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文檔簡介
1、專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課堂演練當(dāng)堂達(dá)標(biāo)1. 下列有關(guān)培養(yǎng)基敘述正確的是()A .培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分都有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽B.除水以外的無機(jī)物都屬于無機(jī)鹽C .用培養(yǎng)基培養(yǎng)甲型H1N1流感病毒作為科學(xué)研究D .培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)調(diào) pH,適應(yīng)各微生物的生長解析:固氮微生物培養(yǎng)基可無氮源,有的無機(jī)物如NH4NO3可作氮源,H1N1流感病毒必須寄生在細(xì)胞內(nèi),不能用培養(yǎng)基培養(yǎng)。答案:D2. 關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是()A .滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C .接種環(huán)用灼燒的方法滅菌D .常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌等解
2、析:消毒是指用溫和的理化方法殺死體表或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),滅菌則是用強(qiáng)烈的理化因素殺死體內(nèi)外所有的 微生物,包括芽孢和孢子。答案:B3. 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是()A .計(jì)算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B.計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C .計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D .計(jì)算、稱量、滅菌、溶化、倒平板解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,應(yīng)先根據(jù)需要計(jì)算各成分 用量,然后稱量、溶化、滅菌、倒平板。答案:C4. 平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是 ()A .接種時(shí)再拿起來方便B.在皿底上標(biāo)記日期等方便C .正著放置容易破碎D .防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染解
3、析:平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。答案:D5. 從自然菌樣中篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是:采集菌樣-富集培養(yǎng)-純種分離-性能測定。請(qǐng)回答篩選過程中的問題:(1) 不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從合適的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)耐鹽菌 的菌樣應(yīng)從 的環(huán)境采集,培養(yǎng)能分解石油的菌樣應(yīng)從勺環(huán)境米集。(2) 富集培養(yǎng)是指創(chuàng)設(shè)僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件,使待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加, 從而實(shí)現(xiàn)從自 然界中分離出所需的特定微生物的培養(yǎng)方法。 對(duì)固氮菌富集培養(yǎng)的培 養(yǎng)基應(yīng)是(物理狀態(tài))培養(yǎng)基;對(duì)耐高溫產(chǎn)淀粉酶菌的富集培養(yǎng)
4、應(yīng)選擇含有 營養(yǎng)成分)的培養(yǎng)基,并在 件下培養(yǎng)。(3) 實(shí)驗(yàn)室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達(dá)到殺菌的效果。高溫滅菌的原理是高溫使微生物的蛋白質(zhì)、DNA等物質(zhì)發(fā)生變性(或結(jié)構(gòu)改變)。在微生物研究和教學(xué)中培養(yǎng)基的火菌法是 火菌法。(4)下圖接種的具體方法是 。答案:(1)含鹽高(或高鹽度)富含石油(2)液體 淀粉 高溫 (3)高壓蒸汽(4)稀釋涂布平板法課后作業(yè)知能強(qiáng)化-A級(jí)基礎(chǔ)鞏固1. 下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是()A .培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C .固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D .微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉
5、眼可見的單個(gè)細(xì)菌解析:培養(yǎng)基除固體、液體培養(yǎng)基外,還有半固體培養(yǎng)基, B錯(cuò) 誤;固體培養(yǎng)基中加入了凝固劑,加入少量水仍為固體培養(yǎng)基,C錯(cuò) 誤;微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉眼可見的菌落,但不 一定是單個(gè)菌落,D錯(cuò)誤。答案:A2. 有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是()A .任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子B.碳源和氮源必須具有一定比例,碳元素的含量最多,其次為 氮元素C .微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外,還受到 pH、氧、滲透壓的影響D .營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好解析:培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物時(shí)不需要添加碳源, 培養(yǎng)固氮菌時(shí)可以 不加氮源;一般來說,培養(yǎng)基中含量最多的是水;配制
6、培養(yǎng)基時(shí)要合 理控制營養(yǎng)物質(zhì)的濃度,必須考慮微生物對(duì)滲透壓的耐受能力。答案:C3. 下面對(duì)微生物培養(yǎng)中滅菌的理解不正確的是 ()A. 防止雜菌污染B. 滅菌就是殺死培養(yǎng)基中的雜菌C .培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備都必須進(jìn)行滅菌D .火菌必須在接種前解析:滅菌的目的是防止雜菌污染,但實(shí)際操作中不可能只消滅 雜菌,而是消滅全部微生物。答案:B4 .自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別在于( )A .碳源B.氮源C .無機(jī)鹽D .生長因子解析:自養(yǎng)型微生物主要包括進(jìn)行光合作用或進(jìn)行化能合成作用 的微生物,他們能夠利用 C02來合成自身所需的有機(jī)物;而異養(yǎng)型 微生物主要是直接利用外界的有機(jī)物來合成自身所需
7、的有機(jī)物,所以他們培養(yǎng)基的主要差別就在于自養(yǎng)型微生物主要是利用無機(jī)物中的 碳,而異養(yǎng)型微生物主要是利用有機(jī)物中的碳。答案:A5.下列制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述,錯(cuò)誤的是 ()A .操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C .將培養(yǎng)基冷卻至50 C左右時(shí)進(jìn)行倒平板D .將平板冷卻凝固約510 min后將平板倒過來放置解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板,順序不能顛倒。牛肉膏容易吸潮,所以當(dāng)牛肉膏融化 并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙。將培養(yǎng)基冷卻至50 C,用手觸摸錐形瓶感覺剛剛不燙手時(shí)倒平板,平板冷卻后還需倒
