病毒學(xué)-第四章-腸道病毒ppt課件

.,腸道病毒Enterovirus,.,急性胃腸炎病毒,脊髓灰質(zhì)炎病毒,甲型肝炎病毒,主要內(nèi)容,.,簡(jiǎn)稱腸道病毒(enterovirus)，通過污染的飲食，經(jīng)糞口途徑傳播，引起消化道傳染病。主要包括腸道病毒和急性胃腸炎病毒腸道病毒(小RNA病毒科)輪狀病毒腸道腺病毒杯狀病毒星狀病毒,呼腸病毒科,急性胃腸炎病毒,腸道感染病毒,.,病毒種類型別所致疾病脊髓灰質(zhì)炎病毒13脊髓灰質(zhì)炎柯薩奇病毒A組124*皰疹性咽喉炎、手足口病B組16心肌炎和心包炎、流行胸痛埃可病毒134*無菌性腦膜炎、腦炎等新腸道病毒6871手足口病、眼病等甲型肝炎病毒72甲型肝炎*A23為?？刹《?型;*第10型為呼腸病毒1型;第28型為7天連鎖酒店鼻病毒1型;第34型為柯薩奇病毒24型。,腸道病毒的分類,.,致病特點(diǎn),在腸道中增殖，卻很少引起腸道疾病不同的型別可引起相同的臨床綜合癥，同型病毒也可引起不同的臨床疾病,.,小RNA病毒，直徑22-30nm，球形，20面立體對(duì)稱，無包膜；核心為單正鏈RNA，起mRNA作用，具感染性；耐乙醚，耐酸(pH3-5)，耐膽汁，可在污水、糞便中存活數(shù)周；對(duì)紫外線、干熱敏感；糞-口傳播為主，腸細(xì)胞內(nèi)增殖，能侵入血流、神經(jīng)系統(tǒng)等，導(dǎo)致腸道外多種疾?。ㄖ袠猩窠?jīng)、心肌損害，皮疹等），隱性感染率高。,腸道病毒共同特性,.,病例,一3歲男童，為新近非洲移民。因不對(duì)稱下肢送醫(yī)。其母訴說患兒5個(gè)月前患發(fā)熱和腹瀉，后自然消失，幾周后發(fā)現(xiàn)他右腿行走不便。查體發(fā)現(xiàn)右下肢細(xì)短，軟弱無力不能行走，右腿深部腱反射消失，但無感覺障礙。上肢活動(dòng)正常，精神狀態(tài)及頭部神經(jīng)反射正常。實(shí)驗(yàn)室檢查：肌電圖（EMG）呈慢性部分神經(jīng)切除改變，并伴有靜脈肌肉異常自發(fā)活動(dòng)。與自愿者對(duì)照，其運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量減少，感覺功能正常。,.,脊髓灰質(zhì)炎病毒Poliovirus,.,脊髓灰質(zhì)炎又稱小兒麻痹癥，是一種多發(fā)生于夏秋季節(jié)由脊髓灰質(zhì)炎病毒引起的急性腸道傳染病。患者在多汗發(fā)熱、周身疼痛數(shù)日后常常會(huì)手足軟綿無力、不會(huì)動(dòng)彈，稱為“馳緩性癱瘓”。嚴(yán)重患者病毒可侵入其腦神經(jīng)，出現(xiàn)面癱、吞咽和呼吸困難，甚至危及生命。開展活疫苗預(yù)防以來，已基本消滅了此病。,.,生物學(xué)性狀,形態(tài)與結(jié)構(gòu)球形，直徑27nm，無包膜。核衣殼:呈20面體立體對(duì)稱。,.,病毒衣殼,有60個(gè)相同的殼粒，殼粒由4種不同的結(jié)構(gòu)蛋白組成：表面：結(jié)構(gòu)蛋白VP1-VP3帶有中和抗原位點(diǎn)，VP1與病毒吸附有關(guān)。內(nèi)部：VP4與RNA結(jié)合，與脫殼穿入有關(guān)。