（浙江選考）2021版新高考生物一輪復習專題12現(xiàn)代生物科技專題第35講克隆技術教學案新人教版.docx

第35講克隆技術知識內容考試要求知識內容考試要求1植物的克隆,b2.動物的克隆a植物的克隆1原理：植物細胞的全能性，即植物體的每個生活細胞都具有遺傳上的全能性，因而都具有發(fā)育成完整植株的潛能。從單個細胞分裂、分化和發(fā)育成植株胚狀體，同受精卵分裂、分化和發(fā)育成胚的過程相似。2技術基礎：植物組織培養(yǎng)。一般程序：3細胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)通過平衡的植物激素配比可以調控器官發(fā)生和形態(tài)建成。處于適當?shù)囊后w培養(yǎng)條件的單個植物細胞，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導，可經(jīng)歷從單細胞依次到細胞團、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整的植株。有的植物(如風信子)可以在愈傷組織的基礎上直接發(fā)育出花器官。4原生質體培養(yǎng)與植物細胞工程項目原生質體培養(yǎng)植物細胞工程操作過程聯(lián)系原生質體培養(yǎng)成功標志著植物細胞工程技術的進步。在此基礎上，形成了原生質體融合(體細胞雜交)和基因工程技術結合的研究領域(1)原生質體：細胞中有代謝活性的原生質部分，包括質膜、細胞質和細胞核。例如，去掉細胞壁的植物細胞等。(2)原生質層：包括質膜、液泡膜，以及兩層膜之間的細胞質(細胞核、細胞液除外)，原生質層具有選擇透性。一般成熟的植物細胞才具有原生質層。5植物克隆實踐的事例(1)通過大量培養(yǎng)特定細胞系，實現(xiàn)了能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。(2)通過花藥(花粉)培養(yǎng)，進行單倍體克隆，在育種中產(chǎn)生了巨大效益。(3)細胞培養(yǎng)產(chǎn)生出遺傳變異的新植株，為選擇有益性狀的新作物創(chuàng)造了條件。(4)在培養(yǎng)基中加入不同濃度的NaCl或病原體的毒蛋白，誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體。(5)在培養(yǎng)基中加入不同濃度的賴氨酸類似物，篩選出抗賴氨酸類似物突變體。(1)植物組織培養(yǎng)的理論基礎是植物細胞具有全能性()(2)通過液體懸浮培養(yǎng)，可將愈傷組織分散成單細胞()(3)愈傷組織是一團未分化的薄壁細胞，可通過調節(jié)培養(yǎng)基中的激素配比誘導愈傷組織分化()(4)胚性細胞具有細胞核大，細胞質豐富，液泡大的特點()(5)去掉植物細胞壁常用的酶是纖維素酶與果膠酶()(6)單細胞發(fā)育成胚的過程為單細胞細胞團心形胚球形胚胚狀體()(7)植物組織培養(yǎng)過程中，器官發(fā)生和形態(tài)重建主要是通過平衡植物激素的種類進行調控()(8)制備原生質體時，采用低滲甘露醇，防止原生質體失水過多失去生物活性()(9)不同種類植物或同種植物的不同基因型個體，其細胞全能性的表達程度大不相同()(10)植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有染色體畸變、細胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，但其結果是可逆的()(11)原生質體培養(yǎng)需要先對原生質體的活力進行檢測，可以采用質壁分離的方法()(12)獲得植物次生代謝產(chǎn)物(如某些中藥：紫草素等)，通過大量培養(yǎng)特定細胞系即可(獲得愈傷組織即可)，無須獲得植株()(選修3 P22圖22改編)如圖表示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是()A植株根尖細胞的全能性比植株根尖細胞的強B試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調節(jié)劑，不含有機物C試管中的細胞具有細胞質豐富、細胞核和液泡都大的特性D調節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調節(jié)劑的比例可誘導產(chǎn)生不同的植物器官解析：選D。