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微生物學(xué)教程，周德慶，高等教育出版社，1993第1章 緒 論 1、教材： 2、參考書(shū) （1）微生物學(xué)教程，周德慶，高等教育出版社，1993 3、參考雜志 “微生物學(xué)報(bào)”、 “微生物學(xué)通報(bào)”、“微生物學(xué)雜志” 二、微生物與我們 微生物既是人類的敵人，更是人類的朋友！ 微生物是自然界物質(zhì)循環(huán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)； 體內(nèi)的正常菌群是人及動(dòng)物健康的基本保證； 幫助消化、提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、組成生理屏障；微生物可以為我們提供很多有用的物質(zhì)；有機(jī)酸、酶、各種藥物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、醬油等等 基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)； 少數(shù)微生物也是人類的敵人！ 鼠疫；天花；艾滋?。化偱２?；埃博拉病毒。 可以說(shuō)，微生物與人類關(guān)系的重要性，你怎么強(qiáng)調(diào)都不過(guò)分，微生物是一把十分鋒利的雙刃劍，它們?cè)诮o人類帶來(lái)巨大利益的同時(shí)也帶來(lái)“殘忍”的破壞。它給人類帶來(lái)的利益不僅是享受，而且實(shí)際上涉及到人類的生存。 三、微生物的發(fā)現(xiàn)和微生物學(xué)的建立與發(fā)展 （一）古代人民對(duì)微生物的認(rèn)識(shí) （二）微生物的發(fā)現(xiàn)（列文虎克）：1676年，微生物學(xué)的先驅(qū)荷蘭人列文虎克（Antony van leeuwenhoek）首次觀察到了細(xì)菌。 （三）微生物學(xué)的奠基 1 法國(guó)人巴斯德（Louis Pasteur）（18221895） (1) 發(fā)現(xiàn)并證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的； (2) 徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說(shuō)：著名的曲頸瓶試驗(yàn)無(wú)可辯駁地證實(shí)，空氣內(nèi)確實(shí)含有微生物，是它們引起有機(jī)質(zhì)的腐敗。 (3) 免疫學(xué)預(yù)防接種：巴斯德研究了幾種對(duì)人類和牲畜危害很大的疾病，如雞瘟、牛羊炭疽病、人的狂犬病等，并發(fā)現(xiàn)引起這些病害的病原體，制成疫苗，用以預(yù)防和治療疾病，為免疫學(xué)奠定基礎(chǔ)。（挽救了許多人、畜生命） (4)其他貢獻(xiàn) 巴斯德消毒法：6065作短時(shí)間（15-20min）加熱處理，殺死有害微生物的方法。 2 德國(guó)人柯赫（Robert Koch）（ 18431910） （1）微生物學(xué)基本操作技術(shù)方面的貢獻(xiàn) a）細(xì)菌純培養(yǎng)方法的建立；b）設(shè)計(jì)了各種培養(yǎng)基，實(shí)現(xiàn)了在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)各種微生物的培養(yǎng)；c）流動(dòng)蒸汽滅菌；d）染色觀察和顯微攝影； （2）對(duì)病原細(xì)菌的研究作出了突出的貢獻(xiàn) a）具體證實(shí)了炭疽桿菌是炭疽病的病原菌；b）發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌；（1905年獲諾貝爾獎(jiǎng)）；c）證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則著名的柯赫原則 （四）微生物學(xué)發(fā)展過(guò)程中的重大事件Griffith發(fā)現(xiàn)細(xì)菌轉(zhuǎn)化； 1929 Fleming 發(fā)現(xiàn)青霉素 1953 Watson和Crick提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu) t1977 Woese提出古生菌是不同于細(xì)菌和真核生物的特殊類群， 19821983 Prusiner發(fā)現(xiàn)朊病毒(prion) （五）20世紀(jì)的微生物學(xué) 1、十九世紀(jì)中到二十世紀(jì)初微生物學(xué)：鑒定病原菌、研究免疫學(xué)及其在預(yù)防疾病中的作用、尋找化學(xué)治療藥物、分析微生物的化學(xué)活性。 2、20世紀(jì)40年代后，微生物自身的特點(diǎn)使其成為生物學(xué)研究的“明星”，微生物學(xué)很快與生物學(xué)主流匯合，并被推到了整個(gè)生命科學(xué)發(fā)展的前沿，獲得了迅速的發(fā)展，在生命科學(xué)的發(fā)展中作出了巨大的貢獻(xiàn)。 微生物學(xué)的主要分支學(xué)科：按研究對(duì)對(duì)象分 （六）我國(guó)微生物學(xué)的發(fā)展 湯飛凡：沙眼病原體的分離和確證（國(guó)際領(lǐng)先） 陳華癸等：根瘤菌固氮作用的研究（開(kāi)創(chuàng)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)） 抗生素的總產(chǎn)量已耀居世界首位：兩步法生產(chǎn)維生素C的技術(shù)居世界先進(jìn)水平 （七）21世紀(jì)微生物學(xué)展望 2與其他學(xué)科實(shí)現(xiàn)更廣泛的交叉，獲得新的發(fā)展 四、微生物的類群及特點(diǎn) 微生物是微小生物的總稱，一般只有借助顯微鏡才能其進(jìn)行觀察。 微生物類群：病毒；原核生物（真細(xì)菌、古生菌）；真核生物（真菌：酵母、霉菌、蕈菌等，單細(xì)胞藻類；原生動(dòng)物）等 微生物的特點(diǎn) 個(gè)體小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)、胃口大、食譜廣、繁殖快、易培養(yǎng)、數(shù)量大、分布廣、種類多、級(jí)界寬、變異易、抗性強(qiáng)、休眠長(zhǎng)、起源早、發(fā)現(xiàn)晚 個(gè)體小：測(cè)量單位：微米或納米 最?。夯鹦请E石中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌化石（直徑 10 nm）； 最大：德國(guó)科學(xué)家H. N. Schulz等1999年在納米比亞海岸的海底沉積物中發(fā)現(xiàn)的一種硫磺細(xì)菌（sulfur bacterium），其大小可達(dá)0.75 mm，Thiomargarita namibiensis，-“納米比亞硫磺珍珠” 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)：無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)（病毒）；單細(xì)胞；簡(jiǎn)單多細(xì)胞； 胃口大： 食譜廣：微生物獲取營(yíng)養(yǎng)的方式多種多樣，其食譜之廣是動(dòng)植物完全無(wú)法相比的！ 繁殖快：大腸桿菌一個(gè)細(xì)胞重約10 12 克，平均20分鐘繁殖一代； 易培養(yǎng)：很多細(xì)菌都可以非常方便地進(jìn)行人工培養(yǎng)！ 數(shù)量大：在自然界中（土壤、水體、空氣，動(dòng)植物體內(nèi)和體表）都生存有大量的微生物！ 分布廣：人跡可到之處，微生物的分布必然很多，而人跡不到的地方，也有大量的微生物存在！ 種類多：微生物的生理代謝類型多；代謝產(chǎn)物種類多；微生物的種數(shù)“多”； 級(jí)界寬：Whittaker的五界分類系統(tǒng)；Woese三原界分類系統(tǒng) 變異易：青霉素的生產(chǎn)：20單位/ ml（1943），10000單位/ ml 抗（逆）性強(qiáng)： 抗熱：有的細(xì)菌能在265個(gè)大氣壓，250 的條件下生長(zhǎng)；自然界中細(xì)菌生長(zhǎng)的最高溫度可以達(dá)到113 ；有些細(xì)菌的芽孢，需加熱煮沸8小時(shí)才被殺死； 抗寒：有些微生物可以在12 30的低溫生長(zhǎng)； 抗酸堿：細(xì)菌能耐受并生長(zhǎng)的pH范圍：pH 0.5 13； 耐滲透壓：蜜餞、腌制品，飽和鹽水（NaCl, 32%）中都有微生物生長(zhǎng)； 抗壓力：有些細(xì)菌可在1400個(gè)大氣壓下生長(zhǎng)； 第2章 純培養(yǎng)和顯微技術(shù) 培養(yǎng)物：在一定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。 