凝聚胺交叉配血標準操作規(guī)程

1、凝聚胺交叉配血標準操作規(guī)程一、目的：為規(guī)范交叉配血試驗的技術(shù)操作，保證臨床輸血安全有效，特制定本規(guī)程。二、適用范圍適用于輸血科進行交叉配血試驗三、職責(zé)輸血科技術(shù)人員負責(zé)交叉配血試驗。四、測定原理：紅細胞表面帶有大量的負電荷，凝聚胺是一種高效價陽離子季胺鹽多聚物，溶解后產(chǎn)生較多正電荷，可以中和紅細胞表面的唾液酸帶有的負電荷，使紅細胞之間的距離減少。若是未被抗體致敏的紅細胞，加入懸浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的紅細胞非特異性凝集散開，試驗結(jié)果為陰性；但如果紅細胞被相應(yīng)的抗體所致敏，則會被凝聚胺凝集，凝塊就不會散開，試驗結(jié)果為陽性。五、試劑及材料(一)聚凝胺試劑盒(合肥天一生物技術(shù)研究所)成分

2、：低離子介質(zhì)溶液、聚凝胺溶液、重懸液、陰性及陽性對照液；保存條件：28貯存2年，試劑盒打開使用后可置于室溫(二)材料：玻璃試管、微量移液器、離心機、載玻片、顯微鏡等六、標本要求： (一)抽取受血者抗凝（抗凝劑為EDTA.K2）靜脈血2-3ml（注意核對病人信息）, 在3000r/min條件下離心5分鐘備用。(二)標本保存：血液樣本必須密封，28保存7天。(三)用于交叉配血必須是28保存3天以內(nèi)的標本。七、操作程序：(一)將受血者紅細胞配成3%鹽水懸液，鑒定ABO血型及Rh血型。(二)將供血者血樣配制3%紅細胞懸液，鑒定ABO血型及Rh血型。(三)取潔凈小試管2支，1支標明受血者血清（PS）+供

3、血者細胞（DC）或“主側(cè)”；另1支標明供血者血清（DS）+受血者細胞(PC)或“次側(cè)”。（四）主側(cè)管：受血者血清100ul+供血者紅細胞懸液50ul。次側(cè)管：供血者血清100ul+受血者紅細胞懸液50ul。各加低離子介質(zhì)溶液0.6 ml，混勻后靜置1分鐘，再各加聚凝胺溶液2滴，靜置15s。(五) 混合均勻后，在1000g條件下離心15s，然后倒掉上清液。(六) 輕輕側(cè)動試管里的細胞扣，目測紅細胞有無凝集，如無凝集，則必須重做。(七) 最后加入重懸液2滴，輕輕轉(zhuǎn)動試管混合，并同時觀察結(jié)果，必要時在顯微鏡下觀察結(jié)果。八、結(jié)果判定：(一)陰性：60秒內(nèi)凝塊散開，代表由聚凝胺溶液引起的非特異性凝集，配血結(jié)果相合。(二)陽性：60秒內(nèi)凝塊不散開，代表紅細胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，配血結(jié)果不相合。(三)如反應(yīng)可疑，可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。九、注意事項：(一)若病人血漿（血清）含肝素，須多加雙倍量的聚凝胺溶液以中和肝素。(二)冬季室溫較低，應(yīng)將試管保溫，以防冷凝集素引起的凝集反應(yīng)，影響結(jié)果判斷。(三)加入血清量應(yīng)嚴格按照操作方法，多加血清會提高離子強度，降低致敏效果