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1、選修三第二講時間:45min滿分:100分一、選擇題(每小題5分,共30分)1下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是()A動物細(xì)胞培養(yǎng)不能獲得有重要價值的蛋白質(zhì)生物制品B動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散C細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中D動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的只是獲得有特殊基因突變的細(xì)胞答案B解析用胰蛋白酶處理可使動物組織分散成單個細(xì)胞,所以B項正確;動物細(xì)胞培養(yǎng)能夠獲得有重要價值的蛋白質(zhì)生物制品,如單克隆抗體,所以A項錯誤;細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生在傳代培養(yǎng)過程中,所以C項錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的還包括獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物,所以D項也錯誤。2(2016東城模擬)下列有關(guān)細(xì)胞工程的說法正確的
2、是()A在愈傷組織形成的過程中,除適宜的溫度、pH和無菌條件外,還需要有植物激素進(jìn)行調(diào)節(jié)B植物體細(xì)胞雜交前需要用酶去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體,然后再用滅活的病毒促進(jìn)融合C利用動物體細(xì)胞核移植的方法得到克隆動物是培育新物種的一種方式D動物細(xì)胞應(yīng)在含5%CO2的恒溫箱中培養(yǎng),CO2的作用是為細(xì)胞提供碳源答案A解析在愈傷組織形成的過程中,需添加生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素進(jìn)行調(diào)節(jié);滅活的病毒是促進(jìn)動物細(xì)胞融合特有的方法;核移植屬于克隆,為無性生殖,不會產(chǎn)生新物種;動物細(xì)胞應(yīng)在含5%CO2的恒溫箱中培養(yǎng),CO2的作用是維持培養(yǎng)液中的pH。3(2016濟(jì)南質(zhì)檢)下圖的簡式表示植物組織培養(yǎng)的大致過程,據(jù)此判斷
3、不正確的是()A若是來自不同植物體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞,則可能出現(xiàn)不同植物的遺傳特性B若是二倍體植株的花粉,則是單倍體植株,經(jīng)染色體加倍后可得到穩(wěn)定遺傳的品種C若是人參細(xì)胞,對進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)可提高細(xì)胞產(chǎn)物人參皂甙的產(chǎn)量D若是具有雜種優(yōu)勢的農(nóng)作物細(xì)胞,則用進(jìn)行繁育會發(fā)生性狀分離答案D解析農(nóng)作物細(xì)胞用繁育屬無性繁殖,不會發(fā)生性狀分離。4在培育克隆羊多利的過程中,下列哪項技術(shù)沒有運(yùn)用到()A細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B細(xì)胞核移植C胚胎移植技術(shù) D基因工程技術(shù)答案D解析培育克隆羊多利的過程中,涉及到細(xì)胞核移植、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。5(2016九江質(zhì)檢)右圖是科學(xué)家研發(fā)的制備單克隆抗體的過程,相關(guān)敘述錯誤的是(
4、)A該過程涉及基因工程和動物細(xì)胞融合技術(shù)B經(jīng)酶A處理后的與質(zhì)粒具有相同的黏性末端C若供體DNA提供了prG基因(無限增殖調(diào)控基因),則該過程中的是已免疫的B淋巴細(xì)胞D通過檢測和篩選得到的細(xì)胞既能無限增殖又能分泌特異性抗體答案A解析由圖可知,該過程涉及基因工程,但未涉及動物細(xì)胞融合技術(shù)。二、非選擇題(共70分)6(12分)(2016寧波質(zhì)檢)紅豆杉,又名紫杉,可從其樹皮中分離出高抗癌活性的紫杉醇。下圖是某同學(xué)設(shè)計的有關(guān)紫杉醇抗腫瘤實驗的研究流程,請分析并回答:(1)酶X是_酶,其主要作用是_。(2)物質(zhì)Y是_,乙組起_作用。(3)細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,例如,需要有_、_、促生長
5、因子、無機(jī)鹽、微量元素等,通常還需要加入血清、血漿。(4)為清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)采取的措施是_。(5)實驗結(jié)果:若甲組_,說明紫杉醇有抗腫瘤作用。(6)為了解決紫杉醇的藥源問題,理論上可用_技術(shù)把離體的紅豆杉細(xì)胞經(jīng)過_培養(yǎng)成愈傷組織,從中提取紫杉醇,進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。答案(1)胰蛋白(膠原蛋白)使腫瘤細(xì)胞分散開(2)生理鹽水對照(與紫杉醇形成對照)(3)糖氨基酸(4)(定期)更換培養(yǎng)液(5)腫瘤細(xì)胞的數(shù)目少于乙組(6)植物組織培養(yǎng)脫分化解析據(jù)題圖可知,酶X是指胰蛋白酶或膠原蛋白酶,其主要作用是使腫瘤細(xì)胞分散開。本題研究的是紫杉醇的抗腫瘤作用,因此需用Y生理鹽水
6、做對照,以觀察紫杉醇的效果。細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)有糖、氨基酸等小分子有機(jī)物,還需要促生長因子等調(diào)節(jié)物,以及無機(jī)鹽、微量元素等無機(jī)物。定期更換培養(yǎng)液的目的是清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。為了解決紫杉醇的藥源問題,理論上可用組織培養(yǎng)技術(shù)將離體的紅豆杉細(xì)胞經(jīng)過脫分化培養(yǎng)為愈傷組織進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。7(12分)某研究小組進(jìn)行藥物試驗時,以動物肝細(xì)胞為材料,測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種,甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞,乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后,