,.,基因結(jié)構(gòu)示意圖基因組單正鏈RNA5VPgVP4VP2VP3VP12A2B2C3A3B3C3DAAAn3,非編碼區(qū)連續(xù)開放讀框非編碼區(qū),5端：共價(jià)結(jié)合一小分子蛋白質(zhì)VPg與病毒RNA合成和7天連鎖酒店基因組裝配有關(guān)3端：帶有poly(A)尾加強(qiáng)了病毒的感染性,.,病毒蛋白質(zhì)合成Poliovirus基因組作模板翻譯前體蛋白質(zhì)(2200aa)結(jié)構(gòu)蛋白+酶蛋白VP3+VP1+VP0VP4+VP2,病毒RNA的復(fù)制Poliovirus基因組RNA（+）復(fù)制互補(bǔ)RNA（-）復(fù)制病毒RNA（+）,.,抗原組成,D抗原(N抗原):完整的病毒顆粒，有感染性，為型特異性抗原。根據(jù)其D抗原的不同，分為、型。C抗原(H抗原):為未裝配的空心顆粒，不含RNA，無感染性，無型特異性。,.,抵抗力,對(duì)理化因素抵抗力較強(qiáng)；在污水和糞便中可存活數(shù)月；能耐受胃酸、蛋白酶和膽汁；室溫下可存活數(shù)日；56經(jīng)30min可滅活,.,致病性與免疫性,傳染源：患者，無癥狀帶毒者。傳播途徑:糞口途徑為主，上呼吸道、咽喉和腸道為入侵門戶。從潛伏期全病程病后數(shù)月均有傳染性(糞便)易感者：兒童過程：1）病毒數(shù)量和毒力；2）機(jī)體狀態(tài)所致疾?。荷窠?jīng)性麻痹（小兒麻痹）識(shí)別受體：免疫球蛋白超家族的細(xì)胞粘附分子脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,.,病毒,口,咽部、腸道淋巴結(jié)大量繁殖,血（第一次病毒血癥）,全身淋巴組織增殖,血（第二次病毒血癥）,靶器官（脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞、腦膜）,病變輕微暫時(shí)性肢體麻痹,0.1%病變嚴(yán)重弛緩性麻痹,極少數(shù)延髓麻痹,呼衰、心衰、死亡,90%隱性感染,5%頓挫感染,非麻痹型脊髓灰質(zhì)炎/無菌性腦膜炎,麻痹型,致病性和免疫性,10%,（發(fā)燒、不適、腹瀉）,（發(fā)熱頭疼乏力咽痛嘔吐）,12,.,90的感染為隱性感染約5出現(xiàn)頓挫感染12為非麻痹性脊髓灰質(zhì)炎或無菌性腦膜炎僅約0.1%出現(xiàn)永久性弛緩性肢體麻痹極少數(shù)發(fā)展為延髓麻痹,臨床特征,.,病毒胃腸道血液和淋巴液血腦屏障中樞神經(jīng)系統(tǒng)在神經(jīng)元中增殖癱瘓,脊髓灰質(zhì)炎的發(fā)病機(jī)理,.,Polioinanancientcivilization.Thisstonetabletfromthe18thDynastyinEgyptdepictsSiptahbearingthesignsofparalyticpolio.,Poliomaycauseparalysis.Childrenarestrickenwithpoliomoreoftenthanadults,leadingtothenameinfantileparalysis.,.,免疫性,感染后，可建立起牢固的特異性免疫應(yīng)答：同型：防御力異型：也有低度防御能力體液免疫為主:腸道:S-IgA,防止病毒在咽喉、腸道內(nèi)吸附和初步增殖。血中:IgG,IgM,中和病毒,阻止侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。IgG抗體可由母親通過胎盤傳給胎兒,故生后6個(gè)月以內(nèi)的嬰兒較少發(fā)病。