted by heavy metals through the food chain.Using plants to reduce heavy metal pollution is a hotspot of research and development at home and abroad. The study

5、 found that cadmium absorbed by the body will turn into cadmium sulfide protein, cadmium sulfide is a selective protein, can be accumulated in kidney, a third of the cadmium can be absorbed by the kidney, the kidney is the target organ of cadmium poisoning. Other organs such as pancreas, spleen, thy

6、roid gland and hair also be accumulated a certain amount. Cadmium in the body will be united by protein molecules containing amino, hydroxyl, inhibition of many enzyme system, so that the normal function of the liver and kidney organs in enzyme system will be damaged. Due to the cadmium, the patient

7、 can appear the symptom of diabetes, protein and amino acid urine, More seriously, which can make bone metabolism, cause osteoporosis, contraction and a series of symptoms, the harm of cadmium has been greatly concerned.In this study, Chelating peptide content in plants was used as an index, which e

8、xplored the influence that different concentrations of cadmium induced the content of peanut plant chelating peptide, the study use peanuts grown in different heavy metal chromium as raw material and take advantage of high performance liquid chromatography-mass spectrometry instrument to determine t

9、he content of peanut plant in chelating peptide.This experiment took advantage of reversed phase column C, acetonitrile and 1.5% trifluoroacetic acid, which detected the chelating peptide content of peanut under The induced of different concentrations of cadmium. In the above experimental conditions

10、, the detection limit was 0.25 mg/L; distribution of the linear range was 0.60 -0.25 mg/L (R2 = 0.9988), and between the recovery rate was over 80%, relatively high sensitivity. Choosing the way of peanut chelating peptide was found quantitative analysis. The results showed that the Peanuts polluted

11、 by heavy metal cadmium were detected with different concentration of plant chelating peptide.The purpose of the study was to do a contribution for heavy metal cadmium pollution reduced.Key words：Cadmium pollution; Peanuts; Plant chelating peptide (PC); High performance liquid chromatography - mass

12、spectrometry目錄序言1 0.1 植物螯合肽( PC)的簡(jiǎn)介10.2 植物螯合肽( PC)的合成1 0.3 PC對(duì)重金屬的解毒作用3第1章 實(shí)驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)方法51.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑及儀器51.2 實(shí)驗(yàn)方法5第2章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分討論7 2.1 PC標(biāo)準(zhǔn)樣品混合物的色譜分離72.2 鎘對(duì)花生體內(nèi)PC和GSH含量和PC狀態(tài)的影響72.3 花生樣品中PC4的含量檢測(cè)8第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)論12 3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論12 3.2 研究展望12參考文獻(xiàn)13致謝14序言0.1植物螯合肽( PC)的簡(jiǎn)介 0.1.1 PC的種類植物螯合肽（PC phytoehelatin），是在重金屬誘導(dǎo)下，植物通過一個(gè)富含

13、半胱氨酸的多肽的酶催化合成的一種巰基含量特別高蛋白質(zhì)。研究表明PC由Glu、Cys、 Gly三種氨基酸組成，分子量位于1.5-4KD之間。研究表明PC最初是在用200 mMol/LCdSO4誘導(dǎo)蛇根木懸浮細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)的，目前人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了5種帶有不同的C-末端氨基酸種類的PC，分別是：（-谷氨酸-半胱氨酸）n-Gly，(-谷氨酸-半胱氨酸）n-Gly，（-谷氨酸-半胱氨酸）-Ala，（-谷氨酸-半胱氨酸）n-ser和（-谷氨酸-半胱氨酸）-n。0.1.2 PC螯合重金屬的原理植物螯合肽對(duì)重金屬離子具備很強(qiáng)的螯合能力，因此在重金屬的積聚與解毒過程當(dāng)中起著決定性功能。其機(jī)理是：重金屬離子植物吸收到體

