《干擾實驗準則》——送審稿.doc

ICS點擊此處添加中國標準文獻分類號WS中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T XXXXXXXXX干擾實驗準則Guide to interference testing in clinical chemistry點擊此處添加與國際標準一致性程度的標識（本稿完成日期：2010.07.23）XXXX - XX - XX發(fā)布XXXX - XX - XX實施中華人民共和國衛(wèi)生部 中國國家標準化管理委員會發(fā)布WS/T XXXXXXXXX目次前言II引言III1范圍12規(guī)范性引用文件13實驗室安全14術(shù)語和定義15干擾實驗方案25.1干擾物對檢測結(jié)果的影響25.2干擾標準及被測量與干擾物實驗濃度的確定35.3對實驗操作人員的要求45.4對檢測系統(tǒng)的要求45.5干擾物篩查實驗55.6干擾物劑量效應評價實驗86干擾實驗報告11附錄A（資料性附錄）附錄A常見生化項目質(zhì)量指標12附錄B（資料性附錄）附錄B常見被測量的建議實驗濃度13附錄C（資料性附錄）附錄C常見內(nèi)源性干擾物的建議實驗濃度16附錄D（資料性附錄）附錄D干擾篩查實驗結(jié)果記錄表18附錄E（資料性附錄）附錄E干擾劑量效應實驗結(jié)果記錄表19參考文獻20前言本準則根據(jù)我國衛(wèi)生部頒發(fā)的臨床實驗室管理辦法的要求，參考有關文獻并結(jié)合我國實際情況起草。本準則中附錄A、B、C、D、E為資料性附錄。本準則由衛(wèi)生標準管理委員會全國臨床檢驗標準委員會歸口。本準則起草單位：衛(wèi)生部臨床檢驗中心。本準則主要起草人： 汪靜，陳文祥，趙海艦，謝潔紅，王冬環(huán)，申子瑜本準則于20XX年XX月首次發(fā)布。本準則由衛(wèi)生部臨檢中心負責解釋。引言干擾是引起臨床實驗室測定誤差的重要原因之一，無論是定性還是定量方法均可受到干擾物質(zhì)的影響。某些情況下，因干擾所致的結(jié)果誤差可能影響醫(yī)生的臨床決定，給醫(yī)患雙方帶來不利影響。臨床實驗室可通過室內(nèi)質(zhì)控對檢測系統(tǒng)的精密度進行監(jiān)測，通過與參考物質(zhì)或參考測量程序的測定值相比較以驗證結(jié)果的準確性，但對因干擾所致的偏差卻較難控制。本準則可幫助生產(chǎn)廠家與臨床實驗室在滿足臨床需求的背景下對干擾物質(zhì)進行評價，明確具有臨床意義的誤差來源。本準則起草過程中參考有關文獻并結(jié)合我國臨床實驗室的實際情況，詳細描述干擾實驗評價方案并提出如何判斷干擾標準的具體方法，在干擾物質(zhì)劑量效應評價時采用更易理解的統(tǒng)計學方法進行線性判斷。附錄中給出了有關常見生化項目質(zhì)量指標、常見被測量建議實驗濃度、常見內(nèi)源性干擾物建議實驗濃度等內(nèi)容，并對結(jié)果記錄表格進行規(guī)范，適用于我國臨床實驗室與生產(chǎn)廠家對臨床生化檢測系統(tǒng)進行干擾評價。21干擾實驗準則1 范圍本準則適用于體外診斷醫(yī)學設備廠商與臨床實驗室，向廠家與實驗室提供科學有效的干擾實驗設計，闡明數(shù)據(jù)分析方法及結(jié)果解釋，使廠家可以評價可能存在的干擾影響并向用戶提供相關干擾報吿，實驗室可對檢測系統(tǒng)的特異性參數(shù)進行驗證。本準則主要用于對常規(guī)臨床實驗室定量方法進行干擾評價，所用樣本類型包括血清、血漿、腦脊液、尿液及其他體液。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。JF1001-1998 通用計量術(shù)語和定義JCGM 200:2008 國際計量術(shù)語（International vocabulary of metrology）？醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法？病原微生物實驗室生物安全管理條例？病原微生物實驗室生物安全環(huán)境管理辦法？醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)范？醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法3 實驗室安全干擾評價實驗中使用的所有樣品均應按感染性物質(zhì)處理。