潔凈車間員工微生物培訓最新版本

1、.,潔凈廠間員工 衛(wèi)生及微生物知識培訓,.,醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范植入性醫(yī)療器械實施細則 明 確規(guī)定：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當確定出產(chǎn)品生產(chǎn)中須避免污染、在相應(yīng) 級別潔凈室（區(qū)）內(nèi)進行生產(chǎn)的過程。 在潔凈室區(qū)內(nèi)的人員數(shù)量嚴格控制的基礎(chǔ)上。潔凈區(qū)內(nèi)的工作 人員（包括維修、輔助人員）應(yīng)定期進行衛(wèi)生和微生物學基礎(chǔ) 知識、潔凈作業(yè)等方面的培訓及考核；對進入潔凈室區(qū)的臨時 外來人員應(yīng)進行指導和監(jiān)督。,法規(guī)要求,.,我們所生活的環(huán)境中，到處都存在著大量的微生物。在一般空氣 中，微生物達8003500個/m3，在土壤中達1500108個/g，在嚴 重污染的水中可達107個/ml。（飲用水要求細菌總數(shù)100個/ml，

2、大腸桿菌3個/ml。)經(jīng)水塔或貯水池貯存后，短期內(nèi)可繁殖至 105106個/ml。人的頭皮上有140萬個/cm2，兩手上約有440萬 個，1g指甲污垢有38億個，1g糞便可達101000億個。可以說微生 物是無處不在，無處不有。 許多以前被人們認為是極端（高溫、高壓、強酸、強堿、低溫等） 甚至是致死的環(huán)境，現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)生活著各種類型的微生物（稱為極 端微生物）。事實說明，微生物有特別頑強的生存、繁殖和變異能 力來適應(yīng)環(huán)境。,前言,.,微生物種類繁多，有的對人有益，有的有 害，有的無益也無害。但在器械生產(chǎn)過程中，不 可能對環(huán)境中的各種微生物加以區(qū)別對待，為保 證器械的安全有效，需要對其進行控制?？?/p>

3、氣中 的微生物多數(shù)附著在灰塵上，或以芽孢形式懸浮 于空氣中，1m以下者處于懸浮狀態(tài)，10m以 上者會逐漸沉下來而形成菌塵。所以也要對塵粒 進行控制。,前言,.,人是潔凈室最大的污染源，占90%左右。一般男 性每人每分鐘向周圍排放1000個以上的含菌粒 子，女性為750個以上。穿無菌服時，靜止時的 發(fā)菌量為10300個/min，一般活動時發(fā)菌量為 1501000個/min，行走時發(fā)菌量為9002500個 /min。咳嗽一次發(fā)菌量為70700個/min，噴嚏 一次為400060000個/min。所以在潔凈室中， 人的數(shù)量和活動應(yīng)有特別嚴格的限制。,前言,.,醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）必須以塵粒和微生物為

4、環(huán)境控制對象。 二者相比，微生物更難以控制 1、存在范圍廣。 2、生長速度快。 3、生存能力強。,控制對象,.,微生物是什么？,一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物。 形體微小、單細胞或個體結(jié)構(gòu)簡單的多細胞、甚或無細胞結(jié)構(gòu)的低等生物。 是生物的一大類，形體微小、構(gòu)造簡單、繁殖迅速，廣泛分布在自然界中，是一群在化學顯微鏡或電子顯微鏡下放大幾千倍，甚至上萬倍才能看得到的微小生物。,.,微生物按其結(jié)構(gòu)、化學組成及生活習性等差異可分成三大類： 1真核細胞型細胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體；胞質(zhì)內(nèi)有完整的細胞器（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體及線粒體等）。真菌屬于此類型微生物。 2原核細胞型細胞核分化程度低，