14、內(nèi)后，與細(xì)胞內(nèi)的PC 作用構(gòu)成復(fù)合物， 而后轉(zhuǎn)運(yùn)到特定的細(xì)胞器( 特別是液泡)，然后區(qū)室化絡(luò)合，降低細(xì)胞質(zhì)中有毒的金屬離子的濃度。0.1.3 PC的測(cè)定方法PC的測(cè)定方式包含高效液相色譜-氨基酸主動(dòng)分析聯(lián)用法、前衍生反相高效液相色譜熒光檢測(cè)法、電化學(xué)法、 電泳法。其中，柱前衍生液相色譜熒光法的優(yōu)點(diǎn)是能測(cè)定不同種類的 PC，但是衍生試劑難購(gòu)買到，并且衍生過程復(fù)雜；電化學(xué)法和電泳法可測(cè)定總的PC，但不能確定不同作物的PC的類型；而高效液相色譜-氨基酸自動(dòng)分析聯(lián)用方式難達(dá)成；高靈敏度液相色譜-質(zhì)譜法，具有分離率高，可在多肽復(fù)合物測(cè)定PC結(jié)構(gòu)鑒定等優(yōu)點(diǎn)，成為PC的主要測(cè)定方法。0.2 PC合成 Sal

15、t等研究者將植物對(duì)金屬的解毒機(jī)制分為生物轉(zhuǎn)化、細(xì)胞修復(fù)作用、區(qū)室化作用、螯合作用這四個(gè)方面。螯合效應(yīng)是指在植物中的PC利用高親和力螯合金屬離子，金屬濃度降低后，植物重金屬毒性有所削弱。螯合作用是指植物中的重金屬經(jīng)過與PC這種高親和力物絡(luò)合成螯合物從而使重金屬離子在植物體內(nèi)的濃度降低，削弱其毒性。0.2.1 PC的合成需要金屬離子的誘導(dǎo)PC 的合成可被金屬離子激活，因?yàn)槊傅幕钚阅鼙唤饘匐x子誘導(dǎo)。當(dāng)植物組織液、細(xì)胞生長(zhǎng)介質(zhì)或酵母培養(yǎng)液中加入微量重金屬元素時(shí)，即可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生少量PC，其中Cd2+對(duì)PC 的影響最大。曾有學(xué)者用實(shí)驗(yàn)測(cè)定了金屬離子對(duì)PC的合成的誘導(dǎo)能力比較，結(jié)果顯示其中Cd2+對(duì)PC合

16、成的影響最大，同時(shí)Ni2+、Cd2+、Cu2+、Hg2+、Ag+、Sn2+、Zn2+、Sb3+、P2+、Au+均可誘導(dǎo)PC合成，然而將激活劑金屬離子濃度降低或者是外加金屬螯合劑( 例如EDTA)時(shí)，PC的合成就會(huì)被迫停止，這說明 PC 生物合成需要金屬離子的誘導(dǎo)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)表明不同金屬對(duì) PC誘導(dǎo)作用在不同種植物中有不同的強(qiáng)度。0.2.2 PC是以谷胱甘肽(GSH)為底物的酶促反應(yīng)關(guān)于GSH合成 PC的過程，研究者普遍認(rèn)為按一下方式進(jìn)行的：-GCS-Glu-Cys+GlyGlu+Cys- ATP -PCGSHGS-ATP-PCS+ Cd2+ 圖 1.1PC 的生物合成過程半胱氨酸：Cys；谷氨酸

17、：Glu；甘氨酸：Gly；谷胱甘肽：GSH 谷胱甘肽酶：GS；-谷氨酰半胱氨酸合成酶：GCS；植螯合肽：PC；植物螯合肽合成酶：PCS 第一步-GCS使用ATP把Cys和Glu連接成- Glu- Cys，再由ATP供應(yīng)能量， 谷胱甘肽合成酶（GS）在-谷氨酸-半胱氨酸連接甘氨酸殘基，從而合成一個(gè)-谷氨酸-半胱氨酸甘氨酸分子即GSH，植物螯合肽合成酶（植物chelatin合成酶，PCS）N端具有有源區(qū)和信號(hào)區(qū)，沒有Cd2 +的存在時(shí)，C端檢測(cè)領(lǐng)域不會(huì)觸發(fā)信號(hào)，則N端的激活結(jié)構(gòu)域的酶就無活性；而當(dāng)溶液中有 Cd2+時(shí)，信號(hào)檢測(cè)域感受到Cd2+，與Cd2+、Cys連接構(gòu)成特別的空間結(jié)構(gòu)，使酶的N端區(qū)

