第九章-色譜分析法.ppt

1 起源 1903年 俄國(guó)植物學(xué)家次維特 MikhailTswett 最先發(fā)明 他采用填充有固體CaCO3細(xì)顆粒的玻璃柱 將植物色素的提取物加于柱頂端 然后以溶劑淋洗 被分離的組份在柱中顯示了不同的色帶 他稱之為色譜 2 原理 各組分和固定相存在一定的化學(xué)親和力 且各組分和固定相的親和力大小不同化學(xué)親和力定向力誘導(dǎo)力色散力氫鍵超分子作用 3 色譜法的流出曲線及有關(guān)術(shù)語(yǔ) 基線峰高死時(shí)間tM 保留時(shí)間tR調(diào)整保留時(shí)間t R峰高h(yuǎn) 峰面積A峰寬W半峰寬W1 2 4 氣相色譜 氣相色譜法 GC 是英國(guó)生物化學(xué)家MartinATP等人在研究液液分配色譜的基礎(chǔ)上 于1952年創(chuàng)立的一種極有效的分離方法 它可分析和分離復(fù)雜的多組分混合物 5 組成 6 1 載氣瓶 2減壓閥 3穩(wěn)流閥 4流量計(jì) 5分流閥 6注射器 7進(jìn)樣器 8色譜柱 9色譜爐 箱 10皂膜流量計(jì) 11檢測(cè)器 12記錄儀 13靜電計(jì)或電橋 14模數(shù)轉(zhuǎn)換器 15數(shù)據(jù)系統(tǒng) 7 色譜峰 1苯酚 2氯酚 32 硝基酚42 4 二甲酚52 4 二氯酚64 氯 3 甲酚72 4 6 三氯酚82 4 二硝基酚94 硝基酚103 甲基 4 6 二硝基甲酚11五氯酚色譜柱 SPB 5 15m 0 53mm載氣 He柱溫 環(huán)境中有機(jī)污染物的分析 廢水中酚的分離 8 1 歸一化法 若樣品中所有的組分均能流出色譜柱且有較好的 可分辨的色譜峰時(shí)可用此法定量 定量計(jì)算方法 9 當(dāng)試樣中所有組分不能全部出峰 或只要測(cè)定試樣中某幾個(gè)組分時(shí) 可采用此法 將一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到準(zhǔn)確稱取的待測(cè)樣中 根據(jù)待測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的峰面積來計(jì)算被測(cè)組分的含量 內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是待測(cè)試樣中不存在的純物質(zhì) 加入的量應(yīng)接近待測(cè)組分的量 同時(shí)要求內(nèi)標(biāo)物的色譜峰應(yīng)位于待測(cè)組分色譜峰附近或幾個(gè)待測(cè)組分色譜峰的中間 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 因內(nèi)標(biāo)法每次分析時(shí) 都要準(zhǔn)確稱取試樣和內(nèi)標(biāo)物質(zhì) 較費(fèi)事 不適用于快速控制分析 采用內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量測(cè)定可避免這些麻煩 內(nèi)標(biāo)法的要求 內(nèi)標(biāo)物必須是待測(cè)試樣中不存在的 但其結(jié)構(gòu)或官能團(tuán)與組分要相似 內(nèi)標(biāo)物與樣品互溶 內(nèi)標(biāo)峰應(yīng)與試樣中的各組分的峰分開 并盡量接近欲分析的組分 二者的加入量即濃度相近 在分析條件下內(nèi)標(biāo)物不與樣品發(fā)生反應(yīng) 內(nèi)標(biāo)物法的缺點(diǎn) 在試樣中增加了一個(gè)內(nèi)標(biāo)物 常常給分離造成一定的困難 內(nèi)標(biāo)法 10 外標(biāo)法方法步驟 取純物質(zhì)配成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液 然后分別取一定體積 注入色譜儀 測(cè)出峰面積 作峰面積 或峰高 和濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線 然后在相同條件下注入等量 固定量進(jìn)樣 待測(cè)樣 測(cè)出該試樣的峰面積 或峰高 由上述標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測(cè)組分的含量 當(dāng)待測(cè)樣品組分濃度變化不大時(shí) 可不作標(biāo)準(zhǔn)曲線 用單點(diǎn)校正法 即配制一個(gè)和被測(cè)組分含量十分接近的標(biāo)準(zhǔn)樣CS 取相同量的標(biāo)準(zhǔn)液和待測(cè)液分別注入色譜儀 測(cè)得相應(yīng)的AS和Ai 由待測(cè)組分和標(biāo)準(zhǔn)樣的峰面積