8、置。答案:A6. 平板冷卻凝固后要將平板倒置,其意義是 ()A .利于大腸桿菌的接種B.有利于大腸桿菌培養(yǎng)C .利于培養(yǎng)基的冷卻D .防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基,防止雜菌污染解析:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的 濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā), 又可以防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。答案:DB級(jí)能力訓(xùn)練7. 將牛奶加熱至約70 C然后晾至室熱,加入酸奶攪拌均勻,蓋 緊蓋子,在42 C環(huán)境下放置46 h,凝固后即制成了酸奶。請(qǐng)回答:(1) 制作酸奶的原理是:常利用 (填“乳酸鏈球菌”或“乳酸桿菌”)在適宜的溫度下進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生乳酸,即為乳酸菌的
9、過程,該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的 。(2) 酸奶制作過程中,“牛奶加熱至約70 C”的目的是, “蓋緊蓋子”的目的是。(3)酸奶制作過程中影響發(fā)酵時(shí)間的因素有溫度、奶的品質(zhì)、孚L酸菌活性、。(4)從開始制作到成品這段時(shí)間內(nèi),牛奶逐漸變酸,這段時(shí)間內(nèi)牛奶中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是 ,原因是。解析:(1)酸奶的制作是利用乳酸桿菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過 程,乳酸菌無氧呼吸的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。(2) “牛奶加熱至約70 C”的目的是通過高溫加熱殺火雜菌,乳酸桿菌是厭氧菌,“蓋緊蓋子”是造成無氧的環(huán)境,有利于乳酸桿菌發(fā)酵。(3)酸奶制作過程 中影響發(fā)酵時(shí)間的因素有溫度、 奶的品質(zhì)、乳酸菌活性、菌種接種數(shù)
10、 量等。(4)酸奶制作過程中,由于乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,牛 奶逐漸變酸,隨乳酸菌的數(shù)量增加,牛奶的酸性增強(qiáng),不耐酸的雜菌 數(shù)量逐漸減少。答案:(1)乳酸桿菌 無氧呼吸 細(xì)胞質(zhì)(基質(zhì))(2)殺滅雜菌 提供無氧條件 (3)菌種接種數(shù)量 (4)乳酸菌數(shù)量增多,雜菌數(shù)量 減少乳酸菌比雜菌更為耐酸8. 為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣 中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是 然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入01
11、mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落 數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為 。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌,操作時(shí),接種環(huán)通過滅菌,在第二次及以后的劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是 。(3) 示意圖A和B中, 示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4) 該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn) 行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng),結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比 靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快,分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液 中的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高的利用率。答案:(1)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格3.8X
12、107 (2)灼燒 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B (4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)9. 為了獲得純度高的大腸桿菌,需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分 離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。(1) 培養(yǎng)大腸桿菌,配制固體培養(yǎng)基的基本步驟:計(jì)算t稱量t T倒平板。稱量時(shí),由于牛肉膏比較黏稠,可以用 挑取,放在上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨 稱量時(shí)動(dòng)作要迅速, 稱量后要及時(shí)蓋上瓶蓋。(3) 在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長,說明培養(yǎng)基含有等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4) 微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如和 ,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè),從而獲得純菌株解析:配制牛肉膏蛋白胨瓊脂
13、培養(yǎng)基的基本步驟:計(jì)算T稱量T溶化T滅菌T倒平板。稱量時(shí),可用玻璃棒挑取,放在稱量紙上稱量, 稱量時(shí)動(dòng)作要迅速。牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要 的碳源、氮源、無機(jī)鹽、水等營養(yǎng)要素,所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。 微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板 法,可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落,從而獲得純菌株。答案:(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水(4)平板劃線法 稀釋涂布平板法菌落10. 下表為牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表,據(jù)此回答:牛肉膏蛋白胨NaCI出0瓊脂05 g1.0 g05 g1002.0 gmL(1) 蛋白胨在培養(yǎng)基
14、中的作用是(2) 此培養(yǎng)基如要培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH值調(diào)至。(3) 從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成,所采用的預(yù)防雜菌感染的方法有:(4) 在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面,其目的是 (5) 若用此培養(yǎng)基純化大腸桿菌,最常用的方法是 、,最終,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè),從而獲得純菌株。答案:(1)提供碳源、氮源、生長因子 (2)酸性(3)高壓蒸汽滅 菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種(4)擴(kuò)大接種面積 (5)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落11. (2016全國I卷)空氣中的微生物在重力等作用下, 可以一定 程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物, 以了解 教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下: 配置培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCI、X、H2O); 制作無菌平板; 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組,進(jìn)行相關(guān)操作; 將
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