生物安全實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范

.,1,生物安全實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范,.,2,發(fā)展概況和我國(guó)現(xiàn)狀,國(guó)際概況20世紀(jì)5060年代1983年WHO第一版實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)（LaboratoryBiosafetyManual）1993年WHO發(fā)表了第二版實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)(LaboratoryBiosafetyManual，2ndedition)2002年WHO又發(fā)表了實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)第二版的網(wǎng)絡(luò)修訂版2004年正式發(fā)布了第三版。,.,3,關(guān)于實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范化管理，美國(guó)、歐洲、加拿大等國(guó)家做得都比較好。在1993年由美國(guó)疾病預(yù)防控制中心/國(guó)立衛(wèi)生研究院（CDC/NIH）發(fā)布了BiosafetyintheMicrobiologicalandBiomedicalLaboratoriesManual,3theditionCDC/NIH1999年發(fā)布了第四版，目前已被國(guó)際公認(rèn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”。,.,4,國(guó)內(nèi)概況（1）：起步,進(jìn)口少數(shù)BSL-3實(shí)驗(yàn)室20世紀(jì)80年代我國(guó)自己研制第一個(gè)國(guó)產(chǎn)三級(jí)生物安全防護(hù)水平（biosafetylevel3,BSL-3）實(shí)驗(yàn)室誕生我國(guó)也建造了一批此種防護(hù)水平或接近BSL-3水平的生物安全實(shí)驗(yàn)室。2002年頒布了微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則（WS2332002），這是一個(gè)開創(chuàng)性工作。2003年獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用標(biāo)準(zhǔn)并已頒布實(shí)施。,.,5,國(guó)內(nèi)概況（2）：SARS期間,2003年5月6日科技部、衛(wèi)生部、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局和國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局聯(lián)合發(fā)布了關(guān)于印發(fā)傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗(yàn)室暫行管理辦法的通知。其內(nèi)容包括傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗(yàn)室暫行管理辦法和傳染性非典型肺炎病毒的毒種保存、使用和感染動(dòng)物模型的暫行管理辦法。,.,6,國(guó)內(nèi)概況（3）：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),2003年8月開始起草，實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB19489-2004。2004年5月中華人民共和國(guó)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)正式頒布了該標(biāo)準(zhǔn)。2004年9月1日中華人民共和國(guó)建設(shè)部與國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局又聯(lián)合發(fā)布了生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范(GB50346-2004）,.,7,國(guó)內(nèi)概況（4）病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例,2004年11月12日，由溫家寶總理簽發(fā)中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令(第424號(hào))公布施行病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例（簡(jiǎn)稱條例）。該條例規(guī)定了在病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員和公眾健康的宗旨，從而使我國(guó)病原微生物實(shí)驗(yàn)室的管理工作步入法制化管理軌道。不言而喻，條例對(duì)我國(guó)防生物威脅和處理突發(fā)衛(wèi)生事件的建設(shè)具有現(xiàn)實(shí)的和深遠(yuǎn)的意義。,.,8,臨床檢驗(yàn)相關(guān)生物危險(xiǎn)等級(jí)分布,.,9,病原微生物實(shí)驗(yàn)室的有關(guān)概念一、生物學(xué)相關(guān)概念,1.生物因子（劑）(bio-agents):具有一定生物活性的制劑2.微生物（microbes,microorganisms）:微生物是指活的生物因子，包括能夠復(fù)制或基因物質(zhì)傳遞的細(xì)胞或非細(xì)胞的微小生物實(shí)體，其中包括致病和非致病的微生物。