,.,微生物學(xué)檢查,病毒分離:糞便抗生素靈長類（猴腎或人胚腎細(xì)胞),37,710天細(xì)胞病變鑒定型,脊髓灰質(zhì)炎病毒感染Vero細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞病變,正常的Vero細(xì)胞,.,血清學(xué)診斷:雙份血清查抗體,ELISA,IFA病毒基因檢測(cè):核酸雜交、PCR、序列分析,微生物學(xué)檢查,.,防治原則,人工主動(dòng)免疫:嬰幼兒(2月齡),兒童。疫苗種類:滅活脊髓灰質(zhì)炎疫苗(IPV,Salk苗);脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗(OPV,Sabin苗);三價(jià)(3個(gè)型)口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗(TOPV):即從生后2個(gè)月開始連服三次TOPV(間隔1個(gè)月),抗體陽轉(zhuǎn)率100,4歲再加強(qiáng)一次。危險(xiǎn):疫苗相關(guān)麻痹性脊髓灰質(zhì)炎(VAPP)發(fā)生,.,脊髓灰質(zhì)炎疫苗比較,種類制備服用抗體產(chǎn)生優(yōu)缺點(diǎn)滅活由三型病肌肉血流中保存、運(yùn)輸方便，疫苗毒經(jīng)甲醛注射和抗體無復(fù)毒危險(xiǎn)，副作(Salk滅活后混用少；需重復(fù)注射，疫苗)合制成IPV維持時(shí)間短，無局部免疫。減毒活特定條件口服血流中免疫效果確實(shí)，間接疫苗下篩選出(冬春和抗體,免疫，保存、運(yùn)輸要(Sabin的減毒變季)腸道冷藏；不能用開水送疫苗)異株制成sIgA服，有復(fù)毒危險(xiǎn)；免OPV疫缺陷者可致麻痹。,建議：最初兩次免疫使用IPV，再用OPV。,.,人工被動(dòng)免疫,對(duì)流行期與患者有過密切接觸的易感者，按照0.30.5ml/kg注射丙種球蛋白可避免發(fā)病或減輕癥狀。,.,急性胃腸炎病毒,.,急性胃腸炎病毒,引起急性胃腸炎，種類有：呼腸病毒科輪狀病毒杯狀病毒科諾如病毒沙波病毒腺病毒科腸道7天連鎖酒店腺病毒40、41型星狀病毒科星狀病毒,.,病毒性與細(xì)菌性胃腸炎的主要區(qū)別：無細(xì)菌病原；多為突然發(fā)生且很快恢復(fù)；臨床表現(xiàn)相似，主要為中等程度的腹瀉與嘔吐；流行特點(diǎn)為無年齡和地域限制。,臨床表現(xiàn)：腹瀉和嘔吐,急性胃腸炎病毒,.,流行方式：五歲以內(nèi)的兒童腹瀉：輪狀病毒（A-C組）占80%，腸道腺病毒占第2位；星狀病毒2.8%。與年齡無關(guān)的暴發(fā)流行腹瀉：杯狀病毒（無菌性胃腸炎暴發(fā)最重要病原）。,急性胃腸炎病毒,.,輪狀病毒(rotavirus),直徑7075nm的球形，具雙層衣殼，無包膜。內(nèi)殼輻射呈車輪狀雙鏈RNA病毒，分11個(gè)節(jié)段，分別編碼6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和5個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白，其中：1、2、3片段編碼核心蛋白VP1、VP2和VP3，具有轉(zhuǎn)錄酶和復(fù)制酶的作用。,.,輪狀病毒,.,輪狀病毒的結(jié)構(gòu)及其核心RNA11條節(jié)段與編碼蛋白質(zhì),.,病毒內(nèi)衣殼,病毒外衣殼,6片段編碼內(nèi)衣殼蛋白VP6，為病毒組和亞組特異性抗原。,4和9片段編碼外衣殼蛋白VP4（血凝素，決定血清型和感染性），VP7（糖蛋白，促病毒穿入），均為中和抗原。