上海交大網絡課程檢驗微生物講義20

第第 2828 章章 腸道病毒腸道病毒 教學大綱 1 掌握腸道病毒的共同特性 熟悉腸道病毒的種類 所致疾病 2 掌握脊髓灰質炎病毒的生物學特征 致病機制 微生物學檢驗 3 熟悉柯薩奇病毒 ?？刹《镜闹虏√攸c及其微生物學檢驗方法 4 熟悉新型腸道病毒的致病性 了解其微生物學檢驗方法 教學內容精要 腸道病毒屬于小 RNA 病毒科 是一大群通過糞 口途徑傳播 經過消化道感染的病毒 人類腸道病毒包括脊髓灰質炎病毒 柯薩基病毒 ?？刹《疽约?1969 年以后相繼分離出的 新型腸道病毒 68 71 型 脊髓灰質炎病毒侵犯中樞神經系統(tǒng)引起脊髓灰質炎 柯薩基病毒和?？刹《究汕址付?種組織系統(tǒng) 導致臨床表現多樣化 腸道病毒 70 型可引起急性出血性結膜炎 71 型可引 起中樞神經系統(tǒng)疾病 也可引起手足口病及皰疹性咽峽炎 一 腸道病毒概述一 腸道病毒概述 一 分類與命名 一 分類與命名 腸道病毒 enterovirus 是一群寄居于人消化道并在腸道細胞內增殖的病毒 在病毒分 類學上歸屬于小 RNA 病毒科 依據交叉中和試驗分為 67 個血清型 人類腸道病毒包括 1 脊髓灰質炎病毒 1 2 3 三型 2 柯薩奇病毒 A B 兩組 A 組包括 1 22 24 型 B 組包括 1 6 型 3 埃可病毒 包括 1 9 11 27 29 33 型 4 新腸道病毒 為 1969 年后陸續(xù)分離到的 包括 68 69 70 和 71 型 二 共同特征 二 共同特征 病毒呈球形 衣殼呈二十面體立體對稱 由 60 個相同的殼粒組成 每個殼粒又由 VP1 VP4 四種不同的多肽組成 無包膜 核酸為單股正鏈 RNA 具有感染性 進入細 胞后可直接起 mRNA 的作用 在宿主細胞漿內復制 有較強的殺細胞作用 除柯薩奇 A 組的某些血清型外 均可在易感細胞中增殖 引起典型的 CPE 抵抗力強 耐酸和乙 醚 對熱和去污劑有一定抵抗力 對高錳酸鉀 過氧化氫 漂白粉等氧化劑敏感 臨床 表現多樣化 經過消化道侵入機體 先在腸道細胞內增殖 但所致疾病多在腸道外 包括 中樞神經 心肌損害及皮疹等 二 二 脊髓灰質炎病毒脊髓灰質炎病毒 脊髓灰質炎病毒是脊髓灰質炎的病原體 病毒侵犯脊髓前角運動神經細胞 導致弛緩 性肢體麻痹 多見于兒童 故脊髓灰質炎亦稱小兒麻痹癥 一 病毒特性 一 病毒特性 1 形態(tài)與結構 具有典型的腸道病毒形態(tài) 球形 衣殼由 4 種蛋白成分組成 VP1 VP2 和 VP3 帶有中和抗原位點 VPl 還與病毒吸附有關 VP4 位于衣殼內部 一旦病 毒 VPl 與受體結合后 VP4 即被釋出 衣殼松動 病毒基因組脫殼穿入 2 培養(yǎng)特性 僅能在靈長類來源的細胞中增殖 常用猴腎 人胚腎或人羊膜細胞等進 行培養(yǎng) 產生典型的 CPE 將病毒注入猴 猩猩的脊髓或腦內 可使動物肢體發(fā)生麻痹 3 抗原性及分型 利用中和試驗 可將脊髓灰質炎病毒分 3 個血清型 3 型之間無 交叉免疫 每型病毒又含有兩種型特異的抗原 分別稱為 D 抗原和 C 抗原 4 抵抗力 對外界抵抗力較強 在酸性環(huán)境中較穩(wěn)定 不易被胃酸和膽汁滅活 但對 各種氧化劑 如高錳酸鉀 漂白粉 雙氧水等敏感 二 臨床意義 二 臨床意義 主要通過糞 口途徑傳播 可形成兩次病毒血癥 病毒進入腸液及唾液中 