生物分離工程復(fù)習(xí)題庫.doc

生物分離工程復(fù)習(xí)題一、名詞解釋 1. 凝聚：在電解質(zhì)作用下，破壞細(xì)胞菌體和蛋白質(zhì)等膠體粒子的分散狀態(tài)，使膠體粒子聚集的過程。2. 分配系數(shù)：在一定溫度、壓力下，溶質(zhì)分子分布在兩個互不相溶的溶劑里，達(dá)到平衡后，它在兩相的濃度為一常數(shù)叫分配系數(shù)。3. 絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過程4. 過濾：是在某一支撐物上放過濾介質(zhì)，注入含固體顆粒的溶液，使液體通過，固體顆粒留下，是固液分離的常用方法之一。5. 萃取過程：利用在兩個互不相溶的液相中各種組分（包括目的產(chǎn)物）溶解度的不同，從而達(dá)到分離的目的6. 吸附：是利用吸附劑對液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力，使其富集在吸附劑表面的過程。7. 反滲析：當(dāng)外加壓力大于滲透壓時，水將從溶液一側(cè)向純水一側(cè)移動，此種滲透稱之為反滲透。8. 離心沉降：利用懸浮液或乳濁液中密度不同的組分在離心力場中迅速沉降分層，實(shí)現(xiàn)固液分離9. 離心過濾：使懸浮液在離心力場作用下產(chǎn)生的離心力壓力，作用在過濾介質(zhì)上，使液體通過過濾介質(zhì)成為濾液，而固體顆粒被截留在過濾介質(zhì)表面，從而實(shí)現(xiàn)固液分離，是離心與過濾單元操作的集成，分離效率更高10. 離子交換：利用離子交換樹脂作為吸附劑，將溶液中的待分離組分，依據(jù)其電荷差異，依靠庫侖力吸附在樹脂上，然后利用合適的洗脫劑將吸附質(zhì)從樹脂上洗脫下來，達(dá)到分離的目的。11. 固相析出技術(shù)：利用沉析劑（precipitator）使所需提取的生化物質(zhì)或雜質(zhì)在溶液中的溶解度降低而形成無定形固體沉淀的過程。12. 助濾劑：助濾劑是一種具有特殊性能的細(xì)粉或纖維，它能使某些難以過濾的物料變得容易過濾13. 色譜技術(shù)：是一組相關(guān)分離方法的總稱，色譜柱的一般結(jié)構(gòu)含有固定相（多孔介質(zhì)）和流動相，根據(jù)物質(zhì)在兩相間的分配行為不同（由于親和力差異），經(jīng)過多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸），達(dá)到分離的目的。14. 有機(jī)溶劑沉淀：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機(jī)溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。15. 等電點(diǎn)沉淀：調(diào)節(jié)體系pH值，使兩性電解質(zhì)的溶解度下降，析出的操作稱為等電點(diǎn)沉淀。16. 膜分離：利用膜的選擇性（孔徑大?。?，以膜的兩側(cè)存在的能量差作為推動力，由于溶液中各組分透過膜的遷移率不同而實(shí)現(xiàn)分離的一種技術(shù)。17. 化學(xué)滲透破壁法：某些化學(xué)試劑，如有機(jī)溶劑、變性劑、表面活性劑、抗生素、金屬螯合劑等，可以改變細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的通透性，從而使胞內(nèi)物質(zhì)有選擇地滲透出來。18. 超臨界流體：超臨界流體是狀態(tài)超過氣液共存時的最高壓力和最高溫度下物質(zhì)特有的點(diǎn)臨界點(diǎn)后的流體。19. 反滲透：在只有溶劑能通過的滲透膜的兩側(cè)，形成大于滲透壓的壓力差，就可以使溶劑發(fā)生倒流，使溶液達(dá)到濃縮的效果，這種操作成為反滲透。20. 樹脂工作交換容量：單位質(zhì)量干樹脂或單位體積濕樹脂所能吸附的一價(jià)離子的毫摩爾數(shù)稱為樹脂交換容量，在充填柱上操作達(dá)到漏出點(diǎn)時，樹脂所吸附的量稱為樹脂工作交換容量。21. 色譜阻滯因數(shù)：溶質(zhì)在色譜柱（紙、板）中的移動速率與流動相移動速率之比稱為阻滯因數(shù)，以Rf表示。