18、域擁有催化活性。在這個(gè)地區(qū)，一個(gè)分子的PC合酶催化另一種分子GSH合成PC2，PC2可以繼續(xù)被GSH催化，使 PC3進(jìn)一步合成。0.3 PC對(duì)重金屬的解毒作用0.3.1 PC可提高植物對(duì)重金屬的抗性 斯特芬和其他科學(xué)家在1986年使番茄品種細(xì)胞用足以致死的濃度處理，獲得了抗Cd2+的細(xì)胞，獲得的抗性細(xì)胞中，植物螯合肽的累積量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞， 但隨著-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制劑BSO（丁亞磺酰亞胺）作用于Cd2+抗性細(xì)胞之后，其又恢復(fù)了對(duì)Cd2+的敏感性，所以他們認(rèn)為PC含量與細(xì)胞對(duì)Cd2+的抗性有關(guān)，做了不同植物的實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果是一樣的。研究人員發(fā)現(xiàn)，吃蘑菇的美味牛肝菌（牛肝菌）通過PC螯合

19、Cd（Collin漢森2007），當(dāng)線蟲cepcs3和煙草耐Cd能力改進(jìn)以后，胞漿中PCCD所占的比重也增加了。許多試驗(yàn)表明，隨著鎘濃度的增加，鎘螯合肽細(xì)胞數(shù)量也增加，高分子螯合肽含量也增加，這些研究表明，PC可以減輕鎘的毒性作用，越來越多的研究表明，PC不僅可以緩解重金屬鎘對(duì)植物的毒性作用還可以提高對(duì)重金屬鎘的抗性。0.3.2 PC解除重金屬的毒害作用機(jī)理 植物螯合肽的功能主要是通過絡(luò)合重金屬與將重金屬區(qū)室化來減輕重金屬對(duì)細(xì)胞的毒害，多數(shù)金屬離子都能被PC 絡(luò)合，但是研究較清楚的是植物螯合肽與金屬Cd的絡(luò)合機(jī)制，并且日前分離出的PC大多是PC-Cd型復(fù)合物。Howden等從被Cd2+誘導(dǎo)的植

20、物中分離出兩種 PC-Cd復(fù)合物，一種是硫含量低的Pc-Cd復(fù)合物和含硫量高的pC-CdS 復(fù)合物，它們均是可溶性化合物，硫含量低的Pc-Cd是Cd2+ 的運(yùn)輸載體，大多數(shù)在細(xì)胞質(zhì)中；硫含量高的pC-CdS是液飽中Cd 2+存在的主要方式。植物對(duì)Cd2+解毒方法可以分為硫含量低的Pc-Cd復(fù)合物的跨液泡膜轉(zhuǎn)運(yùn)、硫離子在液泡中的累積導(dǎo)致的含硫量高的pC-CdS 形成這兩種方式。當(dāng)Cd2+進(jìn)入到細(xì)胞后，PC合酶與Cd2+形成硫含量低的Pc-Cd復(fù)合物，它在重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白hmtl( heavy metal toleranee)（位于液泡膜上）的幫助下進(jìn)入到液泡里面，接著和液泡中的Cd2+、硫化物結(jié)合

21、形成毒性較低的HMW，從而解除了Cd2+的毒性。研究還發(fā)現(xiàn)在酸性環(huán)境下，液泡中的HMW復(fù)合物上的金屬離子還能和檸檬酸、蘋果酸相結(jié)合，失去金屬離子的PC 分解成形成氨基酸，又返回細(xì)胞質(zhì)中參與 PC的合成。見圖1.2圖1.2 PC解除重金屬的毒害作用機(jī)理示意圖第1章 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法1.1實(shí)驗(yàn)材料、試劑及儀器 該實(shí)驗(yàn)所用的實(shí)驗(yàn)試劑有：三氟乙酸（分析純，沈陽(yáng)新紀(jì)化學(xué)公司）；乙腈(色譜純，沈陽(yáng)新紀(jì)化學(xué)公司)；(- G l u-Cys) 4- A la(北京盛科博源生物科技有限公司)；PC標(biāo)準(zhǔn)品（純度 97%的丙氨酸類植物螯合肽PC4 )；去離子水；花生。該實(shí)驗(yàn)所用的實(shí)驗(yàn)儀器有：配備二極管陣列檢測(cè)器；