,.,輪狀病毒的分組,A組人類致病的主要病原體-嬰兒B組感染人-成人C組感染豬，偶爾也感染人D組感染鳥類E組感染豬,根據(jù)輪狀病毒抗原性及遺傳性的不同將其分為AG7個(gè)血清型，其中A、B、C3型是人類腹瀉的重要病原，DG型只引起動(dòng)物腹瀉。血清型之間無交叉反應(yīng)。,.,致病性及免疫性,晚秋及冬季為主要發(fā)病季節(jié)糞口途徑為主要傳播方式潛伏期短，臨床表現(xiàn)為大量水樣便、嘔吐及輕度發(fā)熱。典型病兒排泄白色水樣便，故稱為小兒假性霍亂。少數(shù)嚴(yán)重病人可出現(xiàn)脫水及中毒癥狀。主要保護(hù)性抗體為SIgA，對(duì)同型病毒有保護(hù)作用，對(duì)異型也有部分保護(hù)作用，細(xì)胞免疫亦有交叉保護(hù)作用,.,微生物學(xué)檢查,取患者糞便標(biāo)本用電鏡(診斷率90-95%)、ELISA或乳膠凝集試驗(yàn)檢出病毒或其抗原。,糞便中提取病毒RNA進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，分析A、B、C三組輪狀病毒11個(gè)基因片段特殊RNA圖譜，在臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查中有重要意義。,.,防治原則,控制傳染源，嚴(yán)格消毒，經(jīng)常洗手，防止醫(yī)源性傳播，特別是在嬰幼兒病房中的傳播治療時(shí)注意補(bǔ)液；糾正電解質(zhì)平衡預(yù)防用猴、牛輪狀病毒，可提供交叉保護(hù),.,杯狀病毒(calicivirus),直徑27nm，球形表面有杯狀凹陷，無包膜單正鏈RNA只有一種衣殼蛋白,引起人類胃腸炎的包括諾如病毒和沙波病毒。諾如病毒是最多見的杯狀病毒，也是世界上引起人類非細(xì)菌性胃腸炎暴發(fā)流行最重要的病原體。,.,耐酸、對(duì)熱較穩(wěn)定、6030min不能完全滅活。糞-口途徑為主要傳播方式，呼吸道也可傳播污染的海產(chǎn)品是引起流行的重要原因破壞小腸絨毛和粘膜上皮細(xì)胞，引起嘔吐、腹瀉惡心、低熱等癥狀。一般12d自愈，但免疫力不持久，易再次感染。,杯狀病毒(calicivirus),.,腸道腺病毒(enterrisadenovirus),生物學(xué)性狀與其他腺病毒相似糞-口途徑傳播主要侵犯5歲以下兒童是引起嬰兒病毒性腹瀉的第二位病原體,.,星狀病毒(astrovirus),球形，表面結(jié)構(gòu)呈星形，有56個(gè)角無包膜，單正鏈RNA糞-口途徑傳播，易感染5歲以下兒童，多為隱性感染。侵犯十二指腸粘膜細(xì)胞主要癥狀為發(fā)熱，惡心，腹瀉可持續(xù)2-3d或更長。感染后免疫力牢固是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原體之一,.,輪狀病毒腸道腺病毒杯狀病毒星狀病毒,雙衣殼如車輪20面體對(duì)稱杯狀凹陷表面呈星狀血凝素觸須，血凝素dsRNA，11dsDNAss(+)RNAss(+)RNA節(jié)段基因組7.37.7kb7.0kb常規(guī)培養(yǎng)特殊細(xì)胞不能體外培養(yǎng)大腸癌細(xì)胞A-G7組40、41型成員眾多嬰幼兒腹瀉嬰幼兒腹瀉無菌性胃腸炎嬰幼兒腹瀉嬰幼兒死亡主要原因糞-口,呼吸道糞-口糞-口,呼吸道糞-口大童成人很少發(fā)熱或傳染性強(qiáng)(海免疫力無癥狀感染出現(xiàn)呼吸道癥狀產(chǎn)品污染)牢固,.,甲型肝炎病毒(HepatitisAvirus,HAV),毛蚶，又名麻蛤、麻地、毛蛤、瓦壟子、珠蚶。