由于是由上的組織經(jīng)培養(yǎng)形成的個體，故二者的全能性應該相同，故A項錯誤；由到的過程中植物細胞不能進行光合作用，因而試管中含有有機物如蔗糖等，故B項錯誤；試管中細胞為愈傷組織細胞，液泡小，故C項錯誤。1細胞的全能性(1)含義：植物體的每個生活細胞都具有發(fā)育成完整植株的潛能。(2)基礎：植物體的每一個細胞都包含該物種所特有的全部遺傳信息。(3)全能性表達的條件離體、無菌。一定的營養(yǎng)物質，如水、無機鹽、蔗糖、維生素等。植物生長調節(jié)劑。(4)在生物體內細胞并沒有表現(xiàn)出全能性的原因：基因在特定的時間和空間條件下選擇性表達，細胞分化為不同的組織、器官。(5)全能性表達的程度(由易到難)受精卵生殖細胞體細胞。植物細胞動物細胞。2植物組織培養(yǎng)過程3植物細胞工程 (1)植物組織培養(yǎng)中脫分化和再分化的比較項目脫分化再分化過程離體器官、組織或細胞愈傷組織愈傷組織幼苗或胚狀體實質細胞恢復分裂能力基因選擇性表達形成體的特點相對沒有分化的排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞團形成芽和根的頂端分生組織，并再生出新植株條件離體、適宜的營養(yǎng)物質、適當?shù)闹参锷L調節(jié)劑，避光離體、適宜的營養(yǎng)物質、適當配比的植物生長調節(jié)劑，需光(2)植物組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質體培養(yǎng)的關系植物細胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質體培養(yǎng)統(tǒng)稱為植物組織培養(yǎng)，最終都能得到完整植株，但由于培養(yǎng)目的不同，有時需對愈傷組織進行特殊處理。它們之間的關系如下圖所示： 題組沖關1下列對如圖所示的培養(yǎng)過程的敘述，正確的是 ()Aa、b、c、d中的植物細胞都具有完全相同的DNA和RNABab與bc的培養(yǎng)過程中，植物生長調節(jié)劑的種類可能相同，但比例不同C此為植物花藥離體培養(yǎng)，其中花藥經(jīng)ad發(fā)育成試管苗的過程中可能存在基因突變、基因重組和染色體畸變等變異Dd中的試管苗可以直接轉移至土中培養(yǎng)解析：選B。a、b、c、d中的植物細胞都具有完全相同的DNA，但因細胞分化，細胞中的RNA不同；ab與bc分別是脫分化和再分化，兩過程均需要相同的植物激素調節(jié)，但比例不同；花藥經(jīng)ad發(fā)育成試管苗的過程中可能存在基因突變和染色體畸變等變異；d為單倍體，需要用秋水仙素處理后再移栽到土中。2下圖表示通過克隆技術獲得煙草植株的過程，請回答下列問題：(1)過程往往選取煙草葉片的幼嫩部位，需經(jīng)過_處理，才能置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)。(2)過程稱為_，過程稱為_。(3)通過懸浮培養(yǎng)形成的單細胞可發(fā)育成_，繼而形成植物幼體；也可利用_水解細胞壁，獲得_，其經(jīng)培養(yǎng)后也可形成完整植株。(4)在培養(yǎng)過程中，若要誘導芽的產(chǎn)生，則配制植物激素時要_。A添加適量的生長素和適當減除某些其他激素B添加適當配比的生長素和細胞分裂素C添加適量的生長素和適當增加某些其他激素D適當增加細胞分裂素和生長素的量(5)煙草細胞很容易再生出新植株，但在長期培養(yǎng)過程中，其胚胎發(fā)生和器官形成能力下降，其原因不可能是_。A染色體畸變或細胞核變異B組織或細胞中的激素平衡被打破C產(chǎn)生了缺乏成胚性的細胞系D植物細胞全能性喪失解析：(1)自然環(huán)境中獲取的植物組織、器官攜帶較多微生物，會影響培養(yǎng)過程中植物細胞的生長，因此需先進行消毒處理。(2)高度分化的植物細胞經(jīng)培養(yǎng)形成相對未分化的愈傷組織細胞，此過程稱為脫分化；而相對未分化的愈傷組織細胞經(jīng)誘導分化成胚的過程，稱為再分化。(3)據(jù)圖可知，通過懸浮培養(yǎng)形成的單細胞可發(fā)育成幼胚；細胞壁的主要成分為纖維素和果膠，因此可使用纖維素酶和果膠酶處理細胞壁；植物細胞的細胞壁去除后，其內部的結構稱為原生質體。(4)營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑配比會影響愈傷組織的分化方向，例如適量的生長素和細胞分裂素配比可以誘導芽的分化，適量的生長素和適當減除某些其他激素則可以誘導生根，故要誘導芽的產(chǎn)生，應按照B選項操作。