22. 膜的濃差極化：是指但溶劑透過膜，而溶質(zhì)留在膜上，因而使膜面濃度增大，并高于主體中濃度。23. 超濾：凡是能截留相對分子量在500以上的高分子膜分離過程稱為超濾，它主要是用于從溶劑或小分子溶質(zhì)中將大分子篩分出來。24. 生物分離技術(shù)：是指從動植物與微生物的有機(jī)體或器官、生物工程產(chǎn)物（發(fā)酵液、培養(yǎng)液）及其生物化學(xué)產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質(zhì)的技術(shù)過程。25. 物理萃取：即溶質(zhì)根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達(dá)到分配平衡，萃取劑與溶質(zhì)之間不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。26. 化學(xué)萃?。簞t利用脂溶性萃取劑與溶質(zhì)之間的化學(xué)反應(yīng)生成脂溶性復(fù)合分子實(shí)現(xiàn)溶質(zhì)向有機(jī)相的分配。27. 鹽析：是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。28. 有機(jī)聚合物沉析：利用生物分子與某些有機(jī)聚合物形成沉淀而析出的分離技術(shù)稱為有機(jī)聚合物沉析。29. 離子交換平衡：當(dāng)正反應(yīng)、逆反應(yīng)速率相等時，溶液中各種離子的濃度不再變化而達(dá)平衡狀態(tài)，即稱為離子交換平衡。30. 功能基團(tuán)：離子交換樹脂中與載體以共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)的不能移動的活性基團(tuán)，又稱功能基團(tuán)31. 平衡離子：離子交換樹脂中與功能基團(tuán)以離子鍵聯(lián)結(jié)的可移動的平衡離子，亦稱活性離子。32. 樹脂的再生：就是讓使用過的樹脂重新獲得使用性能的處理過程，樹脂的再生反應(yīng)是交換吸附的逆反應(yīng)。33. 層析分離：是一種物理的分離方法，利用多組分混合物中各組分物理化學(xué)性質(zhì)的差別，使各組分以不同的程度分布在兩個相中。34. 流動相：在層析過程中，推動固定相上待分離的物質(zhì)朝著一個方向移動的液體、氣體或租臨界體等，都稱為流動相。35. 正相色譜：是指固定相的極性高于流動相的極性，因此，在這種層析過程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動的速度快，先從柱中流出來。36. 反相色譜：是指固定相的極性低于流動相的極性，在這種層析過程中，極性大的分子比極性小的分子移動的速度快而先從柱中流出。37. 吸附層析：是以吸附劑為固定相，根據(jù)待分離物與吸附劑之間吸附力不同而達(dá)到分離目的的一種層析技術(shù)。38. 分配層析：是根據(jù)在一個有兩相同時存在的溶劑系統(tǒng)中，不同物質(zhì)的分配系數(shù)不同而達(dá)到分離目的的一種層析技術(shù)。39. 凝膠過濾：層析是以具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠顆粒作為固定相，根據(jù)物質(zhì)的分子大小進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。40. 離子交換層析：是以離子交換劑為固定相，根據(jù)物質(zhì)的帶電性質(zhì)不同而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。41. 高效液相色譜：是指選用顆粒極細(xì)的高效耐壓新型固定相，借助高壓泵來輸送流動相，并配有實(shí)時在線檢測器，實(shí)現(xiàn)色譜分離過程全部自動化的液相色譜法。42. 親和層析：是利用生物活性物質(zhì)之間的專一親和吸附作用而進(jìn)行的層析方法。是近年來發(fā)展的純化酶和其他高分子的一種特殊的層析技術(shù)。43. 