正確處理實驗室廢棄物、實驗人員防護及實驗室環(huán)境應符合國家相應法規(guī)要求，具體措施可參見病原微生物實驗室生物安全管理條例、病原微生物實驗室生物安全環(huán)境管理辦法、醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)范、醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法等。4 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本準則。4.1 干擾 interference在臨床化學中，被測物濃度因樣品特性或其它成分的影響而出現(xiàn)的臨床顯著性偏差。這種影響可見于檢測系統(tǒng)的非特異性、指示反應響應不佳、被測物活性抑制等情況。注： 分析前影響雖也可使被測物濃度產(chǎn)生臨床顯著性偏差，但不屬于分析干擾。4.2 干擾物 interfering substance不是被測量，但對測量結(jié)果有影響的量。JJF1001-1998，定義4.84.2.1 內(nèi)源性干擾物 endogenous interferent因病理原因在樣品中出現(xiàn)的物質(zhì)（如膽紅素或血紅蛋白），可干擾對其他物質(zhì)的檢測。4.2.2 外源性干擾物 exogenous interferent樣品中來自于體外的可干擾其他物質(zhì)檢測的物質(zhì)（如藥物及其代謝物、樣品防腐劑等）。4.3 干擾標準 interference criteria被測物濃度與真值間可產(chǎn)生的最大允許干擾偏差，此偏差可能影響醫(yī)生的醫(yī)療決定。4.4 被測量 measurand作為測量對象的特定量。JJF1001-1998，定義4.74.5 特異性 specificity干擾物存在時分析系統(tǒng)可以正確區(qū)分或檢測被測量的能力。4.6 分析非特異性 nonspecificity檢測系統(tǒng)中某試劑與被測量之外的物質(zhì)產(chǎn)生反應。注： 非特異性常由抗體、酶、離子載體、試劑等與被測量外其他成分形成復合物或發(fā)生其他反應所致。4.7 總分析誤差 total analytical error等同于JCGM 200:2008中的測量誤差（measurement error），指測定值與參考值間的差異。JCTM 200:2008 定義2.165 干擾實驗方案5.1 干擾物對檢測結(jié)果的影響5.1.1 干擾物的干擾效果檢測方法的總分析誤差有3個主要來源：不精密度、方法特異性偏差、樣品特異性偏差。方法學評價時通常只考慮前2者，樣品特異性偏差常被認為與特定樣品有關，不屬于方法學的計量特征。但如果一種檢測方法本身易受某種干擾物質(zhì)的影響，則干擾物即可引起系統(tǒng)誤差也可引起偶然誤差。當采用特異性更好的方法做為比對方法時，特定病人群體樣品中某中干擾物的平均濃度可引起系統(tǒng)偏差，而偏離平均偏差的個體差異則成為總偶然誤差的成份。某些方法中隨機干擾效果超過不精密度成為偶然誤差的主要來源。對于個體病人，干擾物的干擾效果可隨樣品中干擾物濃度的不同發(fā)生變化，這可被誤認為是病人病情的改變。干擾物對檢測結(jié)果的影響可通過一些方法進行補償或修正，使干擾效果在特定病人群體中減小。對于常見的內(nèi)源性干擾物（如膽紅素、血紅蛋白、脂類等），可通過樣品前處理、樣品空白、血清基質(zhì)校準或數(shù)學修正等方法減少干擾效果。5.1.2 干擾效果機制干擾物對分析過程的影響機制有： 化學效應：干擾物通過與試劑競爭或抑制指示反應改變反應結(jié)果，也可通過絡合或沉淀作用改變分析物的形式。 物理效應：干擾物可具有與被測量相近的性質(zhì)，如熒光、顏色、光散射、洗脫位置或檢測時的電極反應等。 基質(zhì)效應：干擾物可改變樣品基質(zhì)的物理特性，如粘度、表面張力、濁度或離子強度等，從而改變被測量濃度。 酶抑制作用：干擾物可與金屬激活因子形成螯合物、與催化位點結(jié)合、氧化必需巰基基團而改變被測量或試劑中酶的活性。 檢測方法的非特異性：干擾物以與被測量同樣的方式參與反應。盡管非特異性與干擾有所不同，但對實驗結(jié)果的效果的相同的。如：酮酸在堿性苦味酸法測肌酐時發(fā)生反應，吲哚硫酸鹽在重氮法測膽紅素時發(fā)生反應，免疫化學中的交叉反應等。 水的取代效應：非水溶性物質(zhì)（蛋白、脂類等）可通過取代液體血漿量影響活性測量。