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紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法實(shí)驗(yàn)原理: 將紅細(xì)胞放置于等滲溶液中,紅細(xì)胞的形態(tài)不發(fā)生改變。放置于高滲和低滲鹽溶液中紅細(xì)胞的形態(tài)均出現(xiàn)改變,置于高滲液中,紅細(xì)胞出現(xiàn)皺縮;置于低滲液中則發(fā)生膨脹,最后破裂,細(xì)胞內(nèi)容物溢入血漿或溶液,這種現(xiàn)象稱(chēng)為溶血。將血液滴入不同濃度的低滲鹽溶液中,可以檢查紅細(xì)胞對(duì)低滲溶液的抵抗力。開(kāi)始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲鹽溶液濃度,為該血液紅細(xì)胞的最小抵抗力(約0.40%0.45%NaCl溶液),而完全溶血?jiǎng)t為該血液紅細(xì)胞的最大抵抗力(約0.30%-0.45%NaCl溶液)。對(duì)低滲鹽溶液的抵抗力小表示紅細(xì)胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范圍,稱(chēng)脆性范圍。實(shí)驗(yàn)對(duì)象 家兔實(shí)驗(yàn)器材 試管架、5 ml試管十支、2 ml吸管兩支、注射器、1%NaCl溶液、蒸餾水、枸椽酸鈉。實(shí)驗(yàn)步驟(一)低滲鹽溶液的配制 取試管十支,洗凈烤干,用玻璃鉛筆編號(hào),排在試管架上,參照下表向各試管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸餾水,每管溶液均2 ml。試管號(hào)試管123456789101%NaCl(ml)1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50蒸餾水(ml)0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50NaCl濃度(%)0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.25(二)枸椽酸鈉血的制備家兔頸部解剖,剝離頸總動(dòng)脈,插管,將血放入燒杯內(nèi),燒杯內(nèi)事先加入3.8%枸椽酸鈉溶液,血與枸椽酸鈉溶液的比例為9:1,輕搖燒杯使之混勻。觀察項(xiàng)目用注射器向每個(gè)試管內(nèi)加入兔血一滴,用拇指堵住試管口,將試管顛倒23次(不要用力振蕩以免溶血),在室溫下靜置1小時(shí),然后觀察各試管的透明度以判斷是否溶血。1、試管內(nèi)下層為混濁紅色,上層為無(wú)色或淡黃色液體,說(shuō)明紅細(xì)胞尚未破壞。2、試管內(nèi)下層為混濁紅色,上層為透明淡紅色,則表明紅細(xì)胞部分溶解,才出現(xiàn)溶血的低滲鹽溶液的濃度,為紅細(xì)胞的最小抵力(最大脆性)。3、試管內(nèi)溶液呈現(xiàn)透明紅色,說(shuō)明紅細(xì)胞全部溶解,稱(chēng)為完全溶血,首先引起紅細(xì)胞全部溶解的低滲鹽溶液濃度,即紅細(xì)胞的最大抵抗力(最小脆性)。通過(guò)試驗(yàn),記錄紅細(xì)胞的脆性范圍。思考題 1. 為什么同一個(gè)體的紅細(xì)胞滲透脆性有最大值和最小值? 2. 紅細(xì)胞滲透脆性實(shí)驗(yàn)的臨床意義。 3. 輸液時(shí)為何要輸?shù)葷B溶液?結(jié)果分析: 將紅細(xì)胞懸浮于低滲鹽溶液中,水將在滲透壓的作用下滲入細(xì)胞,于是紅細(xì)胞發(fā)生膨脹,由正常的雙凹圓碟形變成球形,并開(kāi)始破裂而發(fā)生溶血。紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中發(fā)生膨脹破裂的現(xiàn)象稱(chēng)紅細(xì)胞滲透脆性。但紅細(xì)胞對(duì)低滲鹽溶液具有一定的抵抗力,這種抵抗力的大小可作為衡量紅細(xì)胞滲透脆性的指標(biāo)。