主要指細(xì)菌（螺旋體、立克次體、衣原體）、真菌、病毒和某些寄生蟲。3.病原體（pathogens）:病原體是能致病的生物因子，包括能夠引發(fā)人和動(dòng)物、植物傳染病的生物因子，主要指致病微生物。,.,10,生物學(xué)相關(guān)概念,4、生物戰(zhàn)劑(agentofbio-war):5、生物氣溶膠(bioaerosol)：氣溶膠是指懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001-100m的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對(duì)穩(wěn)定的分散體系。分散相含有生物因子的氣溶膠。6.生物戰(zhàn)劑氣溶膠(bio-agentaerosol)：分散相含有生物戰(zhàn)劑的氣溶膠。氣溶膠噴灑是國(guó)外生物戰(zhàn)釋放生物戰(zhàn)劑的主要方式。,.,11,生物學(xué)相關(guān)概念,7.生物危害(bio-hazard)和生物危險(xiǎn)(bio-risk)：生物危害是由生物因子形成的傷害。生物危險(xiǎn)(bio-risk)是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴(yán)重性的綜合。8.危險(xiǎn)廢物（hazardouswaste）：即有潛在危險(xiǎn)的廢物，即可燃、易燃、腐蝕、有毒、傳染、放射或其他破壞作用的廢物,.,12,病原微生物實(shí)驗(yàn)室的有關(guān)概念二、生物威脅概念,1生物威脅(bio-threat)：是指生物因子形成的使人憂慮的、可能發(fā)生的嚴(yán)重危害。2生物戰(zhàn)（bio-war）：是指用生物戰(zhàn)劑進(jìn)行的戰(zhàn)爭(zhēng)。目前世界發(fā)達(dá)國(guó)家的生物武器相當(dāng)先進(jìn)，武器化能力很強(qiáng)；一些第三世界國(guó)家也掌握了生物武器，被稱為窮人的原子彈；一旦發(fā)生造成的災(zāi)難不可設(shè)想國(guó)內(nèi)外有關(guān)專家認(rèn)為發(fā)生生物戰(zhàn)的潛在危機(jī)正在增加，令人憂慮,.,13,病原微生物實(shí)驗(yàn)室的有關(guān)概念二、生物威脅概念,3生物恐怖（bio-terror）：生物恐怖是遇到生物因子形成的危險(xiǎn)和邪惡產(chǎn)生的極度恐懼。生物恐怖的特點(diǎn)是具有想象或未來(lái)時(shí)間較長(zhǎng)的憂慮或恐懼。生物恐怖活動(dòng)可利用的病原體種類很多、攻擊面寬、實(shí)施手段多種多樣、突然發(fā)生、真真假假難以預(yù)料和防護(hù)。,.,14,二、生物威脅概念,4基因武器（geneweapon）：指用基因工程研制的生物武器?，F(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展一方面為人類造福，另一方面也會(huì)被人利用發(fā)展武器?，F(xiàn)代生物技術(shù)能改變生物戰(zhàn)劑的攻擊性能，改變其抗原性使之難以診斷；增強(qiáng)其致病性以加強(qiáng)殺傷力；增強(qiáng)其存活力以延遲攻擊時(shí)間和擴(kuò)大攻擊面積；增強(qiáng)其抗藥性造成治療困難；改變其基因特性形成基因武器。專家推測(cè)，基因武器能夠進(jìn)行對(duì)人種的特異性攻擊。,.,15,二、生物威脅概念,5實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染(laboratory-associatedinfection)：由于從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)而發(fā)生的與操作的生物因子相關(guān)的感染。在研究病原微生物中存在某種風(fēng)險(xiǎn)，如果在管理和操作病原體中一旦有所疏漏或錯(cuò)誤就會(huì)發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染，造成威脅，進(jìn)而可能造成病原體擴(kuò)散或傳染病的流行。6醫(yī)院感染(hospital-acquiredinfection)：醫(yī)院感染也叫醫(yī)院獲得性感染或院內(nèi)感染,指在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的一切感染。,.,16,二、生物威脅概念,7.人畜共患病(zoonosis):人和動(dòng)物間相互傳播的傳染病。人的傳染病常常由動(dòng)物傳播,可通過(guò)接觸經(jīng)皮膚和粘膜感染,也可經(jīng)消化道進(jìn)入體內(nèi),更可通過(guò)氣溶膠經(jīng)呼吸道感染。8外來(lái)病(exoticdisease)：國(guó)外存在和流行的，國(guó)內(nèi)尚未證實(shí)存在或已被消滅的傳染病。9傳染病（communicabledisease）:是指由各病原體引起的一組具有傳染性的疾病。已有的一些烈性傳染病還沒(méi)有有效的預(yù)防和控制，已經(jīng)控制的一些傳染病有死灰復(fù)燃的勢(shì)頭，新的傳染病不斷出現(xiàn)，是我們面臨挑戰(zhàn)。,.,17,二、生物威脅概念,10突發(fā)公共衛(wèi)生事件(emergenteventsofhealth)：（簡(jiǎn)稱突發(fā)事件），是指突然發(fā)生，造成或者可能造成社會(huì)公眾健康嚴(yán)重?fù)p害的重大傳染病疫情、群體性不明原因疾病、重大食物和職業(yè)中毒以及其他嚴(yán)重影響公眾健康的事件。突發(fā)公共衛(wèi)生事件的危害性和破壞性是多方面的，不僅危害公眾身體健康和生命安全、造成公眾心理恐懼，甚至導(dǎo)致社會(huì)混亂、經(jīng)濟(jì)衰退，威脅國(guó)家安全。