但如測定的是血漿水中被測量的濃度，則不存在水的取代效應。5.2 干擾標準及被測量與干擾物實驗濃度的確定5.2.1 建立被評價方法的干擾標準因干擾所致的允許誤差標準與實驗結(jié)果的臨床應用有關，可通過總允許誤差進行推斷?？傇试S誤差(TEa)包含方法學偏差、不精密度及干擾成份，是對檢測方法的準確性要求。對于已明確提出準確性要求的分析物，可從總允許誤差中減去方法學偏差、不精密度及相應生物學變異，剩余殘差即為干擾成份。對于無明確準確性要求的分析物，可采用下述方法確定總允許誤差。a) 根據(jù)生物學變異確定總允許誤差：不同被測量均有其固有的個體內(nèi)（CVI）及個體間生物學變異（CVG），現(xiàn)被廣泛接受的觀點是檢測方法的理想質(zhì)量指標為結(jié)果偏倚，總允許誤差。對因方法學或技術(shù)能力無法滿足上述要求的分析項目，可使用最低質(zhì)量規(guī)范。據(jù)生物學變異導出的常見生化檢驗項目質(zhì)量規(guī)范見附錄A。b) 通過臨床實踐得出總允許誤差：基于大量臨床和實驗室經(jīng)驗，經(jīng)過廣泛討論，由專業(yè)學會、組織或個人在專業(yè)建議或指南中提出的準確性指標。c) 據(jù)分析變異確定總允許誤差：干擾標準也可從總的長期分析不精密度中得出。如果干擾物所引起的誤差小于一個標準差，則可認為被評價干擾物的作用不大可能影響臨床決定，因此不認為這種物質(zhì)是干擾物。但考慮到現(xiàn)有的檢測系統(tǒng)常具有極佳的精密度，用這種方法決定干擾標準可能使很多物質(zhì)的干擾效果放大。d) 基于法規(guī)和室間質(zhì)量評價的質(zhì)量規(guī)范：總允許誤差也可以從有關實驗室質(zhì)量管理的法規(guī)中得到。如CLIA88法規(guī)文件中提供的常見檢測項目的質(zhì)量規(guī)范。常見生化檢驗項目的CLIA88質(zhì)量規(guī)范見附錄A。5.2.2 被測量實驗濃度的確定通常選取被測量的2個醫(yī)學決定水平作為干擾實驗時的被測量濃度，也可根據(jù)臨床需要選用參考范圍的高限或低限或病理濃度。附錄B 中列出了常見被測量的建議實驗濃度。5.2.3 可能引起干擾作用的物質(zhì)清單干擾實驗開始前應根據(jù)被評價方法的檢測原理和預期用途列出可能引起干擾效果的物質(zhì)清單。常見的可能產(chǎn)生干擾作用的物質(zhì)有： 樣本中的異常物質(zhì)：溶血、黃疸、脂血。 藥物：常見處方與非處方藥，接受某項目檢測的特定病人群體中常用的藥物。 代謝物：在特定病人群體中可能出現(xiàn)的異常生化代謝物與藥物代謝物。 樣品添加劑及在樣品采集與處理過程中可與之接觸的物質(zhì)：抗凝劑（肝素、EDTA、檸檬酸鹽、草酸鹽等）與防腐劑（NaF、HCl、碘醋酸鹽等），血清分離膠，樣品采集容器及膠塞、導管、導管沖冼液、皮膚消毒劑、手部清潔劑、玻璃清洗液、手套粉未等。 文獻中提及的對與被評價方法類似的其他方法有干擾作用的物質(zhì)。 飲食：咖啡因、-胡蘿卜素、罌粟籽等。5.2.4 干擾物的實驗濃度進行干擾實驗時干擾物的濃度可根據(jù)表1中的原則確定，常見可能內(nèi)源性干擾物的建議實驗濃度見附錄C，藥物干擾物的建議實驗濃度請參見有關文獻。表1 干擾物的實驗濃度確定原則可能干擾物樣品類型干擾物實驗濃度藥物與代謝物血清、血漿與全血至少三倍于治療藥物濃度或最高預期濃度尿液至少三倍于24小時尿清除率內(nèi)源性干擾物血清、血漿與全血目標病人群體中預期最高濃度抗凝劑與防腐劑血清、血漿與全血五倍于添加濃度尿液五倍于24小時尿清除率樣品采集與處理設備血清、血漿、全血、尿液樣品與設備接觸24小時，樣品體積應與實際使用相同，需注意防止樣品蒸發(fā)與不穩(wěn)定分析物的丟失，同時應準備一份與實驗樣本相同的對比樣本，此樣本除了不與實驗設備接觸外其余處理過程均與實驗樣本相同。5.3 對實驗操作人員的要求實驗操作人員應熟悉被評價檢測系統(tǒng)的性能，熟練掌握操作流程，明確樣品的正確處理方法，在確保儀器狀態(tài)正常的情況下采用適當?shù)男Ｕ穼x器進行校準。5.4 對檢測系統(tǒng)的要求5.4.1 儀器儀器性能應滿足干擾實驗的要求。精密度應與廠家參數(shù)相一致，也可根據(jù)相應衛(wèi)生行業(yè)標準進行精密度評估。方法學偏差應通過回收實驗或方法學比較實驗（參見相應衛(wèi)生行業(yè)標準）確定，恒定偏差不會影響干擾實驗結(jié)果，但比例性偏差卻可能造成對干擾實驗結(jié)果的錯誤判斷。