(5)在長期培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的原因可能有染色體畸變、細胞核變異或非整倍體產(chǎn)生、細胞或組織中的激素平衡被打破、細胞對外源生長物質的敏感性發(fā)生改變等，以及隨著時間推移，由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏成胚性的細胞系，A、B、C正確；植物細胞仍保留了該物種全套的遺傳物質，故全能性并未喪失，但由于各種原因，其全能性的表達受到了阻礙，D錯誤。答案：(1)消毒(2)脫分化再分化(3)幼胚(或胚狀體)纖維素酶和果膠酶原生質體(4)B(5)D動物的克隆1動物細胞的培養(yǎng)從動物體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后在人工控制的培養(yǎng)條件下，使這些細胞得以生存，并保持生長、分裂(繁殖)乃至接觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡等生命活動現(xiàn)象。2動物組織培養(yǎng)動物組織在體外及人工條件下維持生活狀態(tài)或生長特性。動物組織培養(yǎng)過程中可以伴隨組織分化。3原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(1)原代培養(yǎng)：從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)。(2)傳代培養(yǎng)：將原代培養(yǎng)的細胞分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長、增殖。4細胞系和細胞株(1)細胞系：指可連續(xù)傳代的細胞。原代培養(yǎng)物在首次傳代時就成為細胞系。(2)細胞株：從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質的細胞，一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性等。5克隆培養(yǎng)法(1)概念：把一個單細胞從群體中分離出來單獨培養(yǎng)，使之繁衍成一個新的細胞群體的技術。(2)基本要求：必須肯定所建成的克隆來源于單個細胞。(3)提高成功率的措施：選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細胞支持生長、激素刺激、使用CO2培養(yǎng)箱、調節(jié)pH等。6動物的克隆繁殖(1)動物細胞全能性的表現(xiàn)程度(2)動物難以克隆的根本原因：在動物的個體發(fā)育過程中，細胞分化使得細胞發(fā)生了基因的差異表達，細胞基因組中基因的活動很不完全。(3)細胞核移植實驗和動物的克隆繁殖核移植：利用一個細胞的細胞核來取代另一個細胞中的細胞核，形成一個重建的“合子”。動物的克隆繁殖(1)動物細胞培養(yǎng)過程中，用胰蛋白酶處理可使動物細胞分散開來()(2)動物細胞培養(yǎng)時，通入CO2的目的是刺激細胞呼吸()(3)動物細胞培養(yǎng)過程中，涉及兩次使用胰蛋白酶，第一次是原代培養(yǎng)時，主要目的是使組織細胞分散開，獲得單個細胞；第二次是傳代培養(yǎng)時，目的是使細胞從瓶壁上脫落，以便于傳代培養(yǎng)()(4)有限細胞系大多是發(fā)生轉化了的細胞系，具有異倍體核型()(5)惡性細胞系具有異體致瘤性，不死性細胞系保留接觸抑制()(6)理論上各種細胞都可被克隆，但是單細胞通常不如群體細胞；原代細胞、有限細胞系通常不如無限細胞系、轉化或腫瘤細胞()(7)克隆培養(yǎng)必須保證分離出來的細胞是一種類型的多個細胞，而不是多種類型細胞()(8)誘導動物細胞融合常用的化學方法有聚乙二醇(PEG)或滅活的仙臺病毒作為誘導劑()(9)雜交瘤細胞的特點：既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體()(10)在單克隆抗體的制備中，取小鼠的B淋巴細胞之前，一定要給小鼠注射相應的抗原(或相應的疫苗)()(選修3 P32圖28改編)某實驗室做了如圖所示的實驗研究，下列與實驗相關的敘述正確的是()A過程導入的誘導基因使成纖維母細胞發(fā)生基因突變B丙細胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體C過程屬于動物細胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)D過程所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇解析：選B。