,.,18,二、生物威脅概念,11食源性傳染?。╢oodborneinfectious：指通過(guò)飲食媒介經(jīng)消化道感染的疾病。第53屆世界衛(wèi)生大會(huì)上，世界衛(wèi)生組織將食品安全列為重要議題，并指出食源性疾病與食品污染是不斷擴(kuò)大的公共衛(wèi)生問(wèn)題。在過(guò)去的20年里，食源性疾病的發(fā)生率明顯上升。在發(fā)達(dá)國(guó)家，估計(jì)每年有13以上的人群感染食源性疾病。美國(guó)每年約有7000萬(wàn)8000萬(wàn)人患食源性疾病，其中32.5萬(wàn)人入院治療，5000人死亡。,.,19,國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例按危害程度將病原微生物分為四類：第四類危險(xiǎn)程度最低，第一類危險(xiǎn)程度最高，第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2004）對(duì)微生物的危害進(jìn)行分類，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和等級(jí)劃分與WHO生物安全手冊(cè)第三版（2004）基本一致，但危害程度由4級(jí)至1級(jí)遞減,.,20,國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較不同標(biāo)準(zhǔn)微生物危害等級(jí)劃分與標(biāo)準(zhǔn),.,21,國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,管理?xiàng)l例通用要求WHO安全手冊(cè),.,22,國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,管理?xiàng)l例通用要求WHO安全手冊(cè),.,23,國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較,管理?xiàng)l例通用要求WHO安全手冊(cè),.,24,我國(guó)對(duì)具體病原微生物的分類詳見(jiàn)衛(wèi)生部頒布的人間傳染的病原微生物名錄。該名錄除對(duì)病原微生物的危害分類標(biāo)準(zhǔn)除進(jìn)行危害程度分類外，還規(guī)定了其不同實(shí)驗(yàn)操作的防護(hù)水平以及運(yùn)輸?shù)陌b要求。,.,25,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（1）,1生物安全防護(hù)(bio-safetycontainment)：是指避免生物危險(xiǎn)因子，特別是偶然的和有意利用的生物因子，對(duì)生物體包括實(shí)驗(yàn)室工作者在內(nèi)的傷害和對(duì)環(huán)境的污染的意識(shí)和措施。實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分為一級(jí)防護(hù)（屏障）(primarybarriers)二級(jí)防護(hù)（屏障）(secondarybarriers)。,.,26,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（2）,2一級(jí)防護(hù)：包括兩方面內(nèi)容：（1）生物安全柜(biologicalsafetycabinet,BSC)和類似的設(shè)備等，分成三個(gè)級(jí)別；（2）個(gè)人防護(hù)裝備(personalprotectiveequipment,PPE)，也分成三個(gè)級(jí)別。3.二級(jí)防護(hù):是指實(shí)驗(yàn)室屏障設(shè)施，其建設(shè)有4種不同的結(jié)構(gòu)。各種一級(jí)防護(hù)和二級(jí)防護(hù)的組合構(gòu)成不同防護(hù)水平級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室（BSL-14）。,.,27,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（3）,4.生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(biosafetycontainmentforlaboratories):指能夠避免或控制被操作的有害生物因子危險(xiǎn)的實(shí)驗(yàn)室。措施：通過(guò)規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和精心施工、正確的實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、適合的個(gè)人防護(hù)裝備的使用、嚴(yán)格管理、翔實(shí)的操作規(guī)程（SOP)實(shí)現(xiàn)其功能。建造具有BSL-1和BSL-2的實(shí)驗(yàn)室稱為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室；具有BSL-3防護(hù)水平的實(shí)驗(yàn)室被稱為生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室；達(dá)到BSL-4水平的稱為高度生物防護(hù)實(shí)驗(yàn)室。,.,28,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（4）,5生物安全柜(bio-safetycabinet,BSCs)：是直接操作危險(xiǎn)性微生物時(shí)所用的箱形安全設(shè)備，是生物安全實(shí)驗(yàn)室必備的裝備，保護(hù)使用者和環(huán)境，保護(hù)樣品。