7、觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量_。(2)在動物細(xì)胞培養(yǎng)時,通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是_。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是_。(3)在兩種細(xì)胞生長過程中,當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時,其生長_。藥物試驗需要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更_。若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液,需用_處理。(4)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的_。(5)已知癌基因X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細(xì)胞生長的影響,可將甲細(xì)胞分為A、B兩組,A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_,B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入等量的無菌生理鹽水,經(jīng)培養(yǎng)后
8、,從A、B兩組收集等量細(xì)胞,通過分別檢測X基因在A、B兩組細(xì)胞中的_或_合成水平的差異,確定Y的藥效。答案(1)多(2)血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)維持培養(yǎng)液的pH(3)停止多胰蛋白酶(4)抗生素(5)YmRNA蛋白質(zhì)解析(1)甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞,乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞為無限增殖的細(xì)胞,細(xì)胞周期短。在相同條件下,培養(yǎng)相同的時間,甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)液中必須加入動物血清,血清中含有血清蛋白、生長因子、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的因子、激素等合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH。(3)甲為腫瘤細(xì)胞,能無限增殖,傳代的
9、次數(shù)要比乙細(xì)胞多,乙細(xì)胞(正常肝細(xì)胞)在培養(yǎng)瓶中貼壁生長,當(dāng)鋪滿瓶壁時,生長停止。為得到更多的肝細(xì)胞,需要定期地用胰蛋白酶使細(xì)胞脫離瓶壁,進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(4)培養(yǎng)液中加入抗生素來抑制和殺滅細(xì)菌,抗生素對動物細(xì)胞沒有影響。(5)設(shè)計一組加入抗癌藥物的實驗組,一組不加藥物的對照組,通過檢測藥物影響X基因的表達(dá)過程,即轉(zhuǎn)錄形成mRNA、翻譯形成蛋白質(zhì)的量來檢驗藥效。8(12分)(2015山東卷,36)治療性克隆對解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。流程如下:(1)過程采用的是細(xì)胞工程中的_技術(shù),過程采用的是胚胎工程中的_技術(shù)。(2)體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時,所需氣體主要有O2和CO2,
10、其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液(基)的_。(3)如果克隆過程中需進(jìn)行基因改造,在構(gòu)建基因表達(dá)載體(重組載體)時必須使用_和_兩種工具酶?;虮磉_(dá)載體上除目的基因外,還需有_基因,以便選出成功導(dǎo)入基因表達(dá)載體的細(xì)胞。(4)胚胎干細(xì)胞可以來自于囊胚中的_。在一定條件下,胚胎干細(xì)胞可以分化形成不同的組織器官。若將圖中獲得的組織器官移植給個體_(填“A”或“B”),則不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。答案(1)(體細(xì)胞)核移植(早期)胚胎培養(yǎng)(2)pH(或酸堿度)(3)限制性(核酸)內(nèi)切酶(或限制酶)DNA連接酶(注:兩空可顛倒)標(biāo)記(4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B解析(1)過程表示將從體細(xì)胞中分離出的細(xì)胞核與去核的卵(母)細(xì)胞重
11、組形成重組細(xì)胞的過程,因此采用的是細(xì)胞工程中的(體細(xì)胞)核移植技術(shù)。過程表示將重組細(xì)胞培養(yǎng)至早期胚胎的過程,所以采用的是胚胎工程中的(早期)胚胎培養(yǎng)技術(shù)。(2)在動物細(xì)胞培養(yǎng)時,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液(基)的pH(或酸堿度)。(3)在基因工程中,構(gòu)建基因表達(dá)載體(重組載體)時必須使用限制性(核酸)內(nèi)切酶(或限制酶)和DNA連接酶?;虮磉_(dá)載體的組成,除目的基因外,還必須有啟動子、終止子以及標(biāo)記基因等,其中標(biāo)記基因的作用是篩選出成功導(dǎo)入基因表達(dá)載體的細(xì)胞。(4)胚胎干細(xì)胞可以來自于囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。圖中獲得的組織器官,其細(xì)胞核來自于個體B,其遺傳物質(zhì)組成幾乎與個體B相同,因此將該組織器官移