疏水層析：是利用表面偶聯(lián)弱疏水性基團(tuán)（疏水性配基）的疏水性吸附劑為固定相，根據(jù)蛋白質(zhì)與疏水性吸附劑之間的弱疏水性相互作用的差別進(jìn)行分離純化的層析技術(shù)。44. 介電常數(shù)：表示介質(zhì)對帶有相反電荷的微粒之間的靜電引力與真空對比減弱的倍數(shù)。45. 過濾介質(zhì)：是指能使固一液混合料液得以分離的某一介面，通常指濾布或膜過濾中所用的膜。46. 等電點(diǎn)：是兩性物質(zhì)在其質(zhì)點(diǎn)的凈電荷為零時介質(zhì)的pH值,溶質(zhì)凈電荷為零，分子間排斥電位降低，吸引力增大，能相互聚集起來，沉淀析出，此時溶質(zhì)的溶解度最低。47. 有機(jī)酸沉析：含氮有機(jī)酸（如苦味酸和鞣酸等）能夠與有機(jī)分子的堿性功能團(tuán)形成復(fù)合物而沉淀析出。48. 選擇變性沉析：是利用蛋白質(zhì)、酶與核酸等生物大分子對某些物理或化學(xué)因素敏感性不同，而有選擇地使之變性沉析，以達(dá)到目的物與雜蛋白分離的技術(shù)，稱為選擇變性沉析。四、填空1. 發(fā)酵液常用的固液分離方法有（ 離心 ）和（ 過濾 ）等。2. 常用的蛋白質(zhì)沉析方法有（等電點(diǎn)沉淀），（鹽析）和（ 有機(jī)溶劑沉淀 ）。3. 陽離子交換樹脂按照活性基團(tuán)分類，可分為（強(qiáng)酸型），（弱酸型）和（中等強(qiáng)度）；其典型的活性基團(tuán)分別有（磺酸基團(tuán)），（羧基），（磷酸基）。4. 蛋白質(zhì)分離常用的色譜法有（凝膠色譜法） ，（多糖基離子交換色譜法），（高效液相色譜法）和（親和色譜法） 。5. 為使過濾進(jìn)行的順利通常要加入（惰性助濾劑）。6. 離子交換分離操作中，常用的洗脫方法有（pH梯度） 和（離子強(qiáng)度（鹽）梯度）。7. 陰離子交換樹脂按照活性基團(tuán)分類，可分為（強(qiáng)堿型），（弱堿型）和（中等強(qiáng)度）；其典型的活性基團(tuán)分別有（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、（強(qiáng)弱基團(tuán)都具備）。8. 離子交換樹脂由（載體），（活性基團(tuán)）和（可交換離子）組成。9. 常用的化學(xué)細(xì)胞破碎方法有（滲透沖擊），（酶消化法），（增溶法），（脂溶法）和（堿處理法）。10. DEAE Sepharose是（陰）離子交換樹脂，其活性基團(tuán)是（二乙基氨基乙基）。11. 影響離子交換選擇性的因素有（離子化合價(jià)），（離子水化半徑），（溶液濃度），（離子強(qiáng)度），（溶液的pH值） ，（有機(jī)溶劑），（樹脂物理結(jié)構(gòu)）和（輔助力）。12. CM Sepharose是（陽）離子交換樹脂，其活性基團(tuán)是 （羧甲基） 13. 工業(yè)離心設(shè)備從形式上可分為（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。14. 膜分離過程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為 （微濾膜） ，（超濾膜），（納濾膜）和（反滲透膜）。15. 工業(yè)上常用的超濾裝置有（板式） ，（管式），（螺旋卷式）和（中空纖維式）。16. 影響吸附的主要因素有（吸附劑的性質(zhì)），（吸附質(zhì)的性質(zhì)） ，（溫度），（溶液pH值），（鹽濃度）和（吸附物濃度和吸附劑用量）。17. 影響鹽析的因素有（溶質(zhì)種類） ，（溶質(zhì)濃度），（pH值）和（溫度）。18. 簡單地說，離子交換過程實(shí)際上只有（外部擴(kuò)散），（內(nèi)部擴(kuò)散）和（化學(xué)交換反應(yīng)） 三步；19. 反相高效液相色譜的固定相是（非極性）的，而流動相是（極性）的；常用的固定相有（C18）和（C8）；常用的流動相有（甲醇）和（乙睛）。20. 超臨界流體的特點(diǎn)是與氣體有相似的（粘度（擴(kuò)散系數(shù)），與液體有相似的（密度）。21. 等電聚焦電泳法分離不同蛋白質(zhì)的原理是依據(jù)其（等電點(diǎn)（pI）的不同；22. 