儀器檢測時不應存在明顯的攜帶污染。在實驗開始前，分析系統(tǒng)應表現(xiàn)出穩(wěn)定的運行狀態(tài)。實驗期內(nèi)應據(jù)統(tǒng)計學質(zhì)控程序?qū)\行狀態(tài)進行監(jiān)測。5.4.2 試劑進行干擾實驗時應采用有效期內(nèi)的相同批號試劑。試劑的貯存與配制應嚴格按照產(chǎn)品說明進行。5.4.3 校準品應采用與被評價試劑配套的校準品或經(jīng)實驗驗證可用于被評價檢測系統(tǒng)的產(chǎn)品。校準品的使用應嚴格按照產(chǎn)品說明，儀器校準步驟與間隔應按照實驗室內(nèi)標準操作程序進行。5.5 干擾物篩查實驗5.2.3中列出的干擾物清單中可能包括多種物質(zhì)，需要通過干擾物篩查實驗對這些物質(zhì)進行初步鑒別。實驗方法為首先在基礎樣品中添加較高濃度的可能干擾物質(zhì)，使之成為實驗樣品，然后分別檢測實驗樣品與對照樣品中的被測量濃度，通過配對t檢驗判斷兩樣品的測定結(jié)果間差異是否具有統(tǒng)計學意義。如沒有統(tǒng)計學意義，則由此物質(zhì)引起的偏差不會影響臨床決定，不認為此物質(zhì)是干擾物。如具有統(tǒng)計學意義，則考慮此物質(zhì)可能具有干擾作用，需進一步實驗以確定干擾物濃度與其產(chǎn)生的干擾效應間的關系。5.5.1 樣品制備5.5.1.1 基礎樣品從未服用過藥物的健康人群中采集新鮮標本（血清、尿液等），將標本混勻后即成為基礎樣品。如新鮮標本難以取得，也可采用冰凍或凍干樣品。但應注意這類樣品中含有防腐劑與穩(wěn)定劑或其他可能會對檢測結(jié)果造成影響的成分。因此在應用此類樣品之前應參照相應國家衛(wèi)生行業(yè)標準對其基質(zhì)效應進行評價。確定基礎樣品中的被測量濃度，可通過添加純分析物使樣品中被測量濃度達到醫(yī)學決定水平。5.5.1.2 干擾物原液干擾物質(zhì)的純品多為固體，需要用適當?shù)娜軇⑵淙芙?，制成干擾物原液。如所用的是藥品級制品，應注意所含賦形劑、防腐劑、殺菌劑、抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑、金屬氧化物、填充物等對檢測結(jié)果造成的影響。溶劑應使干擾物充分溶解且不會影響檢測結(jié)果。常用溶劑有純水、HCl 或NaOH溶液、乙醇或甲醇、丙酮、二甲基亞砜等。原液濃度應至少20倍于實驗濃度，以減少對基礎樣品基質(zhì)的稀釋。應注意防止有機溶劑的揮發(fā)并考慮其在水中的溶解度。5.5.1.3 實驗樣品與對照樣品以20倍于實驗濃度的干擾物原液為例，實驗樣品與對照樣品的制備方法見表2。注意樣品制備時取樣體積必須準確，必要時可采用容量瓶。表2 實驗樣品與對照樣品的制備樣品制備種類與體積樣品制備方法基礎樣品用量ml干擾物原液用量ml溶劑用量ml實驗樣品10ml9.50.500對照樣品10ml9.500.505.5.2 測定重復次數(shù)為排除被評價方法的精密度對干擾效果的影響，每份樣品的測定次數(shù)需根據(jù)統(tǒng)計學檢驗的置信水平與檢驗效能及被評價方法的批內(nèi)精密度與干擾標準計算得出。干擾方向不明確時使用雙側(cè)檢驗，計算公式見式（1），干擾方向已確定時則使用單側(cè)檢驗，計算公式見式（2）。(1)式中：z1-/2 雙邊檢驗100（1-）%置信水平時正態(tài)分布所對應的百分位數(shù)。z1- 檢驗效能100（1-）%時正態(tài)分布所對應的百分位數(shù)。s 被評價方法的批內(nèi)重復性標準差。dmax 在被測量實驗濃度下的干擾標準。(2)式中：z1- 單邊檢驗100（1-）%置信水平時正態(tài)分布所對應的百分位數(shù)其余字母項所代表內(nèi)容見式（1）。常見置信水平與檢驗效能下的z值見表3。表3 常見置信水平與檢驗效能下的Z值置信水平/檢驗效能0.9000.9500.9750.9900.995z1.2821.6451.9602.3262.576為便于使用，表4中列出了95%置信水平與檢驗效能下不同干擾標準所需要的樣品重復測定數(shù)（見下頁）。表4 95%置信水平與檢驗效能下不同干擾標準所需樣品測定數(shù)a dmax/s重復數(shù)dmax/s重復數(shù)0.8411.5121.0261.6101.1221.881.2182.071.3162.551.4143.03a 注：dmax/s為干擾標準與重復性標準差的比值。