混合培養(yǎng)物：含有多種微生物的培養(yǎng)物；純培養(yǎng)物：只有一種微生物的培養(yǎng)物。 菌落（colony）：?jiǎn)蝹€(gè)（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。 菌苔（lawn）：眾多菌落連成一片。 不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征（形狀、顏色等），可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行分類、鑒定的重要依據(jù) 二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng) 1、稀釋倒平板法：操作較麻煩，對(duì)好氧菌、熱敏感菌效果不好！ 2、涂布平板法：使用較多的常規(guī)方法，但有時(shí)涂布不均勻！ 3、平板劃線法 4、厭氧微生物的分離：厭氧罐；厭氧手套箱；稀釋搖管法。 三、用液體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)稀釋法進(jìn)行液體分離必須在同一個(gè)稀釋度的許多平行試管中，大多數(shù)（一般應(yīng)超過(guò)95%）表現(xiàn)為不生長(zhǎng)。 四、單細(xì)胞（孢子）分離五、選擇培養(yǎng)分離：抑制大多數(shù)其它微生物的生長(zhǎng)；使待分離的微生物生長(zhǎng)更快； 1.利用選擇平板進(jìn)行直接分離高溫下培養(yǎng)：分離嗜熱細(xì)菌；培養(yǎng)基中不含N：分離固氮菌；培養(yǎng)基加抗生素：分離抗性菌；牛奶平板：分離蛋白酶產(chǎn)生菌；顏色反應(yīng)：分離特定的菌株；2. 富集培養(yǎng) 六、二元培養(yǎng)物：大腸桿菌和蛭弧菌 第3章 微生物類群與形態(tài)結(jié)構(gòu) 古生菌在進(jìn)化譜系上與真細(xì)菌及真核生物相互并列，且與后者關(guān)系更近，而其細(xì)胞構(gòu)造卻與真細(xì)菌較為接近，同屬于原核生物。真細(xì)菌（eubacteria）包括：普通細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、枝原體、立克次氏體和衣原體等 第一節(jié) 真細(xì)菌（Eubacteria） 一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu) （一）個(gè)體形態(tài)和排列(P28)：基本形態(tài)：球狀；桿狀；螺旋狀 1、球狀 1）概念：細(xì)胞個(gè)體呈球形或橢圓形。 2）排列：不同種的球菌在細(xì)胞分裂時(shí)會(huì)形成不同的空間排列方式，常被作為分類依據(jù)。 單、雙、鏈、四聯(lián)、八疊、葡萄球菌等。 3）例子A 金黃色葡萄球菌；B 淋病奈瑟氏球菌；C 肺炎鏈球菌 2、桿狀 1）概念：細(xì)胞呈桿狀或圓柱形，一般其粗細(xì)（直徑）比較穩(wěn)定，而長(zhǎng)度則常因培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)條件不同而有較大變化。 2）排列：桿狀細(xì)菌的排列方式常因生長(zhǎng)階段和培養(yǎng)條件而發(fā)生變化，一般不作為分類依據(jù)。 3）例子：A 枯草芽孢桿菌；B 地衣芽孢桿菌；C 銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）；D 結(jié)核分枝桿菌；E 炭疽病的病原菌-炭疽桿菌；F 破傷風(fēng)梭菌 3、螺旋狀：弧菌，螺旋菌、螺旋體菌 弧菌：菌體只有一個(gè)彎曲，其程度不足一圈，形似“C”字或逗號(hào)，鞭毛偏端生。 例子：霍亂弧菌；寄生性弧菌-蛭弧菌 螺旋菌：菌體回轉(zhuǎn)如螺旋，螺旋數(shù)目和螺距大小因種而異。鞭毛二端生。細(xì)胞壁堅(jiān)韌，菌體較硬。 螺旋體菌：菌體柔軟，用于運(yùn)動(dòng)的類似鞭毛的軸絲位于細(xì)胞外鞘內(nèi)。 例子：梅毒密螺旋體 4、其它形狀 柄桿菌（prosthecate bacteria）：細(xì)胞上有柄（stalk）、菌絲（hyphae）、附器（appendages）等細(xì)胞質(zhì)伸出物，細(xì)胞呈桿狀或梭狀，并有特征性的細(xì)柄。 星形細(xì)菌（star-shaped bacteria ）；方形細(xì)菌（square-ahaped bacteria） 4）異常形態(tài) 環(huán)境條件的變化：物理、化學(xué)因子的刺激阻礙細(xì)胞正常發(fā)育；培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)：細(xì)胞衰老；營(yíng)養(yǎng)缺乏；自身代謝產(chǎn)物積累過(guò)多。環(huán)境條件恢復(fù)正常。 （二）大小 1、范圍：最?。号c無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒相仿（50 nm）；最大：肉眼可見(jiàn)（0.75 mm），（Thiomargarita namibiensis）（0.75mm）；最?。簄anobacteria；最大和最小細(xì)菌的個(gè)體大小懸殊： 一般細(xì)菌的大小范圍： 球菌：0.5 m （直徑）m1 m（長(zhǎng)度）mm （直徑） X 1 80 m桿菌：0.2 1 m （直徑） X 1 50m螺旋菌：0.3 1 m（長(zhǎng)度）(長(zhǎng)度是菌體兩端點(diǎn)之間的距離，而非實(shí)際長(zhǎng)度)m 2、測(cè)量方法：顯微鏡測(cè)微尺；顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進(jìn)行測(cè)算； 2、細(xì)菌大小測(cè)量結(jié)果的影響因素（參見(jiàn) P 31） （三）細(xì)胞的結(jié)構(gòu) 一般構(gòu)造：一般細(xì)菌都有的構(gòu)造； 特殊構(gòu)造：部分細(xì)菌具有的或一般細(xì)菌在特殊環(huán)境下才有的構(gòu)造。 1、細(xì)胞壁 1）概念：細(xì)胞壁（cell wall）是位于細(xì)胞表面，內(nèi)側(cè)緊貼細(xì)胞膜的一層較為堅(jiān)韌，略具彈性的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。 2）證實(shí)細(xì)胞壁存在的方法： （1）細(xì)菌超薄切片的電鏡直接觀察； （2）質(zhì)、壁分離與適當(dāng)?shù)娜旧?，可以在光學(xué)顯微鏡下看到細(xì)胞壁； （3）機(jī)械法破裂細(xì)胞后，分離得到純的細(xì)胞壁； （4）制備原生質(zhì)體，觀察細(xì)胞形態(tài)的變化； 3）細(xì)胞壁的功能： （1）固定細(xì)胞外形和提高機(jī)械強(qiáng)度； （2）為細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂和鞭毛運(yùn)動(dòng)所必需； （3）滲透屏障，阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì)（分子量大于800）進(jìn)入細(xì)胞，保護(hù)細(xì)胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物質(zhì)的損傷； （4）細(xì)菌特定的抗原性、致病性以及對(duì)抗生素和噬菌體的敏感性的物質(zhì)基礎(chǔ)； 4）革蘭氏染色與細(xì)胞壁 （1）革蘭氏染色：C.Gram（革蘭）于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細(xì)菌的染色方法。 