飼料添加劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指南（試行）.DOC

飼料添加劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指南（試行）飼料添加劑的穩(wěn)定性是指飼料添加劑保持其物理、化學(xué)、生物學(xué)和微生物學(xué)性質(zhì)的能力。穩(wěn)定性試驗(yàn)的目的是考察飼料添加劑的性質(zhì)在溫度、濕度、光照等條件的影響下隨時間變化的規(guī)律，為飼料添加劑的生產(chǎn)、包裝、貯存、運(yùn)輸條件和有效期的確定提供科學(xué)依據(jù)，以確保上市飼料添加劑安全有效。穩(wěn)定性試驗(yàn)是飼料添加劑質(zhì)量控制研究的主要內(nèi)容之一，與飼料添加劑質(zhì)量研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立緊密相關(guān)。穩(wěn)定性試驗(yàn)具有階段性特點(diǎn)，貫穿飼料添加劑研究與開發(fā)的全過程，上市后還應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行穩(wěn)定性研究。本指南為一般性原則，具體的試驗(yàn)設(shè)計(jì)和評價(jià)應(yīng)具體問題具體分析。一、產(chǎn)品分類為了便于理解和敘述飼料添加劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)，將飼料添加劑分為飼料添加劑類產(chǎn)品和飼料添加劑類產(chǎn)品。飼料添加劑（類）產(chǎn)品包括：1利用微生物發(fā)酵、化學(xué)和物理方法直接生產(chǎn)的飼料添加劑產(chǎn)品。2在原料生產(chǎn)工藝中同時得到兩種或兩種以上混合成分的產(chǎn)品，如維生素A/D3。3在單一微生物發(fā)酵工藝中同時產(chǎn)生兩種或兩種以上的酶，經(jīng)加工生產(chǎn)的穩(wěn)定的復(fù)合酶制劑。4在單一培養(yǎng)工藝中可共同生長的兩種或兩種以上微生物菌種，經(jīng)加工生產(chǎn)的穩(wěn)定的復(fù)合微生物制劑。飼料添加劑（類）產(chǎn)品包括：1通過改變飼料添加劑（類）產(chǎn)品濃度而生成的飼料添加劑產(chǎn)品。2將飼料級氨基酸、酶制劑、微生物添加劑、抗氧化劑、防腐劑、電解質(zhì)平衡劑、著色劑、調(diào)味劑或香料等同一類多品種飼料添加劑混合配制的飼料添加劑產(chǎn)品。3通過對飼料添加劑（類）產(chǎn)品進(jìn)行精制、脫水、包被等工藝處理而生成的飼料添加劑產(chǎn)品。二、穩(wěn)定性試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要點(diǎn) 穩(wěn)定性試驗(yàn)的設(shè)計(jì)應(yīng)根據(jù)不同的試驗(yàn)?zāi)康?，結(jié)合飼料添加劑的理化性質(zhì)、產(chǎn)品類別和具體的工藝條件等進(jìn)行。（一）樣品的準(zhǔn)備1樣品的批次和規(guī)模一般地，影響因素試驗(yàn)（配合飼料制粒試驗(yàn)除外）采用一批樣品進(jìn)行，配合飼料制粒試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)采用三批樣品進(jìn)行。供穩(wěn)定性試驗(yàn)的樣品應(yīng)從以一定規(guī)模生產(chǎn)的批量產(chǎn)品中抽取，以能夠代表規(guī)模生產(chǎn)條件下的產(chǎn)品質(zhì)量。飼料添加劑類產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝路線、方法、步驟應(yīng)與生產(chǎn)規(guī)模一致；飼料添加劑類產(chǎn)品的配方、制備工藝也應(yīng)與生產(chǎn)規(guī)模一致。穩(wěn)定性試驗(yàn)中，飼料添加劑的批量應(yīng)達(dá)到中試規(guī)模的要求。特殊品種、特殊類型所需數(shù)量，視具體情況而定。2包裝及處置條件穩(wěn)定性試驗(yàn)要求在一定的溫度、濕度、光照條件下進(jìn)行，處置條件的設(shè)置應(yīng)充分考慮到飼料添加劑在貯存、運(yùn)輸及使用過程中可能遇到的環(huán)境因素。 飼料添加劑類產(chǎn)品應(yīng)在影響因素試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上選擇合適的包裝。加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)中的包裝應(yīng)與擬上市包裝一致。