正常家兔磺胺嘧啶鈉藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的測(cè)定參考PPT

1、1,正常家兔磺胺嘧啶鈉藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的測(cè)定,中國(guó)醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院 藥理教研室 孫也之,掌握家兔動(dòng)脈插管的手術(shù)過(guò)程； 2. 熟悉磺胺嘧啶鈉血藥濃度測(cè)定原理與 測(cè)定方法； 3. 了解藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的計(jì)算方法,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)藥品: 20%磺胺嘧啶鈉 30mg%磺胺嘧啶鈉（標(biāo)準(zhǔn)液） 5%三氯醋酸 0.5%麝香草酚（用20%NaOH溶液配制） 0.5%亞硝酸鈉 6. 2N鹽酸 7. 1%肝素（1ml/kg） 8. 20%烏拉坦（5ml/kg,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 家兔，2.02.5kg,實(shí)驗(yàn)設(shè)備 家兔操作臺(tái) 手術(shù)器械,手術(shù)刀 大鑷子 止血鉗 彎頭小鑷子 眼科剪刀 玻璃鉤,實(shí)驗(yàn)設(shè)備： 3. 動(dòng)脈插管 4. 722型可見(jiàn)光分光光

2、度計(jì),實(shí)驗(yàn)設(shè)備： 5. 離心機(jī),實(shí)驗(yàn)步驟： 1. 取家兔，稱重，通過(guò)耳緣靜脈給20%烏拉坦(5ml/kg,耳緣靜脈注射,如何確定家兔已經(jīng)被完全麻醉呢? 家兔同時(shí)出現(xiàn)以下三種體征: 1. 肌張力減弱； 2. 呼吸速率逐漸減慢； 3. 角膜反射消失,2. 頸動(dòng)脈剖開(kāi) 固定家兔頭部、綁四肢； 用彎剪清理頸部毛發(fā)； 沿家兔解剖學(xué)正中線摸到頸部甲狀軟骨，用手術(shù)刀沿甲狀軟骨向下切開(kāi)頸部皮膚5-7cm，血管鉗鈍性分離，暴露氣管； 游離氣管一側(cè)的頸總動(dòng)脈，與周圍組織及迷走、交感神經(jīng)分離； 為了防止凝血，由耳緣靜脈注射1%肝素（1ml/kg）； 頸總動(dòng)脈下穿過(guò)兩根手術(shù)線，一根線頭端結(jié)扎，另一根線備用，心端用動(dòng)脈

3、夾夾住。 眼科小剪刀近頭側(cè)結(jié)扎處下剪小口，插動(dòng)脈插管，結(jié)扎，固定,3. 空白血樣品收集： 從動(dòng)脈插管放空白血0.5ml，用離心管收集，并搖勻。 4. 給藥： 向一側(cè)耳緣靜脈內(nèi)注入20%的磺胺嘧啶鈉（1ml/kg） 5. 血樣品收集： 在給藥后每個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集0.5ml血樣。 時(shí)間點(diǎn)：1、3、5、15、30、60、90、120min。 每次取血前，要先放2滴血再取，以免不同時(shí)間點(diǎn)的血樣間產(chǎn)生污染,注意事項(xiàng),動(dòng)脈插管后，由耳緣靜脈注射肝素（1ml/kg）。 采血試管取血前一定要用肝素浸潤(rùn)；每次取血之前要先將殘血放掉。 每吸取一個(gè)血樣時(shí)，必須更換槍頭；加樣時(shí)槍頭不要碰到三氯醋酸液面。 將血樣加到三氯醋

4、酸試管中應(yīng)立即搖勻，否則易出現(xiàn)血凝塊。 加亞硝酸鈉和麝香草酚的順序不要混亂。 注意各比色杯要清洗干凈、擦干并匹配、取藥液要準(zhǔn)確。 離心時(shí)要注意離心管的配平。 注意嚴(yán)格按照722型分光光度計(jì)操作方法進(jìn)行操作,試管實(shí)驗(yàn) 本實(shí)驗(yàn)測(cè)定磺胺嘧啶鈉的原理： 顯色原理：磺胺類藥物在酸性溶液中，可使苯環(huán)上的氨基（-NH2）離子化生成銨類化合物（-NH3+），進(jìn)而與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng)，產(chǎn)生重氮鹽（-N=N+-）。此重氮鹽在堿性溶液中與酚類化合物如麝香草酚起偶聯(lián)反應(yīng)，生成橙紅色的偶氮化合物。 偶氮染料的顯色深淺與磺胺的濃度有關(guān)?？捎霉舛扔?jì)測(cè)出其吸光度，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度的比較及運(yùn)算，即可推算出磺胺的濃度。計(jì)算公式

5、如下,脫蛋白 取空白血樣與各時(shí)間點(diǎn)血樣0.2ml，放入各離心管中并標(biāo)記，每個(gè)離心管分別加水1.8ml(標(biāo)準(zhǔn)管加水1.6ml)； 另取30mg%磺胺嘧啶鈉標(biāo)準(zhǔn)液0.2ml加入到標(biāo)準(zhǔn)管中，以配置標(biāo)準(zhǔn)血樣品； 各試管分別加入5%三氯醋酸4ml，并搖勻，然后1000rpm離心5min,2. 重氮化及偶聯(lián)呈色 從各離心管提取上清2.0ml并轉(zhuǎn)移至玻璃試管中 試劑按照如下順序添加： 0.5ml 2N HCl 0.5ml 0.5% NaNO2 1.0 ml 0.5%麝香草酚，然后搖勻。 注意：加亞硝酸鈉和加麝香草酚的順序不要顛倒,3.分光光度計(jì)分析： 每個(gè)樣品的吸光度值由722型分光光度計(jì)測(cè)定，最大吸收波長(zhǎng)設(shè)定于480nm. 以空白血樣品作為空白對(duì)照進(jìn)行分光光度計(jì)調(diào)零,計(jì)算血藥濃度 偶氮染料的顯色深淺與磺胺的濃度有關(guān)?？捎霉舛扔?jì)測(cè)出其吸光度值，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的比較及運(yùn)算，即可推算出磺胺的濃度。計(jì)算公式如下,實(shí)驗(yàn)結(jié)果,Table 1. 結(jié)果記錄表,實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1. 以時(shí)間為橫坐標(biāo)，濃度的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，在半對(duì)數(shù)圖上繪制磺胺嘧啶鈉的藥時(shí)曲線，以lgC對(duì)t做直線回歸，得方程: lgC=a+bt。按lgC-t圖判斷房室數(shù)