按防護(hù)水平生物安全柜分為I級(jí)、II級(jí)、III級(jí),II級(jí)的又分為4種類型(ClassIIA1、ClassIIA2、ClassIIB1和ClassIIB2)。,.,29,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（5）,6安全罩(safetyhood)：即覆蓋在生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)或儀器設(shè)備上的內(nèi)部空氣壓力低于環(huán)境壓力的經(jīng)HEPA濾器過(guò)濾的排風(fēng)罩，以減少對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作者和環(huán)境的危害。7圍場(chǎng)操作（enclose）：是指操作有害生物因子時(shí)，用物理防護(hù)設(shè)備把病原微生物局限在一定的空間內(nèi)，避免生物因子對(duì)人體的暴露和污染環(huán)境。,.,30,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（6）,8氣鎖（airlock）和緩沖間（bufferroom）：氣鎖是設(shè)置在氣壓不同的鄰近二區(qū)之間的氣壓可調(diào)節(jié)的密閉小室，作為二區(qū)的過(guò)渡通道。緩沖間是設(shè)在生物安全實(shí)驗(yàn)室的清潔區(qū)與半污染區(qū)之間，或半污染區(qū)與污染區(qū)之間的類似于氣鎖的密閉小室，小室的兩門互鎖。,.,31,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（7）,9個(gè)人防護(hù)裝備：用于防止人員受到化學(xué)和生物等有害因子傷害的器材和裝備。其根本目的是屏蔽生物因子,不與人體發(fā)生直接接觸。我國(guó)在傳染病和微生物實(shí)驗(yàn)室把個(gè)人防護(hù)分為三級(jí)。10實(shí)驗(yàn)室分區(qū)(laboratoryarea)：我國(guó)把BSL-3和BSL-4實(shí)驗(yàn)室平面布局明確分為：“三區(qū)二緩”的結(jié)構(gòu)?！叭齾^(qū)”是指把實(shí)驗(yàn)室分成污染(C)、潛在(半)污染(B)、清潔(A)三個(gè)功能區(qū)。,.,32,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（8）,（1）清潔區(qū)：是指在正常情況下不可能有實(shí)驗(yàn)因子的污染的區(qū)域。（2）半污染區(qū)：是指在正常情況下只有輕微污染可能的區(qū)域。此區(qū)的功能是大量的準(zhǔn)備工作,例如培養(yǎng)基、細(xì)胞、制劑的配制、低溫冰箱的放置等。在此工作的人員要做好個(gè)人防護(hù),如穿上一層防護(hù)服、戴口罩和手套等。（3）污染區(qū)：是指操作實(shí)驗(yàn)因子的地方(BSL-3中心實(shí)驗(yàn)室),在操作過(guò)程中一定會(huì)有污染的區(qū)域,有潛在嚴(yán)重污染的可能。,.,33,四、生物安全防護(hù)相關(guān)概念（9）,（4）緩沖間：是指在A和B之間,B和C之間的區(qū)域（小室）。緩沖間有送、排風(fēng)進(jìn)行凈化換氣,以保證在人員出入時(shí)污染空氣不會(huì)直接向清潔區(qū)擴(kuò)散或分割到清潔區(qū)。其功能包括空氣隔離、更衣?lián)Q鞋、去污染消毒淋浴。（5）傳遞窗：在BSL-3的A和B,B和C之間各設(shè)一個(gè)物流通道,以便傳遞實(shí)驗(yàn)物資。它也是2門連鎖,并可進(jìn)行消毒。,.,34,實(shí)驗(yàn)室生物安全,操作者,操作對(duì)象,環(huán)境,.,35,所有操作人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，通過(guò)考核，獲得上崗證書；在開始相關(guān)工作之前，應(yīng)對(duì)所從事的病原微生物及相關(guān)操作進(jìn)行危險(xiǎn)評(píng)估，根據(jù)國(guó)家對(duì)于各種微生物操作的危險(xiǎn)等級(jí)劃分和防護(hù)要求以及危險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果，制定全面、細(xì)致的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和程序文件，對(duì)于關(guān)鍵的危險(xiǎn)步驟設(shè)計(jì)出可行的防護(hù)措施并對(duì)這些細(xì)節(jié)了然于胸；熟悉各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的一般規(guī)則，掌握各種儀器、設(shè)備、裝備的操作步驟和要點(diǎn)，對(duì)于各種可能的危害應(yīng)非常熟悉；應(yīng)掌握各種感染性物質(zhì)操作的一般準(zhǔn)則和技術(shù)要點(diǎn)。