1、初染：用堿性染料結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染； 2、媒染：用碘溶液進(jìn)行媒染，其作用是提高染料和細(xì)胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固； 3、脫色：用乙醇或丙酮沖洗進(jìn)行脫色。在經(jīng)歷脫色后仍將結(jié)晶紫保留在細(xì)胞內(nèi)的為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，而革蘭氏陰性細(xì)菌的結(jié)晶紫被洗掉，細(xì)胞呈無(wú)色； 4、復(fù)染：用一種與結(jié)晶紫不同顏色堿性染料對(duì)涂片進(jìn)行復(fù)染。例如沙黃，它使原來(lái)無(wú)色的革蘭氏陰性細(xì)菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色，而革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌繼續(xù)保持深紫色。 表3-1 革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌細(xì)胞壁成分的比較（P39） （2）革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁 特點(diǎn)：厚度大（2080nm），化學(xué)組分簡(jiǎn)單，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。 肽聚糖(peptidoglycan)：又稱粘肽(mucopeptide)、胞壁質(zhì)(murein)或粘質(zhì)復(fù)合物(mucocomplex)，是真細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分。 磷壁酸（teichoic acid） A、肽聚糖：厚約2080nm，由40層左右的網(wǎng)格狀分子交織成的網(wǎng)套覆蓋在整個(gè)細(xì)胞上。雙糖單位： 雙糖單位中的-1,4-糖苷鍵很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解，從而引起細(xì)菌因肽聚糖細(xì)胞壁的“散架”而死亡。 B、磷壁酸 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁上特有的化學(xué)成分，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。 壁磷壁酸，它與肽聚糖分子間進(jìn)行共價(jià)結(jié)合，含量會(huì)隨培養(yǎng)基成分而改變，一般占細(xì)胞壁重量的10%，有時(shí)可接近50%。用稀酸或稀堿可以提取。 膜磷壁酸：跨越肽聚糖層并與細(xì)胞膜相交聯(lián)的膜磷壁酸（又稱脂磷壁酸），由甘油磷酸鏈分子與細(xì)胞膜上的磷脂進(jìn)行共價(jià)結(jié)合后形成。其含量與培養(yǎng)條件關(guān)系不大?？捎?5%熱酚水提取，也可用熱水從脫脂的凍干細(xì)菌中提取。 （3）革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁 A、肽聚糖：埋藏在外膜層之內(nèi)，是僅由12層肽聚糖網(wǎng)狀分子組成的薄層(23nm)，含量約占細(xì)胞壁總重的10%，故對(duì)機(jī)械強(qiáng)度的抵抗力較革蘭氏陽(yáng)性菌弱。 B、外膜(outer membrane)：位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外層，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜，有時(shí)也稱為外壁。 脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚（810nm）的類脂多糖類物質(zhì)。 組成：類脂A；核心多糖(core polysaccharide)； O-特異側(cè)鏈（O-specific side chain，或稱O-多糖或O-抗原） 脂多糖的主要功能： LPS結(jié)構(gòu)的多變，決定了革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞表面抗原決定簇的多樣性； LPS負(fù)電荷較強(qiáng)，與磷壁酸相似，也有吸附Mg2+、Ca2+等陽(yáng)離子以提高其在細(xì)胞表面濃度的作用，對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)起穩(wěn)定作用。 類脂A是革蘭氏陰性細(xì)菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ)；具有控制某些物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能；許多噬菌體在細(xì)胞表面的吸附受體。 C、外膜蛋白(outer membrane protein) 嵌合在LPS和磷脂層外膜上的蛋白。有20余種，但多數(shù)功能尚不清楚?？椎鞍?；脂蛋白 D、周質(zhì)空間(periplasmic space, periplasm) 又稱壁膜間隙。在革蘭氏陰性細(xì)菌中，一般指其外膜與細(xì)胞膜之間的狹窄空間（寬約1215nm），呈膠狀。周質(zhì)空間是進(jìn)出細(xì)胞的物質(zhì)的重要中轉(zhuǎn)站和反應(yīng)場(chǎng)所在周質(zhì)空間中，存在著多種周質(zhì)蛋白（periplasmic proteins）： 水解酶類；結(jié)合蛋白；受體蛋白； （4）革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌的比較 革蘭氏染色的原理（參見(jiàn)P46） 5）特殊細(xì)胞壁的細(xì)菌：某些分枝桿菌和諾卡氏菌的細(xì)胞壁主要由一類被稱為霉菌酸（Mycolic acid）的枝鏈羥基脂質(zhì)組成，后者被認(rèn)為與這些細(xì)菌感染能力有關(guān)。用抗酸性染色對(duì)宿主體內(nèi)的分枝桿菌病原體進(jìn)行檢測(cè)。 6）細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌： 缺壁突變L型細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)形成 基本去盡原生質(zhì)體（G+）部分去除球狀體（G-） 在自然界長(zhǎng)期進(jìn)化中形成枝原體 （1）L型細(xì)菌（L-form of bacteria） 細(xì)菌在某些環(huán)境條件下（實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)）通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷變異型。因英國(guó)李斯德（Lister）預(yù)防研究所首先發(fā)現(xiàn)而得名（1935年，念珠狀鏈桿菌 Streptobacillus moniliformis） 特點(diǎn)： 沒(méi)有完整而堅(jiān)韌的細(xì)胞壁，細(xì)胞呈多形態(tài)；有些能通過(guò)細(xì)菌濾器，故又稱“濾過(guò)型細(xì)菌”；對(duì)滲透敏感，在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落（直徑在0.1mm左右）； （2）原生質(zhì)體（protoplast） 在人為條件下，用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生細(xì)胞壁合成而形成的由一層細(xì)胞膜包裹的，圓球形、對(duì)滲透壓變化敏感的細(xì)胞，一般由革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌形成。特點(diǎn)：對(duì)環(huán)境條件變化敏感，低滲透壓、振蕩、離心甚至通氣等都易引起其破裂；有的原生質(zhì)體具有鞭毛，但不能運(yùn)動(dòng)，也不被相應(yīng)噬菌體所感染；在適宜條件（如高滲培養(yǎng)基）可生長(zhǎng)繁殖、形成菌落，形成芽孢。及恢復(fù)成有細(xì)胞壁的正常結(jié)構(gòu)。