同一個(gè)體的紅細(xì)胞對(duì)低滲鹽溶液的抵抗力并不相同。生理情況下,衰老的紅細(xì)胞可變形性減小,變成球形,因而對(duì)低滲鹽溶液抵抗力低,會(huì)先發(fā)生破裂,正常人剛開(kāi)始出現(xiàn)溶血的NaCl溶液濃度為0.46%0.42%NaCl溶液;而較幼稚的紅細(xì)胞的抵抗力高,較后發(fā)生破裂,正常人出現(xiàn)完全溶血的NaCl溶液濃度為0.34%0.32% NaCl溶液。紅細(xì)胞膜對(duì)水分子可自由通透,水分子依滲透壓梯度進(jìn)入紅細(xì)胞,紅細(xì)胞膨脹破裂而溶血,因此,紅細(xì)胞在蒸餾水中立即發(fā)生溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)尿素分子可自由通透,尿素分子依濃度梯度進(jìn)入紅細(xì)胞,而紅細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)不能自由通過(guò)紅細(xì)胞膜,導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)滲透壓增高,水進(jìn)入細(xì)胞,紅細(xì)胞膨脹破裂而溶血,因此,1.9%的尿素溶液雖是等滲溶液,但不是等張溶液。NaCl分子和紅細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)都不易透過(guò)紅細(xì)胞膜,故紅細(xì)胞在等滲的0.85%的NaCl溶液中不會(huì)發(fā)生溶血,因此,0.85%的NaCl溶液既是等滲溶液又是等張溶液。1. 紅細(xì)胞在小于或等于0.46%濃度的低滲鹽溶液中會(huì)發(fā)生溶血。2. 正常人紅細(xì)胞滲透脆性最高值為0.46%0.42% 的NaCl溶液,最低值為0.34%0.32% 的NaCl溶液。3. 紅細(xì)胞在等滲鹽溶液中為雙凹圓碟形,在低滲鹽溶液中為球形。4. 紅細(xì)胞在等滲的尿素溶液或蒸餾水中會(huì)立即發(fā)生溶血?!緦?shí)驗(yàn)報(bào)告要點(diǎn)】一、 為什么同一個(gè)體的紅細(xì)胞滲透脆性有最大值和最小值?同一個(gè)體的紅細(xì)胞對(duì)低滲鹽溶液的抵抗力并不相同。生理情況下,衰老的紅細(xì)胞可變形性減小,變成球形,因而對(duì)低滲鹽溶液抵抗力低,會(huì)先發(fā)生破裂;而較幼稚的紅細(xì)胞的抵抗力高,較后發(fā)生破裂。將血液滴入不同濃度的低滲NaCl溶液中,剛開(kāi)始出現(xiàn)溶血的NaCl溶液濃度為該血液中紅細(xì)胞的最大滲透脆性,出現(xiàn)完全溶血的溶液濃度,為該血液中紅細(xì)胞的最小滲透脆性。二、 紅細(xì)胞在等滲的1.9%尿素溶液中會(huì)發(fā)生什么現(xiàn)象?為何出現(xiàn)這種現(xiàn)象?紅細(xì)胞在等滲的1.9%尿素溶液中會(huì)立即溶血。因紅細(xì)胞膜對(duì)尿素分子可自由通透,尿素分子依濃度梯度進(jìn)入紅細(xì)胞,而紅細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)不能自由通過(guò)紅細(xì)胞膜,導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)滲透壓增高,水進(jìn)入細(xì)胞,紅細(xì)胞膨脹破裂而溶血,因此,1.9%的尿素溶液雖是等滲溶液,但不是等張溶液?!緟⒖純?nèi)容】一、紅細(xì)胞滲透脆性實(shí)驗(yàn)的臨床意義【臨床意義】 紅細(xì)胞在低滲鹽水中,水分透過(guò)細(xì)胞膜可使紅細(xì)胞逐漸脹大而破壞。本試驗(yàn)是測(cè)定紅細(xì)胞對(duì)各種濃度的低滲溶液的抵抗力。紅細(xì)胞對(duì)低滲溶液抵抗力與其厚度有關(guān),厚度越大,膜面積與體積比值越小,則滲透脆性越大。 1.紅細(xì)胞脆性增加 遺
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