如果擬上市產(chǎn)品包裝過大，不方便試驗(yàn)，也可采用模擬小包裝，所用材料和封裝條件應(yīng)與大包裝一致。 穩(wěn)定性試驗(yàn)中應(yīng)對各項(xiàng)試驗(yàn)條件要求的環(huán)境參數(shù)進(jìn)行控制和監(jiān)測。3樣品的采集樣品的采集可參照GB/T 14699.1飼料 采樣的規(guī)定進(jìn)行。對于影響因素試驗(yàn)，采集的樣品量應(yīng)滿足完成一次所有考察項(xiàng)目的檢驗(yàn)需要。對于加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)，每個批次采集的份數(shù)應(yīng)滿足完成各個考察時間點(diǎn)檢驗(yàn)的需要,每份樣品量同影響因素試驗(yàn)。 （二）考察時間點(diǎn)由于穩(wěn)定性試驗(yàn)?zāi)康氖强疾祜暳咸砑觿┵|(zhì)量隨時間變化的規(guī)律，因此試驗(yàn)中一般需要設(shè)置多個時間點(diǎn)考察樣品的質(zhì)量變化?？疾鞎r間點(diǎn)應(yīng)基于對飼料添加劑性質(zhì)的認(rèn)識、穩(wěn)定性趨勢評價(jià)的要求而設(shè)置。如長期試驗(yàn)中，總體考察時間應(yīng)涵蓋所預(yù)期的有效期，中間取樣點(diǎn)的設(shè)置要考慮飼料添加劑的穩(wěn)定性特點(diǎn)和類型特點(diǎn)。對某些環(huán)境因素敏感的飼料添加劑，應(yīng)適當(dāng)增加考察時間點(diǎn)。（三）考察項(xiàng)目穩(wěn)定性試驗(yàn)的考察項(xiàng)目應(yīng)選擇在飼料添加劑保存期間易于變化、并可能影響飼料添加劑質(zhì)量、安全性和有效性的項(xiàng)目，以便客觀、全面地反映飼料添加劑的穩(wěn)定性。根據(jù)飼料添加劑特點(diǎn)和質(zhì)量控制的要求，盡量選取能靈敏反映飼料添加劑穩(wěn)定性的指標(biāo)。飼料添加劑根據(jù)物理性狀大體可分為固體和液體兩類。乳狀飼料添加劑可參照液體飼料添加劑的考察項(xiàng)目進(jìn)行考察。一般地，考察項(xiàng)目可分為物理、化學(xué)、生物學(xué)和微生物學(xué)等幾個方面。具體考察項(xiàng)目設(shè)置可以參考表1。 表1建議飼料添加劑穩(wěn)定性試驗(yàn)考察的項(xiàng)目類別建議考察項(xiàng)目固體產(chǎn)品性狀、色澤、外觀、主成份含量、水分以及根據(jù)所含組分或成分特性和要求設(shè)置的考察項(xiàng)目。液體產(chǎn)品性狀、色澤、外觀、含量、pH值、澄清度、混懸度以及根據(jù)所含組分或成分特性和要求設(shè)置的考察項(xiàng)目。穩(wěn)定性研究中如樣品發(fā)生了顯著變化，則應(yīng)改變條件再進(jìn)行試驗(yàn)。一般來說，飼料添加劑類產(chǎn)品的“顯著變化”應(yīng)包括：1性狀，如顏色、熔點(diǎn)、溶解度、比旋度超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，晶型、水分等超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。2主成份含量測定值超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，或者不能達(dá)到生物學(xué)或者微生物學(xué)的效價(jià)指標(biāo)。3結(jié)晶水發(fā)生變化。4有害微生物或生物毒素等指標(biāo)超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。5pH值超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。一般來說，飼料添加劑類產(chǎn)品的“顯著變化”應(yīng)包括： 1含量測定發(fā)生5%的變化（特殊情況應(yīng)加以說明）；或者不能達(dá)到生物學(xué)或者微生物學(xué)的效價(jià)指標(biāo)。2性狀、物理性質(zhì)以及特殊類別的功能性試驗(yàn)（如顏色、相分離、再混懸能力、結(jié)塊、硬度等）超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。3有害微生物或生物毒素等指標(biāo)超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。4pH值超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。