比正常有細(xì)胞壁的細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì)，是研究遺傳規(guī)律和進(jìn)行原生質(zhì)體育種的良好實(shí)驗(yàn)材料。 （3）球狀體(sphaeroplast)：又稱原生質(zhì)球采用上述同樣方法，針對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌處理后：而獲得的殘留部分細(xì)胞壁（外壁層）的球形體。與原生質(zhì)體相比，它對(duì)外界環(huán)境具有一定的抗性，可在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。 （4）枝原體(Mycoplasma)在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的、適應(yīng)自然生活條件的無(wú)細(xì)胞壁的原核生物。因它的細(xì)胞膜中含有一般原核生物所沒(méi)有的甾醇，? 所以即使缺乏細(xì)胞壁，其細(xì)胞膜仍有較高的機(jī)械強(qiáng)度。 2、細(xì)胞膜 細(xì)胞質(zhì)膜（cytoplasmic membrane），又稱質(zhì)膜（plasma membrane）、細(xì)胞膜（cell membrane）或內(nèi)膜（inner membrane），是緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜，厚約78nm，由磷脂（占20%30%）和蛋白質(zhì)（占50%70%） 組成。 2）觀察方法： 質(zhì)壁分離后結(jié)合鑒別性染色在光學(xué)顯微鏡下觀察；原生質(zhì)體破裂； 超薄切片電鏡觀察 3）細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型： （1）磷脂：膜蛋白約占細(xì)菌細(xì)胞膜的50%70%，比任何一種生物膜都高，而且種類也多。細(xì)胞膜是一個(gè)重要的代謝活動(dòng)中心。 （3）液態(tài)鑲嵌模型(fluid mosaic model) （4）甾醇類物質(zhì) 4）細(xì)胞膜的生理功能：（參見(jiàn)P 48） 5）間體（mesosome，或中體）：細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造，其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見(jiàn)于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物 1）概念：細(xì)胞質(zhì)（cytoplasm）是細(xì)胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。含水量約80%。細(xì)胞質(zhì)的主要成分為核糖體、貯藏物、多種酶類和中間代謝物、質(zhì)粒、各種營(yíng)養(yǎng)物和大分子的單體等，少數(shù)細(xì)菌還有類囊體、羧酶體、氣泡或伴孢晶體等。2）顆粒狀貯藏物(reserve materials)：貯藏物是一類由不同化學(xué)成分累積而成的不溶性沉淀顆粒，主要功能是貯存營(yíng)養(yǎng)物。 聚-羥丁酸(poly-hydroxybutyrate, PHB)：類脂性質(zhì)的碳源類貯藏物它無(wú)毒、可塑、易降解，被認(rèn)為是生產(chǎn)醫(yī)用塑料、生物降解塑料的良好原料。 多糖類貯藏物：在真細(xì)菌中以糖原為多糖原粒較小，不染色需用電鏡觀察，用碘液染成褐色，可在光學(xué)顯微鏡下看到。有的細(xì)菌積累淀粉粒，用碘液染成深蘭色。 異染粒(metachromatic granules)大小：為0.51.0m，成份：無(wú)機(jī)偏磷酸的聚合物，功能：1）貯藏磷元素和能量，2）降低細(xì)胞的滲透壓。一般在含磷豐富的環(huán)境下形成。 藻青素（cyanophycin）：一種內(nèi)源性氮源貯藏物。通常存在于藍(lán)細(xì)菌中。 硫粒（sulfur globules）：很多真細(xì)菌在進(jìn)行產(chǎn)能代謝或生物合成時(shí)，常涉及對(duì)還原性的硫化物如H2S，硫代硫酸鹽等的氧化。在環(huán)境中還原性硫素豐富時(shí)，常在細(xì)胞內(nèi)以折光性很強(qiáng)的硫粒的形式積累硫元素。當(dāng)環(huán)境中環(huán)境中還原性硫缺乏時(shí)，可被細(xì)菌重新利用。 3）磁小體(megnetosome)： 4）羧酶體(carboxysome)：一些自養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物其大小與噬菌體相仿，約10nm，內(nèi)含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶，在自養(yǎng)細(xì)菌的CO2固定中起著關(guān)鍵作用。 5）氣泡（gas vocuoles）：許多光合營(yíng)養(yǎng)型、無(wú)鞭毛運(yùn)動(dòng)的水生細(xì)菌中存在的充滿氣體的泡囊狀內(nèi)含物，大小為0.21.0m75nm，內(nèi)由數(shù)排柱形小空泡組成，外有2nm厚的蛋白質(zhì)膜包裹。 功能：調(diào)節(jié)細(xì)胞比重以使細(xì)胞漂浮在最適水層中獲取光能、O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 氣泡的膜只含蛋白質(zhì)而無(wú)磷脂。二種蛋白質(zhì)相互交連，形成一個(gè)堅(jiān)硬的結(jié)構(gòu)，可耐受一定的壓力。膜的外表面親水，而內(nèi)側(cè)絕對(duì)疏水，故氣泡只能透氣而不能透過(guò)水和溶質(zhì)。 6）載色體（Chromatophore）：光合細(xì)菌進(jìn)行光合作用的部位相當(dāng)于綠色植物的葉綠體。 7）核糖體（ribosome）：組成：70S=50S（大）+ 30S（?。┕δ埽旱鞍踪|(zhì)合成場(chǎng)所。 4、核區(qū)（nuclear region or area）：原核生物所特有的無(wú)核膜結(jié)構(gòu)、無(wú)固定形態(tài)的原始細(xì)胞核。5、特殊的休眠構(gòu)造芽孢 1）概念：某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體，稱為芽孢（endospore或spore，偶譯“內(nèi)生孢子”）。 2）細(xì)菌芽孢的特點(diǎn)：整個(gè)生物界中抗逆性最強(qiáng)的生命體，是否能消滅芽孢是衡量各種消毒滅菌手段的最重要的指標(biāo)。 芽孢是細(xì)菌的休眠體，在適宜的條件下可以重新轉(zhuǎn)變成為營(yíng)養(yǎng)態(tài)細(xì)胞； 產(chǎn)芽孢細(xì)菌的保藏多用其芽孢。產(chǎn)芽孢的細(xì)菌多為桿菌，也有一些球菌。 芽孢的有無(wú)、形態(tài)、大小和著生位置是細(xì)菌分類和鑒定中的重要指標(biāo)。 芽孢與營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞相比化學(xué)組成存在較大差異，容易在光學(xué)顯微鏡下觀察。（相差顯微鏡直接觀察；芽孢染色） 4）芽孢的耐熱機(jī)制：滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說(shuō)。 芽孢衣對(duì)多價(jià)陽(yáng)離子和水分的透性很差皮層的離子強(qiáng)度很高，產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分，結(jié)果造成皮層的充分膨脹。核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，具極強(qiáng)的耐熱性。（參見(jiàn)P52圖3-13） 5）伴孢晶體（parasporal crystal）：少數(shù)芽孢桿菌，例如蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)在其形成芽孢的同時(shí)，會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體內(nèi)毒素，稱為伴孢晶體。特點(diǎn)：不溶于水，對(duì)蛋白酶類不敏感；容易溶于堿性溶劑。