《醫(yī)學免疫學與病原生物學實驗》課程教學大綱.doc

醫(yī)學免疫學與病原生物學實驗課程教學大綱山東大學醫(yī)學院醫(yī)學免疫學與病原生物學實驗課程實驗教學大綱課 程 名 稱： 醫(yī)學免疫學與病原生物學實驗 英 文 名 稱： Medical immunology and Pathogenic Biology Experiment課 程 編 號： 實 驗 課 性 質： 融合創(chuàng)新性實驗課 程 負 責 人：于修平 開放實驗項目數(shù)：大 綱 主 撰 人： 周亞濱 齊眉 何深一 郭淑玲 袁方曙 馬春紅 王曉燕、梁曉紅 大 綱 審 核 人： 于修平 一、學時、學分課程總學時： 實驗學時：24 課程總學分： 實驗學分：二、適用專業(yè)及年級供基礎、臨床、預防、口腔醫(yī)學、護理學、藥學專業(yè)用5、6、7年制三、實驗教學目的與基本要求通過融合性實驗教學，將醫(yī)學微生物學、人體寄生蟲學以及醫(yī)學免疫學的理論知識和實驗技術進行有機整合，培養(yǎng)學生的綜合思維能力和應用能力。同時通過實驗教學，使學生學會使用醫(yī)學機能學實驗常用的儀器，培養(yǎng)學生動手能力、發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力。通過病例分析，培養(yǎng)學生綜合運用所學知識解決實際問題的能力。通過實驗設計，培養(yǎng)學生自主科研能力和創(chuàng)新意識。四、主要儀器設備 超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱、流式細胞儀、酶標儀, 紫外可見分光光度計、PCR擴增儀、醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)等。五、實驗課程內容和學時分配序號實驗項目名 稱實 驗 內 容學時分配實驗要求指導教師已開/未開1小兒腹瀉的病原體檢測1腸道致病菌的微生物學檢查：通過分離培養(yǎng)、生化反應等對標本中的可疑致病菌進行鑒定； 2A組輪狀病毒感染的實驗室檢測：通過ELISA、PCR技術檢測標本中輪狀病毒的存在情況；3腸道腹瀉原蟲的實驗室檢查：通過直接涂片、碘液染色、抗酸染色等對標本中的可疑原蟲進行檢測、鑒定。 8分小組進行周亞濱齊眉等已開2人體蠕形螨的檢查方法 （1）用刮片式取螨器取螨，28-30室溫條件下，受檢者皮膚微汗，毛孔微張為宜，受檢者仰頭有枕靠，助手將其額部皮膚張緊，檢查者手持刮片式取螨器與受檢者皮膚成60度角，加壓刮取皮脂，用牙簽將皮脂剃下。滴一滴液體石蠟于載玻片上，將剃下的皮脂溶于液體石蠟中，用牙簽盡量將皮脂塊碾碎，攪勻。將制好的標本置于顯微鏡下，用低倍鏡和高倍鏡觀察。（2） 用鑷取螨器取螨，同樣室溫條件下，受檢者仰頭，檢查者站其背后，用拇指將被檢側的鼻翼按壓推向對側，充分暴露展平其鼻唇溝，檢查者手持鑷式取螨器于鼻唇溝處加壓鑷取皮脂，同樣方法將皮脂溶于液體石蠟中，用牙簽盡量將皮脂塊碾碎，攪勻后，鏡檢。4分小組進行郭淑玲袁方曙何深一楊青已開3食用豬肉和淡水魚的檢疫（1）豬肉壓片檢查旋毛蟲幼蟲：用手術鑷取豬橫紋肌一塊（綠豆粒大?。┲糜趦蓮堓d玻片之間，用牙簽蘸一滴甘油滴在肌肉上，稍用力夾緊兩玻片，把肌肉壓扁，玻片兩端用棉線捆扎，放在低倍鏡下檢查，注意囊包的形狀和囊內幼蟲的形狀。（2）豬囊尾蚴壓片檢查：用鑷子從鮮肉中取一粒囊尾蚴，用鑷子將囊壁挑破，然后把囊尾蚴夾于兩張載玻片之間，用力把蟲體壓扁，玻片兩端用棉線捆扎，放在低倍鏡下檢查，注意蟲頭上有無吸盤和小鉤。（3）魚肉壓片檢查檢查肝吸蟲囊蚴：一條或一塊鯉科淡水魚放在潔凈的器械盤中，用手術刀和鑷子刮去脊背處的魚鱗，撕去魚皮，從魚的背部鑷取一小塊肌肉（綠豆粒大??；絕大部分囊蚴分布在背部及肛區(qū)至尾鰭的基部）放在兩張載玻片之間，用力壓薄，用棉線扎緊玻片兩端，放在低倍鏡下檢查。囊蚴呈橢圓形，可見囊壁和排泄囊，必要時要與其它吸蟲的囊蚴（如貓后睪吸蟲等）相區(qū)別。4分小組進行袁方曙何深一郭淑玲楊青已開4卡介苗免疫后對T細胞亞群的影響1利用卡介苗給小鼠皮下注射，每周一次，共兩次。 2處死小鼠，取出脾臟，研磨，獲得單細胞懸液。 3利用氯化銨破紅細胞，離心獲得脾細胞，計數(shù)。 4分別利用熒光標記的CD4和CD8單抗標記脾細胞，在流式細胞儀上檢測CD4和CD8陽性T細胞的比例。4分小組進行王曉燕梁曉紅朱法良已開5腫瘤壞死因子的誘生及活性測定 TNF-a的誘生：（1）將小鼠巨噬細胞種板，常規(guī)培養(yǎng)24h；（2）加入LPS刺激，繼續(xù)培養(yǎng)24h；（3）收集培養(yǎng)上清。TNF-a活性檢測：（1）將L929細胞種板，常規(guī)培