外源基因的導入過程屬于基因重組，A項錯誤；丙細胞能產(chǎn)生單克隆抗體，說明丙細胞具有連續(xù)分裂且能分泌單一抗體的能力，B項正確；表示細胞分化過程，C項錯誤；是誘導細胞融合的過程，所用的培養(yǎng)基含有聚乙二醇或滅活的仙臺病毒，而過程不用聚乙二醇，D項錯誤。1動物細胞克隆和動物克隆繁殖的比較項目動物細胞克隆動物克隆繁殖原理細胞增殖細胞核全能性過程技術動物細胞培養(yǎng)技術細胞核移植、胚胎移植等技術結果獲得細胞群獲得動物個體應用制備單克隆抗體、細胞株等動物的無性繁殖2.制備單克隆抗體中兩次篩選的比較項目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞由于小鼠在生活中受到多種抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選。其中未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、“瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔中只有一個雜交瘤細胞的情況下開始單克隆培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群篩選結果得到雜交瘤細胞得到能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞 題組沖關1實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是 ()A甲過程需要對實驗小鼠進行消毒 B乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化 C丙過程得到的細胞大多具有異倍體核型 D丁過程得到的細胞具有異質性 解析：選C。甲過程表示從實驗小鼠身上取皮膚組織小塊，該過程需要對小鼠進行消毒，故A項正確。乙過程表示將皮膚組織分散為單個細胞，可用胰蛋白酶進行酶解消化，故B項正確。丙過程表示由組織細胞培養(yǎng)到細胞系的過程，小鼠細胞是二倍體細胞，其細胞系大多數(shù)為有限細胞系，能繼續(xù)培養(yǎng)下去具有異倍體核型的連續(xù)細胞系很少，故C項錯誤。丁過程表示通過選擇或純化從細胞系中獲得具有特殊性質的細胞株的過程，細胞株具有異質性，故D項正確。2(2020浙江模擬)小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)、皮膚細胞誘導出多種細胞及制備單克隆抗體的操作流程如下。請回答：(1)操作流程中過程可用_處理獲得一個胚胎干細胞；過程中的細胞_(填“可能”或“不可能”)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；過程中細胞內核酸的種類_(填“不變”或“改變”)；過程的核心步驟是_。(2)過程常用的促融劑是_(要求寫出2種)。單克隆抗體的制備過程中，運用了動物克隆技術中的_兩大技術。(3)下列關于單克隆抗體制備過程的敘述，正確的是_。A傳代培養(yǎng)效應B細胞是單克隆抗體制備的必要操作之一B丙細胞能夠無限增殖，實質上就是癌變的效應B細胞C經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出來的丙細胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D操作流程中過程的原理和植物原生質體融合的原理基本相同解析：(1)胰蛋白酶可使細胞間的粘連蛋白水解，使細胞彼此分散開來，獲得單細胞；只有惡性細胞系(癌細胞)的表面粘連蛋白減少或缺失，失去接觸抑制，胚胎干細胞屬于非惡性細胞，保留接觸抑制特征；過程為細胞分化，實質是基因的差異性表達，雖然遺傳物質并未改變，但基因表達過程中產(chǎn)生的mRNA種類和數(shù)量發(fā)生了變化；基因工程的核心是構建重組DNA分子。(2)動物細胞融合常用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇促融；制備單克隆抗體需將經(jīng)免疫的B細胞與骨髓瘤細胞融合，得到雜交瘤細胞，然后對雜交瘤細胞進行培養(yǎng)，使其增殖并產(chǎn)生特異性抗體，故需運用動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)兩大技術。