伴孢晶體對(duì)200多種昆蟲(chóng)尤其是鱗翅目的幼蟲(chóng)有毒殺作用，因而可將這類產(chǎn)伴孢晶體的細(xì)菌制成有利于環(huán)境保護(hù)的生物農(nóng)藥細(xì)菌殺蟲(chóng)劑。 6、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造糖被（glycocalyx） 1) 概念：包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。糖被按其有無(wú)固定層次、層次厚薄又可細(xì)分為莢膜（capsule或macrocapsule，大莢膜）、微莢膜(microcapsule)、粘液層(slime layer)和菌膠團(tuán)(zoogloea)。 2）特點(diǎn)： （1）主要成分是多糖、多肽或蛋白質(zhì)，尤以多糖居多。經(jīng)特殊的莢膜染色，特別是負(fù)染色（又稱背景染色）后可在光學(xué)顯微鏡清楚地觀察到它的存在。 （2）產(chǎn)生糖被是微生物的一種遺傳特性，其菌落特征及血清學(xué)反應(yīng)是是細(xì)菌分類鑒定的指標(biāo)之一。 （3）莢膜等并非細(xì)胞生活的必要結(jié)構(gòu)，但它對(duì)細(xì)菌在環(huán)境中的生存有利。（詳見(jiàn)P 57-58）（4）細(xì)菌糖被與人類的科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐有密切的關(guān)系。（詳見(jiàn)P58） 7、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造 鞭毛(flagellum,復(fù)flagella) 1) 概念：某些細(xì)菌細(xì)胞表面著生的一至數(shù)十條長(zhǎng)絲狀、螺旋形的附屬物，具有推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)功能，為細(xì)菌的“運(yùn)動(dòng)器官”。 醫(yī)學(xué)全在線友情提供 鞭毛的有無(wú)和著生方式具有十分重要的分類學(xué)意義：?jiǎn)味吮廾?；端生叢毛；兩端生鞭毛；周生鞭毛等?2）觀察和判斷細(xì)菌鞭毛的方法 電子顯微鏡直接觀察； 光學(xué)顯微鏡下觀察：鞭毛染色和暗視野顯微鏡； 根據(jù)培養(yǎng)特征判斷：半固體穿刺、菌落（菌苔）形態(tài)。 8、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造菌毛(fimbria，復(fù)數(shù)fimbriae)：長(zhǎng)在細(xì)菌體表的纖細(xì)、中空、短直、數(shù)量較多的蛋白質(zhì)類附屬物，具有使菌體附著于物體表面的功能。 每個(gè)細(xì)菌約有250300條菌毛。有菌毛的細(xì)菌一般以革蘭氏陰性致病菌居多，借助菌毛可把它們牢固地粘附于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道等的粘膜上，進(jìn)一步定殖和致病。9、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造 性毛(pili,單數(shù)pilus)構(gòu)造和成分與菌毛相同，但比菌毛長(zhǎng)，數(shù)量?jī)H一至少數(shù)幾根。性毛一般見(jiàn)于革蘭氏陰性細(xì)菌的雄性菌株（即供體菌）中，其功能是向雌性菌株（即受體菌）傳遞遺傳物質(zhì)。有的性毛還是RNA噬菌體的特異性吸附受體。 二、放線菌 （一）概念：在形態(tài)上具有分枝狀菌絲、菌落形態(tài)與霉菌相似，以孢子進(jìn)行繁殖?！敖橛诩?xì)菌與絲狀真菌之間又接近細(xì)菌的一類絲狀原核生物”放線菌：1）屬于原核微生物，2）細(xì)胞形態(tài)為分枝狀菌絲。 （二）形態(tài)與結(jié)構(gòu) 單細(xì)胞，大多由分枝發(fā)達(dá)的菌絲組成； 菌絲直徑與桿菌類似，約1mm； 細(xì)胞壁組成與細(xì)菌類似，革蘭氏染色陽(yáng)性（少數(shù)陰性）； 細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與細(xì)菌基本相同； 按形態(tài)和功能可分為營(yíng)養(yǎng)、氣生和孢子絲三種。 1、營(yíng)養(yǎng)菌絲：匍匐生長(zhǎng)于培養(yǎng)基內(nèi)，吸收營(yíng)養(yǎng)，也稱基內(nèi)菌絲。一般無(wú)隔膜，直徑0.2-0.8 mm，長(zhǎng)度差別很大，有的可產(chǎn)生色素。 2、氣生菌絲：營(yíng)養(yǎng)菌絲發(fā)育到一定階段，伸向空間形成氣生菌絲，疊生于營(yíng)養(yǎng)菌絲上，可覆蓋整個(gè)菌落表面。在光學(xué)顯微鏡下觀察，顏色較深，直徑較粗（1-1.4 mm），有的產(chǎn)色素。 3、孢子絲：氣生菌絲發(fā)育到一定階段，其上可分化出形成孢子的菌絲，即孢子絲，又稱產(chǎn)孢絲或繁殖菌絲。其形狀和排列方式因種而異，常被作為對(duì)放線菌進(jìn)行分類的依據(jù)。 （三）生長(zhǎng)與繁殖繁殖方式： 1）無(wú)性孢子；存在多種孢子形成方式 2）菌絲斷裂：常見(jiàn)于液體培養(yǎng)中。 （四）菌落形態(tài) 1）能產(chǎn)生大量分枝和氣生菌絲的菌種（如鏈霉菌）：菌落質(zhì)地致密，與培養(yǎng)基結(jié)合緊密，小而不蔓延，不易挑起或挑起后不易破碎。 2）不能產(chǎn)生大量菌絲體的菌種（如諾卡氏菌）：粘著力差，粉質(zhì)，針挑起易粉碎 （五）分布特點(diǎn)及與人類的關(guān)系 1）放線菌常以孢子或菌絲狀態(tài)極其廣泛地存在于自然界，土壤中最多，其代謝產(chǎn)物使土壤具有特殊的泥腥味。 2）能產(chǎn)生大量的、種類繁多的抗生素（其中90%由鏈霉菌產(chǎn)生）。 3）有的放線菌可用于生產(chǎn)維生素、酶制制；此外，在甾體轉(zhuǎn)化、石油脫蠟、烴類發(fā)酵、污水處理等方面也有應(yīng)用； 4）少數(shù)寄生型放線菌可引起人、動(dòng)物（如皮膚、腦、肺和腳部感染）、植物（如馬鈴薯和甜菜的瘡痂?。┑募膊?。三、支原體、立克次氏體和衣原體革蘭氏陰性細(xì)菌，其大小和特性均介于通常的細(xì)菌與病毒之間。 （一）立克次氏體（Rickettsia） 1、概念：立克次氏體是大小介于通常的細(xì)菌與病毒之間，在許多方面類似細(xì)菌，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核微生物。 2、特性 1）某些性質(zhì)與病毒相近： a專性活細(xì)胞寄生物，除五日熱（戰(zhàn)壕熱）立克次氏體（Rickettsia wolhynica）外均不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖。 b體內(nèi)酶系不完全，一些必需的養(yǎng)料需從宿主細(xì)胞獲得； c 細(xì)胞膜比一般細(xì)菌的膜疏松； d大小介于病毒與一般細(xì)菌之間。 2）從一種宿主傳至另一宿主的特殊生活方式主要媒介：節(jié)肢動(dòng)物（虱、蜱、螨等）。通過(guò)節(jié)肢動(dòng)物叮咬和排泄物傳播給人和其他動(dòng)物。有的立克次氏體釀成嚴(yán)重疾病，如人類的流行性斑疹傷寒、羌蟲(chóng)熱、Q熱等。 （二）支原體（Mycoplasma） 1、概念：又稱類菌質(zhì)體，是介于一般細(xì)菌與立克次氏體之間的原核微生物。 2、特性 1）無(wú)細(xì)胞壁，只有細(xì)胞膜，細(xì)胞形態(tài)多變； 2）個(gè)體很小，能通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器，曾被認(rèn)為是最小的可獨(dú)立生活的細(xì)胞型生物。 球狀體：0.2-0.25 m，最小達(dá)0.1 m； 絲狀體：最長(zhǎng)可達(dá)150 m，因細(xì)胞柔軟且具扭曲性，致使細(xì)胞能通過(guò)孔徑比自身小得多的過(guò)濾器。 3）可進(jìn)行人工培養(yǎng)，但營(yíng)養(yǎng)要求苛刻，菌落微小，呈典型的 “油煎荷包蛋”形狀； 4）一些支原體能引起人類、牲畜、家禽和作物的病害疾病； 5）應(yīng)用活組織細(xì)胞培養(yǎng)病毒或體外組織細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常被支原體污染。 （三）衣原體（Chlamydia） 1、概念：介于立克次氏體與病毒之間，能通過(guò)細(xì)菌濾器，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的一類原核微生物。過(guò)去誤認(rèn)為“大病毒”，但它們的生物學(xué)特性更接近細(xì)菌而不同于病毒。 2、特性 1）細(xì)胞結(jié)構(gòu)與細(xì)菌類似； 2）細(xì)胞呈球形或橢圓形，直徑0.2-0.3 m，能通過(guò)細(xì)菌濾器；具有類似的細(xì)胞壁，細(xì)胞壁內(nèi)也含有胞壁酸、二氨基庚二酸；70S核糖體也是由30S和50S二個(gè)亞基組成； 3）專性活細(xì)胞內(nèi)寄生：衣原體有一定的代謝活性，能進(jìn)行有限的大分子合成，但缺乏產(chǎn)生能量的系統(tǒng)，必須依賴宿主獲得ATP，因此又被稱為“能量寄生型生物”。 4）在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖具有獨(dú)特的生活周期，即存在原體和始體兩種形態(tài)。（參見(jiàn)P350）5）衣原體廣泛寄生于人類、哺乳動(dòng)物及鳥(niǎo)類，少數(shù)致??； 沙眼衣原體是人類砂眼的病原體，甚至引起結(jié)膜炎、角膜炎、等臨床癥狀，成為致盲的重要原因。 四、粘細(xì)菌（myxobacteria） 一、概念：粘細(xì)菌又名子實(shí)粘細(xì)菌，是一類具有最復(fù)雜的行為模式和生活史的原核微生物。二、生活史 1、營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞：桿狀、柔軟、缺乏堅(jiān)硬的細(xì)胞壁，無(wú)鞭毛，產(chǎn)生粘液，可在固體表面作“滑行”運(yùn)動(dòng)，以分裂方式進(jìn)行繁殖。 2、子實(shí)體：營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育到一定階段，在適宜的條件下形成形態(tài)各異，肉眼可見(jiàn)的子實(shí)體。五、蛭弧菌（Bdellovibrio） （一）概念：寄生于其它細(xì)菌并導(dǎo)致其裂解的一類弧菌，其行為類似噬菌體。 （二）用途：可能成為防治有害細(xì)菌的一種有力武器。 六、藍(lán)細(xì)菌（Cyanobacteria） 1、概念：也稱藍(lán)藻或藍(lán)綠藻（blue-green algae），是一類含有葉綠素a、能以水作為供氫體和電子供體、通過(guò)光合作用將光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能、同化CO2為有機(jī)物質(zhì)的光合細(xì)菌。以前曾歸于藻類，因?yàn)樗透叩戎参镆粯泳哂泄夂蜕兀ㄈ~綠素a），能進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用。第二節(jié) 古生菌（Archaea） 一、概念的提出：1977年，Carl Woese以16S 原名：古細(xì)菌（Archaebacteria）；后改名：古生菌（Archaea）t多生活于一些生存條件十分惡劣的極端環(huán)境中，例如高溫、高鹽、高酸等。trRNA序列比較為依據(jù)，提出的獨(dú)立于真細(xì)菌和真核生物之外的生命的第三種形式。在分類地位上與真細(xì)菌和真核生物并列為三域（Domain），并且在進(jìn)化譜系上更接近真核生物。在細(xì)胞構(gòu)造上與真細(xì)菌較為接近，同屬原核生物。 二、細(xì)胞形態(tài)：在顯微鏡下，古生菌與細(xì)菌具有類似的個(gè)體形態(tài)。 三、細(xì)胞結(jié)構(gòu)：在細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能上，古生菌既有類似真細(xì)菌之處，也有類似真核生物之處，還具有一些自己獨(dú)特的特點(diǎn)。 （一）細(xì)胞壁：具有與真細(xì)菌類似功能的細(xì)胞壁；細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分均差別甚大；已研究過(guò)的一些古生菌，它們細(xì)胞壁中沒(méi)有真正的肽聚糖，而是由多糖（假肽聚糖）、糖蛋白或蛋白質(zhì)構(gòu)成的。 （三）細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物：無(wú)復(fù)雜內(nèi)膜的細(xì)胞器，核糖體為70 S。 （四）核區(qū)：沒(méi)有具有核仁、核摸的細(xì)胞核，染色體DNA為共價(jià)閉和環(huán)狀。 第三節(jié) 真核微生物 真核微生物的特征：細(xì)胞核具有核膜；能進(jìn)行有絲分裂；細(xì)胞質(zhì)中存在線粒體或同時(shí)存在葉綠體等細(xì)胞器； 真菌：是一類低等真核生物， 特點(diǎn)： 1、核：具有細(xì)胞核，進(jìn)行有絲分裂； 2、細(xì)胞器：細(xì)胞質(zhì)中含有線粒體但沒(méi)有葉綠體，不進(jìn)行光合作用，無(wú)根、莖、葉的分化； 3、繁殖：以產(chǎn)生有性孢子和無(wú)性孢子二種形式進(jìn)行繁殖； 4、營(yíng)養(yǎng)方式：為化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)（異養(yǎng)）、好氧； 5、運(yùn)動(dòng)：不運(yùn)動(dòng)（僅少數(shù)種類的游動(dòng)孢子有1-2根鞭毛）； 6、種類：繁多，形態(tài)各異、大小懸殊，細(xì)胞結(jié)構(gòu)多樣。 一、霉菌 （一）概念：霉菌（mold）是一些“絲狀真菌”的統(tǒng)稱，不是分類學(xué)上的名詞。霉菌菌體均由分枝或不分枝的菌絲（hypha）構(gòu)成。許多菌絲交織在一起，稱為菌絲體（mycelium）。（參見(jiàn)P33） （二）分布特點(diǎn)及與人類的關(guān)系 （三）形態(tài)結(jié)構(gòu) 1、菌絲： 1）細(xì)胞形態(tài)：無(wú)隔膜菌絲；有隔膜菌絲 m，比一般細(xì)菌和放線菌菌絲大幾到幾十倍。m2）菌絲功能：營(yíng)養(yǎng)菌絲；氣生菌絲；繁殖菌絲霉菌菌絲直徑約為210 2、菌絲的特化：1）菌環(huán)；2）菌網(wǎng)；3）附枝：匍匐菌絲、假根（類似樹(shù)根，吸收營(yíng)養(yǎng)），功能是固著和吸收營(yíng)養(yǎng)。4）附著枝；5）吸器；6）附著胞；7）菌核；8）子座等 3、細(xì)胞結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁的化學(xué)成分。 （四）菌落：由粗而長(zhǎng)的分枝狀菌絲組成，菌落疏松，呈絨毛狀、絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀，比細(xì)菌菌落大幾倍到幾十倍，有的沒(méi)有固定大小。各種霉菌，在一定培養(yǎng)基上形成的菌落大小、形狀、顏色等相對(duì)穩(wěn)定，所以菌落特征也為分類依據(jù)之一。 （五）霉菌繁殖方式及生活史霉菌的繁殖方式：無(wú)性孢子；有性孢子；菌絲斷片 1）無(wú)性孢子繁殖：無(wú)性孢子有：厚垣孢子、節(jié)孢子、分生孢子、孢囊孢子等。 2）有性孢子繁殖：兩個(gè)性細(xì)胞結(jié)合產(chǎn)生新個(gè)體的過(guò)程： a）質(zhì)配：兩個(gè)性細(xì)胞結(jié)合，細(xì)胞質(zhì)融合，成為雙核細(xì)胞每個(gè)核均含單倍染色體（n+n）。 b）核配：兩個(gè)核融合，成為二倍體接合子核，此時(shí)核的染色體數(shù)是二倍（2n）。 c）減數(shù)分裂：具有雙倍體的細(xì)胞核經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂，核中的染色體數(shù)目又恢復(fù)到單倍體狀態(tài)（n）。 e）霉菌的有性孢子包括接合孢子、卵孢子、子囊孢子等。半知菌：有一些霉菌，至今尚未發(fā)現(xiàn)其生活史中有有性繁殖階段，這類真菌稱為半知菌 二、酵母菌 （一）概念：酵母菌（yeast）是一群?jiǎn)渭?xì)胞的真核微生物。