肉味鮮美，營養(yǎng)豐富，且產(chǎn)量大，價(jià)格便宜，很受群眾歡迎。家庭多用鹽水池煮后蘸姜醋汁食用。,.,概況,1988年春季上海曾發(fā)生因生食毛蚶而爆發(fā)甲型肝炎流行，患者達(dá)31萬，死亡47例，震驚全國!HAV首先是弗瑞斯特（Feinstone）于1973年應(yīng)用免疫電鏡技術(shù)在急性期肝炎患者糞便中發(fā)現(xiàn)的。1982年國際病毒命名委員會(huì)將列為小RNA病毒科腸道病毒屬72型。因其生物學(xué)性狀與腸道病毒明顯不同,1993年被單列為小RNA病毒科的嗜肝病毒屬（heparnavirus）。,.,生物學(xué)性狀形態(tài)與結(jié)構(gòu)：球形（直徑27-32nm）二十面體立體對(duì)稱，無包膜。,HAV電子顯微鏡圖,.,基因組單股正鏈RNA，約7500核苷酸,基因結(jié)構(gòu)5-Vpg-非編碼區(qū)-P1（VP1-VP2-VP3-VP4）-P2-P3-非編碼區(qū)-AAAn-3,5末端區(qū)：較保守，制備探針，快速診斷編碼區(qū)：衣殼蛋白VP1-4、RNA多聚酶、蛋白酶,.,抗原性,衣殼蛋白：由VP1VP4等4種多肽組成，其中VP1是主要的衣殼蛋白，其抗原決定簇的中和抗體，能中和所有的HAV株。只有一個(gè)血清型,.,抵抗力：較強(qiáng)較腸道病毒更耐熱。60可存活4小時(shí)，4可存活數(shù)月。對(duì)乙醚、酸（pH3）處理有抵抗力。加熱100、5分鐘或用甲醛溶液、氯等處理，可使之滅活。,對(duì)肝炎患者及其排泄物處理應(yīng)特別小心！,.,感染動(dòng)物模型黑猩猩,狨猴和紅面猴對(duì)HAV易感，且能傳代，經(jīng)口或靜脈注射可使動(dòng)物發(fā)生肝炎，恢復(fù)期血清中能檢出HAV的相應(yīng)抗體。,細(xì)胞培養(yǎng)狨猴肝細(xì)胞或恒河猴腎細(xì)胞FPhk6株肝癌細(xì)胞株但不引起CPE，因此需用免疫熒光法或放射免疫法檢出培養(yǎng)的HAV,.,致病性,HAV引起的甲型肝炎是急性肝炎，可造成暴發(fā)或散發(fā)流行，潛伏期短，發(fā)病較急，一般不轉(zhuǎn)為慢性，亦無慢性攜帶者，預(yù)后良好。,.,多侵犯兒童及青少年，且多為隱性感染。潛伏期為2-6周，冬春季節(jié)是甲肝的高發(fā)期。臨床表現(xiàn)多從發(fā)熱、疲乏和食欲不振開始，繼而出現(xiàn)肝腫大、壓痛、肝功能損害，部分患者可出現(xiàn)黃疸。90%以上患者可在2-3個(gè)月完全康復(fù)。,致病性,.,少數(shù)經(jīng)血液、尿液和密切接觸等傳播。,傳播途徑,糞-口：污染水源、食物、海產(chǎn)品和食具等造成散發(fā)流行或大流行。,.,傳染源,糞便血液,急性甲肝患者,隱性感染者,我國HAV感染率高于70%,.,甲肝在世界范圍內(nèi)發(fā)病率示意圖,.,致病機(jī)制,糞口途徑傳播,小腸淋巴結(jié)中大量增殖,入血并形成病毒血癥,肝臟為最終靶器官（免疫病理作用）,通過膽汁隨糞便排出體外,.,免疫性,隱性或顯性感染急性期及恢復(fù)期早期抗-HAVIgM恢復(fù)期后期抗-HAVIgG維持終身,80%40歲以上成人,.,免疫學(xué)檢查：雙份血清HAV抗原檢測(cè)：糞便病毒顆粒觀察：肝活檢組織,標(biāo)本采集：,微生物學(xué)檢查,.,糞便（潛伏期末期和急性期早期）直接電鏡技術(shù)免疫電鏡技術(shù)固相免疫電鏡技術(shù),顯微鏡檢