5、僅有原始核質(zhì)，沒有核膜與核仁；細胞器不很完善。這類微生物種類眾多，有細菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌。 3非細胞型沒有典型的細胞結(jié)構(gòu)，亦無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細胞內(nèi)生長繁殖。體積微小，能通過除菌濾器。病毒屬于此類型微生物。,微生物分類三大類,.,微生物五大共性,體積小，面積大； 吸收多，轉(zhuǎn)化快； 生長旺，繁殖快； 適應(yīng)強，易變異； 分布廣，種類多。,.,1細菌（原核單細胞生物） 細菌按形狀可分為：球菌（0.52m）、桿菌（長15m，寬0.31m）和螺形菌（大小與桿菌相似）。 按革蘭氏染色法染色的不同，分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。革蘭氏陽性菌的細胞壁表面含較多的磷壁酸，會

6、產(chǎn)生外毒素，如金黃色葡萄球菌；革蘭氏陰性菌的細胞壁表面多含脂蛋白和脂多糖，會產(chǎn)生內(nèi)毒素（即熱原），如大腸桿菌。 細菌一般有細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核，有的還有莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞等特殊結(jié)構(gòu)。 細菌一般為無性繁殖，以二分法繁殖，幾十分鐘或12小時分裂一次。,微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),.,2霉菌（絲狀真菌的通稱，真核多細胞生物） 霉菌是真菌的一部分。在培養(yǎng)基上長成絨毛狀或棉絮狀的菌絲體的真菌統(tǒng)稱為霉菌。 霉菌細胞呈狹長的管狀，稱為菌絲。菌絲直徑比細菌、放線菌大，約210m。菌絲分枝連接，交錯集合在一起的總體稱為菌絲體。 霉菌大多數(shù)是多細胞微生物，菌絲細胞由細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核和各種細胞器組

7、成。細胞壁很薄，往往在表面產(chǎn)生色素，使菌落出現(xiàn)各種顏色。 霉菌靠孢子繁殖，有無性繁殖和有性繁殖兩種方式，以無性繁殖為主。 有些真菌可用釀酒造醬，或用于發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸、葡萄糖酸、酶、抗生素（如青霉素、頭孢菌素）；少數(shù)真菌能引起各種真菌病。真菌產(chǎn)生的真菌毒素（如黃曲霉素）有毒。,微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),.,3酵母菌（真核單細胞生物，屬真菌） 酵母菌以單細胞存在，呈圓形、卵圓形和香腸形，比細菌大，細胞長530m，寬15m。細胞結(jié)構(gòu)有細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核和各種細胞器等。 酵母菌的增殖分無性繁殖和有性繁殖兩個階段，有三種方式：芽殖、裂殖、孢子生殖。 酵母菌是重要的工業(yè)微生物，用于釀酒，生產(chǎn)單細胞蛋白

8、、B族維生素、核酸、輔酶A、細胞色素C等。一般對人體無害。,微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),.,4放線菌（原核單細胞生物） 放線菌有生長發(fā)育良好的菌絲體，呈分枝狀，菌絲寬為0.21.2m，革蘭氏陽性。其內(nèi)部構(gòu)造與細菌相似，無完整的細胞核。菌落常呈幅射狀，因此稱放線菌。 繁殖方式為無性孢子繁殖。最適pH6.77.5，溫度2530。 放線菌可用于生產(chǎn)抗生素、維生素和酶類，少數(shù)可引起人畜放線菌病。,微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),.,5病毒 病毒是一類體積十分微小，結(jié)構(gòu)簡單，只含一種核酸（DNA或RNA），沒有產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細胞內(nèi)以復(fù)制方式增殖的非細胞型微生物。病毒在自然界分布非常廣泛，在所有其它生物中都有病毒寄居

9、。病毒是最常見的致病微生物，人類傳染病中大約75%是由病毒引起的。 病毒體主要由核酸和蛋白質(zhì)組成。病毒體積微小，最大直徑300nm（如牛痘病毒），最小直徑20nm（如口蹄疫病毒），絕大多數(shù)在150nm以下，能通過細菌濾器，用普通光學顯微鏡看不見，必須用電子顯微鏡放大數(shù)千至數(shù)萬倍才能看見。形態(tài)多呈球形，少數(shù)為桿狀或磚形。噬菌體（細菌病毒）有呈蝌蚪狀的。,微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),.,1水分：水占細胞漿的70%90%，是細胞的重要組成成分。較普遍的觀點認為：只有在含水的環(huán)境中微生物才能存活。但也有人發(fā)現(xiàn)在無水碳氫化合物中微生物可長期存活。 2碳源：碳源是構(gòu)成細胞的重要物質(zhì)。有些微生物的碳源必須來自有機碳化