這個(gè)術(shù)語(yǔ)也是無(wú)分類學(xué)意義的普通名稱，通常用于以芽殖或裂殖來(lái)進(jìn)行無(wú)性繁殖單細(xì)胞真菌，以與霉菌區(qū)分開(kāi)。有些可產(chǎn)生子囊孢子進(jìn)行有性繁殖。（參見(jiàn)P34） （二）分布及與人類的關(guān)系1、多分布在含糖的偏酸性環(huán)境，也稱為“糖菌”。 （三）形態(tài)結(jié)構(gòu)1、個(gè)體形態(tài)形態(tài)：卵圓、圓、圓柱、梨形等單細(xì)胞， 大小：細(xì)胞直徑一般比細(xì)菌粗10倍左右； 假菌絲：有的酵母菌子代細(xì)胞連在一起成為鏈狀。2、細(xì)胞結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁的化學(xué)成分。 （四）菌落特征：與細(xì)菌菌落類似，但一般較細(xì)菌菌落大且厚，表面濕潤(rùn)，粘稠，易被挑起，多為乳白色，少數(shù)呈紅色。 （五）繁殖方式和生活史 1、無(wú)性繁殖1）芽殖；2）裂殖 2、有性繁殖：酵母菌以形成子囊和子囊孢子的形式進(jìn)行有性繁殖。 3、生活史：酵母菌單倍體和雙倍體細(xì)胞均可獨(dú)立存在，有三種類型： 1）單倍體型：營(yíng)養(yǎng)體只能以單倍體形式存在（核配后立即進(jìn)行減數(shù)分裂） 2）雙倍體型：營(yíng)養(yǎng)體只能以雙倍體形式存在（核配后不立即進(jìn)行減數(shù)分裂） 3）單雙倍體型：營(yíng)養(yǎng)體既可以單倍體也可以雙倍體形式存在，都可進(jìn)行出芽繁殖。 假酵母：酵母菌中尚未發(fā)現(xiàn)其有性階段的酵母 第四章 微生物的營(yíng)養(yǎng) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：那些能夠滿足微生物機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理活動(dòng)所需的物質(zhì)。 營(yíng)養(yǎng)：微生物獲得和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程 第一節(jié) 微生物的營(yíng)養(yǎng)要求 一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成 二、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能 三、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：自養(yǎng)型生物；異養(yǎng)型生物生物生長(zhǎng)過(guò)程中能量的來(lái)源：光能營(yíng)養(yǎng)型；化能營(yíng)養(yǎng)型光能自養(yǎng)型：以光為能源，不依賴任何有機(jī)物即可正常生長(zhǎng) 光能異養(yǎng)型：以光為能源，但生長(zhǎng)需要一定的有機(jī)營(yíng)養(yǎng) 化能自養(yǎng)型：以無(wú)機(jī)物的氧化獲得能量，生長(zhǎng)不依賴有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物 化能異養(yǎng)型：以有機(jī)物的氧化獲得能量，生長(zhǎng)依賴于有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 三、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型 1光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型（光能自養(yǎng)型）碳源：以CO2為主要唯一或主要碳源；能源：進(jìn)行光合作用獲取生長(zhǎng)所需要的能量；供氫體：以無(wú)機(jī)物如H2、H2S、S等作為供氫體或電子供體，使CO2還原為細(xì)胞物質(zhì)； 例子：1）藻類及藍(lán)細(xì)菌等和植物一樣，以水為電子供體，進(jìn)行產(chǎn)氧型的光合作用。 2）紅硫細(xì)菌，以H2S為電子供體，合成細(xì)胞物質(zhì)，并伴隨硫元素的產(chǎn)生。 2光能有機(jī)異養(yǎng)型（光能異養(yǎng)型）碳源：不能以CO2為主要或唯一的碳源；供氫體：有機(jī)物為供氫體，利用光能將CO2還原為細(xì)胞物質(zhì)；在生長(zhǎng)時(shí)大多數(shù)需要外源的生長(zhǎng)因子； 例子：紅螺菌屬中的一些細(xì)菌能利用異丙醇作為供氫體，將CO2還原成細(xì)胞物質(zhì)，同時(shí)積累丙酮。 3化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型（化能自養(yǎng)型）碳源：以CO2或碳酸鹽作為唯一或主要碳源， 能源：無(wú)機(jī)物氧化過(guò)程中放出的化學(xué)能；電子供體：利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等?；軣o(wú)機(jī)自養(yǎng)型只存在于微生物中，可在完全無(wú)機(jī)及無(wú)光的環(huán)境中生長(zhǎng)。 意義：它們廣泛分布于土壤及水環(huán)境中, 參與地球物質(zhì)循環(huán)。 4化能有機(jī)異養(yǎng)型（化能異養(yǎng)型）碳源：主要是一些有機(jī)化合物，如淀粉、糖類、纖維素、有機(jī)酸等。能源：有機(jī)物氧化過(guò)程中放出的化學(xué)能； 例子：1）大多數(shù)細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物都是化能有機(jī)異養(yǎng)型微生物；腐生型(metatrophy)：可利用無(wú)生命的有機(jī)物(如動(dòng)植物尸體和殘?bào)w)作為碳源；寄生型(paratrophy)：寄生在活的寄主機(jī)體內(nèi)吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),離開(kāi)寄主就不能生存；在腐生型和寄生型之間還存在中間類型： 兼性腐生型(facultive metatrophy)； 兼性寄生型(facultive paratrophy)； 注：不同營(yíng)養(yǎng)類型之間的界限并非絕對(duì)（P82）： 1）異養(yǎng)型微生物并非絕對(duì)不能利用CO2； 2）自養(yǎng)型微生物也并非不能利用有機(jī)物進(jìn)行生長(zhǎng)； 5營(yíng)養(yǎng)缺陷型：某些菌株發(fā)生突變(自然突變或人工誘變)后，失去合成某種(或某些)對(duì)該菌株生長(zhǎng)必不可少的物質(zhì)(通常是生長(zhǎng)因子如氨基酸、維生素)的能力，必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長(zhǎng)繁殖，這種突變型菌株稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型(auxotroph)，相應(yīng)的野生型菌株稱為原養(yǎng)型(prototroph)。 第二節(jié) 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基（medium）：是人工配制的，適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長(zhǎng)所需要六大營(yíng)養(yǎng)要素：碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、能源、生長(zhǎng)因子、水。 注：任何培養(yǎng)基一旦配成，必須立即進(jìn)行滅菌處理（參見(jiàn)P85）； 常規(guī)高壓蒸汽滅菌：1.05kg/cm2, 121.315-30分鐘；0.56kg/cm2, 112.6 15-30分鐘； 某些成分進(jìn)行分別滅菌；過(guò)濾除菌； 一、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則和方法 1、選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)； 2、營(yíng)養(yǎng)物的濃度及配比合適； 3、物理、化學(xué)條件適宜； 4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約； 5、精心設(shè)計(jì)、試驗(yàn)比較：進(jìn)行生態(tài)模擬，研究某種微生物的培養(yǎng)條件； 文獻(xiàn)查閱，設(shè)計(jì)特定微生物的培養(yǎng)基配方； 試驗(yàn)比較，確定特定微生物的最佳培養(yǎng)條件。 