12、植給個體B則不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。9(12分)(2014新課標(biāo)卷,40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。回答下列問題:(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才
13、能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是_小鼠,理由是_ _。(2)細(xì)胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有_個細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_。答案(1)4YY小鼠的血清抗體效價最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)不能無限增殖解析(1)據(jù)圖分析,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價均達(dá)到16000以上,小鼠Y
14、的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價最高,最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物;由于細(xì)胞融合具有隨機(jī)性,故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后,由于核膜具有流動性,小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會融合形成一個雜交的細(xì)胞核,正常情況下融合后的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目為100條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞在不發(fā)生突變的情況下經(jīng)過多次分裂后會衰老死亡,不能無限增殖。10(2016長沙質(zhì)檢)如圖所示為單克隆抗體的制備過程,回答以下問題:(1)圖中指的是_。(2)實際操作時,要得到所需的雜交瘤細(xì)胞,過程至少要經(jīng)歷_次篩選,
15、一是因為同種細(xì)胞會出現(xiàn)自融現(xiàn)象,二是因為每一個B淋巴細(xì)胞能分泌_種抗體,所以篩選出來的雜交瘤細(xì)胞還要進(jìn)行_檢驗。(3)圖中指的是_,如采用該種方式培養(yǎng),需使受體小鼠不產(chǎn)生_。(4)單克隆抗體與普通抗體相比較,具有_且可大量制備等優(yōu)點。(5)單克隆抗體的主要用途有_(至少舉出兩例)。答案(1)注射特異性抗原 (2)兩1抗體陽性 (3)體內(nèi)培養(yǎng)免疫排斥反應(yīng) (4)特異性強(qiáng)、靈敏度高 (5)作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物解析(1)制備單克隆抗體應(yīng)先對小鼠注射特異性抗原,然后從其體內(nèi)分離出B淋巴細(xì)胞。(2)由于免疫過的B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體但不能無限增殖,而骨髓瘤細(xì)胞則相反,將兩種細(xì)胞混合在一起,
16、在物理、化學(xué)試劑或滅活病毒的作用下相互融合。假如細(xì)胞兩兩融合,會出現(xiàn)瘤瘤細(xì)胞、瘤B細(xì)胞以及BB細(xì)胞,先通過特殊培養(yǎng)基篩選出瘤B細(xì)胞,又因分離出來的不一定是特異性抗原刺激而來的B淋巴細(xì)胞,所以還要對篩選出來的融合細(xì)胞進(jìn)行抗體陽性檢測,篩選出所需的雜交瘤細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞既可以在體外培養(yǎng)也可以在體內(nèi)培養(yǎng),但在體內(nèi)培養(yǎng)時,受體小鼠應(yīng)為供體小鼠的組織相容性同系小鼠或無胸腺裸鼠,以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。(4)單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強(qiáng)、靈敏度高,且可大量制備。(5)目前單克隆抗體用到許多方面,比如作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物等。11(11分)所謂“基因靶向”技術(shù)(人們大都稱之為基因“敲除”技
17、術(shù))是指利用細(xì)胞脫氧核糖核酸(DNA)可與外源性DNA同源序列發(fā)生同源重組的性質(zhì),定向改造生物某一基因的技術(shù)。借助這一從上世紀(jì)80年代發(fā)展起來的技術(shù),人們得以按照預(yù)先設(shè)計的方式對生物遺傳信息進(jìn)行精細(xì)改造。有了“基因靶向”這一高精度瞄準(zhǔn)鏡,科學(xué)家就可以精確瞄準(zhǔn)任何一個基因,使其失去活性,進(jìn)而研究該基因的功能。請回答下列問題:(1)“敲除”一種基因需要分兩步來完成:第一步是利用化學(xué)“剪刀”,例如用某種酶切除哺乳動物染色體中有某種功能的基因,第二步是用修改過的基因取代原有基因。這里的“某種酶”應(yīng)該是_ 酶。用修改過的基因取代原有基因時還需要_酶。(2)假如要“敲除”小鼠的胰島素基因,請設(shè)計出實驗步驟:_ _。給出一種檢驗胰島素基因是否被“敲除”的方法:_。(3)利用細(xì)胞工程也可獲得可供器官移植之用的“敲除排斥基因”的老鼠,其過程大致如下圖所示:促進(jìn)卵細(xì)胞融合最常用的試劑是_。重組細(xì)胞培養(yǎng)成胚胎的過程所用的培養(yǎng)基,從物理性質(zhì)上看屬于_,培養(yǎng)基中至少要加入水、無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、維生素、促生長因子、微量元素和_等物質(zhì),同時要創(chuàng)造適宜溫度、pH和無菌條件,其中需要無菌環(huán)境的原因是_ _。答案(1)限制性核酸內(nèi)切DNA連接(2)用限制性核酸內(nèi)切酶切除小鼠胚胎干細(xì)胞中的胰島素基因,用修改過的基
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