（四）分析方法評價(jià)指標(biāo)所采用的分析方法應(yīng)經(jīng)過充分的驗(yàn)證，能滿足試驗(yàn)的要求，具有一定的專屬性、準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性、靈敏度和精密度。三、穩(wěn)定性試驗(yàn)方法和要求根據(jù)研究目的不同，穩(wěn)定性試驗(yàn)方法分為影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)、長期試驗(yàn)和上市后的穩(wěn)定性考察。飼料添加劑類產(chǎn)品需要進(jìn)行影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)；飼料添加劑類產(chǎn)品需要進(jìn)行加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)，必要時，應(yīng)進(jìn)行部分影響因素試驗(yàn)。在進(jìn)行飼料添加劑類產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)之前，應(yīng)先查閱飼料添加劑類產(chǎn)品所涉及的各組成成分穩(wěn)定性的有關(guān)資料，尤其是溫度、濕度、光照等對飼料添加劑類產(chǎn)品各組成成分穩(wěn)定性的影響，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行試驗(yàn)。如果飼料添加劑類產(chǎn)品所涉及的各組成成分沒有穩(wěn)定性資料，應(yīng)進(jìn)行影響因素試驗(yàn)。一般情況下，加速試驗(yàn)應(yīng)達(dá)到6個月以上，長期試驗(yàn)應(yīng)達(dá)到18個月以上。在飼料添加劑通過審批獲準(zhǔn)上市后，還應(yīng)進(jìn)行上市后的穩(wěn)定性考察。（一）影響因素試驗(yàn)影響因素試驗(yàn)是在劇烈條件下進(jìn)行的，目的是了解影響穩(wěn)定性的因素及其影響程度，為飼料添加劑產(chǎn)品的工藝篩選、包裝材料和容器的選擇、貯存條件的確定以及是否適合于配合飼料濕熱調(diào)質(zhì)、制粒等熱加工提供依據(jù)；同時為加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)應(yīng)采用的溫度和濕度等條件提供依據(jù)，還可為分析方法的選擇提供依據(jù)。 影響因素試驗(yàn)一般包括高溫、高濕、光照試驗(yàn)和配合飼料制粒試驗(yàn)。一般將供試品置于適宜的容器中（如稱量瓶或培養(yǎng)皿），攤成5mm厚的薄層，結(jié)構(gòu)疏松的供試品攤成10mm厚的薄層進(jìn)行試驗(yàn)。如試驗(yàn)結(jié)果不明確，應(yīng)加試兩個批次的樣品。1高溫試驗(yàn) 供試品置于密封潔凈容器中，在60條件下放置10天，于第0天、第5天和第10天取樣，檢測有關(guān)指標(biāo)。如供試品發(fā)生顯著變化，則在40下同法進(jìn)行試驗(yàn)。如60無顯著變化，則不必進(jìn)行40試驗(yàn)。2高濕試驗(yàn) 供試品置恒濕密閉容器中，于25、RH905條件下放置10天，于第0天、第5天和第10天取樣檢測。檢測項(xiàng)目應(yīng)包括吸濕增重項(xiàng)。若吸濕增重5%以上，則應(yīng)在25、RH75%5下同法進(jìn)行試驗(yàn)；若吸濕增重5%以下，且其他考察項(xiàng)目符合要求，則不再進(jìn)行此項(xiàng)試驗(yàn)。液體飼料添加劑可不進(jìn)行此項(xiàng)試驗(yàn)。恒濕條件可采用恒溫恒濕箱或通過在密閉容器下部放置飽和鹽溶液來實(shí)現(xiàn)。根據(jù)不同的濕度要求，選擇NaCl飽和溶液（15.560，RH751）或KNO3飽和溶液（25，RH90）。3光照試驗(yàn)供試品置于光照箱或其它適宜的光照容器內(nèi)，于照度4500Lx500Lx條件下放置10天，于第0天、第5天和第10天取樣檢測。對于光敏感而要求避光保存的飼料添加劑，可不進(jìn)行此項(xiàng)試驗(yàn)。以上為影響因素穩(wěn)定性研究的一般要求。根據(jù)飼料添加劑的性質(zhì)必要時可以設(shè)計(jì)其他試驗(yàn)，如考察pH值、氧、低溫等因素對飼料添加劑穩(wěn)定性的影響。4配合飼料制粒試驗(yàn)將供試品于混合機(jī)上按比例加入粉狀配合飼料中混合均勻，在飼料制粒機(jī)中調(diào)質(zhì)、制粒，調(diào)質(zhì)器內(nèi)試驗(yàn)飼料的出機(jī)溫度應(yīng)達(dá)到855，調(diào)質(zhì)后水分含量在16%-17%，經(jīng)制粒機(jī)擠壓、切割制成顆粒，于冷卻器下取樣，測定供試樣品中試驗(yàn)添加劑的檢測指標(biāo)。