故此時可從 糞便和唾液中分離出病毒 病毒隨血液播散到全身淋巴組織或易感的神經外組織 約 90 95 的患者可因機體免疫力強而阻止病毒 后發(fā)展為隱性感染 僅約 0 1 的患者 病毒可侵入脊髓前角灰白質區(qū) 在其內增殖并破壞運動神經元 輕者出現暫時性 松弛性 四肢肌肉麻痹 重者可造成麻痹后遺癥 極少數人可發(fā)展為延髓麻痹 導致呼吸衰竭而死 亡 病毒感染后的結局取決于病毒入侵的數量 毒株的毒力 機體的免疫力等多種因素 三 微生物學檢驗 三 微生物學檢驗 1 病毒分離與鑒定 糞便標本處理后 接種原代猴腎或人胚腎細胞 若出現細胞病變 用中和試驗進一步鑒定其型別 2 血清學試驗 用發(fā)病早期和恢復期雙份血清進行中和試驗 若血清抗體有 4 倍或以 上增長 則有診斷意義 3 核酸檢測 用核酸雜交 PCR 等分子生物學方法可檢測病毒基因組的存在而進行快 速診斷 同時可根據毒株核苷酸組成或序列的差異或酶切位點的不同來區(qū)別疫苗株與野毒 株 三 柯薩奇病毒和三 柯薩奇病毒和 ECHOECHO 病毒病毒 ?？刹《?echovirus 全名 腸道致細胞病變孤兒病毒 enteric cytopathogenic human orphan virus 簡稱 ECHO 病毒 與柯薩奇病毒 coxsackie viruses 形態(tài)結構 生物學性 狀 致病性及免疫過程等都較相似 1 病毒特性病毒特性 柯薩奇病毒和?？刹《揪是蛐?核酸為單股正鏈 RNA 無包膜 衣殼呈二十面體立 體對稱 柯薩奇病毒對乳鼠有致病作用 并可根據該特點分為 A B 兩組 根據中和試驗 和交叉保護試驗 A 組現可分為 23 個抗原型 B 組分為 6 個抗原型 ?？刹《緦θ槭鬅o致 病作用 根據衣殼上的特異性抗原 現已鑒定出 31 型 柯薩奇病毒可選用非洲綠猴腎及各種人細胞系細胞 埃可病毒最適于在猴腎細胞中生 長 有些病毒也能在人羊膜細胞及 HeLa 細胞中生長 柯薩奇病毒和?？刹《揪軐е屡?養(yǎng)細胞產生 CPE 2 臨床意義臨床意義 柯薩奇病毒和?？刹《咀R別的受體在組織和細胞中分布廣泛 包括中樞神經系統(tǒng) 心 肺 胰 黏膜 皮膚及其他系統(tǒng) 因而引起的疾病種類復雜 輕重不一 見表 28 1 表表 28 1 柯薩奇病毒和?？刹《镜闹虏⌒?致病病毒及血清型 疾 病 柯薩奇病毒埃可病毒其他腸道病毒 皰疹性咽峽炎A2 6 8 10 手足口病A5 10 16新型腸道病毒 71 流行性胸痛A9 B1 51 6 9 心肌炎 心包炎A4 16 B1 51 6 9 19 急性結膜炎A24 無菌性腦膜炎幾乎所有型大部分型新型腸道病毒 71 Polio 新生兒全身感染B1 53 4 6 9 17 19 3 微生物學檢驗微生物學檢驗 1 分離鑒定 將標本接種到原代或傳代猴腎細胞或人源細胞系 病毒增殖后觀察 CPE 情況 收集病毒培養(yǎng)液鑒定分型 2 免疫學檢測 利用 ELISA 等可檢測病人血清中的 IgG 和 IgM 抗體 免疫印跡試驗 Wethern Blot 是診斷病毒感染的確證試驗 四 新型腸道病毒四 新型腸道病毒 到目前為止 新型腸道病毒 New enteroviruses 已有 5 個型別 即 68 69 70 71 72 型 68 型與小兒肺炎 支氣管炎有關 69 型尚未發(fā)現其與何種疾病 有關 70 型引起急性出血性