根據(jù)分離機(jī)理的不同，色譜法可分為（吸附色譜），（離子交換色譜），（凝膠色譜），（分配色譜）和（親和色譜）。23. 典型的工業(yè)過濾設(shè)備有（板框壓濾機(jī)）和（真空轉(zhuǎn)鼓過濾機(jī)）。24. 常用離心設(shè)備可分為（離心沉降）和（離心過濾） 兩大類；25. 根據(jù)物化理論，萃取達(dá)到平衡時，溶質(zhì)在萃取相和萃余相中的（濃度的比值）一定；26. 根據(jù)吸附劑與吸附質(zhì)之間存在的吸附力性質(zhì)的不同，可將吸附分為（物理）、（化學(xué)）、（極性）和（交換）吸附；27. 離子交換操作一般分為（動態(tài)）和（靜態(tài)）兩種；28. 蛋白質(zhì)等生物大分子，在溶液中呈穩(wěn)定的分散狀態(tài)，其原因是由于（分子表面電荷）和（水化層）；29. 鹽析用鹽的選擇需考慮（鹽析作用強(qiáng)）、（溶解度大）、（生物學(xué)惰性）和（來源豐富、經(jīng)濟(jì)）等幾個方面的因素；30. 影響有機(jī)溶劑沉淀的因素有（溫度）、（pH）、（樣品濃度）、（中性鹽濃度）和（金屬離子）。31. 結(jié)晶包括三個過程（過飽和溶液的形成）、（晶核的形成）和（晶體的生長）。32. 過飽和溶液的形成方法有（飽和溶液冷卻）、（部分溶劑蒸發(fā)）、（解析）和（化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶）。33. 物料中所含水分可分為（結(jié)合水）和（非結(jié)合水）三種；34. 根據(jù)干燥曲線，物料干燥可分為（恒速干燥階段）和（降速干燥階段） 兩個階段；35. 液液萃取從機(jī)理上分析可分為（物理萃?。┖停ɑ瘜W(xué)萃?。﹥深?；36. 大孔網(wǎng)狀吸附劑有（非極性）、（中等極性）和（極性）三種主要類型；37. 影響離子交換速度的因素有（樹脂粒度）、（交聯(lián)度）、（溶液流速）、（溫度）、（離子的大?。ⅲx子的化合價(jià)）和（離子濃度）。38. 分配色譜的基本構(gòu)成要素有（載體）、（固定相）和（流動相）。39. 分子篩色譜也稱（凝膠色譜）的主要應(yīng)用是（脫鹽）和（分級分離）40. 根據(jù)膜結(jié)構(gòu)的不同，常用的膜可分為（對稱性膜）、（非對稱膜）和（復(fù)合膜）三類；41. 固體可分為（結(jié)晶）和（無定型）兩種狀態(tài)；42. 結(jié)晶的前提是（過飽和溶液的形成）；結(jié)晶的推動力是（溶液的過飽和度）；43. 根據(jù)晶體生長擴(kuò)散學(xué)說，晶體的生長包括（溶質(zhì)借擴(kuò)散作用從溶液中轉(zhuǎn)移到晶體的表面）、（溶質(zhì)長入晶面放出結(jié)晶熱）和（結(jié)晶熱傳遞回到溶液中）三個過程；44. 影響晶體生長速度的主要因素有（雜質(zhì)）、（攪拌）、（過飽和度）和（溫度）。五、簡答與問答題1、試述凝膠色譜的原理？答：將混合原料加在柱上并用流動相洗脫，則無法進(jìn)入孔隙內(nèi)部的大分子直接被洗脫下來，小分子因?yàn)榭梢赃M(jìn)入孔隙內(nèi)部而受到很大的阻滯，最晚被洗脫下來，而中等大小的分子，雖然可以進(jìn)入孔隙內(nèi)部但并不深入，受到的阻滯作用不強(qiáng)，因而在兩者之間被洗脫下來。2、在色譜操作過程中為什么要進(jìn)行平衡？答：1、流速平衡：流速是柱層析操作當(dāng)中的主要影響因素，流速的快慢直接影響著分離的效果，流速過快，混合物得不到完全的分離，流速過慢，整體分離的時間要延長，因此在分離前首先要確定留宿。 2、液體環(huán)境：為了保持被分離物質(zhì)運(yùn)動的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致，所以進(jìn)行液體環(huán)境的平衡。3、以羧酸吸附蛋白質(zhì)為例，簡要說明離子交換樹脂的洗脫方法及其原理？答：1、加堿：主要是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)到達(dá)等電點(diǎn)，是蛋白質(zhì)帶電量減少，吸附力下降從而被洗脫下來。2、加酸：主要是抑制羧酸的電離，使活性基團(tuán)帶電量下降，吸附力下降從而蛋白質(zhì)被洗脫下來。