,生物安全意識(shí)至關(guān)重要,.,36,實(shí)驗(yàn)室感染的傳播鏈,容器中的病原體,泄漏,預(yù)防接種,感染途徑/感染劑量,傳播,個(gè)人防護(hù)裝備,易感宿主,規(guī)程/設(shè)備,潛伏期,醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè),規(guī)程/設(shè)備,.,37,實(shí)驗(yàn)室的生物安全規(guī)范,實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行規(guī)范儀器設(shè)備的使用規(guī)范針對(duì)感染性材料的操作規(guī)范個(gè)人防護(hù)用品的使用規(guī)范,.,38,LaboratoryBiosafetyManual,3rdedition-labcommissioningandcertification-labbiosecurityconcepts,Biosafety:Topromotetheuseofsafepracticesinthehandlingofpathogenicmicroorganismsinthelaboratoryduringtransportationinfieldinvestigationsinmanufacturingfacilitiesinhealth-carefacilities,LaboratoryBiosafetyManual1stedition,1983,1993,2003,2004,WHOLaboratoryBiosafetyManual,-translatedintoF,S,P,Ch,Ru-availableonweb,CD-Rom,hardcopies,.,39,病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物危險(xiǎn),.,40,實(shí)驗(yàn)室主要生物危害,微生物氣溶膠吸入刺傷、割傷皮膚、黏膜污染食入感染的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物咬傷,還有許多不明原因的實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染,.,41,Pike等對(duì)3921例實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，已知原因的實(shí)驗(yàn)室感染只占全部感染的18，不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染卻高達(dá)82。對(duì)不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染的研究表明，大多數(shù)可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠在空氣擴(kuò)散，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員吸入了污染的空氣感染發(fā)病的。,.,42,實(shí)驗(yàn)室微生物氣溶膠的種類,飛沫核氣溶膠粉塵氣溶膠,兩類微生物氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員都具有嚴(yán)重的危害性，其程度取決于微生物本身的毒力、氣溶膠的濃度、氣溶膠粒子大小、以及當(dāng)時(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的微小氣候條件。研究發(fā)現(xiàn)，粒徑100m的飛沫沉降很快，而粒徑5m的飛沫核能夠被呼吸道的粘膜捕獲。,.,43,產(chǎn)生微生物氣溶膠的其它因素,另外，一些在自然環(huán)境中可以繁殖的微生物，一旦進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的空調(diào)或通風(fēng)系統(tǒng)，污染了空調(diào)的冷卻水，則可以形成更廣泛的微生物氣溶膠污染。除了實(shí)驗(yàn)室操作可以產(chǎn)生微生物氣溶膠外，患有呼吸道傳染病或皮毛上染有病原微生物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物也可以產(chǎn)生微生物氣溶膠。微生物氣溶膠在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)產(chǎn)生后，還可以通過(guò)氣流轉(zhuǎn)移到同一建筑物的其他地方，甚至污染整個(gè)建筑物的空氣。,.,44,生物安全實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行規(guī)范,.,45,生物安全防護(hù)水平（BSL）,由一級(jí)防護(hù)屏障（安全設(shè)備）和二級(jí)防護(hù)屏障（實(shí)驗(yàn)室設(shè)施）組合構(gòu)成四級(jí)生物安全水平。一級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL1）二級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL2）三級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL3）四級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL4）,.,46,一級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL1）,BSL1適合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子（對(duì)應(yīng)于我國(guó)的第四類危害的微生物）的工作。許多通常與人類疾病不相關(guān)的病原微生物是條件致病性的，在特定情況下，可以在兒童、老年人、免疫缺陷的和免疫抑制的個(gè)體中引起感染。對(duì)于在體內(nèi)已經(jīng)繁殖多代的疫苗株不要簡(jiǎn)單地認(rèn)為是無(wú)毒的。,.,47,一級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL1）,枯草桿菌、格氏阿米巴原蟲和感染性犬肝炎病毒是符合這些標(biāo)準(zhǔn)微生物的代表。