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文檔簡介
中藥學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文精品論文豆科兩種植物毛狀根體系的建立關(guān)鍵詞豆科植物發(fā)根農(nóng)桿菌毛狀根愈傷組織轉(zhuǎn)化條件生長狀況摘要本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。正文內(nèi)容本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最利于甘草、黃芪愈傷的培養(yǎng)條件,并嘗試?yán)酶什莺忘S芪的愈傷組織誘導(dǎo)毛狀根,但均未成功。主要研究內(nèi)容1選用烏拉爾甘草無菌苗,苗齡610D為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)甘草毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對甘草毛狀根誘導(dǎo)的影響。得出烏拉爾甘草毛狀根最佳誘導(dǎo)條件B5培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,15834菌液搖床震蕩侵染10MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)60,成功建立甘草毛狀根培養(yǎng)體系。2選用黃芪無菌苗,610D苗為外植體。以無菌苗的子葉、胚軸、幼莖、幼葉為外植體,分別考察外植體對誘導(dǎo)率的影響。以不同菌株成功誘導(dǎo)黃芪毛狀根,并分別考察不同菌株誘導(dǎo)率,以及毛狀根生長狀況。分別嘗試共培養(yǎng)法和直接注射法誘導(dǎo)毛狀根,以及培養(yǎng)基等不同理化因素對黃芪毛狀根誘導(dǎo)的影響,得出黃芪毛狀根最佳誘導(dǎo)條件MS無N培養(yǎng)基PH58,預(yù)培養(yǎng)3D,R1601菌液超聲波侵染2MIN,AS100M/L,共培養(yǎng)3D,251黑暗條件,子葉為外植體,誘導(dǎo)率可高達(dá)40,成功建立黃芪毛狀根培養(yǎng)體系。3甘草、黃芪愈傷組織的研究主要考察了單一激素和不同激素配合使用對愈傷組織誘導(dǎo)和生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草以胚軸為外植體誘導(dǎo)率最高,2,4D對甘草愈傷組織誘導(dǎo)起著特殊的作用,誘導(dǎo)率較高,但愈傷組織的狀態(tài)為灰黃或黃色的水漬狀,所以激素單獨(dú)使用效果不理想。6BA10MG/L、2,4D10MG/L、NAA02MG/L條件下甘草愈傷組織長勢最好。黃芪在MS2,4D1MG/L6BA05MG/LNAA05MG/L環(huán)境下愈傷誘導(dǎo)率最高,長勢最好,胚軸為外植體愈傷組織誘導(dǎo)最快,誘導(dǎo)率最高。本實(shí)驗(yàn)以豆科常用中藥甘草、黃芪為研究對象,分別用發(fā)根農(nóng)桿菌1000、ATCC15834、R1601、1025、A4、9402進(jìn)行毛狀根的誘導(dǎo)及毛狀根體系的建立。為了優(yōu)化毛狀根誘導(dǎo)條件,提高甘草和黃芪毛狀根轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)出率,筆者從外植體的選擇、發(fā)根農(nóng)桿菌的類型、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基的類型、侵染方式、共培養(yǎng)時(shí)間、乙酰丁香酮的用量等因素出發(fā),系統(tǒng)地進(jìn)行了研究,得出了甘草和黃芪毛狀根誘導(dǎo)最佳組合條件,建立了毛狀根體系,并且首次嘗試超聲波,微波在黃芪、甘草毛狀根誘導(dǎo)中的應(yīng)用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲波對提高黃芪誘導(dǎo)率有顯著作用。筆者還對甘草和黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,考察了不同激素使用對甘草、黃芪愈傷組織誘導(dǎo)的影響,得出最
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