22、色譜儀 (美國(guó)公司 )；單極質(zhì)譜聯(lián)用儀 (美國(guó)公司) ； 有50mm、1 mm、 3.5mm規(guī)格的C18色譜柱（美國(guó)公司)，配有電霧化學(xué)源，質(zhì)譜工作站。1.2實(shí)方法驗(yàn)1.2.1 花生樣品的處理 花生種植后，樣品被粉碎，利用索氏提取脫脂，脫脂干燥后是一種粗蛋白粉，稱 0 .6-2.5 g蛋白粉末。1.2.2 花生中PC的提取 根據(jù)sneller（2000）的方法，把花生鮮樣用液氮在研缽中磨碎，然后冷凍干燥達(dá)70小時(shí)，冷凍干燥以后稱量約0.1g的花生，再加入7mL的0.1% TFA（含6.3mmol/LDOTA，PH1)，充分振蕩 30min ，然后4度下， 在約10000 r/m in離心率下離

23、心20 m i n ，吸取上清液以備待測(cè)用。1.2.3 巰基化合物標(biāo)準(zhǔn)品的配制 選用0.1% TFA(含6.3mmol /L的LDTPA) 制成4種巰基化合物貯備液，濃度均為1mmol /L的，分別為：Cd- PC 標(biāo)準(zhǔn)品（(美國(guó) Waters公司），Cys和GSH 備用液，置于4冰箱保存。1.2.4 花生中GSH，PC等總含量的測(cè)定 配置含1.6 mmol /L 的埃爾曼試劑試劑顯色劑(含6.3 mmol /L的DTPA)的200 mmol /L的HEPPS 緩沖液（pH = 7.6），避光保存，取花生組織提取液 300 L 加到300L DTNB顯色劑中，混勻后在30下反應(yīng)3 min，其中

24、GSH，PC和TNB會(huì)發(fā)生反應(yīng)，生成黃色化合物，非蛋白巰基化合物與黃色化合物含量符合1:1的比例關(guān)系，依據(jù)有差別的花生樣品在420 nm下的吸光度值不同，便可計(jì)算出花生樣品中巰基含量。1.2.5 衍生試劑(mBBr)的配制及柱前衍生反應(yīng) 衍生試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用，用100%的乙腈正確配制250mmol /L的mBBr衍生試劑，搖勻后，置于4冰箱避光保存。柱前衍生化反應(yīng)為將10 L 25mmol/ L的mBBr和670 L 200 mmol/LHEPPS(pH = 8.0 )加到300L 的4種標(biāo)準(zhǔn)液和植物組織上清液中，充分混合，37孵化反應(yīng)40min，于200 L 的1 mmol/L MSA激波旋

25、渦抖動(dòng)，停止反應(yīng)，并作試劑空白的衍生反應(yīng)，反應(yīng)液在4冰箱避光保存，等待高效液相色譜法測(cè)定。1.2.6 色譜質(zhì)譜條件 （1） 實(shí)驗(yàn)的色譜條件：選用洗脫劑為 0 .1 % 三氟乙酸 ( TFA)乙腈進(jìn)行梯度淋洗， 流速為0.2mL /min；淋洗梯度條件見表1.1；設(shè)置柱溫為30；220-280 nm的二極管陣列檢測(cè)；進(jìn)樣容量為10ml。表1.1 淋洗梯度時(shí)間（M）三氟乙酸(0. 1%)乙腈(色譜純)流速（0.2mL/mi n）0100200.210100200.240201000.260100200.2（2）質(zhì)譜條件：柱子型號(hào)為SB- C18；電噴霧電離的方式，噴霧電壓：3.5 kV；掃描范圍是

26、：m / z 600-1500；錐電壓為：25 V；采樣錐電壓：20 V；溶劑氣體溫度為：360；采樣錐電壓：20 V；氣體溫度和溶劑：360；脫溶劑氣流量：110m L /h。第2章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論2.1 PCs標(biāo)準(zhǔn)樣品混合物的色譜分離 經(jīng)提取的GSH，PCs巰基化合物和衍生試劑(mBBr) 在45的條件下衍生反應(yīng)40min 以后，生成帶有熒光的衍物mBSR， 在MBSR流線（ACN 0.1% TFA）下，一定濃度的混合樣品的4種化合物和GSH的分離是很清楚的，依次是GSH PC2 PC3 PC4這樣的分離順序。見圖2.1 0 10 20 30 40t/min圖2.1 混合樣品中標(biāo)準(zhǔn)PC，G