通常培養(yǎng)pH條件：細(xì)菌與放線菌：pH77.5；酵母菌和霉菌：pH4.56范圍內(nèi)生長(zhǎng)；水活度：在天然環(huán)境中，微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量。 二、培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用 1按成份不同劃分：天然培養(yǎng)基(complex medium)：以化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物組成合成培養(yǎng)基(synthetic medium)：是由化學(xué)成份完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基，也稱化學(xué)限定培養(yǎng)基(chemically defined medium)。 2根據(jù)物理狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)基； 3按用途劃分： 1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimum medium)：在一定條件下含有某種微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，也稱為基本培養(yǎng)基。 2）完全培養(yǎng)基(complete medium)：在一定條件下含有某種微生物生長(zhǎng)繁殖所需的所有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是枯草芽孢桿菌等的完全培養(yǎng)基。 3）加富培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基(enrichment medium)加富培養(yǎng)基：在普通培養(yǎng)基（如肉湯蛋白胨培養(yǎng)基）中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：血液、血清、酵母浸膏、動(dòng)植物組織液等。 用途：培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物。富集培養(yǎng)基：根據(jù)待分離微生物的特點(diǎn)設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，用于從環(huán)境中富集和分離某種微生物。（目的微生物在這種培養(yǎng)基中較其他微生物生長(zhǎng)速度快，并逐漸富集而占優(yōu)勢(shì)，從而容易達(dá)到分離該種微生物的目的。） 4）鑒別培養(yǎng)基(differential medium)用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征性變化，根據(jù)這種特征性變化，可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開(kāi)來(lái)。 5）選擇培養(yǎng)基(selective medium)用于將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng)。 第三節(jié) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞 一、簡(jiǎn)單擴(kuò)散(diffusion)特點(diǎn)： 被動(dòng)的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式；物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程中不消耗能量；不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比。擴(kuò)散并不是微生物細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要方式，水是唯一可以通過(guò)擴(kuò)散自由通過(guò)原生質(zhì)膜的分子，脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些氣體分子(O2、CO2)及某些氨基酸在一定程度上也可通過(guò)擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞。 二、促進(jìn)擴(kuò)散(facilitated diffusion)特點(diǎn)： 被動(dòng)的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式；物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程中不消耗能量；參與運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)在運(yùn)輸過(guò)程中不發(fā)生化學(xué)變化；不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比；有載體(carrier)參與。通過(guò)促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)需要借助與載體(carrier)的作用才能進(jìn)入細(xì)胞，而且每種載體只運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì)，具有較高的專一性。被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)：氨基酸、單糖、維生素、無(wú)機(jī)鹽等 三、主動(dòng)運(yùn)輸(active transport)特點(diǎn)：主動(dòng)的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式；物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程中需要消耗能量(ATP)；可以進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；有載體(carrier)參與。主動(dòng)運(yùn)輸是廣泛存在于微生物中的一種主要的物質(zhì)運(yùn)輸方式 1、初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸(primary active transport)：由電子傳遞系統(tǒng)、ATP酶、或細(xì)菌嗜紫紅質(zhì)引起的質(zhì)子運(yùn)輸方式。 2、次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸(secondary active transport)：質(zhì)子濃度差消失過(guò)程中偶聯(lián)其他物質(zhì)運(yùn)輸。 有：同向運(yùn)輸(symport)；逆向運(yùn)輸(antiport)；單向運(yùn)輸(uniport)。 3、基團(tuán)轉(zhuǎn)位(group translocation)特點(diǎn)：有一個(gè)復(fù)雜的運(yùn)輸系統(tǒng)來(lái)完成物質(zhì)的運(yùn)輸；物質(zhì)在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生化學(xué)變化；基團(tuán)轉(zhuǎn)位主要用于糖的運(yùn)輸。 4、Na+,K+-ATP酶(Na+,K+-ATPase)系統(tǒng)四、膜泡運(yùn)輸(memberane vesicle transport)：主要存在于原生動(dòng)物中。 第 五 章 微生物的代謝 第一節(jié) 代謝概論 代謝（metabolism）：細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的各種化學(xué)反應(yīng)的總稱。 第二節(jié) 微生物