5.5.3 測定步驟1) 將實驗樣品（T）與對照樣品（C）按5.5.2中計算出的重復數(shù)n各分裝n份。2) 用被評價方法檢測樣品中被測量濃度，樣品測定順序為C1T1C2T2C3T3CnTn。3) 如檢測系統(tǒng)存在攜帶污染，可在檢測過程中加測對照樣品以減少實驗樣品的可能污染，測定順序為C1T1CxCxC2T2CxCxC3T3CxCxCnTn。此處Cx為加測的對照樣品，其測定結(jié)果不參加實驗數(shù)據(jù)分析。4) 記錄檢測結(jié)果，格式可參照附錄D。5.5.4 數(shù)據(jù)處理與分析a) 計算干擾效果：用實驗樣品與對照樣品測定均值間的偏差（dobs）表示干擾效果，計算公式為：(3)式中： - 實驗樣品測定均值。-對照樣品測定均值。b) 計算界值dc: 雙側(cè)檢驗時界值計算公式為式（4），單側(cè)檢驗時界值計算公式為式（5）。(4)(5)式中：dnull 無效假設的值，常為0。z（1-/2 ） 相對于雙邊檢驗100（1-）%置信水平時正態(tài)分布的百分數(shù)。z（1-） 相對于單邊檢驗100（1-）%置信水平時正態(tài)分布的百分數(shù)。s 被評價方法的批內(nèi)重復性標準差。n 樣品重復次數(shù)。c) 計算干擾效果的95%置信區(qū)間：(6)式中：t0.975,(n-1) 自由度為n-1，t分布的第97.5%概率密度值。當n30時 t0.975,(n-1)近似等于2.0。s 被評價方法的批內(nèi)精密度。n 每個樣品的重復次數(shù)。其余字母項代表內(nèi)容見式（3）。d) 結(jié)果分析：如果，則可判斷由被評價干擾物所致偏差未超過允許標準，不認為此物質(zhì)為干擾物。反之則認為被評價干擾物對被評價方法有明顯干擾作用。5.6 干擾物劑量效應評價實驗對于經(jīng)干擾篩查證明對被評價方法有明顯干擾作用的可能干擾物，需對其在不同濃度下對測定結(jié)果的干擾效應進行評價。5.6.1 樣品制備5.6.1.1 基礎樣品參見5.5.1.1制備方法。5.6.1.2 干擾物原液參見5.5.1.2制備方法。5.6.1.3 干擾物高實驗濃度樣品與低實驗濃度樣品干擾物高實驗濃度樣品制備方法參見5.5.1.3中實驗樣品的制備，其干擾物終濃度可參見附錄C。干擾物低濃度樣品的制備參見5.5.1.3中對照樣品的制備，其干擾物終濃度為臨床標本中此干擾物的平均濃度，常可忽略為零。5.6.1.4 實驗樣品系列的制備將5.6.1.3中干擾物高實驗濃度樣品與低實驗濃度樣品定量混合，可得到干擾物濃度介于兩樣品之間的一系列實驗樣品。確定線性劑量相關關系時需要5個濃度水平。具體制備方法見表5。表5 干擾物不同濃度系列樣品的制備系列樣品號高實驗濃度樣品用量ml低實驗濃度樣品用量ml101022.57.535.05.047.52.551005.6.2 測定重復次數(shù)與干擾篩查實驗一樣，評價干擾物劑量效應時也需排除方法精密度對結(jié)果的影響，通常每個水平重復測定3次即可滿足要求。5.6.3 測定步驟1) 將實驗系列樣品每份分裝3支。2) 所有樣品一次檢測完成。將樣品按干擾物濃度從低到高的順序命名為樣品1、2、3、4、5，則檢測順序為第一組測定按升序（12345），第二組測定按降序（54321），第三組為升序。3) 也可按隨機數(shù)表為樣品進行分組，決定檢測順序。4) 記錄檢測結(jié)果，格式可參照附表E。5.6.4 數(shù)據(jù)處理與分析計算最低干擾物濃度樣品的測定均值，用5個水平樣品的每個測定值減去此均值得出不同濃度干擾物的干擾效果。以干擾效果為Y值，干擾物濃度為X值，繪出干擾物劑量相關曲線。根據(jù)曲線趨勢進行數(shù)據(jù)分析。5.6.4.1 線性相關如曲線為近似直線，可用最小二乘法分析，數(shù)學模型為：(7)式中：Yij 第i個樣品第j次重復測定時的干擾效果值。Xij 第i個樣品的干擾物濃度。a 截距。b 斜率。Eij 第i個樣品第j次重復測定時實測值與預測值的差。a) 計算線性回歸方程的相關參數(shù)：通過回歸分析，可得到Y(jié)i與Xi間的數(shù)學關系式及相關參數(shù)，其中斜率b的計算公式為：(8)式中： -全部樣品的干擾物濃度均值。 -全部樣品的干擾效果均值。其余字母項代表內(nèi)容見式（7）。截距a的計算公式為：(9)式中：字母項代表內(nèi)容見式（8）?；貧w方程的估標準誤計算公式為：(10)式中： -樣品中干擾物濃度為xij時由回歸方程得出的y預測值i - 樣品數(shù)，此處為5。