10、合物如糖、蛋白質(zhì)、脂肪、有機酸等（同時利用其化學能），屬異養(yǎng)型；有些微生物不需有機碳化合物，以CO2為碳源，屬自養(yǎng)型（分為光能自養(yǎng)型和化能自養(yǎng)型）。 3氮源：氮是組成蛋白質(zhì)和核酸的重要元素。 4無機鹽類：細菌所需無機鹽包括磷、硫、鎂、鐵、鉀、鈉、鈣、氯、錳、鋅、鈷、銅等。其中磷、硫、鎂、鉀、鈉、鐵需要量較多，其他只需微量。 5生長因子：生長因子是某些微生物生長發(fā)育所必需，而其自身又不能合成的一類營養(yǎng)物質(zhì)。包括維生素、嘌呤和嘧啶等。,微生物的養(yǎng)分,.,1營養(yǎng)物 2pH值：各種微生物都有其最適宜的pH值，大多數(shù)細菌最適pH為6.87.4，但一般有較大的容忍度，在49也可存活和生長，少數(shù)細菌能在極端

11、pH值范圍內(nèi)生長。真菌適于pH值36的微酸性環(huán)境，但在210也可生長。,微生物生長的影響因素,.,3溫度：微生物適于生長繁殖要有適宜的溫度，當超過其最低或最高可耐受的溫度時，即停止生長或死亡。一般細菌最適溫度為3040，真菌為2030。 4氧氣：大多數(shù)細菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧環(huán)境中才能生長），少數(shù)細菌是厭氧菌（在無氧環(huán)境中才能生長），有些細菌和酵母菌是兼性需氧厭氧的，在有氧或無氧環(huán)境中都能生長繁殖。,微生物生長的影響因素,.,5滲透壓：微生物細胞膜和所有生物膜一樣是一種半透膜，可讓水自由通過，對溶質(zhì)則有選擇性。由于細胞壁的保護，微生物能存活在低滲透壓的水中。而在高滲溶液（如高濃度的鹽溶

12、液或糖溶液、40%甘油）中，細胞會脫水并停止生長繁殖。但也有一些專性耐高鹽細菌只有在高鹽（1015%）條件下才生長。,微生物生長的影響因素,.,6表面張力：表面活性劑可降低表面張力，它是影響細菌生長的因素之一。很多革蘭氏陰性菌，特別是大腸菌群可很好地在表面活性劑包圍的介質(zhì)中生長，而大多數(shù)革蘭氏陽性菌在表面張力低時（0.05N/m）不能很好生長。陽離子表面活性劑對很多有機體有毒性，陰離子表面活性劑毒性很小，非離子表面活性劑幾乎沒有毒性，并可成為某些微生物的營養(yǎng)物。,微生物生長的影響因素,.,消毒與滅菌是微生物實驗技術(shù)中最基本的 操作，從事器械生產(chǎn)和檢驗的人員都應(yīng)當 了解消毒與滅菌的方法及其意義，

13、嚴格遵 守操作規(guī)程，否則會影響產(chǎn)品質(zhì)量，危害 患者安全。,消毒與滅菌,.,無菌不存在活的生物（GMP指南）。 “無菌”從定義上來說是一個絕對的概念，但遺憾的是，在科學和技術(shù)高度發(fā)展的今天，器械的絕對無菌即做不到，也無法加以證實。然而，器械的安全性要求人們設(shè)定無菌的相對標準。 FDA、歐洲制藥工業(yè)界曾將百萬分之一微生物污染率作為滅菌產(chǎn)品“無菌”的相對標準，它和蒸汽滅菌后產(chǎn)品中微生物存活的概率為10-6,這一標準如今已為世界各國普遍接受和采用。,消毒與滅菌-慨念,.,滅菌使達到無菌狀態(tài)的方法（GMP指南）。用物理或化學方法殺滅傳播媒介上所有的微生物，使其達到無菌。通常是指殺滅或除去全部活的微生物（