同時應(yīng)記錄所用壓?？讖胶湍？椎拈L徑比、出壓模顆粒飼料的溫度等。（二）加速試驗(yàn)加速試驗(yàn)是在超常條件下進(jìn)行的，目的是通過加快市售包裝中飼料添加劑的化學(xué)或物理性質(zhì)變化速度來考察其穩(wěn)定性，對飼料添加劑在運(yùn)輸、保存過程中可能會遇到的短暫超常條件下的穩(wěn)定性進(jìn)行模擬考察，并初步預(yù)測樣品在規(guī)定的貯存條件下的長期穩(wěn)定性。加速試驗(yàn)一般取擬上市包裝的三批樣品進(jìn)行，建議在比長期試驗(yàn)放置溫度至少高15的條件下進(jìn)行。一般可選擇402、RH755條件下進(jìn)行6個月試驗(yàn)。在試驗(yàn)期間第0、1、2、3、6個月末取樣檢測考察指標(biāo)。如在6個月內(nèi)供試品經(jīng)檢測不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求或發(fā)生顯著變化，則應(yīng)在中間條件302、RH655同法進(jìn)行6個月試驗(yàn)。在對采用不可透過性包裝的含有水性介質(zhì)的飼料添加劑，如液體或乳狀飼料添加劑等的穩(wěn)定性試驗(yàn)中可不要求相對濕度。對采用半通透性的容器包裝的飼料添加劑，如塑料軟袋裝、塑料瓶裝的液體飼料添加劑，加速試驗(yàn)應(yīng)在402、RH205的條件下進(jìn)行。對溫度敏感的飼料添加劑（需在冰箱中4-8冷藏保存）的加速試驗(yàn)可在252、RH605條件下同法進(jìn)行。需要冷凍保存的飼料添加劑可不進(jìn)行加速試驗(yàn)。（三）長期試驗(yàn)長期試驗(yàn)是在上市飼料添加劑規(guī)定的貯存條件下進(jìn)行，目的是考察其在運(yùn)輸、貯存、使用過程中的穩(wěn)定性，能直接地反映飼料添加劑穩(wěn)定性特征，是確定有效期和貯存條件的最終依據(jù)。取三批樣品在252、RH6010條件進(jìn)行試驗(yàn)，取樣時間點(diǎn)在第一年一般為每3個月末一次，第二年每6個月末一次，以后每年末一次。對溫度敏感的飼料添加劑，其長期試驗(yàn)可在62條件下進(jìn)行試驗(yàn)；對采用半通透性的容器包裝的飼料添加劑，長期試驗(yàn)應(yīng)在252、RH4010的條件下進(jìn)行，取樣時間同上。（四）飼料添加劑上市后的穩(wěn)定性考察飼料添加劑在審批階段進(jìn)行的穩(wěn)定性試驗(yàn)，一般并不是實(shí)際生產(chǎn)產(chǎn)品的穩(wěn)定性，具有一定的局限性。在飼料添加劑獲準(zhǔn)生產(chǎn)上市后，應(yīng)采用實(shí)際規(guī)模生產(chǎn)的飼料添加劑繼續(xù)進(jìn)行長期試驗(yàn)。根據(jù)繼續(xù)進(jìn)行的穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果，對包裝、貯存條件和有效期進(jìn)行進(jìn)一步的確認(rèn)。飼料添加劑在獲得上市批準(zhǔn)后，可能會因各種原因而申請對制備工藝、配方組成、規(guī)格、包裝材料等進(jìn)行變更，一般應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的穩(wěn)定性試驗(yàn)，以考察變更后飼料添加劑的穩(wěn)定性趨勢，并與變更前的穩(wěn)定性試驗(yàn)資料進(jìn)行對比，以評價(jià)變更的合理性。四、穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果通過對影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)、長期試驗(yàn)獲得的飼料添加劑穩(wěn)定性信息進(jìn)行系統(tǒng)的分析，確定飼料添加劑的貯存條件、包裝材料/容器和有效期。（一）貯存條件的確定應(yīng)綜合影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)的結(jié)果，同時結(jié)合飼料添加劑在流通過程中可能遇到的情況進(jìn)行綜合分析。選定的貯存條件應(yīng)采用規(guī)范術(shù)語描述。（二）包裝材料/容器的確定一般先根據(jù)影響因素試驗(yàn)結(jié)果，初步確定包裝材料和容器，結(jié)合加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)的穩(wěn)定性研究的結(jié)果，進(jìn)一步驗(yàn)證采用的包裝材料和容器的合理性。