j - 每份樣品的重復測定次數(shù)，此處為3。其余字母項代表內(nèi)容見式（7）?；貧w方程斜率b的標準誤sb計算公式為：(11)式中：字母項代表內(nèi)容見式（7）、（8）、（10）。b) 對斜率b進行統(tǒng)計學檢驗：對回歸方程的斜率b進行t檢驗。設總體回歸系數(shù)為，假設檢驗為H0： =0，H1： 0。計算統(tǒng)計量t ：(12)式中：- 總體回歸系數(shù)，此處為0。b - 回歸方程的斜率。sb - 回歸方程斜率b的標準誤。由t值表查出t(0.05,i.j-2)，如 ，表明p0.05，否定H1，接受H0，直線回歸方程不成立。對于非線性相關結(jié)果，可參照5.6.4.2進一步處理。c) 計算干擾物濃度對測定結(jié)果干擾效應的95%置信區(qū)間：某一確定干擾物濃度對測定結(jié)果干擾效應的雙側(cè)95%置信區(qū)間的計算公式：(13)式中： -樣品中干擾物濃度為xi時由回歸方程得出的y預測值t0.025,(i.j-2) -自由度為i*j-2，此處為13，t分布的第2.5%概率密度值。xi - 第i個樣品的干擾物濃度，此處與xij相同。其余字母項代表內(nèi)容見式（7）、（8）、（10）。d) 結(jié)果分析：回歸方程的斜率b表示干擾物每個濃度單位所造成的干擾效果，斜率為正表明干擾物引起正向干擾，反之為負向干擾。截距a表示對內(nèi)源性干擾物濃度的修正。干擾物任意濃度下對測定結(jié)果的影響程度可由回歸方程得出。5.6.4.2 非線性相關如干擾劑量效應曲線為非線性，可采用非線性回歸分析得出相應的最佳擬合曲線與數(shù)學模型，置信區(qū)間可用適當?shù)姆蔷€性回歸分析程序計算。具體計算方法較為復雜，建議采用統(tǒng)計學軟件，如SPSS、SAS等進行計算。根據(jù)得出的最佳數(shù)學模型可推斷出在評價范圍內(nèi)任意干擾物濃度所引起的干擾效應值。6 干擾實驗報告干擾實驗報告中應包括以下主要內(nèi)容：a) 被評價檢測系統(tǒng)的名稱、品牌、型號，所用試劑、校準品、質(zhì)控品的生產(chǎn)廠家、批號b) 被測量的名稱c) 被評價干擾物化學名稱或通用名稱d) 干擾評價方案依據(jù)e) 干擾實驗中使用的樣品類型及被測量濃度與干擾物濃度f) 表述干擾效果的相關數(shù)據(jù)或方程g) 在描述干擾效果時，可用以下方式： 列出干擾物質(zhì)的特定濃度，高于此濃度可引起超過干擾標準的偏差 列出干擾物質(zhì)的特定濃度，低于此濃度未觀察到具臨床意義的干擾h) 當定量信息無法得到或引用參考文獻中的相關內(nèi)容時，須將可能干擾物質(zhì)及其對被評價方法不具干擾性的信息以方法特異性說明的方式進行總結(jié)說明。AA附錄A （資料性附錄）附錄A 常見生化項目質(zhì)量指標基于生物學變異的質(zhì)量規(guī)范CLIA88中的質(zhì)量規(guī)范分析項目允許CV%允許的偏倚（%）允許總誤差（Tea，%）允許變異允許的偏倚允許總誤差期望最低ALT12.2232.148.16.67%10.0%20%AST65.415.222.86.67%10.0%20%AMY4.87.815.723.510.0%15.0%30%LDH4.34.39.514.26.67%10.0%20%CK11.411.530.345.510.0%15.0%30%GGT6.910.822.233.3ALP 3.26.411.717.510.0%15.0%30%TP1.41.23.45.23.33%5.0%10%ALB1.61.33.95.83.33%5.0%10%T-BIL12.81031.146.6D-BIL18.414.244.566.8UA4.34.811.917.95.67%8.5%17%UREA6.25.515.723.50.33mg/dl或4.5%1mg/dl或4.5%2mg/dl或9%CREA2.23.46.910.40.1mg/dl或5%0.15mg/dl或7.5%0.3mg/dl 或15%GLU3.32.37.911.82mg/dl或3.3%3mg/dl或5%6mg/dl或10%T-C34.1913.63.33%5.0%10%TG10.510.728428.33%12.5%25%LDL-C4.26.813.620.4HDL-C3.65.211.116.610.0%15.0%30%Apo A13.33.79.113.6Apo