14、包括繁殖體和芽孢）。 消毒用物理或化學方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達到無害化。通常是指殺死病原微生物的繁殖體，但不能破壞其芽孢。所以消毒是不徹底的，不能代替滅菌。,消毒與滅菌-慨念,.,消毒與滅菌-常用消毒劑,.,1）干熱滅菌法常見的有火焰、燒灼、干烤和紅外線滅菌等。 火焰、燒灼：通常用于實驗室無菌操作中金屬或其它耐火材料制成的器具的滅菌。 干烤和紅外線：利用干熱空氣或熱輻射進行滅菌。一般135145需35h，160170需2h以上，170180需1h以上，180200需0.51h。除熱原則需25030min，或20045min，1802h。 空氣傳熱慢，穿透力不強，故干熱滅菌時

15、間長。干熱滅菌時烤箱內(nèi)裝入物品應(yīng)留有空隙，以利空氣流動，否則使箱內(nèi)溫度不均，部分物品滅菌不徹底。,消毒與滅菌-常用滅菌法,.,2）濕熱滅菌法通過熱蒸汽或沸水使蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透力強，滅菌效果較干熱好。 煮沸或流通蒸汽滅菌：常壓下沸水和蒸汽的溫度是100，一般處理3060min可殺死細菌繁殖體，但不能完全殺滅芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。 低溫間隙滅菌（巴斯德滅菌法）：將物品先用6080加熱（或煮沸）1h，然后置2025保存24h（或常溫過夜），使其中殘存的芽孢萌發(fā)成繁殖體，再用以上條件滅菌，如此反復(fù)三次。本法適用于不耐高溫或高溫下易變質(zhì)的物品，但很費時。 高壓蒸汽

16、滅菌（熱壓滅菌法）：超過一個大氣壓時，水的沸點高于100，反之亦然。高壓蒸汽滅菌就是通過加壓提高蒸汽溫度，滅菌效果最好。它簡便、經(jīng)濟、可靠、無毒，是最可靠、應(yīng)用最廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。常用條件為： 115.5 30min 121.5 20min 126.5 15min,消毒與滅菌-常用滅菌法,.,3）化學滅菌法利用化學試劑形成的氣體來殺滅微生物的方法。常用的滅菌劑為環(huán)氧乙烷（又稱氧化乙烯）。環(huán)氧乙烷是廣譜殺菌劑，能殺滅細菌、芽孢和多種病毒，還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環(huán)氧乙烷易燃易爆且有毒（有致變異性），用于藥品方面極有限，多用于醫(yī)療器械、塑料制品等滅菌。（不能用于橡膠和乳

17、膠手套，能將其溶解。）,消毒與滅菌-常用滅菌法,.,4）輻射滅菌法輻射有兩種類型：一種是電磁波輻射，如紫外線、紅外線、微波；一種是電離輻射，如可引起被照射物電離的X射線、射線。,消毒與滅菌-常用滅菌法,.,紫外線：紫外光波長在136390nm之間，其中260nm左右能破壞核酸，殺菌作用最強。另外，空氣中的氧受紫外線照射后，可微量轉(zhuǎn)變?yōu)槌粞豕餐饸⒕饔?。紫外線消毒的效果與光源的功率、光源與被照射物的距離、照射時間、溫度和濕度等因素有關(guān)。我國規(guī)定紫外燈照射強度在距離1m處不低于70W/cm2（以紫外線測強儀測定）。在操作面上要求強度40W/cm2以上。一般每10m2裝30W燈管1支，工作前306

18、0min。紫外線的穿透力很弱，不能穿透一般包裝材料，如玻璃、塑料薄膜、紙等。因此，它主要用于空氣和物體表面消毒，特制的紫外燈裝置也可用于水的消毒。,消毒與滅菌-常用滅菌法,.,1.葡萄球菌：可引起局部感染 2.大腸桿菌：膽道及尿道感染 3.綠膿桿菌：化膿性感染、中耳炎、肺炎 4.枯草桿菌：結(jié)膜炎 5.酵母菌：使糖分解，藥液產(chǎn)生有機酸 6.霉菌：使制劑霉壞、酸敗變質(zhì),常見污染器械的微生物,.,潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？,空氣 水 人員 器具,.,1. 空氣中的微生物,灰塵“微生物的飛行器”。 微生物不是憑空存在的，99%的微生物都附在顆粒上。控制空氣中的微粒數(shù)，就是控制了微生物數(shù)量。 灰塵、微粒具