27、SH化合物的色譜分離2.2 鎘對(duì)花生體內(nèi)PC和GSH含量和PCs狀態(tài)的影響由圖2.2可得到，在濃度為60 mol/L的Cd 的脅迫作用下，花生體內(nèi)GSH與未加毒的比較相比含量無有明顯差別，這是由于土壤環(huán)境中有Fe 或者Zn等金屬離子的存在使得在無Cd的對(duì)照組中也檢測(cè)到 了PC2 ，通過設(shè)置多重比較，可知，花生經(jīng)Cd 處理后誘導(dǎo)花生產(chǎn)生了PC4，在Cd的影響下花生體內(nèi)產(chǎn)生的含量最大的是PC3，PC4與PC2 含量沒有明顯的差異。圖2.2 花生樣品中GSH，PCs的分離色譜圖圖2.3 Cd脅迫下花生中GSH，PCs的 含量2.3 花生樣品中PC4的含量檢測(cè)2.3.1選擇HPLC質(zhì)譜條件 選用正離子

28、模式，負(fù)離子形式分別掃描濃度為 1.0mg /L 的PC標(biāo)準(zhǔn)溶液，證實(shí)PC4在負(fù)離子模式下信號(hào)反應(yīng)很弱，在正離子模式下反應(yīng)信號(hào)比較靈敏。優(yōu)化正離子掃描條件下各種條件，例如錐電壓為：25 V；噴霧電壓為：3.5 kV； 溶劑氣體溫度的去除：350；采樣錐電壓：20 V；透鏡電壓l2.0 V； 錐孔溫度為：105；脫溶劑氣流量為：110m L/h ； 全掃描范圍m /z 為：500-1200，反吹氣流量為：80m L /h。圖 2.4為條件優(yōu)化以后PC4的總離子流圖，圖 2.5為PC4化合物在正離子模式下的掃描質(zhì)譜圖。 圖2.4 PC 的總離子流圖圖2.5 正離子質(zhì)譜圖 PC4分子式為(-G l

29、u-Cys) 4-A la ，分子量為1018.22。從圖6b可以得出，信號(hào)反應(yīng)最強(qiáng)的是m/z1018的M +母離子峰；m /z 698的是M-Glu-Cys-Ala+離子峰，m/z 929的為M-Ala+離子峰，均為斷裂峰；m/z1019為 M + H +離子峰，m /z 521為M+H+ Na2 +離子峰，m /z 1056為 M- H + K +離子峰，大概是由于環(huán)境，樣品和容器含鉀，N和其他堿金屬，由于去除堿金屬樣品存在困難，所以在質(zhì)譜，K離子往往往作為一個(gè)特征離子。2.3.2線性范圍和檢出限 將PC標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成濃度為 0.5、1.0、5 .0、10.0和 20.0mg /L的梯度溶

30、液，用色譜-質(zhì)譜方式測(cè)定，橫坐標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度表示，縱坐標(biāo)用峰面積表示，繪制這個(gè)條件下標(biāo)準(zhǔn)線性回歸曲線。當(dāng)濃度為0.520.0mg/L時(shí)，線性方程為 y = 4351.3x+ 80275（r=0.9972）當(dāng)信噪比 S/N=3時(shí)，儀器檢出限為0.21mg /L，定量限為0.62mg /L。2.3.3 回收率和精密度選用統(tǒng)一花生樣品進(jìn)行重復(fù)的精密度實(shí)驗(yàn)，同時(shí)設(shè)置試劑作為空白，結(jié)果見表 2.1，結(jié)果表明，本方法對(duì)濃度水平為 25.5mg /kg的樣品中 ，測(cè)定的PC4平均回收率達(dá) 89.3 % ；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差達(dá)4.26 %。表格 2.1反映了回收率與精密度分析的結(jié)果 。表格2.1 實(shí)驗(yàn)的回收率與精密度的分析結(jié)果 ( n = 3)NUMBER分析結(jié)果mg/kg回收率(%)RSD124.688.14.26223.382.64.26325.589.34.262.3.4 實(shí)際花生樣品的分析 選用HPLC-MS檢測(cè)方法，在兩種不同鎘水平下測(cè)定了兩個(gè)花生品種。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，花生樣品均有不同濃度的PC4化合物的發(fā)現(xiàn)，表2.2是測(cè)定結(jié)果，PC4花生樣品譜圖如圖2.6所示。文獻(xiàn)表明，含（-谷氨酸-半胱