B3.5611.617.5K2.41.85.88.70.17mol/L0.2mmol/L0.5mmol/LNa0.40.30.91.30.13mmol/L2mmol/L4mmol/LCl0.60.51.52.21.67%2.5%5%Ca10.82.43.60.33mg/dl0.5mmol/L1.0mg/dlMg1.81.84.87.28.33%12.5%25%P4.33.210.215.3BB附錄B （資料性附錄）附錄B 常見被測量的建議實驗濃度分析物分子量實驗濃度低值實驗濃度高值濃度單位SI單位濃度單位SI單位對乙酰氨基酚151.1633mol/L5g/mL199mol/L30g/mL丙酮58.080.34mmol/L2mg/dL3.4mmol/L20mg/dL白蛋白 66 000 35g/L3.5g/dL50g/L5g/dL醛固酮360.440.2nmol/L8ng/dL1.1nmol/L40ng/dL甲胎蛋白 66 000 300ng/L30ng/dL150g/L150ng/mL氨17.0310mol/L14g/dL80mol/L112g/dL載脂蛋白A1 28 000 0.8g/L80mg/dL1.8g/L180mg/dL載脂蛋白B 549 000 0.6g/L60mg/dL1.3g/L130mg/dL結(jié)合膽紅素584.673.4mol/L0.2mg/dL86mol/L5mg/dL未結(jié)合膽紅素584.6717mol/L1mg/dL257mol/L15mg/dLC反應蛋白 114 000 0.01g/L1mg/dL0.04g/L4mg/dL離子鈣40.081mmol/L4mg/dL2mmol/L8mg/dL總鈣40.082mmol/L8mg/dL3mmol/L12mg/dL卡巴咪嗪236.2612.7mol/L3g/mL50.8mol/L12g/mL氯35.590mmol/L90mEq/L110mmol/L110mEq/LHDL膽固醇386.660.9mmol/L35mg/dL1.8mmol/L70mg/dL總膽固醇386.663.88mmol/L150mg/dL6.47mmol/L250mg/dL總CO244.0120mmol/L20mEq/L35mmol/L35mEq/L皮質(zhì)醇362.47138nmol/L5g/dL828nmol/L30g/dL肌酐113.12133mol/L1.5mg/dL442mol/L5mg/dL地高辛780.920.5nmol/L0.4ng/mL2.6nmol/L2ng/mL腎上腺素183.21218pmol/L40pg/mL546pmol/L100pg/mL雌三醇288.39139nmol/L40ng/mL1040nmol/L300ng/mL乙醇46.072.17mmol/L10mg/dL21.7mmol/L100mg/dL鐵蛋白 474 000 45pmol/L20ng/mL449pmol/L200ng/mL葉酸441.411nmol/L5ng/mL34nmol/L15ng/mL附錄B 常見被測量的建議實驗濃度（續(xù)表1）分析物分子量實驗濃度低值實驗濃度高值濃度單位SI單位濃度單位SI單位鐵55.847.2mol/L40g/dL26.9mol/L150g/dL鐵結(jié)合力 NA 44.8mol/L250g/dL80.6mol/L450g/dL乳酸鹽（乳酸）90.080.7mmol/L6.3mg/dL2.6mmol/L23.4mg/dL鉛207.191.21mol/L25g/dL4.83mol/L100g/dL鋰6.9390.2mmol/L0.14mg/dL1.5mmol/L1mg/dL鎂24.311.6mmol/L3.9mg/dL2.6mmol/L6.3mg/dL去甲腎上腺素169.180.65nmol/L110pg/mL4.14nmol/L700pg/mL苯巴比妥232.24215mol/L5g/mL1722mol/L40g/mL苯丙氨酸165.1961mol/L1mg/dL1211mol/L20mg/dL苯妥英252.2812moI/L3g/mL79moI/L20g/mL無機磷30.970.8mmol/L2.5mg/dL2.1mmol/L6.5mg/dL鉀39.13mmol/L3mEq/L5mmol/L5mEq/L前白蛋白 30 000 100g/L10mg/dL400g/L40mg/dL普里米酮218.2614mol/L3g/mL55mol/L12g/mL普魯卡因酰胺235.3317mol/L4g/mL42mol/L10g/mL孕酮314.473.2nmol/L1ng/mL64nmol/L20ng/mL總血清蛋白 