19、有沉降和粘附的趨勢，所以同一區(qū)域內(nèi)，地面是微粒相對集中的地方，也是微生物相對較多的地方，墻壁也容易粘附灰塵。,.,利用過濾技術(shù)將每升空氣中含有的以十萬計甚至百萬計的灰塵顆粒,降低到每升空氣中只含有幾粒,幾百,幾千粒的不同凈化等級,以控制空間的含塵數(shù)量.,潔凈室,.,98版GMP,.,Air lock兩扇門不能同時打開,Air Lock,外包間,潔凈區(qū)走廊 Or DISP,高效過濾器,高效過濾器,氣流,.,控制空氣對流，減少外界臟空氣中的微粒、灰塵進入車間。 須保持門的關(guān)閉，不得同時開啟。,緩沖間/傳遞窗作用,.,空氣自凈有死角 頂送頂回（潔凈走廊），地面 頂送側(cè)回（清洗間，操作間），對面的墻角

20、， 頂棚。 微粒沉降和粘附 不得跑跳、大聲喧嘩。 不靠在墻上或其他物體上。,空氣自凈和微粒的沉降與粘附,.,2 水,水是生命之源，有水的地方就有生命,水微生物的樂園 水體是微生物廣泛分布的第二個天然環(huán)境。 水中的細菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。,.,醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范明確規(guī)定：工藝用水的制備、儲存和分配應(yīng)能防止微生物的滋生和污染。儲罐和輸送管道所用材料應(yīng)無毒、耐腐蝕。管道的設(shè)計和安裝應(yīng)避免死角、盲管。儲罐和管道要規(guī)定清洗、滅菌周期。,法規(guī),.,水源：城市自來水、井水等達到飲用水標準的水源。 產(chǎn)品容器： 容器清洗：飲用水 容器最終淋洗：凈化水 產(chǎn)品： 前道清洗：凈化水 最終淋

21、洗：凈化水 ,水質(zhì)的要求,.,制備純化水的水源 容器的初洗 應(yīng)符合衛(wèi)生部生活飲用水標準,水質(zhì)類別-飲用水,.,制備注射用水的水源 包裝材料最后一次洗滌用水 產(chǎn)品最后一次洗滌用水 應(yīng)符合中國藥典標準,水質(zhì)類別-純化水,.,純水由于去除了水中的余氯，特別容易滋長微生物。必須放在干凈處保存。 純水管中不能有積水。否則再使用時，微生物會污染整根管道。,純水管的放置,.,3 人,1、人在代謝過程中會釋放和分泌污染物。 2、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。 3、人在潔凈室內(nèi)的各種動作也會產(chǎn)生微粒和微生物。,潔凈室中最大的微生物污染源,.,1、皮膚：表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八疊球菌屬細菌、類白喉棒桿菌

22、、金黃色葡萄球菌等 2、口腔：唾液鏈球菌、溶血鏈球菌、乳酸桿菌、流感桿菌、類白喉棒桿菌等 3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等。 4、下呼吸道：包括氣管、支氣管和肺 。健康人的下呼吸道是無菌的。 5、胃腸道：大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、糞產(chǎn)堿桿菌、糞鏈球菌、梭桿菌屬、螺旋體屬、乳桿菌屬、梭菌屬、擬桿菌屬中的一些種 6、泌尿生殖道：常見的有嗜酸乳桿菌、類白喉棒桿菌、葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌,人體內(nèi)外微生物的分布,.,進入潔凈室（區(qū)）的人員不得化妝和佩帶飾物，不得裸手直接接觸器械。 無菌工作服必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。,如何阻斷人體污染源,.,一次更鞋：阻斷外界粘在鞋