BSL1不需要特殊的一級(jí)和二級(jí)屏障、除需要洗手池外，依靠標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作即可獲得基本的防護(hù)水平。,.,48,BSL1實(shí)驗(yàn)室,.,49,二級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL2）,二級(jí)生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗(yàn)室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國(guó)的第三類（少量二類）危害的致病微生物。二級(jí)生物安全防護(hù)水平是適合于從未知病原的人身上取血、體液和組織。,.,50,二級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL2）,接觸這些致病微生物的工作人員的主要危害是與感染性材料的偶然的皮膚或粘膜破損、或吞食感染性食物。必須強(qiáng)調(diào)對(duì)污染的針頭或利器的使用要非常謹(jǐn)慎。對(duì)未知是通過(guò)氣溶膠途徑傳播的微生物、具有可以增加工作人員暴露的可能氣溶膠或高度飛濺物的程序，二級(jí)生物安全防護(hù)水平微生物操作必需在一級(jí)生物安全防護(hù)水平的基礎(chǔ)之上，增加生物安全柜、高壓滅菌器、安全離心機(jī)罩帽、防濺罩或面罩等。,.,51,BSL2實(shí)驗(yàn)室,.,52,BSL1實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,BSL1實(shí)驗(yàn)室對(duì)高壓滅菌器、離心機(jī)安全罩沒(méi)有要求；生物安全柜要求型生物安全柜。,.,53,BSL1實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室外套手套,.,54,BSL1實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,另外,個(gè)人防護(hù)設(shè)備可能也需要面部防護(hù)眼睛防護(hù),.,55,BSL2實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,生物安全柜各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際情況選用合適的級(jí)A1型或B1型生物安全柜。生物安全柜應(yīng)安裝在BSL2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)氣流流動(dòng)小，人員走動(dòng)少，離門和中央空調(diào)送風(fēng)口較遠(yuǎn)的地方。生物安全柜的周圍應(yīng)有一定的空間，與墻壁至少保持30cm的距離，便于清潔環(huán)境衛(wèi)生。,.,56,BSL2實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,高壓滅菌器高壓滅菌器應(yīng)選擇立式或臺(tái)式不排氣（產(chǎn)生的蒸汽被回收）的，放置在BSL2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，或門外。離心機(jī)安全罩不需要離心機(jī)安全罩。洗眼器應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)內(nèi)容，確定是否需要安裝洗眼器。如果需要洗眼器，則應(yīng)安裝在BSL2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)靠近出口的地方。,.,57,一、BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室,.,58,（一）BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)入,未經(jīng)批準(zhǔn)，任何人不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。兒童不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域?？赡茉黾荧@得性感染的危險(xiǎn)性或感染后可能引起嚴(yán)重后果的人員不允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物房。BSL-2實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志，包括通用的生物危險(xiǎn)性標(biāo)志，標(biāo)明傳染因子、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其他人姓名、電話、以及進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。工作人員進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)特別批準(zhǔn)。與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。,.,59,（二）BSL-1和BSL-2防護(hù)要求,在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，必須穿著合適的工作服或防護(hù)服。在進(jìn)行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。為了防止眼睛或面部受到噴濺物的污染、碰撞或人工紫外線輻射的傷害，必須戴合適的安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋。禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。,.,60,（三）BSL-1和BSL-2有關(guān)操作的指導(dǎo)原則,嚴(yán)禁用口吸移液管,嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。所有的實(shí)驗(yàn)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來(lái)進(jìn)行。應(yīng)限制使用注射針頭和注射器。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液外，注射針頭和注射器不能用于移液或用作其他用途。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制訂并執(zhí)行處理溢出物的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)如實(shí)記錄有關(guān)暴露和處理的情況，保存相關(guān)記錄。污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果準(zhǔn)備專門的污水處理系統(tǒng)。只有保證在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒(méi)有受到污染的文件紙張才能帶出實(shí)驗(yàn)室,.,61,（四）BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)的管理原則,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。每天工作結(jié)束后應(yīng)清除工作臺(tái)面的污染。若發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出應(yīng)立即清除污染。所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須先清除污染。感染性材料的包裝和運(yùn)輸應(yīng)遵循國(guó)家和或國(guó)際的相關(guān)規(guī)定。如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動(dòng)物進(jìn)入的紗窗。,.,62,（五）BSL-1和BSL-2生物安全管理的指導(dǎo)原則,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及實(shí)驗(yàn)室安全或/和操作手冊(cè)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn),并建立制度。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人（或生物安全負(fù)責(zé)人）要將生物安全實(shí)驗(yàn)室的特殊危害告知實(shí)驗(yàn)室人員，同時(shí)要求他們閱讀生物安全或/和操作手冊(cè)，并遵循標(biāo)準(zhǔn)的操作程序。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或/或操作手冊(cè)。所有實(shí)驗(yàn)室人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，了解所從事工作的危險(xiǎn)、掌握有關(guān)的管理規(guī)定和操作程序，通過(guò)考核后方可從事相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作。應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物的控制方案。如有必要，應(yīng)為所有實(shí)驗(yàn)室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評(píng)估、監(jiān)測(cè)和治療，并建立健康檔案。實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)接受與所操作生物因子或?qū)嶒?yàn)室內(nèi)潛在的因子相關(guān)的免疫接種或檢測(cè)。,.,63,三級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL3）,三級(jí)生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗(yàn)室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國(guó)第二類（個(gè)別第一類）病原微生物。這些致病微生物對(duì)工作人員的主要危害是與自身接種(自傷)、吞服、和暴露于感染性氣溶膠。,.,64,三級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL3）,三級(jí)生物安全防護(hù)水平有嚴(yán)格的一級(jí)防護(hù)屏障和二級(jí)防護(hù)屏障的要求，以防止相鄰區(qū)域的工作人員、社會(huì)和環(huán)境暴露于可能的感染性氣溶膠。例如，所有實(shí)驗(yàn)室操作應(yīng)該在生物安全柜或其它密閉容器中操作，諸如氣密型氣溶膠發(fā)生柜。這一水平的二級(jí)屏障包括實(shí)驗(yàn)室的控制入口和為減小感染性氣溶膠從實(shí)驗(yàn)室釋放的特殊通風(fēng)系統(tǒng)。,.,65,BSL3實(shí)驗(yàn)室,.,66,BSL3實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,生物安全柜BSL3實(shí)驗(yàn)室必須安裝和使用生物安全柜，應(yīng)根據(jù)病原微生物試驗(yàn)活動(dòng)的內(nèi)容的不同，選擇不同型別的生物安全柜。