NA 60g/L6g/dL80g/L8g/dL奎尼丁324.426.2mol/L2g/mL15mol/L5g/mL水楊酸鹽138.120.14mmol/L2mg/dL1.45mmol/L20mg/dL鈉22.99130mmol/L130mEq/L150mmol/L150mEq/L睪酮288.431.7nmol/L50ng/dL10.4nmol/L300ng/dL茶堿180.1733.3mol/L6g/mL111mol/L20g/mL轉(zhuǎn)鐵蛋白 77 000 2g/L200mg/dL4g/L400mg/dL總甘油三酯 NA 1.7mmol/L150mg/dL5.6mmol/L500mg/dL酪氨酸181.19221mol/L4mg/dL1104mol/L20mg/dL尿素 60.06 (Urea) 28.01 (Urea N) 3mmol/L9mg/dL7mmol/L40mg/dL尿酸168.110.2mmol/L3mg/dL0.5mmol/L9mg/dL丙戊酸144.2135mol/L5g/mL693mol/L100g/mL維生素B121355.42148pmol/L200pg/mL740pmol/L1000pg/mL附錄B 常見被測量的建議實驗濃度（續(xù)表2）分析物分子量實驗濃度低值實驗濃度高值濃度單位SI單位濃度單位SI單位人絨毛膜促性腺激素（hCG）36 7005IU/L5mlU/mL50IU/L50mlU/mL黃體生成素（LH）30 0005IU/L5mlU/mL110IU/L110mlU/mL卵泡刺激素（FSH）30 0005IU/L5mIU/mL40IU/L40mIU/mLN-乙酰普魯卡胺 (NAPA)277.3718mol/L5g/mL108mol/L30g/mL促甲狀腺素（TSH）28 0000.3mIU/L0.3IU/mL8mIU/L8IU/mL游離甲狀腺素（FT4）776.8713pmol/L1ng/dL32.5pmol/L2.5ng/dL游離三碘甲腺原氨酸（FT3）650.983.9pmol/L250pg/dL10.8pmol/L700pg/dL葡萄糖180.164.4mmol/L80mg/dL6.7mmol/L120mg/dL血紅蛋白 16 114 100g/L10g/dL200g/L20g/dLCC附錄C （資料性附錄）附錄C 常見內(nèi)源性干擾物的建議實驗濃度干擾物分子量參考區(qū)間1病理值2建議實驗濃度3乙酰乙酸102 0.1 mmol/L 2 mmol/L 2.0 mmol/L 丙酮58 0.05 0.34 mmol/L12 mmol/L 12 mmol/L氨80 11 32 mol N/L 107 mol N/L 107 mol N/LL-抗壞血酸176 23 85 mol/L 114 mol/L -胡羅卜素537 0.19 1.58 mol/L 3.7 11.2 mol/L 3.7 mol/L 碳酸氫鹽84 21 28 mmol/L 10 45 mmol/L 35 mmol/L 膽汁酸 390 513 0 10 mol/L 30 mol/L 結(jié)合膽紅素 778 971 0 3.4 mol/L (adult) 513 mol/L 342 mol/L 未結(jié)合膽紅素585 5 21 mol/L (adult) 684 mol/L 342 mol/L 總鈣40 1.90 2.55 mmol/L 5.0 mmol/L 5.0 mmol/L 鵝脫氧膽酸 392 0 1.61 mol/L 2.5 mol/L 30 mol/L 氯35 98 107 mmol/L 85 160 mmol/L 120 mmol/L 膽固醇387 2.95 5.2 mmol/L4 13 mmol/L 13 mmol/L 膽酸4080.07 0.91 mol/L 2.67 mol/L 肌酐113 53 115 mol/L 115 mol/L 442 mol/L 總游離脂肪酸 0 0.92 mmol/L 2.76 mmol/L 果糖180 56 333 mol/L 1000 mol/L 半乳糖180 2 g/L 2 g/L 乳酸鹽90 0.5 2.2 mmol/L 6.6 mmol/L 6.6 mmol/L 鎂24 0.65 1.05 mmol/L 5 mmol/L 15 mmol/L 油酸282 27 81 mol/L 軟脂酸256 1 0.2 2.0 mmol/L6.0 mmol/L 附錄C 常