（三）有效期的確定飼料添加劑的有效期應(yīng)綜合加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)的結(jié)果，進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)分析得到，最終有效期的確定一般以長期試驗(yàn)的結(jié)果來確定。由于試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分散性，一般應(yīng)按95%可信限進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出合理的有效期。如三批統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果差別較小，則取其平均值為有效期；如差別較大，則取其最短的為有效期。若數(shù)據(jù)表明測定結(jié)果變化很小，提示飼料添加劑是很穩(wěn)定的，則可以不做統(tǒng)計(jì)分析。五、名詞解釋有效期：在規(guī)定的貯存條件下放置,能保證飼料添加劑質(zhì)量符合注冊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求的期限。批次：指按相同的生產(chǎn)工藝在一次生產(chǎn)過程中生產(chǎn)的一定數(shù)量的飼料添加劑，其產(chǎn)品質(zhì)量具有均一性。上市包裝：上市銷售飼料添加劑的內(nèi)包裝和其他層次包裝的總稱。六、參考文獻(xiàn)1 ICH. Guidance for Industry Q1A(R2) Stability Testing of New Drug Substances and ProductsZ. 2003.2 Food and Drug Administration, USA. Guidance for Industry Stability Testing of New Veterinary Drug Substances and Medicinal Products (Revision) VICH GL3(R) Z. 2007.3 Food and Drug Administration, USA. Guidance for Industry Stablity Testing for medicted Premixe VICH GL8Z. 2000.4 ICH. Q1C Stability Testing for New Dosage Forms. 1996. 5 ICH. Q1B Photostability Testing of New Drug Substances and Products. 1997. 6 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部. 獸藥穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則Z.中國獸藥藥典.2005 .7 中華人民共和國衛(wèi)生部. 原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則Z.中國藥典.2005.8 國家食品藥品監(jiān)督管理局. 中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則.Z.GPH5-1.2006.9 國家食品藥品監(jiān)督管理局. 化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則H.GPH6-1.2005.10 Daniel LIU. 藥物穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)研究的國際化規(guī)范J.中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào).2005.36(3):284-288.11 陳振生，王慶喜. ICH最新動向. 中國醫(yī)藥導(dǎo)刊. 2007. vol9(1):78.12 中華人民共和國國務(wù)院. 國務(wù)院令第327號 飼料添加劑管理?xiàng)l例Z. 2001. 13 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部. 飼料行政許可申報(bào)材料要求Z.中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第611號.2006七、附錄（一）國際氣候帶穩(wěn)定性長期試驗(yàn)所采用的一般條件是根據(jù)國際氣候帶制定的。將全球分為I、II、III、IV四個國際氣候帶，溫帶主要有英國、北歐、加拿大、俄羅斯；亞熱帶有美國、日本、西歐（葡萄牙-希臘）；干熱帶有伊朗、伊拉克