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醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱課 程 名 稱: 醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 英 文 名 稱: Medical immunology and Pathogenic Biology Experiment課 程 編 號(hào): 實(shí) 驗(yàn) 課 性 質(zhì): 融合創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)課 程 負(fù) 責(zé) 人:于修平 開放實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目數(shù):大 綱 主 撰 人: 周亞濱 齊眉 何深一 郭淑玲 袁方曙 馬春紅 王曉燕、梁曉紅 大 綱 審 核 人: 于修平 一、學(xué)時(shí)、學(xué)分課程總學(xué)時(shí): 實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí):24 課程總學(xué)分: 實(shí)驗(yàn)學(xué)分:二、適用專業(yè)及年級(jí)供基礎(chǔ)、臨床、預(yù)防、口腔醫(yī)學(xué)、護(hù)理學(xué)、藥學(xué)專業(yè)用5、6、7年制三、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的與基本要求通過(guò)融合性實(shí)驗(yàn)教學(xué),將醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、人體寄生蟲學(xué)以及醫(yī)學(xué)免疫學(xué)的理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行有機(jī)整合,培養(yǎng)學(xué)生的綜合思維能力和應(yīng)用能力。同時(shí)通過(guò)實(shí)驗(yàn)教學(xué),使學(xué)生學(xué)會(huì)使用醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器,培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力、發(fā)現(xiàn)問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力。通過(guò)病例分析,培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),培養(yǎng)學(xué)生自主科研能力和創(chuàng)新意識(shí)。四、主要儀器設(shè)備 超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱、流式細(xì)胞儀、酶標(biāo)儀, 紫外可見分光光度計(jì)、PCR擴(kuò)增儀、醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)等。五、實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容和學(xué)時(shí)分配序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名 稱實(shí) 驗(yàn) 內(nèi) 容學(xué)時(shí)分配實(shí)驗(yàn)要求指導(dǎo)教師已開/未開1小兒腹瀉的病原體檢測(cè)1腸道致病菌的微生物學(xué)檢查:通過(guò)分離培養(yǎng)、生化反應(yīng)等對(duì)標(biāo)本中的可疑致病菌進(jìn)行鑒定; 2A組輪狀病毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè):通過(guò)ELISA、PCR技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中輪狀病毒的存在情況;3腸道腹瀉原蟲的實(shí)驗(yàn)室檢查:通過(guò)直接涂片、碘液染色、抗酸染色等對(duì)標(biāo)本中的可疑原蟲進(jìn)行檢測(cè)、鑒定。 8分小組進(jìn)行周亞濱齊眉等已開2人體蠕形螨的檢查方法 (1)用刮片式取螨器取螨,28-30室溫條件下,受檢者皮膚微汗,毛孔微張為宜,受檢者仰頭有枕靠,助手將其額部皮膚張緊,檢查者手持刮片式取螨器與受檢者皮膚成60度角,加壓刮取皮脂,用牙簽將皮脂剃下。滴一滴液體石蠟于載玻片上,將剃下的皮脂溶于液體石蠟中,用牙簽盡量將皮脂塊碾碎,攪勻。將制好的標(biāo)本置于顯微鏡下,用低倍鏡和高倍鏡觀察。(2) 用鑷取螨器取螨,同樣室溫條件下,受檢者仰頭,檢查者站其背后,用拇指將被檢側(cè)的鼻翼按壓推向?qū)?cè),充分暴露展平其鼻唇溝,檢查者手持鑷式取螨器于鼻唇溝處加壓鑷取皮脂,同樣方法將皮脂溶于液體石蠟中,用牙簽盡量將皮脂塊碾碎,攪勻后,鏡檢。4分小組進(jìn)行郭淑玲袁方曙何深一楊青已開3食用豬肉和淡水魚的檢疫(1)豬肉壓片檢查旋毛蟲幼蟲:用手術(shù)鑷取豬橫紋肌一塊(綠豆粒大?。┲糜趦蓮堓d玻片之間,用牙簽蘸一滴甘油滴在肌肉上,稍用力夾緊兩玻片,把肌肉壓扁,玻片兩端用棉線捆扎,放在低倍鏡下檢查,注意囊包的形狀和囊內(nèi)幼蟲的形狀。(2)豬囊尾蚴壓片檢查:用鑷子從鮮肉中取一粒囊尾蚴,用鑷子將囊壁挑破,然后把囊尾蚴夾于兩張載玻片之間,用力把蟲體壓扁,玻片兩端用棉線捆扎,放在低倍鏡下檢查,注意蟲頭上有無(wú)吸盤和小鉤。(3)魚肉壓片檢查檢查肝吸蟲囊蚴:一條或一塊鯉科淡水魚放在潔凈的器械盤中,用手術(shù)刀和鑷子刮去脊背處的魚鱗,撕去魚皮,從魚的背部鑷取一小塊肌肉(綠豆粒大小;絕大部分囊蚴分布在背部及肛區(qū)至尾鰭的基部)放在兩張載玻片之間,用力壓薄,用棉線扎緊玻片兩端,放在低倍鏡下檢查。囊蚴呈橢圓形,可見囊壁和排泄囊,必要時(shí)要與其它吸蟲的囊蚴(如貓后睪吸蟲等)相區(qū)別。4分小組進(jìn)行袁方曙何深一郭淑玲楊青已開4卡介苗免疫后對(duì)T細(xì)胞亞群的影響1利用卡介苗給小鼠皮下注射,每周一次,共兩次。 2處死小鼠,取出脾臟,研磨,獲得單細(xì)胞懸液。 3利用氯化銨破紅細(xì)胞,離心獲得脾細(xì)胞,計(jì)數(shù)。 4分別利用熒光標(biāo)記的CD4和CD8單抗標(biāo)記脾細(xì)胞,在流式細(xì)胞儀上檢測(cè)CD4和CD8陽(yáng)性T細(xì)胞的比例。4分小組進(jìn)行王曉燕梁曉紅朱法良已開5腫瘤壞死因子的誘生及活性測(cè)定 TNF-a的誘生:(1)將小鼠巨噬細(xì)胞種板,常規(guī)培養(yǎng)24h;(2)加入LPS刺激,繼續(xù)培養(yǎng)24h;(3)收集培養(yǎng)上清。TNF-a活性檢測(cè):(1)將L929細(xì)胞種板,常規(guī)培
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