(3)效應B細胞無增殖能力，無法傳代培養(yǎng)，A錯誤；丙是經(jīng)免疫的B細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞，并非癌變的效應B細胞，B錯誤；選擇培養(yǎng)基只是將雜交瘤細胞篩選出來，但該雜交瘤細胞是否能產(chǎn)生特異性抗體，還需將該雜交瘤細胞單獨培養(yǎng)并利用抗原抗體雜交反應進行進一步篩選，C錯誤；流程與植物原生質體融合都利用了細胞膜的流動性，D正確。答案：(1)胰蛋白酶可能改變構建重組DNA分子(2)聚乙二醇、滅活的仙臺病毒動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)(3)D1如圖是某植物組織培養(yǎng)過程的簡圖。下列有關說法中正確的是()花粉粒愈傷組織胚狀體植株A花藥離體培養(yǎng)的條件與種子萌發(fā)的條件完全相同B若花粉粒核中有兩個或多個染色體組，則所得植株為二倍體或多倍體C過程都是細胞分化過程，因此起作用的激素只有生長素D該過程體現(xiàn)了植物細胞的全能性解析：選D?；ㄋ庪x體培養(yǎng)所需條件要求高，需要培養(yǎng)基，另外還需要適宜的pH、溫度和光照，而種子萌發(fā)需要適宜的溫度、水分等，A項錯誤；花粉粒培養(yǎng)形成的植株稱為單倍體，B項錯誤；在細胞分化過程中多種激素起作用，其中起主要作用的是細胞分裂素和生長素，C項錯誤；在該過程中，單個細胞最終培養(yǎng)成了植株，體現(xiàn)了植物細胞的全能性，D項正確。2下列有關細胞系和細胞株的說法錯誤的是()A原代培養(yǎng)得到的細胞也可以是細胞系B細胞株是特殊的細胞系C連續(xù)細胞系都獲得了不死性D連續(xù)細胞系不一定都發(fā)生了轉化解析：選D。原代培養(yǎng)得到的細胞也可以是細胞系；細胞株是特殊的細胞系；連續(xù)細胞系都獲得了不死性；連續(xù)細胞系肯定都發(fā)生了轉化。3下列關于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖D動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒解析：選B。動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需加入動物血清，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需加入植物激素等，A項正確。動物細胞培養(yǎng)需利用胰蛋白酶將動物組織分散成單個細胞再進行培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)中不需要將細胞分離，B項錯誤。葉片細胞高度分化，但仍具有全能性，可以通過植物組織培養(yǎng)形成新個體；小鼠雜交瘤細胞具備瘤細胞的遺傳特性，能夠不斷分裂增殖，C項正確。有毒物質會影響細胞正常的生命活動，故可根據(jù)細胞在培養(yǎng)過程中生命活動的變化情況檢測有毒物質；植物莖尖細胞分裂較快，細胞中幾乎無病毒，故可用莖尖通過植物組織培養(yǎng)形成脫毒苗，D項正確。4(2017浙江11月選考)回答與植物克隆和動物克隆有關的問題：(1)利用植物愈傷組織獲得再生植株主要有兩條途徑：一是由愈傷組織的細胞先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個完整植株的_途徑，二是由愈傷組織細胞產(chǎn)生胚狀體后再萌發(fā)形成完整植株的胚胎發(fā)生途徑。另外也可不通過愈傷組織階段而直接采用帶腋芽的莖段培養(yǎng)成叢狀苗，再誘導生根獲得再生植株，其原因是腋芽中存在_。(2)利用植物克隆培育新品種，一方面可利用帶有目的基因的_侵染植株，或將目的基因通過_方法導入植物細胞、組織或器官獲得轉基因植株，另一方面利用異源植株的_進行融合產(chǎn)生雜種植株，或利用異源植物在試管內進行_，對其產(chǎn)生的胚進行培養(yǎng)產(chǎn)生雜種植株。(3)下列屬于植物克隆和動物克隆共有培養(yǎng)方法是_。