級(jí)A2型、B1型生物安全柜，B2型生物安全柜也可以使用，但因換氣量太大，對(duì)實(shí)驗(yàn)室負(fù)壓和氣流的影響比較大，一般不需要使用級(jí)B2生物安全柜；少數(shù)特殊操作（如感染的中型和大型動(dòng)物解剖）可以使用級(jí)B2生物安全柜。另外，BSL3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安裝級(jí)生物安全柜時(shí)，要充分考慮實(shí)驗(yàn)室和生物安全柜的氣流平衡和回流的問(wèn)題。生物安全柜排風(fēng)口與排風(fēng)管道之間可以通過(guò)硬連接，也可以通過(guò)套管結(jié)構(gòu)連接，無(wú)論是那一種連接方式，排風(fēng)管道中都應(yīng)有止回閥，且排風(fēng)管道中還應(yīng)有一道HEPA過(guò)濾器。,.,67,BSL3安全設(shè)備(一級(jí)屏障),在BSL-1and2安全設(shè)備的基礎(chǔ)上，加:呼吸道保護(hù),.,68,BSL3實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,高壓滅菌器在BSL3實(shí)驗(yàn)室的半污染區(qū)和清潔區(qū)之間，宜安裝雙扉生物安全型高壓滅菌器，即高壓滅菌器跨墻安裝，雙門互鎖結(jié)構(gòu)，且對(duì)高壓產(chǎn)生的蒸汽具有回收再高壓的性能。高壓滅菌器的安裝，必須確保高壓滅菌器與墻體之間的密封，不能夠有一點(diǎn)泄漏。污染區(qū)內(nèi)應(yīng)設(shè)置不排蒸汽的高壓蒸汽滅菌器或其他消毒裝置。,.,69,BSL3實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,離心機(jī)安全罩是否需要離心機(jī)安全罩，取決于離心機(jī)的類型。如果是傳統(tǒng)型的離心機(jī)，最好安裝離心機(jī)安全罩；如果離心機(jī)是新式生物安全型的，即負(fù)壓離心機(jī)或有離心杯帽的離心機(jī)，則不需要離心機(jī)安全罩。離心機(jī)和安全罩宜靠近排風(fēng)口。,.,70,BSL3實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,洗手裝置應(yīng)在污染區(qū)和半污染區(qū)出口處設(shè)洗手裝置。洗手裝置的供水應(yīng)為非手動(dòng)開關(guān)。供水管應(yīng)安裝防回流裝置。不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安設(shè)地漏。下水道應(yīng)與建筑物的下水管線完全隔離，且有明顯標(biāo)識(shí)。下水應(yīng)直接通往獨(dú)立的液體消毒系統(tǒng)集中收集，經(jīng)有效消毒后處置。,.,71,四級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL4）,四級(jí)生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗(yàn)室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國(guó)第一類病原微生物。另外，與四級(jí)生物安全防護(hù)水平的微生物具有相近的或一致的抗原關(guān)系的微生物也應(yīng)該在該防護(hù)水平進(jìn)行研究。,.,72,四級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL4）,四級(jí)生物安全防護(hù)水平的微生物對(duì)工作人員的主要危害是呼吸道暴露于感染性氣溶膠、粘膜暴露于感染性飛沫、和自身接種。所有操作可能具有感染性的診斷材料、分離培養(yǎng)物、以及自然或?qū)嶒?yàn)感染的動(dòng)物時(shí)，實(shí)驗(yàn)室工作人員、社會(huì)和環(huán)境均可造成高度危險(xiǎn)的感染。,.,73,四級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL4）,III級(jí)生物安全柜或全身正壓防護(hù)服能夠把實(shí)驗(yàn)室工作人員與氣溶膠的化感染性材料完全隔離開。四級(jí)生物安全防護(hù)水平設(shè)施一般是獨(dú)立建筑物或具有復(fù)雜的、特殊的通風(fēng)系統(tǒng)和防止活的微生物釋放到環(huán)境中的污物處理系統(tǒng)與其它建筑完全隔離。,.,74,BSL4實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,生物安全柜BSL4實(shí)驗(yàn)室必須安裝和使用生物安全柜，應(yīng)根據(jù)病原微生物試驗(yàn)活動(dòng)的內(nèi)容的不同，可以選擇級(jí)B型和級(jí)兩種不同型別的生物安全柜。在正壓防護(hù)服型BSL4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，可以選擇級(jí)生物安全柜；在生物安全柜型BSL4實(shí)驗(yàn)室中，選擇級(jí)生物安全柜；在混合型BSL4實(shí)驗(yàn)室中，應(yīng)選擇級(jí)生物安全柜。,.,75,BSL4實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備的要求,高壓滅菌器根據(jù)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB194892004的要求，應(yīng)在半污染區(qū)和清潔區(qū)墻上、半污染區(qū)和污染區(qū)墻上設(shè)置不排蒸汽的雙扉高