3、加鹽：依照質(zhì)量作用定律，把蛋白質(zhì)洗脫下來。3、在離子交換色譜操作中，怎樣選擇離子交換樹脂？答：1、對陰陽離子交換樹脂的選擇：正電荷選擇陽離子交換樹脂，負(fù)電荷選擇陰離子交換樹脂。2、對離子交換樹脂強(qiáng)弱的選擇：較強(qiáng)的酸性或堿性，選擇選用弱酸性或弱堿性樹脂。3、對離子交換樹脂離子型的選擇：根據(jù)分離的目的，弱酸或弱堿性樹脂不使用H或OH型。4、簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象？答：當(dāng)中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時可能出現(xiàn)以下兩種情況：（1）“鹽溶”現(xiàn)象低鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度增大（2）“鹽析”現(xiàn)象高鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度隨之下降，原因如下：（a）無機(jī)離子與蛋白質(zhì)表面電荷中和，形成離子對，部分中和了蛋白質(zhì)的電性，使蛋白質(zhì)分子之間的排斥力減弱，從而能夠相互靠攏；（b）中性鹽的親水性大，使蛋白質(zhì)脫去水化膜，疏水區(qū)暴露，由于疏水區(qū)的相互作用導(dǎo)致沉淀；5、簡述吸附色譜分離技術(shù)的原理？答: 利用溶質(zhì)與吸附劑之間的分子吸附力(范德華力，包括色散力、誘導(dǎo)力、定向力以及氫鍵)的差異而實(shí)現(xiàn)分離6、在運(yùn)用離子交換技術(shù)提取蛋白質(zhì)時，為什么要使用多糖基離子交換劑？答:因?yàn)殡x子交換樹脂孔徑小,大分子蛋白質(zhì)難以進(jìn)入。同時，樹脂內(nèi)部主要為疏水性，對親水性的蛋白質(zhì)會產(chǎn)生影響。而多糖基離子交換劑沒有上述問題。 7、簡述過飽和溶液形成的方法？答：（1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶）適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時，溶解度隨溫度變化的幅度要適中；（2）部分溶劑蒸發(fā)法（等溫結(jié)晶法）適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系，或隨溫度升高溶解度降低的體系；（3）真空蒸發(fā)冷卻法使溶劑在真空下迅速蒸發(fā)，并結(jié)合絕熱冷卻，是結(jié)合冷卻和部分溶劑蒸發(fā)兩種方法的一種結(jié)晶方法。（4）化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶加入反應(yīng)劑產(chǎn)生新物質(zhì)，當(dāng)該新物質(zhì)的溶解度超過飽和溶解度時，即有晶體析出；8、怎樣進(jìn)行離子交換樹脂的預(yù)處理及轉(zhuǎn)型？答：物理處理：水洗、過篩，去雜，以獲得粒度均勻的樹脂顆粒；化學(xué)處理：轉(zhuǎn)型（氫型或鈉型） 陽離子樹脂 酸堿酸 陰離子樹脂 堿酸堿最后以去離子水或緩沖液平衡9、何謂等電點(diǎn)沉析法？答:蛋白質(zhì)再等電點(diǎn)下的溶解度最低，根據(jù)這一性質(zhì)，再溶液中加入一定比例的有機(jī)溶劑，破壞蛋白質(zhì)表面的水化層和雙電層，降低分子間斥力，加強(qiáng)了蛋白質(zhì)分子間的疏水相互作用，使得蛋白質(zhì)分子得以聚集成團(tuán)沉淀下來。10、何謂超臨界流體萃取，并簡述其分離原理？答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴(kuò)散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強(qiáng)）的特點(diǎn)，利用超臨界流體為萃取劑進(jìn)行的萃取單元操作。其特點(diǎn)是安全、無毒、產(chǎn)品分離簡單，但設(shè)備投資較大。11、簡述結(jié)晶過程中晶體形成的條件？