A懸浮培養(yǎng)、器官培養(yǎng)B貼壁培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)C器官培養(yǎng)、愈傷組織培養(yǎng)D原生質體培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)解析：(1)愈傷組織不經(jīng)過胚狀體而是通過直接得到芽和根等器官再形成完整植株的培養(yǎng)稱為器官培養(yǎng)。不通過愈傷組織階段直接采用帶腋芽的莖段培養(yǎng)得到胚狀體，再誘導生根，主要是因為腋芽中存在分生組織。(2)轉基因植物技術中將目的基因導入受體細胞的方法很多，如果受體細胞是植物細胞，則可采用農(nóng)桿菌轉化法，如果受體細胞是去除細胞壁的原生質體，則可采用顯微注射的方法。轉基因可使不同來源的遺傳物質重新組合，也可以通過原生質體融合將不同來源的遺傳物質重新組合，或通過在試管內進行受精來生產(chǎn)植株。(3)動物和植物細胞都有懸浮培養(yǎng)和器官培養(yǎng)，A正確；貼壁生長是動物細胞培養(yǎng)的方法，B錯誤；愈傷組織培養(yǎng)是植物細胞培養(yǎng)的方法，C錯誤；原生質體培養(yǎng)是植物細胞培養(yǎng)的方法，傳代培養(yǎng)是動物細胞培養(yǎng)的方法，D錯誤。答案：(1)器官發(fā)生分生組織(2)農(nóng)桿菌顯微注射原生質體受精(3)A5回答下列關于單克隆抗體制備的相關問題：(1)利用抗原抗體反應的高度特異性，可以診斷和防治各種疾病，可以研究抗原物質在細胞中的定位及其功能，所以制備高純度抗體十分必要，_技術的發(fā)明，使得這一目標得以實現(xiàn)，此外該技術也可解決抗血清的_問題。(2)下圖為制備單克隆抗體的技術流程圖：圖中用_(生物方法)處理得到細胞群體1，利用HAT培養(yǎng)基獲得細胞群體2的類型有多種，所以需用_方法獲得產(chǎn)生抗體且能_的陽性細胞。產(chǎn)生抗體的陽性細胞克隆的最基本要求是_，提高細胞克隆形成率的措施：選擇適宜培養(yǎng)基、添加血清、以_支持生長等。解析：(1)雜交瘤技術的發(fā)明，使得制備高純度抗體這一目標得以實現(xiàn)，此外該技術也可解決抗血清的異質性問題。(2)滅活的仙臺病毒能促使動物細胞融合，融合后的細胞有多種，利用在HAT培養(yǎng)基中骨髓瘤細胞不能增殖，B淋巴細胞可以增殖的特點，篩選得到能產(chǎn)生抗體且能無限增殖的雜交瘤細胞，但類型有很多種，所以還需利用抗體檢驗的方法篩選得到產(chǎn)生針對羊紅細胞抗原的特異性抗體陽性細胞。細胞克隆的最基本要求是來源于單個細胞，提高細胞克隆形成率的措施有：選擇適宜培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細胞支持生長等。答案：(1)雜交瘤異質性(2)滅活的仙臺病毒抗體檢驗無限增殖來源于單個細胞滋養(yǎng)細胞1如圖是植物體細胞雜交過程示意圖，如果A、B植物均為二倍體，據(jù)圖分析回答：(1)圖中所示過程的原理有：_。(2)圖中的過程是_。(3)植物體細胞融合成功的標志是_，其產(chǎn)生與細胞內_(細胞器)有關。(4)和過程分別是_和_的過程。則該雜交植物有_個染色體組。(5)該技術的最顯著優(yōu)勢是：_。解析：(1)植物體細胞雜交過程中有原生質體A和原生質體B的融合過程，其原理是細胞膜具有流動性；將雜種細胞培育成新的個體，其原理是植物細胞具有全能性。(2)圖中的過程是去除植物細胞壁，制備原生質體。(3)植物體細胞融合成功的標志是形成新的細胞壁，植物細胞壁的形成與高爾基體有關。(4)雜種細胞通過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)再分化形成雜種植株。圖中雜種植株是由兩個二倍體的細胞融合成的雜種細胞培育成的新個體，含有四個染色體組。(5)植物體細胞雜交可以克服遠緣雜交不親和的障礙。答案：(1)細胞膜具有流動性、植物細胞具全能性(缺一不可)(2)(去壁)制備原生質體(3)形成新的細胞壁高爾基體(4)脫分化再分化四(5)克服遠緣雜交不親和的障礙2(2020浙江黃巖選考模擬)下面是煙草葉片原生質體分離和培養(yǎng)的流程圖，請回答：(1)酶解時，在纖維素酶和果膠酶的混合液中，還需添加_來提高混合液的滲透壓，獲得的完整的原生質體呈_(填形狀)。(2)獲得原生質體后，可用_方法檢測原生質體是否存活，然后將原生質體制成懸浮液，滴加在_上，用顯微鏡觀察并計數(shù)。要判定原生質體是否已形成細胞壁，可用_方法鑒別。(3)欲通過原生質體培養(yǎng)得到愈傷組織，從培養(yǎng)基的成分考慮，配制培養(yǎng)基時需要注意的主要方面有_和_的適當配比。