答：結(jié)晶過程包括過飽和溶液的形成、晶核的形成及晶體的生長三個過程，其中溶液達(dá)到過飽和狀態(tài)是結(jié)晶的前提，過飽和度是結(jié)晶的推動力。12、簡述凝膠色譜的分離原理？答：凝膠排阻色譜的分離介質(zhì)（填料）具有均勻的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)，其分離原理是具有不同分子量的溶質(zhì)分子，在流經(jīng)柱床是，由于大分子難以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，而從凝膠顆粒之間流出，保留時間短；而小分子溶質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，由于凝膠多孔結(jié)構(gòu)的阻滯作用，流經(jīng)體積變大，保留時間延長。這樣，分子量不同的溶質(zhì)分子得以分離。13、膜分離過程中，有那些原因會造成膜污染，如何處理？答：（1）膜污染主要有兩種情況：一是附著層被濾餅、有機(jī)物凝膠、無機(jī)物水垢膠體物質(zhì)或微生物等吸附于表面；另一種是料液中溶質(zhì)結(jié)晶或沉淀造成堵塞。（3分）（2）膜污染是可以預(yù)防或減輕的，措施包括料液預(yù)處理、膜性質(zhì)的改善、操作條件改變等方式。（2分）（3）膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的，只能通過清洗的處理方式消除，包括物理方法沖洗和化學(xué)藥品溶液清洗等。（2分）14、超臨界萃取的原理及SC-CO2萃取的優(yōu)點(diǎn)？答:原理：溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度，與其密度有關(guān)，密度越大，溶解度越大。在臨界點(diǎn)附近，微小的壓力增加或溫度下降，則溶劑的密度大幅度增加，對溶質(zhì)的溶解度將大幅度增加，有利于溶質(zhì)的萃取。而在臨界點(diǎn)附近，微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑的密度大幅度減少，對溶質(zhì)的溶解度將大幅減少，有利于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收。優(yōu)點(diǎn)：無毒無腐蝕性，不可燃燒，價(jià)格低廉，傳質(zhì)好萃取快，臨界溫度和臨界壓力較低適合于熱敏生物制品，可獲萃取物或萃余物15、何謂免疫親和層析，簡述親和免疫層析介質(zhì)的制備過程?答、免疫親和層析是利用親和技術(shù)和色譜分離集成產(chǎn)生的一種高效色譜分離技術(shù)，其分離原理是通過抗原-抗體之間特異性的相互作用，從而實(shí)現(xiàn)高效的分離。層析介質(zhì)的制備過程包括：抗體的制備、抗體提取、載體活化，手臂鏈的連接、抗體的連接等步驟。16、何謂親和吸附，有何特點(diǎn)？答：親和吸附是吸附單元操作的一種，它是利用親和吸附劑與目標(biāo)物之間的特殊的化學(xué)作用實(shí)現(xiàn)的高效分離手段。親和吸附劑的組成包括：惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。親和吸附的特點(diǎn)是高效、簡便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和，但載體制備難度大，通用性差，成本較高。17、簡述生物分離過程的特點(diǎn)?答: 1、產(chǎn)品豐富：產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性2、絕大多數(shù)生物分離方法來源于化學(xué)分離3、生物分離一般比化工分離難度大（1）成分復(fù)雜（2）懸液中的目標(biāo)產(chǎn)物濃度低（3）生物活性，條件相對溫和（4）生物產(chǎn)品要求高質(zhì)量（5）獲得高純度的干燥產(chǎn)品（6）衛(wèi)生18、試比較凝聚和絮凝兩過程的異同？答：凝聚和絮凝在電介質(zhì)作用下，破壞溶質(zhì)膠體顆粒表面的雙電層，破壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，使膠體粒子聚集的過程。凝聚：簡單電解質(zhì)降低膠體間的排斥力。從而范德華引力起主導(dǎo)作用，聚合成較大的膠粒，粒子的密度越大，越易分離。絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過程19、簡述有機(jī)溶劑沉析的原理？答：1、概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機(jī)溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。2、原理：（1）降低了溶質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)之間的靜電引力增加，從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，導(dǎo)致沉淀。（2）由于有機(jī)溶劑的水合作用，降低了自由水的濃度，降低了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度，降低了親水性，導(dǎo)致脫水凝聚。20、膜分離技術(shù)的類型和定義？答：膜分離過程的實(shí)質(zhì)是物質(zhì)透過或被截留于膜的過程，近似于篩分過程，依據(jù)濾膜孔徑大小而達(dá)到物質(zhì)分離的目的，故而可以按分離粒子大小進(jìn)行分類：（1）微濾：以多孔細(xì)小薄膜為過濾介質(zhì)，壓力為推動力，使不溶性物質(zhì)得以分離的操作，孔徑分布范圍在0.02514m之間；（2）超濾：分離介質(zhì)同上，但孔徑更小，為0.0010.02 m，分離推動力仍為壓力差，適合于分離酶、蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)；（3）反滲透：是一種以壓力差為推動力，從溶液中分離出溶劑的膜分離操作，孔徑范圍在0.00010.001 m之間；（由于分離的溶劑分子往往很小，不能忽略滲透壓的作用，故而成為反滲透）；（4）納濾：以壓力差為推動力，從溶液中分離3001000小分子量的膜分離過程，孔徑分布在平均2nm；（5）電滲析：以電位差為推動力，利用離子交換膜的選擇透過性，從溶液中脫除或富集電解質(zhì)的膜分離操作；21、影響液-固分離的因素？（一）微生物種類的影響一般真菌的菌絲比較粗大，液一固分離容易，含真菌菌體及絮凝蛋白質(zhì)的發(fā)酵液，可采用鼓式真空過濾或板框過濾。對于酵母菌體，離心分離的方法具有較好的效果。但是細(xì)菌或細(xì)胞碎片相當(dāng)細(xì)小，液一固分離十分困難，用一般的離心分離或過濾方法效果很差，因此應(yīng)先用預(yù)處理的各種手段來增大粒子，才能獲得澄清的濾液。（二）發(fā)酵液的黏度液一固分離的速度通常與黏度成反比。影響發(fā)酵液黏度的因素很多：（1）菌體種類和濃度不同，其黏度有很大差別。（2）不同的培養(yǎng)基組分和用量也會影響?zhàn)ざ?，如用黃豆餅粉、花生餅粉作氮源，用淀粉作碳源會使黏度增大。發(fā)酵液中未用完的培養(yǎng)基較多或發(fā)酵后期用油作消沫劑也會使過濾困難。22、影響有機(jī)溶劑萃取分離的因素？影響液一液萃取的因素主要有目的物在兩相的分配比（分配系數(shù)K）和有機(jī)溶劑的用量等。分配系數(shù)K值增大，提取效率也增大，萃取就易于進(jìn)行完全。當(dāng)K值較小時，可以適當(dāng)增加有機(jī)溶劑用量來提高萃取率，但有機(jī)溶劑用量增加會增加后處理的工作量，因此在實(shí)際工作中，常常采取分次加入溶劑，連續(xù)多次提取來提高萃取率。23、鹽析的原理及影響因素？1、親水性大于蛋白質(zhì)破壞水化層2、帶電離子中和蛋白質(zhì)表面電荷影響因素：（1）鹽離子濃度（2）生物分子種類（3）生物分子濃度（4） pH值（五）溫度24、影響有機(jī)溶劑沉析的因素？（1）溫度（2）生物樣品的濃度（3）pH（4）離子強(qiáng)度（5）金屬離子25、何時應(yīng)用靜態(tài)離子交換分離法？ 