解析：(1)在獲得原生質體時，混合液中需添加甘露醇來維持較高滲透壓，以免原生質體吸水漲破。獲得的原生質體是球形的。(2)可用紅墨水染色法檢測原生質體的死活，若細胞內部被染成紅色，說明原生質體已經(jīng)死亡；在顯微鏡下一般用血細胞計數(shù)板對原生質體進行計數(shù)；可用質壁分離方法鑒別原生質體是否已形成細胞壁。(3)在配制獲得愈傷組織的培養(yǎng)基時，應注意營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑的適當配比。答案：(1)甘露醇球形(2)紅墨水染色血細胞計數(shù)板質壁分離(3)營養(yǎng)物質植物生長調節(jié)劑3(2020浙江臺州高三模擬)某科研團隊利用植物細胞工程技術，把基因序列已知的抗除草劑(Bar)基因導入原生質體獲得抗除草劑大豆。請回答下列相關問題：(1)對于已獲得的Bar基因可以用_技術進行擴增。圖中的a過程通常使用相同的_酶和DNA連接酶，使目的基因與載體連接形成重組DNA。 (2)在b過程中，獲得原生質體除了需要纖維素酶和果膠酶，還需要用到的試劑是_。(3)成功導入重組DNA的原生質體經(jīng)脫分化形成_，進而生長發(fā)育成植株。下列不屬于細胞應具有的特征是_。A薄壁細胞B細胞質豐富C液泡小 D細胞核小(4)若要判斷轉基因抗除草劑大豆是否成功，比較簡便的檢測方法是_。解析：(1)可通過PCR技術進行體外擴增，獲得大量Bar基因。a過程為形成重組DNA分子，需要相同的限制性核酸內切酶和DNA連接酶處理，使目的基因與載體連接形成重組DNA。(2)在獲得植物原生質體時，需在0.50.6 mol/L的甘露醇溶液環(huán)境(較高滲透壓)下用纖維素酶和果膠酶混合液處理實驗材料，將細胞壁消化除去，獲得球形的原生質體。(3)成功導入重組DNA的原生質體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化，分化出芽和根，進而生長發(fā)育成植株。細胞為愈傷組織，該類單細胞具有細胞質豐富、液泡小、細胞核大等特征，故D錯誤。答案：(1)PCR限制性核酸內切(2)(較高濃度的)甘露醇(3)愈傷組織D(4)用一定濃度的除草劑噴灑，觀察轉基因大豆的生長情況4(2020杭州名校測試)科學家利用植物體細胞雜交技術成功獲得了番茄馬鈴薯雜種植株，為了便于雜種細胞的篩選和鑒定，科學家利用紅色熒光和綠色熒光分別標記番茄和馬鈴薯的原生質體膜上的蛋白質，其培育過程如圖所示：(1)植物體細胞雜交依據(jù)的生物學原理有_。(2)過程常用的酶是_，細胞融合完成的標志是_。(3)植物原生質體融合過程常利用化學試劑_誘導融合，在鑒定雜種原生質體時可用顯微鏡觀察，根據(jù)細胞膜表面熒光的不同可觀察到_種不同的原生質體，當觀察到_時可判斷該原生質體是由番茄細胞和馬鈴薯細胞融合而成的。(4)過程和過程依次為_，過程中的培養(yǎng)基常添加的植物激素是_。(5)若番茄細胞內有m條染色體，馬鈴薯細胞中含n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細胞在有絲分裂后期含_條染色體。若雜種細胞培育成的“番茄馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于_植株。解析：(1)植物體細胞雜交包括原生質體融合和培育雜種植株兩大步驟，兩者的原理分別是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。(2)去除細胞壁常用的酶是纖維素酶和果膠酶，細胞融合完成的標志是形成新的細胞壁。(3)化學促融劑是聚乙二醇，兩兩融合的原生質體有三種：番茄番茄、馬鈴薯番茄、馬鈴薯馬鈴薯，其中雜種細胞的細胞表面有兩種顏色的熒光。(4)過程和過程分別表示脫分化和再分化，誘導細胞分化所用的植物激素主要是生長素和細胞分裂素。(5)“番茄馬鈴薯”體細胞有mn條染色體，有絲分裂后期染色體數(shù)目加倍。由配子發(fā)育成的個體均為單倍體。答案：(1)細胞膜的流動性、植物細胞的全能性(2)纖維素酶和果膠酶形成了新的細胞壁(3)聚乙二醇(或PEG)3融合的細胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光(4)脫分化和再分化生長素和細胞分裂素(5)2(mn)單倍體5如圖可表示細胞融合技術的一些過程，請據(jù)圖回答下列問題：(1)若A、B到C過程是體外受精過程，則對已取得的精子必須先進行_處理，若需獲取更多的卵細胞一般要對雌性個體注射_，使其_。