一般只是在試探性實(shí)驗(yàn)、測定交換平衡常數(shù)、某些交換動力學(xué)的研究、交換分配系數(shù)的測定、絡(luò)合物離解常數(shù)的測定、滴定曲線的研究、某些催化反應(yīng)的試探性研究、除去鹽溶液中過剩的酸和堿、吸附溶液中所含的高分子量物質(zhì)等方面可能用到。此外還用于不適合用柱進(jìn)行操作的離子交換分離，如溶液粘度太大、含有懸浮固體及在反應(yīng)時放出氣體會造成溝流或堵塞管柱；或者是含有碳酸鹽、亞硫酸鹽、硫化物的溶液與氫型陽離子柱交換時；以及某些交換速度較慢、交換要求在一步完成的等條件下，還是可以采用的。26、簡述交換容量及其影響因素？交換容量是指離子交換劑能提供交換離子的量，它反映離子交換劑與溶液中離子進(jìn)行交換的能力。通常所說的離子交換劑的交換容量是指離子交換劑所能提供交換離子的總量，又稱為總交換容量，它只和離子交換劑本身的性質(zhì)有關(guān)。影響交換容量的因素很多，主要可以分為兩個方面，一方面是離子交換劑顆粒大小、顆粒內(nèi)孔隙大小以及所分離的樣品組分的大小等影響。另一些影響因素如實(shí)驗(yàn)中的離子強(qiáng)度、pH值等主要影響樣品中組分和離子交換劑的帶電性質(zhì)。27、疏水柱層析分離原理？親水性蛋白質(zhì)（酶）表面均含有一定量的疏水性基團(tuán)。盡管在水溶液中蛋白質(zhì)（酶）具有將疏水性基團(tuán)折疊在分子內(nèi)部而表面顯露極性和荷電基團(tuán)的趨勢，但總會有一些疏水性基團(tuán)或極性基團(tuán)的疏水部位暴露在蛋白質(zhì)（酶）表面。這部分疏水基團(tuán)可與親水性固定相表面偶聯(lián)的短鏈烷基、苯基等弱疏水基會發(fā)生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附劑）所吸附。28、 影響電泳分離的主要因素？1、大分子的性質(zhì)2、電場強(qiáng)度3、溶液的pH 4、溶液的離子強(qiáng)度5、 電滲6、溫度7、支持物的影響38. 提高晶體質(zhì)量的方法有哪些？（1）晶體大小的控制（2）晶體形狀的控制（3）晶體純度的控制（4）晶體結(jié)塊的控制29、生物分離的基本原理？主要是依據(jù)離心力、分子大?。êY分）、濃度差、壓力差、電荷效應(yīng)、吸附作用、靜電作用、親和作用、疏水作用、溶解度、平衡分離等原理對原料或產(chǎn)物進(jìn)行分離、純化。不同的分離對象需要采用不同的分離方法才能有效地被分離。30、 試列舉常見的吸附劑（1）活性炭（2）白陶土（白土、陶土、高嶺土）（3）磷酸鈣凝膠（4）氫氧化鋁凝膠（5）氧化鋁（6）硅膠（7）滑石粉（8）硅藻土（9）皂土（10）沸石（11）聚酰胺粉（12）大網(wǎng)格聚合物吸附劑31、吸附色譜分離化學(xué)成分的原理是什么？簡述硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭這四種吸附劑的主要用途和特點(diǎn)？利用混合物中各成分在兩相中吸附力的差異進(jìn)行分離。硅膠可分離各類成分。氧化鋁分離堿性或親脂性成分。活性炭分離水溶性成分。聚酰胺是氫鍵吸附，適合分離黃酮成分。32、樹脂的再生（或稱活化）？所謂樹脂的再生就是讓使用過的樹脂重新獲得使用性能的處理過程，樹脂的再生反應(yīng)是交換吸附的逆反應(yīng)。再生方法可根據(jù)污染情況和條件而定，一般陽樹脂在軟化中易受Fe3+污染，清除鐵化合物的方法，通常是用加抑制劑的高濃度鹽酸（10%15%）浸泡樹脂512h，甚至更長。也可用檸檬酸、氨基三乙酸、EDTA等絡(luò)合物進(jìn)行處理。陰樹脂易受有機(jī)物污染，可用10%NaCl+2%5%NaOH混合溶液浸泡或淋洗33、液一液萃取時溶劑的選擇要注意以下幾點(diǎn)？（1）選用的溶劑必須具有較高選擇性，各種溶質(zhì)在所選的溶劑中之分配系數(shù)差異愈大愈好。（2）、選用的溶劑，在萃取后，溶質(zhì)與溶劑要容易分離與回收。（3）、兩種溶劑的密度相差不大時，易形成乳化，不利于萃取液的分離，選用溶劑時應(yīng)注意。（4）、要選用無毒，不易燃燒的價(jià)廉易得的溶劑。34、試述活性炭的吸附劑的吸附特點(diǎn)？（1）在水溶液中吸附力最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中吸