(2)若該過程是制備單克隆抗體的過程，在A、B到C的過程中，A細胞為骨髓瘤細胞，B細胞為能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞，那么D細胞稱為_細胞。從融合細胞中選擇出它的方法是在特定的選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)，篩選出該類細胞后還需進行_培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選可獲得數(shù)量足夠的能分泌所需抗體的細胞。(3)若A、B細胞為植物細胞，D細胞在植物組織培養(yǎng)時，先配制_培養(yǎng)基，再加入一定比例的植物激素，當生長素相對較少時，愈傷組織可發(fā)育形成_。(4)若要培育轉基因植物，則可采用_法將目的基因導入受體細胞中。受體細胞應該是_(A.體細胞B卵細胞C受精卵D雄配子)。為了得到農(nóng)桿菌的單菌落，常采用的分離方法有兩種，即_和_。解析：(1)受精之前，對已取得的精子先進行獲能處理；若需更多的卵細胞，一般要對雌性個體注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵。(2)依據(jù)題中信息可確定圖中D細胞為雜交瘤細胞；對獲得的雜交瘤細胞需進行克隆化培養(yǎng)以擴大數(shù)量。(3)若要培育轉基因植物，則可采用誘導生芽或生根的培養(yǎng)基(MS培養(yǎng)基)培養(yǎng)；當生長素相對較少時，愈傷組織可發(fā)育形成叢狀苗。(4)若要培育轉基因植物，通常采用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞中；受體細胞應該是植物體細胞；為了得到農(nóng)桿菌的單菌落，常采用的分離方法有兩種，即劃線分離法和涂布分離法。答案：(1)獲能促性腺激素超數(shù)排卵(2)雜交瘤克隆化(3)MS叢狀苗(4)農(nóng)桿菌轉化A劃線分離法涂布分離法6(2020浙江綠色評估聯(lián)盟高三考試)科研人員采用轉基因體細胞克隆技術獲得轉基因綿羊，以便通過乳腺生物反應器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術路線如圖。(1)由過程獲得的A為_。(2)在核移植之前，必須先去掉受體卵母細胞的核，目的是_。受體應選用_期卵母細胞。(3)進行胚胎移植時，代孕母羊對移入子宮的重組胚胎基本上不發(fā)生_，這為重組胚胎在代孕母羊體內的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細胞進行轉基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉基因綿羊，這是因為_。解析：(1)分析圖示可知，過程構建的A為含目的基因的表達載體。(2)核移植以前，必須去掉受體卵母細胞的核，目的是保證核遺傳物質來自含目的基因的成纖維細胞。受體應該選用處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞。(3)在進行胚胎移植時，受體即代孕母羊對移入子宮的外來胚胎基本上不會發(fā)生免疫排斥反應。(4)轉基因體細胞克隆產(chǎn)生的重組細胞具有全能性，培養(yǎng)產(chǎn)生的含目的基因的成纖維細胞可進行傳代培養(yǎng)，因此理論上可獲得無限個轉基因綿羊。答案：(1)含目的基因的表達載體(2)保證核遺傳物質來自含目的基因的成纖維細胞M中(3)免疫排斥反應(4)整合有目的基因的成纖維細胞可進行傳代培養(yǎng)7(2020浙江超級全能生聯(lián)考)如圖表示動物細胞克隆和制備單克隆抗體的相關過程，請回答相關問題：(1)過程常應用_法導入重組誘導基因后得到干細胞；部分干細胞經(jīng)過誘導可分化成全身的不同組織或器官，說明這些細胞具有_性。(2)該過程利用了甲細胞具有_的能力，甲和乙細胞可經(jīng)過生物誘導劑_的作用形成丙細胞。取一個丙細胞，放在含大量失去_的小鼠成纖維細胞的特定培養(yǎng)體系中培養(yǎng)，最后產(chǎn)生大量的細胞群，這種方法為_法。(3)下列關于經(jīng)和過程得到單克隆抗體的敘述，錯誤的是_。A該過程應用了細胞膜具有流動性的原理B丙細胞要具有分泌多種抗體的能力C該過程應用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術D丙細胞的形成